单克隆抗体靶向治疗大肠癌的研究进展

大肠癌是最常见的消化道恶性肿瘤之一.已证实,大肠癌肿瘤细胞生长与血管内皮生长因子（VEGF）和表皮生长因子受体（EGFR）的过度表达均有密切的关系,作为VEGF和EGFR单克隆抗体,贝伐单抗、西妥昔单抗、帕尼单抗通过阻断VEGF和EGFR的活性,发挥抗肿瘤的作用,为治疗大肠癌开辟了一条新途径.现就近年来单克隆抗体针对大肠癌的治疗作用的研究进展进行综述.     

Ang-2在大肠癌血管生成和肿瘤生长中的作用

目的探讨促血管生成素Ⅱ(Angiopoietin-2，Ang-2)在肠腺瘤和大肠癌组织生长和血管生成中的作用。方法采用免疫组化实验方法检测62例大肠癌和30例肠腺瘤手术标本中Ang-2、CD-34和ki67蛋白表达量，同时以16例正常大肠粘膜组织作对照。结果Ang-2、ki67蛋白和微血管密度(MVD)在大肠癌和肠腺瘤组织中均有高表达，正常大肠粘膜组织表达量少；肠癌组织表达水平明显高于肠腺瘤样组织，且两者均高于正常对照组；肠癌Ang-2与MVD和ki67在相应组织中的表达成正相关。结论肠癌和肠腺瘤组织中过多表达Ang-2与肿瘤血管和肿瘤生长密切相关，Ang-2在大肠癌血管生成及其肿瘤发生、发展过程中起着重要作用。     

野生型p53基因重组体腺病毒介导的肿瘤抑制作用

采用同源重缚方法构建了野生型ｐ５３全长ｃＤＮＡ的重组体腺病毒，通过转导人卵巢癌细胞系ＳＫ－ＯＶ－３和黑色素瘤细胞系ＷＭ－９８３Ａ，证实腺病毒能介导ｐ５３基因进行有效转移，并能显著抑制这两种肿瘤细胞的生长和集落形成能力，生长抑制率分别这到９３％和８６％，对两种肿瘤细胞裸鼠皮下移植瘤的治疗实验表明，ｐ５３能明显抑制肿瘤的生长，流式细胞计数ＤＮＡ片段化及ＴＵＮＥＬ分析证实，Ｐ５３可诱导肿瘤细胞凋亡和Ｇ１     

荷瘤裸鼠模型的T细胞功能重建与肿瘤凋亡

给人大肠癌Ｈ９０１和ＳＷ１１１６ＮＣ裸小鼠模型接种同系半裸鼠的胸腺，经２－３周免疫效应潜伏期后，直径约１ｃｍ的瘤块逐渐缩小，在９周内完全消失。光镜检查发现，肿瘤细胞在瘤块内逐渐缩小，被浸润的淋巴细胞和间质分割成孤岛状，在５周未肿瘤细胞基本消失，继而是一个肿瘤残存结构被逐步完全吸收的过程。透射电镜检查发现肿瘤细胞的死亡与细胞凋亡现象有关，即肿瘤细胞的核染色质浓聚，沿核膜分布。在先天性Ｔ细胞免疫缺陷的ＮＣ裸小鼠中经胸腺移植后部分重建裸鼠Ｔ细胞功能杀灭实体肿瘤的模型对进一步研究免疫系统抗肿瘤作用的机理有一定的意义。     

硒诱导肿瘤细胞凋亡的实验研究

目的：研究硒抑制肿瘤细胞生长的机理。方法：采用DNA电泳及流式细胞仪分析等方法。结果：硒能诱导Hela细胞调亡。1．5％琼脂凝胶电泳呈现典型的阶梯现象。流式细胞仪检测显示大量的亚二倍体细胞。结论：硒促进Hela。肿瘤细胞凋亡,可能是硒抑制肿瘤细胞生长的机理之一。     

