中药防风对胃癌SGC-7901细胞生长及基因表达的研究

目的 研究中药防风对胃癌SGC-7901细胞生长及基因表达的影响.方法 应用集落形成实验、MTT实验及电子显微镜技术观察了防风对SGC-7901细胞生长的影响;应用免疫组织化学染色技术研究防风对SGC-7901细胞基因表达的影响.结果 防风对SGC-7901细胞的生长曲线、集落形成有明显的抑制作用,其抑制作用与防风的浓度和时间呈正相关关系,其IC50值为24g/mL.防风能使SGC-7901细胞p16和p21编码基因的蛋白表达上调,PCNA,C-Met编码基因的蛋白表达下调.结论 防风能抑制SGC-7901细胞生长;防风可使SGC-7901细胞的p16,p21,PCNA,C-Met表达改变.这些结果 为防风在临床上的进一步应用提供了理论依据.     

自体肝癌细胞裂解物致敏的树突状细胞诱导抗肝癌免疫的体外研究

从术后肝癌病人的外周血中诱导树突状细胞（DC），并经自体肝癌细胞裂解物致敏DC，用流式细胞仪、^3H-TdR掺入法及MTT法检测了DC表面分子的表达、DC刺激T细胞的增殖效应及DC诱导的T细胞对肝癌细胞的杀伤作用，进而比较经自体肝癌细胞裂解物致敏的DC与其它条件下的DC功能的差异．结果显示：肝癌细胞裂解物致敏DC的功能较未致敏DC显著提高，其可诱导自体混合淋巴细胞强的增殖效应，同时诱导的T细胞对自体肝癌细胞有较强的杀伤率．     

溴氰菊酯诱导果蝇细胞毒性及相关基因表达的变化

溴氰菊酯(deltamethrin,DM)是一种神经毒剂,由于其高效、低毒而被广泛用于农业害虫的防治.长期大范围不合理的使用导致害虫产生抗药性,但目前其确切的抗药性作用机制仍不十分清楚.本研究对溴氰菊酯细胞毒性的研究显示DM染毒可以使果蝇Kc细胞增殖、细胞形态和细胞活性发生明显变化.较低和较高浓度的DM能明显抑制细胞活性,在15 ppm诱导下果蝇细胞的活性有一定程度的升高.实时荧光定量PCR和免疫印迹分析结果显示,经DM处理后的果蝇Kc细胞中与氧化应激反应和免疫相关的基因的表达量显著上调.本研究对细胞毒性和基因表达差异的检测,为进一步探讨与溴氰菊酯抗药性相关的细胞和分子毒理提供了研究基础.     

不同生长期小鼠肝、脑及肝癌细胞中SOD的研究

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳的高分辨率,氯化硝基四氮唑兰(NBT)和联大茴香胺对超氧化物歧化酶(SOD)的特异性染色,鉴定了不同生长期小鼠肝、脏、脑、再生肝、H22_α腹水型肝癌、荷癌鼠肝(匀浆后,20000×g离心的上清液)的SOD。实验结果表明:新生鼠肝,3月龄鼠肝和脑,8月龄鼠肝、再生肝、荷癌鼠肝均能泳出三条酶带,其中前一条为CuZn-SOD,后两条均为Mn-SOD。但SOD的含量随年龄变化有明显的差别(3月龄>8月龄>新生鼠)。在同样条件下新生鼠脑泳出一条酶带,3月龄鼠脑泳出三条酶带,八月龄鼠脑泳出两条酶带。H22_α腹水型肝癌,泳出两条酶带(Mn-SOD)。我们也用生化法测定了SOD活力,所得结果与电泳结果基本相符。     

生长激素内分泌调节的模型及混沌行为研究

依据非线性动力学、生理学和酶促反应动力学理论,考虑生长激素内分泌调节的正负反馈的作用和物质代谢功能,首次构建了生长激素内分泌调节的动力学模型.通过计算机模拟,得到该模型的脉冲分泌数值解和混沌解,同时,求出了正常情况下各激素血液中的分泌量.结果表明:计算值与已有的临床检测标准值完全相符,说明了该模型的合理性.     

