CTLL—2／MTT法快速测定IL—2基因转移效率的研究

应用包装ＩＬ－２基因的逆转录病毒载体，将ＩＬ－２基因导入小鼠成纤维细胞ＮＩＨ－３Ｔ３和小鼠黑色素瘤细胞Ｂ１６，建立了ＮＩＨ－３Ｔ３／ＩＬ－２－２，ＮＩＨ－３Ｔ３／ＩＬ－２－７和Ｂ１６／ＩＬ－２－４等３个转基因细胞株，应用ＣＴＬＬ－２／ＭＴＴ法快速测定各转基因细胞株分泌上清ＩＬ－２的浓度．转染效率最高的ＮＩＨ－３Ｔ３／ＩＬ－２－７其ＩＬ－２分泌量高达１４２２ｕ／（１０６ｃ·２４ｈ），表明这一基因转移系统能有效地将外源基因导入靶细胞．ＣＴＬＬ－２／ＭＴＴ法能快速、简便、有效地检测ＩＬ－２的表达．     

Ha—ras和Ki—ras癌基因转染和细胞对小鼠细小病毒杀伤敏感…

为研究Ｈａ－ｒａｓ和Ｋｉ－ｒａｓ癌基因转染和细胞对小鼠细小病毒（ＭＶＭ）杀伤敏感性间的关系，两个细胞株，即Ｋｉ－ｒａｓ癌基因转株ＤＴ和Ｈａ－ｒａｓ癌基因转化细胞株ＲＥＦ４－３，被用来作为研究材料，体外细胞集落形成率和细胞在裸小鼠体内的成瘤能力测定显示，和对照细胞ＮＩＨ／３Ｔ３相比之这ＲＥＦ４－３和ＤＴ对ＭＶＭ的杀伤作用更敏感，同时，ＤＮＡ杂交和蛋白免疫沉淀实验结果也显示，在ＲＥＦ４－３和ＤＴ细胞中     

眼镜蛇（Najanajaatra）毒膜毒素MT—I的生物学效应研究

从眼镜蛇毒中纯化出膜毒素ＭＴ－Ｉ，该毒素与磷脂酶Ａ２产生协同学保血效应，使同二胜利肌等标本产生进行性挛缩，对体外Ｈｕｔ－７８细胞有杀伤作用，腹腔注射能引起家猫的心电图异常。     

牛α—s1酪蛋白基因3‘端DNA的PCR扩增,克隆及鉴定

本研究以牛血总ＤＮＡ为模板，用ＰＣＲ技术扩增牛α－ｓ１酪蛋白基因的５＇端３．６ｋｂＤＮＡ片段和３＇端１．５ｋｂＤＮＡ片段的调控区序列，得到了相应的特异性扩增片段．用Ｋｌｅｎｏｗ处理后，将两个扩增片段分别与经Ｓｍａｌ酶切的ｐＵＣ１８质粒载体用Ｔ４ＤＮＡ连接酶连接，转化大肠杆菌ＪＭ１０９．在含有Ｘ－ｇａｌ，ＩＰＴＧ和Ａｍｐ的选择培养基上培养．从白色菌落中提取质粒ＤＮＡ，进行限制酶切鉴定．结果得到一个插入有１．３ｋｂＤＮＡ片段的阳性克隆．对其进行部分序列分析表明，该片段为５＇端缺失约１７０ｂｐ的牛α－ｓ１酪蛋白基因３＇端及下游区序列．     

水稻花发育相关MADS—box基因的克隆

以水稻幼穗总ＲＮＡ为模板,利用３’－ＲＡＣＥ克隆了８个接近于全长的水稻ＭＡＤＳ－ｂｏｘ基因ｃＤＮＡ。在ＧｅｎＢａｎｋ的数据库中查询表明,其中２个ＦＤＲＭＡＤＳ１,ＦＤＲＭＡＤ＃２分别与已报道的水稻ＭＡＤＳ－ｂｏｘ基因ＯＳＭＡＤＳ５和ＯｓＭＡＤ４５有极高的同源性。另外６个为新的未见报道的的水稻ＭＡＤＳ－ｂｏｘ基因。     