肿瘤组织块接种法建立人脑肿瘤裸小鼠移植模型的研究

以脑肿瘤患者肿瘤组织块接种法建立三种人脑脑肿瘤裸小鼠移植模型，成功率为４２．８％。移植瘤在质地、血供、间质结构、生长特征等方面良好保持了原肿瘤特性，其直接、快速、稳定地建立模型的方法优于肿瘤细胞系接种法。较高的建模型成功率有赖于快速接种、较大接种量、长期观察、良好的净化条件等因素。     

维生素A诱导Shope肿瘤细胞凋亡

目的：探讨维生素A抑制Shope肿瘤细胞生长的机理。方法：电镜观察Shope肿瘤细胞凋亡的形态学改变：琼脂糖凝胶电泳进行DNA片段化；流式细胞仪检测凋亡细胞的百分比。结果：电镜下可VA诱导的Shope肿瘤细胞变小，细胞浆固缩，染色质聚集并靠近核膜，在1．5％琼脂糖凝胶电泳中，Shope肿瘤细胞DNA呈现明显的阶梯状图谱。流式细胞仪检测经10－5MV作用24h、48h、72h后，凋亡细胞百分比分别为：17．1％、22．4％、32．4％。结论：以上结果表明，VA对Shope肿瘤细胞有明显的抑制作用。     

血管内皮生长因子、微血管密度与大肠癌浸润转移及预后的关系

大肠癌是最常见消化道肿瘤之一,大多数大肠癌患者多死于肿瘤的转移与扩散,而血管新生是大肠癌恶性演变过程中最重要的环节之一,血管内皮生长因子能特异性作用于血管内皮细胞,促进其有丝分裂,使部分血管形成和增加血管通透性,在大肠癌的生长、浸润和转移过程中发挥重要作用.     

外刊

<正>Cell本期《细胞》杂志上的一项新研究称,传统的抗癌策略通常都是杀死肿瘤细胞,现在或许只需要激活一个基因就可以诱导癌细胞恢复为正常组织。研究人员发现在小鼠中让一个人类大肠癌基因恢复至正常水平,在四天内即可阻止肿瘤生长,重建正常的肠功能。引人注目的是,在两周之内肿瘤便被清除,数月后也未出现癌症复发的迹象。     

聚焦超声激活血卟啉对在体S180肿瘤细胞的抑制作用研究

目的 研究频率为2.2MHz的聚焦超声结合血卟啉对在体S180肿瘤组织的杀伤作用.方法 计算不同处理后对肿瘤组织的生长抑制作用,并通过透射电镜观察处理后不同时间段取材S180实体瘤超微结构的变化.结果 单纯血卟啉对在体S180肿瘤细胞几乎没有生长抑制作用;单纯超声对S180肿瘤组织有一定的生长抑制作用,且随着超声强度的增加,抑制效应逐渐显著,而超声结合血卟啉所产生的协同效应对S180肿瘤细胞的生长抑制作用明显高于单纯超声组,电镜下观察到超声激活血卟啉可以破坏肿瘤细胞的超微结构,尤其是对肿瘤细胞膜和膜性细胞器的通透性和结构的损伤,并且随着取材时间的延长,损伤效应进一步加强.结论 超声结合血卟啉能有效地抑制S180肿瘤的生长作用.     

新基因SNC 66在大肠癌组织中的表达研究

为探讨大肠癌相关新基因SNC66在大肠癌中的表达以及该基因与大肠癌发生的相互关系，分别采用常规RT—PCR和组织原位RT—PCR方法，以β-actin为对照，对SNC66在大肠癌组织和正常大肠粘膜中的表达情况作了配对研究。结果显示，SNC66在大肠癌组织中的表达显著低于其在大肠粘膜中的表达；粘膜组织中，SNC66只在上皮细胞和淋巴细胞中有表达，在其他细胞中未见表达，研究表明SNC66可能是一个新的大肠癌抑癌基因，SNC66基因表达水平的降低可能与大肠癌的发生和发展有关。     

