rhsBLyS活性检测方法的比较

以FluroBeads B荧光磁珠法体外分离并培养人B淋巴细胞作为研究材料，通过MTT法、^3H-TdR掺入法测定重组入B淋巴细胞刺激因子(rhsBLyS)对人B淋巴细胞的促增殖活性并进行相应比较．结果表明：rhsBLyS非融合蛋白在引发剂Anti-IgM的协同作用下表现出显著刺激B淋巴细胞增殖的活性，且两种方法所得结果一致，充分验证了rhsBLyS样品的活性；MTT法检测可替代放射性同位素法．     

3H-TdR掺入法检测镉致鲫外周血单个核细胞的增殖抑制

以Cd2 浓度1.25、2.503、.75 mg.kg-1腹腔注射染鲫后,用3H-胸腺嘧啶脱氧核苷掺入法研究镉对鲫外周血单个核细胞(PBMC)增殖的影响.检测鲫PBMC的增殖.结果显示:1.25 mg.kg-1组与对照组在不同时间放射性活度(dpm)的差异均无显著性;0d和3d时各染镉组与对照组dpm的差异均无显著性;5d时2.50 mg.kg-1及3.75 mg.kg-1组与对照组及1.25 mg.kg-1组dpm的差异有显著性且呈剂量效应,7d和10d时dpm与5d时基本相同;14d时3.75 mg.kg-1组与其余组dpm的差异有显著性,但已出现缩小的趋势.因此低浓度Cd2 对鲫PBMC增殖的影响不大,高浓度Cd2 则能诱导鲫PBMC增殖抑制.     

过氧化氢酶活性测定方法的研究进展

过氧化氢酶为含铁卟啉的结合酶,是一种广泛存在的抗氧化酶,能维护细胞的稳定性和完整性,起到保护细胞的作用。它普遍存在于各类粮食中,其活性的高低与种子的生活力水平及粮食品质之间有一定的相关关系,故测定其活性具有重要意义。本文综述了测定过氧化氢酶活性的各类方法。     

尿激酶原活性测定方法研究

以双链尿激酶国际标准品（IS）为对照，用显色底物法和凝块溶解法测定糖基化和非糖基化的尿激酶原的酶活性，结果表明与凝块法相比，显色底物法测定两种形式的尿激酶原的酶活力相近，测量误差小，重复性好，更适于产品的质量控制。     

建立利用萤光素酶快速检测细胞活性的方法

运用PCR的方法,从萤火虫萤光素酶基因载体 pGL4.26 扩增萤火虫萤光素酶基因片段,将其插入连接于原核表达载体pET24a 中,构建重组表达载体pET24a-Luc.经酶切鉴定及序列分析后,将重组载体转化到表达菌株大肠杆菌BL21（DE3） 中,获得阳性重组菌BL21/pET24a-Luc.IPTG诱导蛋白高效表达并通过镍柱亲和层析纯化萤火虫萤光素酶.该目的蛋白活性用Bright-GloTM试剂进行验证并用于建立一种基于测量ATP含量的检测细胞生物活性的方法.与传统的细胞生物活性检测试剂盒MTT,CCK-8以及Alamar Blue比较,该方法具有反应迅速、活力高、灵敏度好、生产方便的优点,具有实际应用的潜力.     

SIOC-AA-005的抗肿瘤活性研究

观察SIOC-AA-005体外及体内抗肿瘤活性，通过MTT法和集落形成法观察SIOC-AA-005在体外的抗肿瘤活性，利用^3H-标记前体掺入法检测生物大分子的合成．利用小鼠移植瘤模型观察了SIOC-AA-005在体内的抗肿瘤活性．SIOC-AA-005对人结肠腺癌HT-29细胞的IC50为18．7nmoL／L，比对人胚肺成纤维细胞HELF的IC50低1000多倍，这一结果与集落形成和细胞生长曲线结果一致．SIOC-AA-005对HT-29细胞的DNA、RNA以及蛋白质合成均有抑制作用,SIOC-AA-005在10mg／kg剂量下对小鼠Lewis肺癌的抑制率为30．5％，在5mg／kg，10mg／kg和20mg／kg剂量下对小鼠肝癌H22的抑制率分别为37．6％、40．0％、47．2％，表现出良好的剂量效应关系,SIOC-AA-005在体外、体内均显示了较好的肿癌生长抑制作用，是一个有前景的抗肿癌化合物。     

辣根过氧化物酶活性的电化学研究

将辣根过氧化酶固定在铜电极的表面制成酶电极,利用循环伏安法从pH值、富集时间、H2O2浓度三方面寻求酶活性的最佳条件,得出pH=6.7,富集时间为25 min时,酶的活性最大,且H2O2浓度在1.0×10-4~4.0×10-3mol/L之间呈良好的线性关系.     

