氯化三丁基锡对鲤鱼肝胰脏线粒体DNA的影响

研究了氯化三丁基锡(TBT-Cl)对鲤鱼肝胰脏线粒体DNA(mtDNA)在体内和体外的毒性作用.结果表明,在体外反应中,200mg/LTBT-Cl可以引起双链闭环的mtDNA部分单链打开的损伤,浓度为600mg/L时,导致大部分mtDNA被切断成线状的严重损伤.体内实验0.05μg/L浓度即可引起mtDNA的严重损伤.     

从微量血中快速制备线粒体DNA片段

目的　建立并鉴定用于从微量血中快速制备线粒体DNA片段的技术 .方法　采用微量血样品 ,改进提取线粒体DNA的方法 ;以不同的方法提取的血DNA为模板 ,同时扩增nDNA上的基因片段和mtDNA上的基因片段 ,PCR相对定量分析比较各种方法提取的mtDNA片段的纯度 ;结果　用华美公司生产的ReadyPCR(tm)微量全血DNA纯化系统和作者的方法都得到了mtDNA ,而用作者的方法获得的mtDNA的纯度较高 ;结论　由于线粒体DNA与核DNA存在有同源片段 ,ReadyPCR(tm)微量全血DNA纯化系统和常规酶解法提取DNA不适合用于对mtDNA的鉴定 ,作者的方法简便快捷地排除了核DNA的污染 ,非常适合于对mtDNA进行PCR分析 .     

小麦线粒体DNA理化特性的初步研究

对小麦(冀麦七号)线粒体DNA(mtDNA)理化特性的初步研究实验表明,小麦mtDNA由主带(大分子)和小分子群两部分组成。在1×SSC溶液中,对小麦mtDNA的热变性特性进行了分析,其Tm值为86℃,(G+C)％含量为40.8。本实验制备的小麦mtDNA大分子都是线状分子;mtDNA小分子中,主要是线状分子,也有少量的环状分子。mtDNA大分子的分子量为58.02—103.09×10~6道尔顿,线状和环状mtDNA小分子量分别为2.4—11.6×10~6道尔顿和0.4—9.1×10~6道尔顿。     

太行山猕猴种群mtDNA遗传多样性研究

2007年11月～2008年2月,利用非损伤性取样法,在太行山猕猴国家级自然保护区采集到3个地理单元、5个野生种群猕猴个体的粪便样品,并从22份样品中提取到DNA,在此基础上,分析和探讨了野生太行山猕猴种群的遗传多样性状况及种群遗传结构.结果表明:①在341 bp的mtDNA控制区序列中发现11个变异位点,其中转换和颠换的位点分别为9个和2个;②在3个地理单元中,共定义了9种单倍型;③AMOVA分析结果表明,88.02％和11.03％的遗传变异分别发生在各地理单元间和各种群间,而地理单元内的各种群间的遗传变异仅占0.95％,且济源、焦作和新乡3个地理单元间存在着显著的遗传分化(P＜0.01),无共享单倍型;④济源黄楝树种群具有最多的单倍型数(3),最高的单倍型多样性(0.833),最高的核苷酸多样性(0.002 93)和最高的平均核苷酸差异数(1.000).因此,从保护物种基因多样性的角度考虑,建议自然保护区管理部门将该种群列为优先保护单元.     

两种优化的提纯鱼类线粒体DNA的方法

以鱼类的卵巢、肝脏为材料，采用两种方法制备并纯化了线粒体DNA（mtDNA），并进行了琼脂糖电泳检查。结果表明，两种方法都能获取高浓度的mtDNA样品，且收得率都较高。     

鱼类线粒体基因组研究进展

线粒体基因组(mitochondrial genome DNA,mtDNA)具有严格的母系遗传且能进行自我复制,并且在世代传递过程中不易发生重组、进化速率较快等优点.因此mtDNA广泛应用于系统进化、种群遗传、适应性进化等领域中.本文对鱼类mtDNA研究做了详细阐述,系统总结了近年来鱼类mtDNA结构与特征、线粒体的起源与演化、种群遗传、适应性进化、鱼类条形码物种识别等研究进展,以期对相关研究有一定参考价值.     