四种中药制剂对人大肠癌Moser细胞增殖与凋亡的影响

研究大肠癌Moser细胞和乳腺癌MCF7细胞对市售4种中药制剂（斑蟊酸钠、苦参素、华蟾素和川穹素）的敏感性，以及川穹素影响大肠癌细胞增殖的可能机理。采用MTT法测定药物对细胞增殖的抑制率和药物间的协同抑制作用；酶联免疫法检测 CEA表达水平；流式细胞法测定细胞周期。4种中药对乳腺癌MCF7细胞的增殖均有不同程度的抑制作用，但只有川穹素可明显抑制大肠癌Moser细胞的增殖；川穹素与5种化疗药物联合对Moser细胞有协同作用；对Moser细胞表达CEA没有影响；可诱导Moser细胞凋亡。斑蝥酸钠、苦参素和华蟾素对不同肿瘤细胞的抑制效果差异很大；川穹素不仅有抑制肿瘤细胞增殖的作用，还与化疗药物有协同效果；川穹素抑制Moser细胞增殖的机理似与转化生长因子信号传导途径无关。     

hTERT基因反义核酸对TNF-a抗C57BL/6鼠氟它胺耐受型(雄激素非依赖性)前列腺癌影响机制研究

建立C57BL/6鼠雄激素非依赖性前列腺癌模型,探讨hTERT基因反义核酸(AS PS-ODN)对肿瘤坏死因子-a(TNF-a)抗肿瘤的影响机制。建立雄激素非依赖性前列腺癌模型,通过肿瘤抑制率测定,肿瘤细胞生长周期时间、测定及肿瘤组织病理学检测观察TNF-a对肿瘤细胞PC3的抑制作用。hTERT基因AS PS-ODN联合TNF-a治疗组肿瘤生长明显抑制,与TNF-a组和对照组比较有统计学意义(P0.05)。hTERT AS PS-ODN对TNF-a抗C57BL/6鼠雄激素非依赖性前列腺癌细胞PC3有协同作用。     

硒化麒麟菜多糖对宫颈癌细胞株生长和淍亡的影响

目的：探讨硒化麒麟菜多糖在体外对宫颈癌Hela细胞株生长和凋亡的作用及机制。方法：以宫颈癌Hela细胞株为研究对象，用MTT法检测硒化麒麟菜多糖对肿瘤细胞增殖的影响，流式细胞仪检测细胞周期、细胞调亡以及凋亡基因Fas的表达情况，以顺铂为对照组，比较硒化麒麟菜多糖与顺铂的疗效。结果：硒化麒麟菜多糖可阻滞宫颈癌Hela细胞的生长使之停留在S和G2-M期，从而抑制了肿瘤细胞的增殖，同时通过促进Fas表达，诱导Hela细胞凋亡。结论：硒化麒麟菜多糖通过阻滞肿瘤细胞的生长及诱导细胞凋亡等机制，对宫颈癌细胞的增殖有一定的抑制作用。     

人端粒酶逆转录酶核酶抑制端粒酶活性的实验研究

目的　为有效地切割端粒酶逆转录酶mRNA以降低端粒酶活性 ,从而使肿瘤细胞生长变慢 ,凋亡增加 .方法　设计并合成了 2个针对端粒酶逆转录酶mRNA的锤头状核酶基因htertRZ及htert 5’RZ ,构建了核酶基因的体外转录和真核表达质粒 ;并将核酶转染致肿瘤细胞中 ,检测其对肿瘤细胞端粒酶活性和生物学性状的影响 .结果　 2种核酶在细胞内均能明显地抑制端粒酶活性 ;核酶htertRZ稳定转染细胞后 ,使细胞生长变慢 ,倍增时间延长 ,但无明显促细胞凋亡作用 .结论　 2种核酶可望成为有效的端粒酶抑制剂 ,在抑制肿瘤生长中发挥作用 .     

