卵黄缓冲液4℃保存3种低品质精液后的穿卵率变化

临床上采用手术、药物或激素调节疗法，对相当一部分不育患者的精液质量改善不明显。国外人类生殖临床目前趋向于借助体外的方法，对低品质精液作优化精子功能处理，但国内有关报告尚少，对不同低品质精液类型的处理效果未见详细评价。本研究探讨3种低品质精液经卵黄缓冲液冷保存后，精子受精能力的变化。参照世界卫生组织精液分析手册的精子参数标准，实验标本分为3组：低精子活动率组（n＝13），低精子密度组（n＝7）和低正常精子形态组（n＝9）。标本与卵黄缓冲液以等体积比混匀，置冰箱4℃；冷水浴24－48h。用去透明带地鼠卵穿透试验检…     

冷冻保存对人类精子顶体蛋白酶的影响

探讨了冷冻保存对人类精子顶体蛋白酶的影响,应用明胶薄层法检测,冷冻保存后精子顶体蛋白酶反应率和成环直径显著减少（ｎ＝３０,Ｐ＜０．０１）．透射电镜观察到冷冻保存后精子（ｎ＝３）头部结构完整性显著降低,提示浆膜、顶体膜超微结构的冷冻损伤与冷冻精子顶体蛋白酶活性丢失和降低有关．冷冻精子穿卵率与顶体蛋白酶反应率不呈相关性（ｎ＝２１,ｒ＝０．３４,Ｐ＞０．０５）,提示两项检测反映的是精子功能的不同方面．     

人类低品质精液的一步冷冻保存

男性不育症有部分病因是由于低品质精液因素所致,对这类精液进行冷冻保存有助于临床结合生殖工程技术实施治疗。近年人类精液冷冻保存方法学有了很大进展,但低品质精液体外处理结合一步冷冻的效果尚无报道。低品质精液按照其低精子参数分成3组：1组（低精子计数组,n二6）,11组（低精子活动率组,n＝11）,皿组（低正常精子形态率组,n＝8）。1组用BWW生理液洗涤、离心制备成精子悬液。3组的精子悬液与冷冻保护剂等量混匀后吸人IInL聚丙烯注射器,直接置一196T一步冷冻和保存。经体外处理精子后的3组标本,解冻后的精子复苏率分别为（…     

冷冻保存对人类附睾精子功能的影响

目的：了解人类附睾精子经历冷冻保存后的精子功能变化。方法：应用精子功能检测方法。结果：１１ 例先天性双侧输精管缺如患者附睾精子标本冷冻保存后,每例冷冻标本均见活动精子,但精子活动率显著降低,精子活动能力减弱。精子膜完整率显著下降,头膜损伤－ 尾膜完整的精子率（ Ⅲ型精子） 显著升高,精子体外存活时间显著缩短。精子顶体蛋白酶活性降低。去透明带地鼠卵穿透试验检验精子体外授精能力失败的标本,采用显微注射技术可使精子辅助授精。结论：（１） 冷冻保存对附睾精子功能有显著的影响,造成精子功能减弱;（２） 冷冻精子仅用单一尾膜肿胀试验筛选,有可能拾取到的是尾膜完整,但头膜损伤的精子;（３） 建立显微授精技术可有效地对冷冻附睾精子辅助受精。     

冷冻保存对人类精子膜完整性的影响

既往报道精子膜经历冷冻保存后的改变，但检测多局限在精子的一个部位，未能同时揭示单个精子头膜与尾膜冷冻损伤的状态，有些需荧光显微镜或透射电镜的方法，也难在基层实验室普遍应用。世界卫生组织（WHO）推荐Jeyendran的低渗肿胀试验（HOS）和Eliasson的伊红拒染（EY）法应用于对人类精子的评价。HOS检测精子尾膜完整性，EY反映精子头膜完整性。故此，结合这两种方法形成单一试验可以避免HOS或EY只显示精子一个部位膜状态的局限性。本研究建立HOS－EY结合试验探讨冷冻保存对人类精子头部和尾部膜完整性的影响。HOS－EY试验…     