子宫腺肌病凋亡及相关基因表达的研究

本研究旨在通过对子宫肌腺病中异位腺上皮细胞凋亡及相关基因bcl-2、bax的表达的实验研究以探讨凋亡及相关基因在子宫肌腺病的发生及发展中的作用及其临床意义。1 材料和方法1.1 标本来源全部选自甘肃省妇幼保健医院1998—1999年手术切除的增殖期子宫内膜标本（取自月经周期4—12天）。其中选择子宫腺肌病40例,选择子宫其它良性病变并确定术前无治疗史标本36例作为正常对照组,以上标本均有完整病历资料,并经两位病理科专家复查确诊。1.2 实验方法分组：本实验分为两组（1）增殖期正常子宫内膜组36例,（2）子宫肌腺病40例。切片制备：全…     

顺铂与白藜芦醇对体外人胃癌细胞的影响

目的:观察顺铂(DDP)、白藜芦醇合并用药前后对人胃癌细胞影响的实验研究.方法:用MTT法观察其对体外培养的人胃癌细胞SGC-7901,在DDP与白藜芦醇合并用药前后对细胞存活率的影响,并通过流式细胞仪检测细胞周期变化,透射电镜观察细胞超微结构变化.结果:DDP与白藜芦醇合用与单独应用化疗药相比细胞存活率明显下降,其增效倍数为单独用药的2.61~4.21倍(P<0.01),细胞生长停止在S期,S期数分数为0.52,抑制细胞有丝分裂及DNA合成,细胞超微结构显示:细胞核固缩、空泡形成、微绒毛减少、线粒体及内质网肿胀.结论:研究表明顺铂与普通中药合用,可获得化疗药单独用药相同疗效,白藜芦醇能增加化疗药对肿瘤细胞的细胞毒作用,增加敏感性,减少药物副作用.     

顺铂与丝裂霉素对体外人胃癌细胞的影响

进行了顺铂(DDP)、丝裂霉素(MMC)合用对人胃癌细胞影响的实验研究.用MTT法观察其对体外培养的人胃癌细胞SGC7901,在DDP与MMC合并用药前后对细胞存活率的影响,并通过流式细胞仪检测细胞周期变化,透射电镜观察细胞超微结构变化.DDP与MMC合用与单独应用化疗药相比细胞存活率明显下降,其增效倍数为单独用药的2.52～4.36倍(P＜0.01),细胞生长停止在S期,S期数分数为0.49,抑制细胞有丝分裂及DNA合成,细胞超微结构显示细胞核固缩、空泡形成、微绒毛减少、线粒体及内质网肿胀.结果显示,顺铂与小剂量化疗药物合用,可获得化疗药物单独用药相同疗效,丝裂霉素增加化疗药对肿瘤细胞的细胞毒作用,增加敏感性,减少药物副作用.     

青少年移情、攻击行为方式的相关研究

本研究揭示了被试的移情能力和攻击行为方式之间的关系，得到以下结果：身体攻击在不同年级上存在显著差异，初中一年级身体攻击水平低于小学五年级和初中二年级；控制年级、性别、独生和非独生子女三个人口学变量后，偏相关结果显示，移情与言语攻击呈显著正相关。移情与敌意呈显著正相关。     

同期双胚源恶性肿瘤——胃癌、盆腔恶性纤维组织细胞瘤一例报告

患者陈某,男,48岁,干部,住院号:31593。因胃镜检查诊为胃腺癌一个多月,右下腹包块一个月于1990年7月24日入院。患者于一个多月前因头晕,恶心,呕吐,呕出物为胃内容物,在当地医院以“美尼尔氏综合征”收住院治疗,住院期间行胃镜检查,发现胃窦部大弯侧浅在性溃疡约1.2×1.5cm大小,周围隆起,凹凸不平,间有糜烂,附有粘稠性分泌物。病理检查结果为胃腺癌。一个月前又无意中发现右下腹包块约鹅蛋大小,到某医院检查,以“胃癌并腹腔转移”称病情已属晚期,无手术指     