代谢性突变的研究进展

在肿瘤形成过程中，正常的生长机制被解除并且通过凋亡来清除异常细胞的保护机制也会缺失。肿瘤细胞也必须通过增加营养素的摄取和血管的形成来支持无限制的生长带来的新陈代谢的上调。另外，它们必须依赖糖酵解产生的无效的能量，这种糖酵解的状态可以来源于突变，该突变能促进细胞的增值、含氧量低的肿瘤微环境还可能使线粒体的功能丧失。在肿瘤中，自体吞噬途径的失火可增强坏死和炎症，促进基因组的不稳定性，这种情况可以进一步增强肿瘤的生长。因此，肿瘤细胞不能有效的适应代谢性应激并且在代谢突变的情况下导致细胞的死亡。     

一种新的MDM2-p53信号通路抑制剂的发现研究

本研究以研发新型小分子MDM2抑制剂为目的,建立了以分子对接为基础的虚拟筛选流程.利用虚拟筛选流程对SPECS化合物库的分子进行类药性筛选、分子对接粗筛、二次筛选以及排序挑选,并通过细胞实验验证这些分子激活p53并抑制肿瘤细胞生长的活性.结果表明M12能够激活p53及其下游信号通路,抑制肿瘤细胞周期并促进肿瘤细胞凋亡.M12与已知MDM2-p53抑制剂结构完全不同,是一种潜在的癌症治疗候选药物.     

血管内皮生长因子-C及其受体Flt-4在大肠癌组织中表达的意义

目的：探讨血管内皮生长因子C(VEGF-C)及其Flt-4受体在大肠癌的表达与淋巴管新生及转移的关系。方法：对58例大肠癌组织及12例正常肠黏膜进行VEGF-C、FLt-4及CD34免疫组织化学染色，并计数微淋巴管密度(LMVD)和血管密度(MVD)。结果：VEGF-C在大肠癌中的表达明显高于正常黏膜(P＜O．01)。大肠癌VEGF-C表达与淋巴结转移及Dukes分期呈显正相关(P＜O．01)。大肠癌微淋巴管密度(LMVD)与淋巴结转移呈正相关(P＜O．01)。结论：VEGF-C在大肠癌中表达升高，可能通过旁分泌方式作用于Flt-4信号通路引发淋巴管新生，有助于发生淋巴结转移；VEGF-C对判断大肠癌预后有辅助作用。     

Hepa1-6细胞的培养及小鼠皮下移植瘤模型的建立

目的 培养小鼠Hepa1-6细胞,建立小鼠皮下肝癌模型,为后续实验奠定基础.方法 Hepa1-6体外培养,观察细胞生长情况,按2×105/鼠(A组)、2×106/鼠(B组)和4×106/鼠(C组)的细胞量,接种于C57BL/6j小鼠,观察肿瘤生长情况.结果 细胞生长速度较慢,传代第3 d为指数生长期;成瘤率分别为A组30%,B组为80%,C组为100%;A、B组分别在接种肿瘤细胞后12 d和10 d成瘤,而C组在接种肿瘤细胞后7 d成瘤,成瘤速度明显高于前两组;第3周和第4周C组和B组肿瘤生长体积显著高于A组(P<0.01),而C组和B组之间无明显差异.结论 使用Hepa1-6细胞以4×104/鼠的细胞用量在SPF.级雌性C57BL/6j小鼠前肢部皮下成功建立了肝癌移植瘤,完成了小鼠肝癌动物模型的建立.     

一种新的MDM2-p53信号通路抑制剂的研究

本研究以研发新型小分子MDM2抑制剂为目的,建立了以分子对接为基础的虚拟筛选流程.利用虚拟筛选流程对SPECS化合物库的分子进行类药性筛选、分子对接粗筛、二次筛选以及排序挑选,并通过细胞实验验证这些分子激活p53并抑制肿瘤细胞生长的活性.结果表明M12能够激活p53及其下游信号通路,抑制肿瘤细胞周期并促进肿瘤细胞凋亡.M12与已知MDM2-p53抑制剂结构完全不同,是一种潜在的癌症治疗候选药物.