金黄地鼠卵冷冻保存的初步研究

人精子一去透明带地鼠卵穿透试验（HOPT）在国内外广泛应用于评价人精子的生育潜力,但实施检测尚存在实验周期长,动物超排获得卵子往往难与精子完成制备的时间相一致等问题。为此,应用冷冻保存的金黄地鼠卵可以克服这些不足。本研究应用程序控制生物冷冻仪,探讨金黄地鼠冷冻保存的可行性。冷冻保护剂为二甲基亚砜（DMSO）,降温冷冻为5步程序。卵子解冻后用渗透压递减洗涤脱除DMSO。冷冻保存卵采用卵子形态学和精子穿卵率评价。结果表明,冷冻保存后约47％的卵子保持近似对照组的形态,53％的卵子表现出细胞结构损伤或异常。与对照…     

先天性双侧输精管缺如患者的睾丸生殖病理学及睾丸精子观察

对先天性双侧输精管缺如不育患者,采用睾丸活检组织观察睾丸组织生殖病理学（n=18）及其睾丸精子（n＝8）特征。结果显示这类患者宰丸曲细精管界膜呈现不同程度的病理改变。大部分标本的曲细精管扩张,生精上皮变薄、剥落。精子发生障碍以轻、中度为主。间质无明显病变。睾丸组织切片（n＝18）见曲细精管腔内有精子,睾丸活检组织（n＝8）可分离出精子,睾丸精子可呈微弱运动,精于畸形率高。     

无卵黄型人类精液冷冻保护剂试验与临床初步应用

不含卵黄的“改良 Tyrode’s液—甘油”型冷冻保护剂(简称 T—G 保护剂)与含卵黄的“甘油—卵黄—柠檬酸钠”型冷冻保护剂的试验比较表明,两者的精子复苏率、膜低渗肿胀率、Kremer’s 精子宫颈粘液穿透试验、去透明带地鼠卵穿透试验没有显著性差异(P>0.05);T-G 保护剂的甘油浓度分别为15%、10%,6%时,精子复苏率没有显著性差异(P>0.05);应用 T-G 保护剂冷冻保护的精液,人工授精已使1名丈夫无精子症的妇女受孕,并足月分娩1男婴,生长发育正常,提示 T-G 保护剂能有效地保护精子的受精能力。此外,对“TES-Tris-甘油-卵黄”型冷冻保护剂去除卵黄后的效果观察,精子的复苏率显著低于对照组(P<0.01)。     

人类精子功能检则的现状（综述）

人类精子功能检则的现状（综述）朱伟杰（暨南大学生殖免疫研究中心，５１０６３２，广州）精子功能检测是男性生育与不育基础研究和临床评估必需实施的检查，广义而言，精子功能检测包括标准精液分析和特定精子功能测试。前者了解精液、精子和精浆的一般性状，后者评价精...     

人类睾丸精子和附睾精子的顶体蛋白酶活性

精子形成过程最明显的条件之一是顶体的发育，顶体蛋白酶则是顶体内发育的重要酶类。人类射出精子的顶体蛋白酶活性已有研究，但在人睾丸和附睾水平，顶体蛋白酶的活性状态国内外尚无报道。本文探讨顶体蛋白酶在人睾丸和附睾部位的活性和变化。先天性双侧输精管缺如者取睾丸精子和附睾精子；精索静脉曲张结扎者取睾丸精子和射出精子。睾丸精子从常规睾丸活检组织中分离；附睾精子在阴囊探查术或人工贮精囊术时获取。射出精子为手淫法取精。应用明胶薄层试验、去透明带地鼠卵穿透试验和透射电镜观察顶体蛋白酶活性及其影响。实验结果表明，睾…     