小鼠金属硫蛋白基因—I在CHO细胞中稳定表达及其在医疗…

将小鼠的ＭＴ－Ｉ基因插入ｐＳＶ２－ｄｈｆｒ质粒的ＥｃｏＲＩ位点，构建了具有ＳＶ４０和ＭＴ双启动子并正向插入ＭＴ－Ｉ基因的表达载体。用改良的磷酸钙／ＤＮＡ沉淀法将表达载体导入ＣＨＯ－ｄｈｆｒ＾－细胞内，用不含次黄嘌呤（Ｈ）和胸腺嘧啶（Ｔ）的选择培养基筛选出稳定表达ＭＴ阳性克隆Ｄ－２２，经检测１０＾６细胞的ＭＴ表达量约为１．８μｇ，Ｄ－２２细胞对Ｃｄ＾２＋浓度抗性较之ＣＨＯ－ｄｈｆｒ＾－细胞高１４倍。     

1－（N－哌啶甲基）－3－苯基－4－芳酰基－1，2，4－三唑啉－5－硫酮的合成

通过１－苯甲酰基－４－芳酰基氨基硫脲在碱性条件下环化脱水成为３－苯基－４－芳酰基－１，２，４－三唑啉－５－硫酮Ⅰ１～９．Ⅰ１～９与３７％甲醛溶液和六氢吡啶在二氧六环溶液中发生Ｍａｎｎｉｃｈ反应合成了９种新的１－（Ｎ－哌啶甲基）－３－苯基－４－芳酰基－１，２，３－三唑啉－５－硫硐Ⅱ１～９．所得１８种新化合物的结构经ＩＲ，１Ｈ－ＮＭＲ和ＭＳ鉴定．     

MT—hGH基因注入小鼠受精卵的研究

用显微注射法，将MT－hGH融合基因注入昆明白小鼠受精卵雄原核中，受注的原核卵经体外培养发育的198枚2细胞胚、45枚桑椹胚和161枚胚泡，移植到54只假孕受体，其中16只妊娠产仔只，存活到供试的仔鼠25只，小鼠长到3个月后，切尾制备DNA，经DNA斑点杂交和Southern印迹杂交检测基因整合情况，25只小鼠中3只有融合基因整合，称为转基因小鼠，仔鼠21日龄离乳后饮水中加入锌（Za^ )，以诱导融合基因表达，85日龄时，转基因小鼠体重比对照组重32．0％，还讨论了基因整合方式对胚胎发育的影响。     

乙烯系单体自由基聚合的阻聚效应（XX）：取代哌啶羟胺及其…

研究了２，２，６，６－四甲基－４－羟基哌啶羟胺（ＴＭＨＰＨＡ）和２，２，２，６－四甲基－羟基哌啶－１－氧自由基（ＴＭＨＰＯ）对偶氮二异丁腈（ＡＩＢＮ）６０℃引发的苯乙烯（Ｍ１）－甲基丙烯酸甲酯（Ｍ２）共聚合的行为，结果表明，两种阻聚剂对苯乙烯（Ｓｔ）－甲人烯酸甲酯（ＭＭＡ）共聚合均呈现良好的阻聚效应，其中ＴＭＨＰＡ略优于ＴＭＨＰＯ；同时观察到Ｓｔ－ＭＭＡ共聚表现活化能和竞聚率表现出的差异，当阻聚剂     

哺乳动物CuMT和（Cu,Zn）MT与H2O2反应动力学的研究

ＣｕＭＴ紫外光谱的特点是在２００￣３５０ｎｍ有吸收，在２６０ｎｍ处有一肩峰。２６０ｎｍ的紫外吸收为ＣｕＭＴ中Ｃｕ－Ｓ键的特征吸收，因此通过观察紫外光谱中ＣｕＭＴ在２６０ｎｍ处吸光度的变化，研究了Ｈ２Ｏ２引起哺乳动物ＣｕＭＴ中Ｃｕ－Ｓ键断裂的反应动力学，并且比较了ＭＴ中金属组成对反应动力学的影响，结果表明，锌的存在可以稳定ＣｕＭＴ。     

3—苯基—4—芳酰基—1,2,4—三唑—5—巯基乙酸和—5—甲硫基类化合…

合成９种３－苯基－４－芳酰基－１，２，４－三唑－５－巯基乙酸Ⅱ１－９和９种３－苯基－４－芳酰基－５－甲硫基－１，２，４－三唑Ⅲ１－９类化合物，１８种新化合物的结构经ＩＲ〈＾１Ｈ－ＮＭＲ的ＭＳ鉴定。     