文蛤多肽对体外培养人肝癌细胞SMMC-7721的抑制作用

研究了文蛤多肽对体外培养的人肝癌SMMC-7721细胞的抑制作用,结果表明,经5.0μg/mL文蛤多肽处理的体外培养的人肝癌细胞(SMMC-7721)生长缓慢,倍增时间延长,细胞生长抑制率达89.4%;处理后的癌细胞形态发生明显改变,处于G0/G1期的细胞明显增多,而S期和M期细胞减少,出现明显的凋亡峰,凋亡率为22.3%.实验结果表明,文蛤多肽能有效地抑制体外培养肝癌细胞的增殖活动,可通过改变肝癌细胞的形态及细胞周期而明显抑制细胞的增殖.     

载药果胶基纳米粒子体外HepG2肝癌细胞的靶向性研究

具有良好的生物相容性且生物可降解天然多糖,一直作为药物传递体系,具有如下优点:可延长药物的生物半衰期,减轻药物的毒副作用.本实验旨在制备一种果胶基载5-氟脲嘧啶(5-Fluorouracil,5-FU)纳米粒子(P-5-FU)载药系统,探讨果胶基纳米载药体系本身带有大量的半乳糖残基这种天然靶头对人肝癌细胞HepG2的靶向效果.MTT法测定载药果胶基纳米粒子对HepG2和A549细胞的增殖抑制作用,MTT结果显示P-5-FU对HepG2细胞的增殖具有明显抑制作用,呈剂量依赖性,且作用较5-FU强;而P-5-FU对A549细胞增殖亦有明显抑制作用,呈剂量依赖性,但与5-FU相比无明显差别;高效液相色谱法(HPLC)对两种细胞对载药纳米粒子的摄取情况和靶向性进行了测定.细胞摄取结果显示HepG2细胞对P-5-FU的摄取量较5-FU明显增多,而A549细胞对P-5-FU和5-FU的摄取量没有明显的差别.半乳糖饱和ASGPR结合位点后两种细胞对P-5-FU和5-FU的摄取量都没有明显的差别.结果表明果胶基纳米载药粒子可特异性靶向高表达的细胞.     

人肝癌HepG2细胞异质性亚系的建立及生物学行为初探

目的：从人肝癌细胞株HepG2母系克隆分离异质性亚系，探讨肝癌异质性机理。方法：应用有限稀释法对培养人肝癌细胞株HepG2进行单细胞克隆分离异质性亚系，并应用细胞计数法、流式细胞仪检测其细胞周期和DNA含量，MTT法检测其对不同抗癌药物敏感性，同时应用裸鼠脾种植肝转移在体实验模型探讨其生物学行为的差异。结果：分离到HepG2—D3及HepG2—F4两个细胞亚系。HepG2—F4亚系细胞呈长梭形，体外增殖能力强，但脾脏内种植后不成瘤，不转移(0／10)；HepG2—D3亚系细胞呈多角形、多突起，脾脏内种植成瘤率高(10／10)，并在肝脏形成广泛转移(10／10)。结论：从人肝癌细胞株HepG2母系成功分离建立了两个异质性细胞亚系，两在形态学、增殖能力及其对不同抗癌药物敏感性、成瘤和转移能力方面均存在差异，该亚系可为进一步研究肝癌异质性尤其是转移的确切机制提供良好的素材。     

器官发育及细胞程序化死亡的基因调节研究

用线虫实验模型系统研究调节器官发育及细胞程序化死亡的基因，且发现这种基因在人体中也存在，这一成果获得了2002年诺贝尔生理学医学奖。“程序性细胞死亡”机理的发现为艾滋病、肿瘤和癌症等疾病的治疗提供了寻找新方法的可能，将在人类战胜疾病过程中发挥重要作用。     

