aroA基因的克隆和优化

除草剂草甘膦 (glyphosate ,N_phosphonomethylglycine )的靶标酶是由aroA基因编码的EPSP (5_烯醇式丙酮酰莽草酸_3_磷酸 ,5_enolpyruvylshikimate_3_phosphate)合成酶。采用先进的基因优化技术 ,以鼠伤寒沙门氏杆菌和大肠杆菌的EPSP合成酶基因为模板 ,通过随机结合 ,交错延伸的PCR扩增过程 ,克服定点突变的局限性 ,使基因获得多位点突变 ,并使之在大肠杆菌中得到表达。对纯化后的表达产物的酶动力学性质的测定结果表明 ,获得了与作为模板的野生型相比 ,具有高得多的酶活力 (降低的Km (PEP) )和大大增强的草甘膦抗性 (升高的Ki(glyphosate) )的突变基因     

极谱法测定铕（Ⅲ）与有机磷酸,丝氨酸和半胱氨酸三元 …

用极谱法研究了铕与有机磷酸（Ｐ）、丝氨酸（Ｓｅｒ）、半胱氨酸（Ｃｙｓ）等形成的二元体系Ｅｕ＾３＋－Ｐ、Ｅｕ＾３＋－Ｓｅｒ、Ｅｕ＾３＋－Ｃｙｓ和三元体系Ｅｕ＾３＋－Ｐ－Ｓｅｒ、Ｅｕ＾３＋－Ｐ－Ｃｙｓ。考察了各种配合物形成的条件、电化学性质,测定了配合物的组成及其稳定常数。结果发现,其稳定常数随有机磷酸烷基取代基的增大而减小。     

几种沙生植物光合碳代谢途径关键酶的研究

研究了分布于甘肃省临泽地区的沙拐枣、珍珠、霸王、泡泡刺、胡杨等５种沙生植物的光合酶：果糖－１．６－双磷酸酯酶（ＦＤＰａｓｅ）、１．５－二磷酸核酮糖羧化酶（ＲＵＢＰｃａｓｅ）、磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（ＰＥＰｃａｓｅ）、ＮＡＤ－苹果酸脱氢酶（ＮＡＤ－ＭＤＨ）活性的季节变化。结果表明，珍珠和沙拐枣的ＦＤＰａｓｅ酶活性远低于其它几种材料；珍珠、霸王、沙拐枣的ＰＥＰｃａｓｅ活性明显高于其它两种材料；珍珠、沙拐枣的ＮＡＤ－ＭＤＨ活性明显高于其它三种材料。可见，珍珠、霸王是ＣＡＭ植物，沙拐枣是Ｃ４植物，胡杨是Ｃ３植物，泡泡刺有可能在干旱协迫下由Ｃ３向Ｃ４或ＣＡＭ途径转化。     

8-巯基喹啉金属螯合物的合成及性质研究

自1987年美国柯达公司Ｃ.Ｗ.Ｔａｎｇ等人首次报道高性能有机电致发光器件(ＯＥＬＤｓ)以来[1],有机电致发光材料(ＯＥＬＭｓ)及其显示器件已成为当今发光器件研究的热点.目前已开发出有机染料分子[2,3],有机金属螯合物[4,5],高分子化合物[6,7]等三大ＯＥＬＭＳ体系.1997年,日本先锋公司率先实现了绿色ＯＥＬＤ的商品化[8].8巯基喹啉作为金属螯合剂在分析化学中已有广泛应用[9],但是其螯合物作为ＯＥＬＭ,尚未深入研究.铝金属螯合物(Ａｌｑ3)是当今公认最好的一种电致绿光材料[9].因此,研究开发类似结构的发光材料是十分有意义的.我们设计合…     

栽培和野生大豆核酮糖—1,5—二磷酸羧化酶的结晶及其大小亚基等 …

栽培大豆和野生大豆叶片的蛋白抽提液经硫酸铵盐析,Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－５０柱层析以及浓缩透析等步骤,分别得到核酮糖－１,５－二磷酸羟化酶的结晶。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ酶标抗体技术鉴定证实为Ｒｕｂｉｓｃｏ。用ＩＥＦ－ＰＡＧＥ方法分析这２种不同进化类型大豆的Ｒｕｂｉｓｃｏ大小亚基,发现其具有高度同源性。     