β—内酰胺酶基因在谷氨酸产生菌T6—13染色体上的…

以质粒ｐＵＣ１３编码的β－内酰胺酶基因为外源基因，通过随机连接谷氨酸产生菌Ｔ６－１３染色体ＤＮＡ片段后转化Ｔ６－１３原生质体，使其整合到染色体上，得以表达。在实验条件下，所测１９株转化子的抗性都有很高的稳定性，其中１０株能百分之百地保持抗性。经生物素标记的ｐＵＣ１３为探针的分子杂交实验证实抗性基因已整合到Ｔ６－１３菌染色体ＤＮＡ上。     

番红花离体培养下花柱－柱头状物的诱导及植株再生

番红花花被和花柱，在含４ｍｇ／ＬＫＴ，３ｍｇ／ＬＮＡＡ和０．６ｍｇ／Ｌ４ＰＵ－３０的ＭＳ培养基中可定向再生红色花柱－柱头状物，花被的诱导频率大于花柱；长度为２２～６６ｍｍ的花芽具有较高的诱导频率（３４．４％）．番红花球茎在含１．４ｍｇ／ＬＮＡＡ和０．６ｍｇ／ＬＫＴ或０．８ｍｇ／Ｌ２，４－Ｄ的Ｂ５和ＭＳ培养基上，均能诱导出颗粒状愈伤组织，愈伤组织在附加０．６～１．４ｍｇ／ＬＮＡＡ的ＭＳ培养基上，既可形成小球茎，也能长出完整植株     

用dystrophin cDNA1－7的三个亚探针检出四个新的TaqⅠ限制性片段长度多态

报道在ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎ基因内新发现四个ＴａｑⅠ限制性片段长度多态，用ｄｙｓｔｒｏｐｈｉｎｃＤＮＡ１—２ａ检测到的ＴａｑⅠ等位片段是４．０ｋｂ（Ａ１）和３．３ｋｂ（Ａ２），用ＣＤＮＡ２ｂ—３检测到的ＴａｑⅠ等位片段是７．２ｋｂ（Ａ１）和６．８ｋｂ（Ａ２）。用ｃＤＮＡ５ｂ—７检测到两对新的ＴａｑⅠ等位片段，分别是１０．０ｋｂ（Ａ１）和８．４ｋｂ（Ａ２），以及２．５５ｋｂ（Ｃ１）和１．６ｋｂ（Ｃ２）片段。在４５个ＤＭＤ／ＢＭＤ家系的基因检测中，这四对新的等位片段，在部分家系的上下代传递中分别呈孟德尔遗传学分离。它们的实际观察杂合体频率依次是：０．２９，０．０７，０．０４和０．１８，预期杂合体频率是０．２０，０．０６，０．０２和０．２０。这些新的ＴａｑⅠ限制性片段长度多态，已在杜氏肌营养不良症家系的遗传连锁分析及致病基因携带者的诊断中，显示出较高的；临床应用价值。     

妊高征候选基因EDN1多态性的初步研究

目的：内皮素－１基因是妊高征的候选基因之一。通过研究该基因ＴａｑⅠ位点在中国人群中的多态性,探讨中国人群中ＥＤＮ１与妊高征的关系。方法：根据ＥＤＮ１第４内含子中多成性片段的有关序列,设计相应引物,建立检测该多态性片段的ＰＣＲ技术技术。结果：２６个样品５２个内皮素－１基因ＴａｑⅠ位点等位基因中Ｔ１的频率为８０．９％,Ｔ２的频率为１９．１％。结论：显示中国汉族人群内皮素－１基因中存在着ＴａｑⅠ酶切位点     

植物病毒病化学防治剂的探寻：Ⅲ.2,4—二氧六氢—1,3,5三…

以２，４－二氧六氢－１，３，５－三嗪为先导化合物，引入不同的酰基，进行Ｎ－酰化结构改造，合成了７个新化合物，抗病毒活性测试表明，其中４个化合物对ＴＭＶ的抑制率达到５０－５３％，与参照物ＤＡＤＨＴ接近。     