一母系遗传非综合征耳聋家系的线粒体DNA突变分析

在问卷调查及家系随访的基础上,在安徽省淮北市收集到一母系遗传非综合征耳聋家系,利用聚合酶链式反应-限制片段长度多态性分析(PCR-RFLP)和测序技术,检测了该家系成员线粒体DNA(mtDNA)上可导致非综合征耳聋的两个突变热点处(12S rRNA基因上的1 555位点和tRNASer(UCN)基因上的7 445位点)的碱基变化,发现该家系所有母系成员的mtDNA上都有A1555G同质型突变,但7 445位点无异常;进而对该家系两个表型明显不同母系成员(一例具有先天性耳聋表型,另一例听力正常)的mtDNA进行全长测序,结果未在mtDNA上发现除A1555G以外的其他位点突变,只发现了27处多态性序列变化,且两成员的mtDNA无序列差异.说明mtDNA上的A1555G同质型突变是该家系部分母系成员致聋的分子生物学基础之一;推测该家系A1555G突变携带者临床表型的差异可能与mtDNA多态性无关,而更可能是核修饰基因与A1555G突变协同作用的结果.     

茄子雄性不育株和可育株的胞质DNA和核DNA差异分析

以茄子(Solanum melongenaL)雄性不育株“正兴1号”(S)和可育株(F)的总DNA为模板,对60个随机引物进行了筛选,找到5个其RAPD(Random amplified polymorphic DNA,RAPD)扩增产物在茄子雄性不育系和对照材料间存在稳定差异的引物．将该5个引物同时扩增总DNA、核DNA和线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)．以总DNA为模板时得到多态性片段9个,以核DNA为模板时得到5个,以mtDNA为模板时得到9个．以总DNA为模板时得到的9个扩增片段中,有5个在总DNA和mtDNA中同时出现,而在核中没有出现,即认为来自mtDNA,这5个片段中,有4个来自可育株,1个来自不育株,说明不育株和可育株在mtDNA上存在差异;有4个片段同时出现在以总DNA和核DNA为模板的扩增中,但在以mtDNA为模板的扩增中却没有出现,认为是来自核DNA,这4个片段中,有3个来自不育株,一个来自可育株,说明可育株和不育株在核DNA上也存在差异．结果初步表明：新发现的茄子雄性不育可能是核质相互作用所引起．     

Can the occurrence of rare insertion／deletion polymor—phisms in human mtDNA be verfied from phylogeny？

Due to its specific characteristics,such as ma-ternal inheritance and absence of recombination,each mtDNA belongs to certain monophyletic clade in the rooted mtDNA tree(haplogroup) according to the mutations it har-bors,Rare mutation(excluding parallel mutation) occurring at multiple times in different haplogroups could thus be a potential reading error according to the mtDNA phylogent.This experience has been widely used im double-checking the credibility of the rare mutations in human mtDNA sequences.However,no test has been performed so far for the feasibility of applying this strategy to the rare insertion/deletion(indel) events in mtDNA sequences.In this study,we attempted to relate the rare indels in mtDNAs to their haplogroup status in a total of 2352 individuals from 50 populations in China.Our results show that the insertion of A at position 16259 is restricted to a subclade of haplogroup Cand can be verified.The other indel polymorphisms,Which occur in the repeat of the deleted or inserted nucleotide(s),may not be distin-guished from phantom mutations from a phylogenetic point of view.Independently and multiply sequencing the frag-ment with the indel is the best and the most reliable way for confirmation.     

线粒体假基因--核基因组中的分子化石

核基因组中线粒体DNA片段是线粒体基因向核基因组转移造成的．这些线粒体来源的核DNA片段都是不能表达的假基因，这种序列容易被通用引物从总DNA模板中优先扩增出来，它的存在必然给mtDNA的应用带来负面影响．总结了脊椎动物线粒体假基因的特点，结合笔在GenBank上发现的登录为mtDNA而实际为假基因的序列提出假基因存在的普遍性，分析这种序列对mtDNA在人类线粒体病理学、脊椎动物系统进化研究等方面应用的负面影响．对假基因在线粒体和细胞核两基因组进化研究以及物种系统发育学研究中的应用前景进行展望．     

Mitochondrial DNA analysis of ancient Sampula population in Xinjiang

The archaeological site of Sampula cemetery was located about 14 km to the southwest of the Luo County in Xinjiang Khotan, China, belonging to the ancient Yutian kingdom. ¹⁴C analysis showed that this cemetery was used from 217 B.C. to 283 A.D. Ancient DNA was analyzed by 364 bp of the mitochondrial DNA hypervariable region I (mtDNA HVR-I), and by six restriction fragment length polymorphism (RFLP) sites of mtDNA coding region. We successfully extracted and sequenced intact stretches of maternally inherited mtDNA from 13 out of 16 ancient Sampula samples. The analysis of mtDNA haplogroup distribution showed that the ancient Sampula was a complex population with both European and Asian characteristics. Median joining network of U3 sub-haplogroup and multi-dimensional scaling analysis all showed that the ancient Sampula had maternal relationship with Ossetian and Iranian.     