冷冻保存对精子运动的影响

目的：观察精子运动状态,其中包括精子折断现象与冷冻损伤的关系。方法：对精液标本进行一步冷冻保存和分步冷冻保存,并用鉴别精子形态湿片法对冷冻前后精子运动状态及折断率进行评价。结果：冷冻保存复温后的精子活动率与冷冻前的精了活动率比较明显下降（P＜0．01）;含冷冻保护剂的实验组与不含冷冻保护剂的对照组比较,精子率呈显著性差异（P＜0．01）,精子折断率无显著性差异（P＞0．05）;一步冷冻和分步冷冻保存的精子之间活动率及折断率相比较,无显著性差异（P＞0．05）。结论：冷冻保存易造成精子活动率下降、运动形态异常,但不能显著地导致精子折断发生率增加。     

人输卵管液和输卵管上皮细胞培养液诱发精子的顶体反应

目的：探讨人输卵管液和上皮细胞培养液对人精子顶体反应的诱发作用。方法：用Ｈａｍ′ｓＦ１０作对照组，输卵管液和上皮细胞培养液为实验组，分别与生育力组（ｎ＝２０）和不育组（ｎ＝２０）的精子进行共孵育，用精子顶体三色染色法对顶体状态进行评价。结果：共孵育３ｈ时与Ｈａｍ′ｓＦ１０对照组相比较，两种输卵管液均可显著提高生育力组和不育组的精子顶反应率（Ｐ〈０．０５），但这两种输卵管液处理的生育力组与不育组之间     

人类精子间期核荧光原位杂交

目的：研究人类精子染色体畸变。方法：Ｅ和３号染色体涂染探针对人类精子间期核进行荧光原位杂交，共检测了１０名正常健康男性，２名涉及３号染色体平衡易位携带ｔ（３：７）、ｔ（３：９）的精子。结果：正常男性精子间期核中３号染色数目和（或）结构畸变率〈２％，涉及３号染色体平衡易位携带的畸变率〉１０％。结论：荧光原位杂交技术可秀于检测精子间期核染色体的畸变．     

端粒缺陷相关因子和人类IgA肾病的关系

研究目的：分析在中国人群中，端粒缩短以及相关衰老因子与人类IgA肾病发生进展的关系。创新要点：目前的研究发现，端粒功能缺陷是限制分裂增殖、细胞衰老的重要分子机制。它不仅仅与衰老相关，而且在疾病的发生、进展过程中都有直接影响。肾脏的正常衰老过程伴随端粒逐渐缩短，端粒功能缺陷可以加速慢性肾脏疾病进程，并伴随相关衰老因子cathelin相关抗菌肽（CRAMP）、延长因子-1α（EF-1α）、几丁质酶（chitinase）和微管不稳定蛋白（stathmin）等表达增加。本项研究首次在中国人群中，揭示端粒缩短以及相关衰老因子与人类IgA肾病发生进展的关系。研究方法：采用双盲法，以IgA肾病患者（n=177）为实验组，以狼疮肾炎（n=50）、糖尿病肾病（n=30）和局灶节段性肾小球硬化（n=30）病人以及健康人（n=83）为对照组，通过定量荧光原位杂交（qFISH）检测了肾脏组织的端粒长度，并通过酶联免疫吸附试验（ELISA）检测了血液、尿液中的CRAMP、EF-1α、stathrnin的含量，运用几丁质酶试剂盒（CS1030）检测了血液、尿液中几丁质酶的酶活性，运用免疫荧光染色检测了组织中CRAMP的表达情况。重要结论：端粒缩短和相关炎症蛋白与IgA肾病的发生发展有关，并为IgA肾病的特异性诊断和及预后评估提供可靠的研究基础。     

家猪精子单倍染色体及其G—显带的研究

用体外获能的家猪精子穿透去透明带金黄地鼠卵试验（ＳＰＡ），制备出了长白猪和成华猪的精子单倍染色体，出现精子单倍染色体的百分率为２５．１％。对家猪精子单倍染色体自然畸变率进行了分析，畸变率为６．４％，其中亚单倍体率为４．１％，超单倍体率为２．３％，并对家猪精子单倍染色体进行了Ｇ－显带的探索，取得了初步结果。     