NIH3T3细胞与其癌变细胞的PARP酶被抑制后DNA损伤修复的 …

ＰＡＲＰ酶（聚ＡＤＰ核糖基聚合酶Ｐｏｌｙ－ＡＤＰ－ｒｉｂｏｓｅ ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ，ＰＡＲＰ）对于ＤＮＡ损伤修复具有重要功能，正常细胞及其癌变细胞的该酶对抑制剂的敏感程度可能会有差异。为此，通过姐妹染色体交换频率，带报告基因的质粒转化频率，以及彗星测定等方法，对ＤＮＡ的损伤修复进行初步的检测。实验结果表明，正常细胞和癌变细胞ＰＡＲＰ酶在抑制剂作用下酶活性都会降低，但是癌变细胞的ＰＡＲＰ酶对抑制剂     

水产胶原蛋白肽功能活性及其制备工艺研究进展

概述了水产胶原蛋白及其肽的特点和制备技术,并阐述了水产胶原蛋白肽的多种功能特性,包括抑制血管紧张素转化酶、抗氧化、免疫调节、抑制酪氨酸酶及其它活性,揭示了其在食品、化妆品及医药制备等领域的广阔应用前景.     

烤烟叶片还原糖含量测定方法的改进

烤烟叶片还原糖含量是烤烟品质的重要指标之一,现有的测定方法在稳定性、准确度、成本消耗及效率方面尚存在不足之处.该研究在对3,5-二硝基水杨酸(DNS)法与斐林试剂比色法进行比较的基础上,对3,5-二硝基水杨酸(DNS)法提取烤烟叶片还原糖含量进行了优化.结果表明:可将预浸提试剂由酒精改为蒸馏水,浸提时间由10 h缩短为10 min;对于大量样品检测而言,此方法的改进可简化流程,节约成本,提高效率.     

EC109细胞株细胞周期DNA代谢和形态改变的研究

人食管癌细胞株 EC109以显微分光光度计测定癌细胞核 DNA 含量,以放射自显影测定细胞核摄取~3H-TdR 和扫描电镜检查细胞表面的超微结构.大多数 EC109瘤细胞间期细胞核的 DNA 含量增加,主要干系细胞 DNA 含量为2 C,属 G_1期,也可见低于四倍体(3 C),高于四倍体(>4 C).甚至多倍体(>8 C)的瘤细胞.~3H-TdR 加入培养基10分钟后,许多瘤细胞核有银粒出现(S 期细胞).大量细胞进入细胞周期反映其恶性程度高.扫描电镜可见 EC109在细胞周期不同阶段其细胞大小形状和微绒毛也不同.本文结果说明用细胞核 DAN 含量测定,~3H-TdR 掺入和细胞表面超微结构可测定肿瘤周期.也可用这些方法判定瘤细胞的恶性程度.     

GM-CSF体外促进多倍体巨核细胞的生成

在TPO IL-3的细胞因子组合中添加不同浓度GM-CSF，从脐血CD34^ 细胞定向诱导巨核细胞的形成，以此考察GM-CSF对巨核细胞体外扩增和成熟的作用。比较了TPO IL-3、TPO IL-3 GM-CSF(5、20、100μg／L)的4种细胞因子组合对巨核细胞扩增及形成多倍体的作用。结果发现：在TPO IL-3的细胞因子组合中添加GM-CSF有利于总细胞的扩增，对巨核细胞的纯度没有显著的影响。体外培养14d后，培养物巨核细胞中多倍体(≥8N)巨核细胞比例明显提高，从中可以看出GM-CSF能促进巨核细胞多倍体的形成。     

蜡酯合成酶的研究进展及其应用

蜡酯合成酶（WS）是生物体内蜡酯合成的关键酶,存在于多种动植物和微生物中,该酶可催化生成一系列结构各异、功用不同的酯类化合物。随着对WS的深入研究,人们发现不同物种的WS在功能与活性上有较大的差异,这些差异导致了其合成产物及用途的多样性。本文系统论述了不同生物体内蜡酯的合成途径、WS的生化特性与酶工程改造及其在各种酯类化合物生产中的应用,为WS的进一步研究提供参考依据。     

蜂胶黄酮Pinobanksin-3-acetate对结肠癌HCT-116细胞增殖及凋亡的影响

 为探讨蜂胶黄酮(Pinobanksin-3-acetate, PB3A)对结肠癌HCT-116 细胞增殖及细胞凋亡的影响, 采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法, 检测不同浓度、不同时间PB3A、5-氟尿嘧啶(5-FU)及两种药物联合作用对HCT-116 细胞生长所产生的影响, 倒置显微镜观察细胞的形态学变化特点, Annexin V-FITC/PI 双染色、流式细胞仪检测药物作用24 h 后的细胞凋亡率。结果显示, PB3A 对HCT-116 细胞增殖有明显的抑制作用, 并呈浓度和时间依赖性。其抑制活性与5-FU 几乎没有显著性差异, 联合用药具有协同效应; 在一定剂量范围内, 可见凋亡细胞明显增多。流式细胞仪分析结果表明, 细胞凋亡率明显上升, 呈剂量依赖性。PB3A 对HCT-116 细胞具有明显的增殖抑制和诱导细胞凋亡作用。     