乙烯系单体自由基聚合的阻聚效应(XX)取代哌啶羟胺及其稳定自由基对苯乙烯-甲基丙烯酸甲酯共聚合的影响

研究了２，２，６，６－四甲基－４－羟基哌啶羟胺（ＴＭＨＰＨＡ）和２，２，６，６－四甲基－羟基哌啶－１－氧自由基（ＴＭＨＰＯ）对偶氮二异丁腈（ＡＩＢＮ）６０℃引发的苯乙烯（Ｍ１）－甲基丙烯酸甲酯（Ｍ２）共聚合的行为．结果表明，两种阻聚剂对苯乙烯（Ｓｔ）－甲基丙烯酸甲酯（ＭＭＡ）共聚合均呈现良好的阻聚效应，其中ＴＭＨＰＨＡ略优于ＴＭＨＰＯ；同时观察到Ｓｔ－ＭＭＡ共聚表观活化能和竞聚率表现出的差异．当阻聚剂为２００μｇ时，共聚物组成发生改变，它们的恒比共聚点由对照实验的０．５２９分别变化为０．５４３（ＴＭＨＰＨＡ）和０．５６７（ＴＭＨＰＯ）．     

CTMAB存在下铬（Ⅲ）与PAR及三乙醇胺的显色反应

研究了在溴化十六烷基三甲基铵（ＣＴＭＡＢ）存在下，铬（Ⅲ）与４－（２－吡啶偶氮）－间苯二酚（ＰＡＲ）及三乙醇胺（ＴＥＡ）的显色反应。结果表明在ｐＨ６．８～７．８的三乙醇胺及其盐酸盐的缓冲体系中，经沸水浴２０ｍｉｎ，Ｃｒ（Ⅲ）－ＰＡＲ－ＴＥＡ显色完全，ＣＴＭＡＢ有较好的增敏及稳定作用；λ_（ｍａｘ）＝５４０ｎｍ，ε_（５４０）＝５．６×１０~４Ｌ·ｍｏｌ~（－１）·ｃｍ~（－１），Ｃｒ（Ⅲ）含量在０．８－８×１０~（－４）ｇ·Ｌ~（－１）范围内吸光度遵从比尔定律。     

巴西铁的茎组织培养

以巴西铁（Ｄｒａｃａｅｎａ　ｓａｎｄｅｒｉｅｎａ）茎段为接种材料，ＭＳ为基本培养基，吲哚乙酸（ＩＡＡ）、茶乙酸（ＮＡＡ），２，４－二氯苯氧乙酸（２．４－Ｄ）、６－苄氨基嘌呤（６－ＢＡ）、６一糠基氨基嘌呤（６－ＦＡ）、吲哚丁酸（ＩＢＡ）、生根粉（ＡＢＴ１）、玉米素（ＺＴ）为附加成分，进行诱导、分化、生根试验。诱导结果表明：ＩＡＡ不起作用，２，４－Ｄ有较好的促进作用，０．５ｍｇ／Ｌ（２，４－Ｄ）＋２ｍｇ／Ｌ（６－ＢＡ）组合，诱导率高达９０％。分化结果表明：ＮＡＡ、６－ＢＡ效果较好，６－ＦＡ作用不明显，ｌｍｇ／ＬＮＡＡ＋４ｍｓ／Ｌ（６－ＢＡ）＋２ｍｓ／ＬＺＴ组合，分化率最高．达８１．１％。生根结果表明：ＭＳ＋０．５ｍｇ／ＬＮＡＡ＋０．５ｍｇ／Ｌ（６－ＦＡ），ＭＳ＋０．４ｍｇ／ＬＮＡＡ＋２ｍｇ／ＬＩＢＡ，ＭＳ＋０．２ｍｇ／ＬＮＡＡ＋０．１ｍｇ／Ｌ（６－ＦＡ）＋ＡＢＴ１三种培养基均发根，生根率７０％以上，根粗，但有点脆，若培养基中加入活性碳产生的根则细而韧。     

2－苯亚甲基－3－丁酮酸乙酯与芳香胺的Mannich反应

２－苯亚甲基－３－丁酮酸乙酯与芳香胺和ｗ＝３７％甲醛水溶液或芳胺和甲醛的缩合物在氯化氢－无水乙醇存在下可直接发生的Ｍａｎｎｉｃｈ反应，得到１－对位取代芳基－２－苯基－３－羰乙氧基－哌啶－４－酮。共合成了６个新化合物，产率为４７％～６１％，用ＩＲ，１ＨＮＭＲ，１３ＣＮＭＲＭＳ和元素分析确定了结构。