家猪精子单倍染色体及其G－显带的研究

用体外获能的家猪精子穿透去透明带金黄地鼠卵试验（ＳＰＡ），制备出了长白猪和成华猪的精子单倍染色体，出现精子单倍染色体的百分率为２５．１％，对家猪精子单倍染色体自然畸变率进行了分析，畸变率为６．４％，其中亚单倍体率为４．１％，超单倍体率为２．３％，并对家猪精子单倍染色体进行了Ｇ－显带的探索，取得了初步结果。     

金黄地鼠卵母细胞4℃保存的研究

目前体外评价人类精子受精潜力是借助去透明带地鼠卵穿透试验（HOPT）。但实际应用中，动物超排获得的新鲜卵往往难与精子完成制备的时相一致。而且，精子所需获能时间也存在很大个体差异。故此，离体后卵子若能在一定时间内保持活性则可避免这些不足。本文以4℃作卵子冷保存的条件进行实验，以期为HOPf应用冷保存卵提供参考性资料。卵子冷保存基液为HamsF10生理液，加人牛血清白蛋白、乳酸钙、碳酸氢钠等。以0．2mL为液滴，放人卵子20－30个／滴，置冰箱4℃水浴中保存。结果表明，冷保存24h组卵子的穿透率与对照组比较没有显著性差异。…     

维生素B_(12)对牛冷冻精液精子质量的影响

牛精液冷冻前于精液稀释液中添加ＶＢ１２为试验组，不添加ＶＢ１２的为对照组。冷冻结果表明：试验组冻精解冻后精子活力、顶体完整率分别比对照组提高１６．１１％（Ｐ＜０．０１），１５．９％（Ｐ＜０．０１）；精子畸形率与ＧＯＴ活性均明显下降；精子存活时间延长。说明ＶＢ１２在牛精液冷冻中对牛精子形态结构具有保护作用。     

运用计算机辅助分析检测超低温保存的真鲷（Pagrosomus major）精子的质量

采用电脑辅助分析（CASA）检测二甲基亚砜(DMSO)作为抗冻剂超低温保存的真鲷精子运动特征及总运动率与受精率、孵化率的关系.以12%—21% DMSO作为保护剂超低温保存2周的精子解冻激活10s后，运动精子百分率与鲜精的没有显著的差异，而且超低温保存过程没有明显的改变其运动速度和运动方式.然而超低温保存却显著地降低了冻精运动持续的时间，激活后30s冻精总运动率显著低于鲜精，激活后60s降至（52.1±9.2）%.我们以标准化的最佳精卵比500∶1对超低温保存的精子进行人工授精实验，发现冻精总运动率与受精率（r=0.869）、孵化率（r=0.826）呈显著的正相关.实验结果显示CASA系统可以客观地检测超低温保存的真鲷精子质量，进一步证明了CASA在精子质量检测中简单、快速、准确的优点，因此该方法在鱼类精子超低温保存研究中具有广阔的应用前景.     

白色和灰色H-point法分析鲁南贝特片

比较H－point法在白色与灰色体系中的应用，考察其分析结果的可靠性。研究鲁南贝特片、氯唑沙宗、对乙酰氨基酚的紫外吸收光谱，优化纯组分区间，采用标准加入系列光谱数据，测定主要成分的含量，并与白色处理方法比较。得出了氯唑沙宗的回收率为102.9%，RSD＝2.12%（n＝7),对乙酰氨基酚的回收率为100.5%，RSD＝1.98%(n=7）；样品的标示含量为氯唑沙宗98.8%，RSD＝1.64(n=3）；对乙酰氨基酚98.3%，RSD＝1.69(n=3)。结果表明此法适合于灰色体系的分析，具有一定的实际应用价值。