松科植物木质素合成相关基因研究进展

植物木质素是影响纸浆材品质的关键因素,而松科植物作为重要的纸浆材,对其木质素合成相关调控基因进行系统了解,可为完善木质素生物合成模型提供一定的理论依据。笔者通过对国内外已有研究进行分析,总结植物木质素结构、木质素合成途径、木质素合成相关酶基因及松科植物木质素合成基因的研究进展。归纳出松科植物火炬松(Pinus taeda)、马尾松(P. massoniana)、辐射松(P. radiata)、挪威云杉(Picea abie)等木质素合成酶基因研究主要集中在苯丙氨酸解氨酶(phenylalanineammonialyase,PAL)、4-香豆酸辅酶A连接酶(4-coumarate CoA ligase, 4CL)、肉桂酸4-羟化酶(cinnamic 4-hydroxygenase, C₄H)、香豆酸3-羟化酶(Coumarate 3-hydroxylase, C3H)、咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶(caffeoyl coenzyme A-O-methyltransferase, CCoAOMT)、肉桂酰基辅酶A还原酶(Cinnamoyl CoA reductase, CCR)和肉桂醇脱氢酶(Cinnamyl alcohol dehydrogenase, CAD)等一些常见基因上,其他莽草酸羟基肉桂酰转移酶(shikimate hydroxycinnamoyl transferase, HCT)、阿魏酸5-羟化酶(ferulo 5-hydroxylase, F5H)、O-甲基转移酶(O-methyltransferase, OMT)及咖啡酸-O-甲基转移酶(caffeic acid O-methyltransferase, COMT)等基因研究较欠缺,此外,还有部分基因未涉及。木质素合成是研究松科植物纸浆材的重要切入点,对现有松科植物木质素合成过程中存在问题进行精确的估计,对进一步深入研究松科植物木质素合成机制和优质纸浆材选育具有重要意义。     

米诺的尔对兔晶体上皮细胞增殖的影响

研究米诺的尔(Minoxidil)对体外培养的兔晶体上皮细胞增生的影响。将不同浓度的米诺的尔加入体外培养的兔晶体上皮细胞,分别作用24、48及72 h,采用MTT法观察米诺的尔对兔晶体上皮细胞增生的影响。将3.0 mmol的米诺的尔加入体外培养的兔晶体上皮细胞作用72 h,而后吸出药液,加入正常DMEM培养液继续培养96 h,观察米诺的尔在撤药96 h后对兔晶体上皮细胞增殖的抑制作用;并应用光学显微镜观察兔晶体上皮细胞在含或不含有3.0 mmol米诺地尔的培养液培养72h后的形态学变化。米诺的尔对兔晶体上皮细胞增生有抑制作用,呈浓度依赖性和时间依赖性。3.0 mmol米诺的尔对兔晶体上皮细胞增殖的抑制作用在撤除药液后并未降低,抑制作用持续增加。说明米诺的尔能有效抑制体外培养的兔晶体上皮细胞增生。     

3种芦荟多糖体外抗肿瘤作用的比较研究

比较研究了3种芦荟多糖的体外抗肿瘤药效.采用体外培养法培养细胞,MTT比色法观察3种芦荟多糖在7个质量浓度下对Hela、K562和A973细胞株的体外直接作用.结果,随着芦荟多糖质量浓度的增加,对3种肿瘤细胞的抑制作用不断增强.经计算,对于Hela、K562和A9733种人体肿瘤细胞,库拉索芦荟多糖的IC50分别为183 40、170 26和151 12Qg/mL;木立芦荟多糖的IC50分别为191 18、125 44和49 01欤?mL;中国芦荟多糖的IC50分别为78 79、138 02和114 48欤?mL,均高于10嚕?mL.倒置显微镜下观察发现,除200、400嚕?mL两剂量外,给药后各孔细胞形态良好,与空白对照组比较无明显变化.以上结果提示3种芦荟多糖对上述3种瘤细胞直接作用较弱.     

Effects of Pulsed Electric Fields on DNA Synthesis in an Osteoblast-Like Cell Line (UMR-106)

IntroductionThebioeffectsofelectromagneticfields(EMFs)havebeenacontinuingsourceofskepticismandinteresttothescientificcommunityformanyyears.Inthe1850s,thepiezoelectricpropertyofbonewasobservedanddemonstrated[1,2].Subsequently,Friedenbergandhisgroupreportedontheuseofelectricitytohealanonunionofmedialmalleolus[3].Sincethen,extensiveclinicalexperienceandresearchhavebeenreportedcontainingelectricalstimulationfornonunionorotherosseousdiseases.However,usingEMFstotreatbonediseasesisstillcontrovers…