RAPD标记在桂花遗传多样性检测和品种鉴定中的应用

从100个随机引物中筛选出28个多态性稳定的引物,对34个桂花品种、6个桂花野生居群个体、5个木犀属其他种进行了遗传多样性和亲缘关系的RAPD分析.共检测了231个位点,其中209个位点为多态位点(90.4%).不同品种群的多态性位点频率差异明显,按大小依次排序为银桂品种群＞四季桂品种群、金桂品种群＞丹桂品种群.聚类结果与形态分类结果不完全一致.利用来自引物A11和M18扩增的21条多态性条带构建了桂花品种的DNA指纹图谱,该图谱可以方便地应用于桂花品种的鉴定.不同桂花品种之间存在明显差异.研究结果表明,RAPD技术可用于桂花品种的鉴定和亲缘关系的探讨.     

内蒙古3个绒山羊品种RAPD的初步研究

利用随机扩增多态DNA（RAPD）技术,研究了内蒙古地区3个绒山羊品种的DNA多态性,由此推导它们之间的遗传距离和系统发育关系。在所使用的12种随机引物中,有8种随机引物扩增出多态谱带,共检测到32个RAPD标记,其中有21个发生变异。用Nei的片段公享度公式计算了品种间的遗传距离,用UPGMA聚类法构建了系统发育树。结果表明：内蒙古白绒山羊的3个类群彼此亲缘关系较近,分化不明显;内蒙古白绒山羊与罕山白绒山羊聚为一个大类,辽宁绒山羊和乌珠穆沁白绒山羊聚为一个大类,说明内蒙古白绒山羊与罕山白绒山羊有较近的亲缘关系,乌珠穆沁白绒山羊与辽宁绒山羊的亲缘关系较近。     

RAPD标记在桂花遗传多样性检测和品种鉴定中的应用(英文)

<正>从100个随机引物中筛选出28个多态性稳定的引物,对34个桂花品种、6个桂花野生居群个体、5个木犀属其他种进行了遗传多样性和亲缘关系的RAPD分析。共检测了231个位点,其中209个位点为多态位点(90.4％)。不同品种群的多态性位点频率差异明显,按大小依次排序为:银桂品种群>四季桂品种群、金桂品种群>丹桂品种群。聚类结果与形态分类结果不完全一致。利用来自引物A11和M18扩增的21条多态性条带构建了桂花品种的DNA指纹图谱,该图谱可以方便地应用于桂花品种的鉴定。不同桂花品种之间存在明显差异。研究结果表明,RAPD技术可用于桂花品种的鉴定和亲缘关系的探讨。     

木通属植物的RAPD研究

以木通属4个种的12个材料为研究对象,用RAPD技术对其进行亲缘关系分析,建立适合木通属植物的RAPD-PCR反应体系,从40个随机引物(10mer)中筛选出5个,对所有供试材料进行扩增,共获得5张DNA指纹图谱,共在52个位点上扩增出条带,平均每个引物扩增10.4个,多态位点43个,占总带数的82.7%. 指纹图谱的直观分析结果表明,1.七叶木通与三叶木通,白木通,五叶木通亲缘关系较远;2.白木通是三叶木通的一个变种, 与其有较近的亲缘关系;3.三叶木通的遗传多样性在湖南、湖北两省的分布上存在的差异很小.     

籼稻93-11和粳稻日本晴DNA插入缺失差异片段揭示的水稻籼-粳分化

碱基的插入/缺失(InDel)引起DNA序列变化并形成了DNA片段长度多态,可以用作遗传标记.为了评价基于籼稻93-11和粳稻日本晴全基因组序列比对获得的差异片段而设计的InDel引物在鉴定籼稻和粳稻两种生态型以及研究稻属不同物种之间亲缘关系的意义,采用45对InDel引物,对来自亚洲10个国家的49份籼稻、43份粳稻品种和24份野生稻进行了检验.结果表明,其中41对InDel引物鉴定籼稻或粳稻品种的准确率高于80%.主成分分析散点图显示:籼稻与粳稻存在明显的遗传分化;含AA基因组的野生稻物种与籼稻品种存在较近的亲缘关系;非AA基因组的野生稻物种不存在明显的籼-粳分化.并且证明了基于籼稻93-11和粳稻日本晴全基因组序列比对获得的InDel差异片段设计的引物可以用于栽培稻籼稻和粳稻品种的鉴定以及籼-粳分化问题的研究,及探索稻属不同物种间的亲缘关系.     