氯氰菊酯与辛硫磷混用对美洲大蠊中枢神经的电生理影响

研究了氯氰菊酯与辛硫磷以１∶１０比例混用对美洲大蠊中枢神经兴奋性突触后电位（ＥＰＳＰｓ）的影响．混用对ＥＰＳＰｓ的兴奋程度均高于辛硫磷单用，特别是顺式氯氰菊酯加辛硫磷，ＥＰＳＰｓ开始兴奋的时间大为缩短，仅需１．３ｍｉｎ，振幅幅值增加１１０％．认为，两类杀虫剂混用增效的原因之一是提高了对靶标酶———乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）的抑制．     

栽培和野生大豆核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶的结晶及其大小亚基等电聚焦分析

栽培大豆和野生大豆叶片的蛋白抽提液经硫酸铵盐析、Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－５０柱层析以及浓缩透析等步骤,分别得到核酮糖－１,５－二磷酸羟化酶（简称Ｒｕｂｉｓｃｏ）的结晶．经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ酶标抗体技术鉴定证实为Ｒｕｂｉｓｃｏ．用ＩＥＦ－ＰＡＧＥ方法分析这２种不同进化类型大豆的Ｒｕｂｉｓｃｏ 大小亚基,发现其具有高度同源性     

消泡剂TBP对起泡剂C12E8表面性质的影响

报道了消泡剂ＴＢＰ（Ｔｒｉｂｕｔｙｌｐｈｏｓｐｈａｔｅ）对起泡剂Ｃ１２Ｅ８（Ｏｃｔａｅｔｈｙｌｅｎｅｇｌｙｃｏｌｍｏｎｏｄｏ－ｄｅｃｙｌｅｔｈｅｒ）表面吸附性质和表面弹性的影响．文中通过对理想表面模型－Ｌａｎｇｍｕｉｒ－Ｓｚｙｓｚｋｏｗｓｋｉ吸附等温线和非理想表面模型－Ｆｒｕｍｋｉｎ吸附方程的研究,得出起泡剂Ｃ１２Ｅ８溶液表面吸附－脱附活化能与吸附量有关的结果,并且阐明了Ｃ１２Ｅ８浓度小于ｃｍｃ时消泡剂ＴＢＰ的消泡机理．可以认为ＴＢＰ降低了Ｃ１２Ｅ８的表面吸附量以及表面吸附和脱附活化能,有利于表面张力梯度的修复是通过变形表面下溶液分子的直接吸附,从而削弱其表面弹性,降低泡沫的稳定性     

白蜡虫碱性磷酸酶的分离纯化及部分性质研究

碱性磷酸酶 (ＡｌｋａｌｉｎｅＰｈｏｓｐｈａｔａｓｅ ,简称ＡＫＰ ,ＥＣ 3·1·3·1)可催化磷酸单酯水解及磷酸基团的转移 ,不仅参与钙磷代谢 ,维持体内适宜的钙磷比例 ,而且还与蛋白质的分泌与合成相关 ,在生物体的物质代谢中具有重要作用[1～ 3] .关于微生物、软体动物、文昌鱼和脊椎动物的ＡＫＰ研究 ,国内外均有报道 .对节肢动物的研究较少[4 ] ,而对昆虫的碱性磷酸酶的研究还未见报道 .我们对我国特产资源昆虫白蜡虫的ＡＫＰ进行了分离提纯 ,并对其部分性质作了研究 ,以期为白蜡虫的酶学性质和生化特征提供部分依据 .1　材料和方法1.…     

诸葛菜EPSPS基因5′端的克隆和序列分析

烯醇式丙酮基莽草酸 3 磷酸合成酶(5 enolpyruvylshikimate 3 phosphatesynthase,EP SPS)是植物和微生物莽草酸途径中的一个必需合成酶,植物中该基因的超量表达或该基因中某些氨基酸突变可以产生对除草剂草甘膦(glyphosate)的耐性.采用5′ RACE技术从诸葛菜(Orychophragmusviolaceus)叶中克隆出一条长743bp的cDNA片段.序列分析结果表明:该cDNA与其它植物的EPSPS基因具有相当高的核苷酸序列同源性.其所编码的氨基酸序列与欧洲油菜(Brassicanapus)同源性最高为90%,与拟南芥(Arabidopsisthaliana)、玉米(Zeamays)、西红柿(Lycopersiconesculentum)、烟草(Nicotianatabacum)和水稻(Oryzasativa)的同源性分别为88%,81%,64%,62%和71%.