内蒙古砧子山墓地古人的线粒体DNA多态性分析

为了研究内蒙古元上都遗址砧子山墓地古代人群的遗传结构及其可能来源,对该墓地古人的DNA进行了抽提、扩增和测序,获得了10个个体的线粒体DNA高可变一区序列.结合现代东亚、北亚、中亚和欧洲人的线粒体DNA数据进行了系统发育分析和多维尺度分析.研究结果表明:埋藏在砧子山墓地的元代居民为汉族人,主要是来自中国北方地区的汉族.本研究为揭示元代的复杂社会结构和人群历史动态提供了新的方法.     

Mitochondrial DNA analysis of ancient Sampula population in Xinjiang

The archaeological site of Sampula cemetery was located about 14 km to the southwest of the Luo County in Xinjiang Khotan,China,belonging to the ancient Yutian kingdom.~14C analysis showed that this cemetery was used from 217 B.C.to 283 A.D. Ancient DNA was analyzed by 364 bp of the mitochondrial DNA hypervariable region I (mtDNA HVR-I),and by six restriction fragment length polymorphism (RFLP) sites of mtDNA coding region.We successfully extracted and sequenced intact stretches of maternally inher- ited mtDNA from 13 out of 16 ancient Sampula samples.The analysis of mtDNA haplogroup distribution showed that the ancient Sampula was a complex population with both European and Asian characteristics.Median joining network of U3 sub-haplogroup and multi-dimen- sional scaling analysis all showed that the ancient Sampula had maternal relationship with Ossetian and Iranian.     

云南大理白族和汉族弱精子症患者精子mtDNA 4977 bp缺失相关性研究

探讨云南大理白族和汉族弱精子症患者精子线粒体DNA(mtDNA) 4977 bp缺失的相关性。收集云南大理白族弱精子症患者137例,汉族弱精子症患者121例,正常对照组大理白族和白族精子活力正常人各120例,提取精液基因组DNA,采用聚合酶链式反应(PCR)技术进行精子mtDNA4977bp缺失的研究。结果显示,120例正常对照的大理白族精子活力正常人中有10例(8.33%)存在mtDNA4977 bp缺失;而137例大理白族弱精子症患者中有89例(64.96%)存在mtDNA 4977 bp缺失。两组4977 bp缺失频率比较有极显著性差异(P 0.01)。120例正常对照的汉族精子活力正常人中有7例(5.83%)存在mtDNA 4977 bp缺失;121例大理白族弱精子症患者中有85例(70.25%)存在mtDNA 4977 bp缺失。两组4977 bp缺失频率比较差异有极显著性(P 0.01)。同时发现大理白族弱精子症患者与汉族弱精子症患者mtDNA 4977 bp缺失频率无显著性差异(P 0.05)。大理白族和汉族人群mt DNA 4977 bp缺失与弱精子症的发病有明显的关联,提示mtDNA 4977 bp缺失在弱精子症的发生中可能起重要作用。     

淡水鱼类线粒体DNA D-loop基因的引物设计和应用

 线粒体DNA测序已广泛应用于鉴定和区分种类以及解决系统进化关系问题。本文选取已测定的主要淡水鱼类的线粒体DNA D-loop基因序列进行同源性比较,寻找保守序列,利用简并性原则设计一对通用的简并引物。利用设计的引物对广东省珠江流域主要的淡水鱼类线粒体DNA D-loop控制区基因进行扩增,均能获得单一的目的DNA片断,特异性扩增产物大小为1 kb左右。经测序及与GenBank同源序列的比较,证实为包含线粒体控制区全序列的扩增产物。本研究所设计的引物和应用的方法可以快速地同时对多种鱼类进行大规模的遗传背景分析,鉴定某些难于鉴别的近缘物种,为我国鱼类的种类鉴定、地理种群鉴别及种质资源的评估提供重要的工具。     

内蒙古和林格尔东周时期古代人群的分子遗传学分析

对10个古代个体的线粒体DNA高可变Ⅰ区进行了扩增和测序. 基于和林格尔古代人群与现今相关欧亚人群的mtDNA序列， 进行了系统发育分析和多维尺度分析. 研究结果表明, 和林格尔古代人群在母系遗传上与现在北亚人群的亲缘关系最近. 结合考古学、 人类学以及分子生物学的研究， 推断这个古代人群是从蒙古高原以及外贝加尔地区南下迁移至今天的内蒙古和林格尔地区的游牧人.     

饮牛沟墓地古人骨线粒体DNA的研究

对内蒙古饮牛沟战国时期墓地的古代人群（Yng古代人群）进行分子生物学研究, 获得了线粒体高可变一区DNA序列, 初步确定了单倍型归属并搜寻其共享序列, 与现代人群对比构建系统发育树和多维尺度分析. 结果表明, 饮牛沟古代人群与现代东亚人群在母系遗传关系上较近.