中国4个两性生殖卤虫品系的ISSR指纹分析

根据微卫星DNA序列设计了10种ISSR引物，对中国4个两性生殖卤虫品系的亲缘关系进行了分析．用10种ISSR引物对卤虫基因组DNA进行扩增，共获得188条清晰稳定的条带，75个基因座位，其中有99条多态性片段，53个多态性座位，片段长度在2000-150bp之间．聚类分析结果表明：3个内蒙品系卤虫亲缘关系较近，当遗传相似系数为0．5333时，明显把来自内蒙古和西藏的卤虫分为2个类群．     

不同巢穴尼科巴弓背蚁的RAPD分析

用RAPD技术对尼科巴弓背蚁5个巢穴的DNA样品进行分析,15个RAPD引物共检测到61个位点,每个引物产生2~7个位点,其中23个为多态位点,占37.70%,Nei's基因多样性指数H为0.1220,Shannon多态性信息指数I为0.1858。地域之间遗传相似性系数S的变化在0.8515~0.9485,遗传距离指数D的变化为0.0516~0.1603,用NTSYSpc 2.10软件包中的UPGMA法进行聚类分析。结果表明,5个不同巢穴间的尼科巴弓背蚁亲缘关系与地理距离相吻合。     

基于微卫星标记的西方蜜蜂抗螨蜂种群体遗传多态性分析

为了分析西方蜜蜂抗螨蜂种的群体遗传多态性情况,采用18对微卫星(SSR)引物对抗螨蜂种子一代和子二代,并与同场饲养不抗螨的本地意蜂和浙大蜜浆高产蜂种进行比对,共计22个群体进行遗传多样性检测.结果表明:遗传一致度在0.2时,抗螨蜂种子代发生一定的分化,其他两个品系基本一致.抗螨蜂种子代之间的亲缘关系较近(遗传距离在0.043 9以内),与本地意蜂和浙大蜜浆高产蜂种各自相互分开.从而对抗螨蜂种的选育和保护具有重要的指导意义.     

滩羊体大品系遗传标记的研究

采用RAPD(Rondom Amplified Polymorphic DNA)技术,利用混合基因池(DNA pool)法,对滩羊体大品系、普通品系进行了DNA多态性分析,从100种具有10个碱基的随机引物中,筛选出84种引物在滩羊群体基因组中共扩增出358条带,其中22种引物的扩增产物表现为多态(占22％),且扩增出32条有差异的条带,占总带数的8.94％;62种引物的扩增产物表现为单态(占62％)。滩羊体大品系的特异性条带有5条,而普通品系的特异性条带有7条,这些特异标记可以用来鉴定滩羊的两个品系;滩羊体大品系与普通品系间的遗传距离为0.136±0.087,表明两品系之间的亲缘关系很近。     

ISSR标记技术在猕猴桃遗传研究中的运用

利用ISSR技术对采自四川省猕猴桃科研基地的14个猕猴桃品种进行了遗传多样性分析．通过引物筛选,从6个ISSR引物中扩增出103条带,其中84条为多态带,占82．41％．UPGMA聚类分析结果揭示了各品种间的亲缘关系．ISSR标记说明猕猴桃品种间遗传距离与地理分布有一定关系,地理位置较近的材料能聚在一起．分子标记可用于猕猴桃种质资源的分类、鉴定及良种选育．     

过氧化物酶与不同甜瓜品种对小西葫芦黄化花叶病毒抗性的关系

研究了对小西葫芦黄化花叶病毒新疆株（Zucchiniyellowmosaicvirus-Xinjiangstrain,ZYMV）抗性不同的甜瓜品种受病毒感染后过氧化物酶活力及其同工酶谱的变化．与健康对照相比,受感染植株的酶活力均有所增高,但不同抗性品种受感染植株酶活力增高的幅度、酶活力高峰出现的时间和同工酶谱带的增多,均表现与抗性相关的规律性差异．抗性品种“新玉”的酶活力增高幅度是感性品种“网纹香”的2倍,酶峰早出现12d;2条只在感染植株中出现的同工酶带C和E在“新玉”中较“网纹香”中早出现15d,并多维持12d．抗性居中的品种“红心脆”和“向里黄”的以上指标则居“新玉”和“网纹香”之间．2条健康对照和感性品种都不存在的酶带H和I,则仅在抗性较强的品种中出现．     

不同苹果品种抗寒性的研究

为了检测适宜加工苹果不同品种在石河子的抗寒适应性,筛选适宜在石河子地区大面积推广的加工苹果品种,采用试验室模拟田间低温环境方法对8个苹果品种1年生枝条分别在4、-15、-20、-25、-30、-35℃条件下进行预处理,并对其相对电导率并计算临界半致死温度(LT40)、可溶性蛋白、脯氨酸及丙二醛含量进行研究。结果显示,经过不同梯度低温处理后,寒富、国光的萌芽率显著较高;相对电导率显著较低;国光丙二醛含量显著性较低;寒富的脯氨酸含量与可溶性蛋白含量显著较高。结论:苹果枝条经过低温胁迫后,寒富、国光、甜格力在石河子地区抗寒能力较好。     

桉叶多酚种质资源筛选

桉叶中多酚含量丰富,是一类具有开发价值的天然活性物质。对国内多个品种桉叶的多酚含量进行比较,为桉叶多酚的开发利用进行资源筛选。选择了四川、广西、湛江和广州的主要桉树品种,15种桉叶进行桉叶多酚提取和抗氧化活性筛选,其中湛江广林9号、广林29号以及广西广林9号的桉叶多酚含量和抗氧化活性均高于其它品种,可作为桉叶多酚提取原料。另外对桉叶的干燥处理方法进行了考察,结果表明阴干的桉叶多酚含量高,抗氧化活性强。     

Experimental validation of inter-subspecific genetic diversity in rice represented by the differences between the DNA sequences of ‘Nipponbare’ and ‘93-11’

The pedigrees of three sequenced rice cultivars were analyzed to show that a majority of the genetic composition of 'Nipponbare' originates from japonica cultivars while the minority originates from indica cultivars. In contrast, '93-11' is derived mainly from indica cultivars with a smaller contribution from japonica cultivars. All ancestors of 'Guang lu ai 4' appeared to be indica lines. A set of molecular markers (46 InDels and 53 SSRs) polymorphic between 'Nipponbare' and '93-11' were examined in 46 typical indica and 47 typical japonica cultivars selected from 443 accessions according to Cheng's index. All cultivars were divided into indica and japonica groups without overlapping when clustered by Cheng's index, InDels and SSRs. Much higher InDel and SSR diversity between groups than within groups implies that the marker polymorphisms between 'Nipponbare' and '93-11' represent a large proportion of inter-subspecific diversity. About 85% of indica cultivars and more than 90% of japonica cultivars were confirmed to have the same PCR banding patterns as '93-11' and 'Nipponbare', respectively. Some polymorphic loci between 'Nipponbare' and '93-11' cannot be validated in other indica and japonica cultivars, either as subspecies-specific but not predominant alleles, or alleles not specific between the two groups. It was concluded that molecular markers developed from sequence polymorphism between 'Nipponbare' and '93-11' often represent inter-subspecific diversity, although some exceptions were sensitive to either particular marker loci or particular cultivars.     

Expression of lysine-rich protein gene and analysis of lysine content in transgenic wheat

Expression vector pBPC102, which carries winged bean lysine-rich protein (wblrp) gene and dihydropicolinate synthase (DHDPS) gene, was transferred into hexaploid winter wheat cv. Jinghua No.l, Jing411, You899 and Yangnongl5 explants of immature inflorescence and immature embryos by particle bombardment. More than 100 transgenic plants were obtained under the selection of s-(2-aminoethyl)-L-cysteine (AEC). Confirmed transgenic plants of To and TI generation by PCR and PCR-Southern blotting analyses showed successful integration of wblrp gene into wheat genome. Analysis of transgenic plant lines of T2 by Northern dot-blotting showed good expression of wblrp gene in offspring seed. The content of free lysine in leaves, contents of bound lysine and total proteins in seeds of T2 transgenie wheat lines were determined and analyzed. Among 34 tested transgenic lines, levels of free lysine content in leaves of 9 transgenic lines are 2~3times higher than un-trans-formed wild-type cultivars. Among 17 analyzed transgenic lines, bound lysine content of 4 transgenic lines is more than 10% higher than that of wild-type cultivars. Our research suggests that introducing wblrp gene into wheat is an effective way to improve its nutrition quality.     

陆稻不同品种(系)幼穗分化的观察

本文分别对五个陆稻品种(系)及两个水稻品种的幼穗分化过程进行了观察.按照丁颖对水稻幼穗分化期的划分方法,划分陆稻幼穗分化各期.结果表明:1.陆稻的生育期及幼穗分化期都比水稻短.2.一般大穗、多粒型品种,幼穗分化前期分化速度比较慢.3.幼穗分化后期分化速度较快的品种,一般空秕率比较高.     

基于SSR标记构建宝巾花品种的分子指纹

【目的】针对宝巾花(Bougainvillea)品种繁多、同物异名和同名异物多有发生的现象,利用可靠的分子标记技术进行品种的有效分类。【方法】基于15个简单重复序列(SSR)位点,利用荧光标记的引物对131个宝巾花品种进行PCR扩增,扩增产物经毛细管电泳检测,分析品种多样性和遗传距离,并构建品种聚类图和指纹图谱。【结果】15个SSR位点共扩增出85个等位基因,平均每个位点的等位片段数5.60个,Shannon’s 信息指数、观测杂合度和期望杂合度的变化范围分别为0.38~1.53、0.11~0.94和0.16~0.73,平均值分别为1.04、0.50和0.57,位点的多态性信息量介于0.15~0.69之间,平均0.51。宝巾花品种的遗传距离为0.00~0.65,平均0.33;聚类分析表明,同一种的品种大多数聚在一类,但同一个种仍有品种未聚在一类或亚类,也有多个种的品种聚在一类;有多对品种存在同物异名或同名异物的现象;基于11个位点可有效鉴别131个品种,建立了各品种的分子指纹图谱。【结论】对同物异名或同名异物的品种,需要进一步确认品种中文名或拉丁名;基于SSR标记的宝巾花品种的指纹图谱为宝巾花品种登记、注册和知识产权保护提供了可靠技术,也为品种鉴定提供了有效手段。     

小麦黑胚病菌链格孢产毒培养条件及其毒素的致病力测定

对小麦黑胚病菌链格孢(Alternaria alternata)产毒条件及其粗毒素的致病力进行了研究.结果表明,链格孢菌在不同的培养基、pH值、培养天数所制备的毒素致病力差异显著,以初始pH值为4的PSK培养液中培养13～15 d时提取的粗毒素毒性最强,而且对小麦种子萌发和种子根系的生长均有明显的抑制作用.同时,在小麦幼穗上接种病原菌(Alternaria alternata)及其毒素均会造成黑胚症状,以感病品种比抗病品种更为显著.     

白粉菌对抗、感白粉病小麦品种叶片组织侵染情况的研究

采用透明染色法对白粉菌15号生理小种侵染的小麦叶片进行处理,观察不同时间段白粉菌对京411,Brock及其杂交后代近等基因系（NIL）叶片的侵染情况。结果表明：Brock,NIL抗病耐受性均强于京411,此结果可为今后抗病基因的克隆、植物抗性信号转导机制等研究提供细胞学上的依据。     

20个荷花品种花粉活力测定及贮藏研究

为研究荷花花粉的生活力,选择了20个荷花品种分别用TTC染色法、亚甲基蓝染色法和离体萌发法测定了花粉的染色率和萌发率,并研究了不同温度贮藏条件对花粉生活力的影响.结果表明,亚甲基蓝染色法不能作为荷花花粉生活力的测定方法,离体萌发法结果更直观和准确;20个荷花品种间的离体萌发率差异明显,最高为13.1%,最低为0;不同品种在三种贮藏温度下萌发率变化趋势相同,4℃条件下贮藏较有利于荷花花粉生活力的保持.