两种帕金森体外模型的构建及相关研究

为检测a-突触核蛋白(a-Synuclein)在人神经元母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)中的表达,构建人野生型(WT)和A53T突变型a-Synuclein质粒(p EGFP-SNCA-WT和p EGFP-SNCA-A53T),经酶切鉴定无误后转染SH-SY5Y细胞,并对转染完成的细胞进行嘌呤霉素筛选,然后通过PCR法扩增转染后SH-SY5Y细胞的a-Synuclein片段,并对其进行测序,检测目的基因,运用Western blot法检测转染后SH-SY5Y细胞中a-Synuclein的表达.酶切鉴定结果表明p EGFP-SNCA-WT和p EGFP-SNCA-A53T质粒构建成功,嘌呤霉素筛选和转基因细胞a-Synuclein片段测序结果显示慢病毒表达载体能成功的整合到SH-SY5Y细胞基因组中,Western blot结果表明,转染后的SH-SY5Y细胞能成功的过表达a-Synuclein.a-Synuclein慢病毒表达载体构建成功,并且SH-SY5Y细胞作为宿主细胞能够表达a-Synuclein.为今后帕金森病(PD)体外模型的建立及帕金森病发病机制的研究奠定了基础.     

基因芯片对胃癌和食管癌基因表达谱的对比研究

目的 对比研究胃癌和食管癌的基因表达谱,筛选各自特异性基因.方法 利用基因芯片技术对两种上消化道常见肿瘤胃癌和食管癌的基因表达谱进行分析.结果 筛选出在胃癌中差异表达的基因34个.和21个在食管癌中发生差异表达的基因,最后发现在两种肿瘤组织中都发生显著变化的基因有4个.另外,对这些肿瘤相关基因的表达水平进行聚类分析,可以很清楚地将两种肿瘤组织及正常组织区分开来.结论 利用基因芯片技术可以高通量地筛选出肿瘤组织差异表达基因.通过少量特异性基因的表达水平,可以用来区分不同的肿瘤组织,对将来的基因诊断和基因治疗有一定的参考价值.     

二十碳五烯酸和亚油酸对黄姑鱼肝脏细胞炎症相关基因表达的影响

饲料中过高比例植物油替代鱼油会引起肝脏炎症反应,养殖实验普遍存在周期长、价格昂贵以及干扰因素多等问题,离体实验部分弥补了养殖实验的缺点。植物油替代饲料中鱼油的本质是脂肪酸的替代。以往的研究发现豆油替代饲料中鱼油会引起炎症反应。为探究豆油对黄姑鱼肝脏细胞炎症影响,本实验分离并培养了黄姑鱼原代肝脏细胞。分别使用BSA(对照)、0.1 m M二十碳五烯酸-牛血清白蛋白复合物(EPA-BSA)、0.1 mM亚油酸-牛血清白蛋白复合物(LNA-BSA)孵育黄姑鱼原代肝脏细胞6 h,用1.0 mg·mL-1 LPS刺激细胞。结果表明:EPA与LNA相比,显著降低了促炎基因TLR2、TLR22、MyD88、TNF-α、IL-1β和IL-6的表达量(P0.05)。本研究建立的黄姑鱼原代肝脏细胞模型可用于营养免疫研究,在黄姑鱼原代肝脏细胞中相同浓度的EPA相对LNA有更强抑炎效果,饲料中豆油替代鱼油引起的肝脏炎症反应可能是由于EPA含量减少,LNA含量升高引起的。     

肝癌细胞形态和生长行为对基底拉伸的响应

采用“四点弯曲梁加载装置”，对培养的人肝癌细胞株SMMC－7721旋以拉伸刺激，通过显微计算机图像处理系统了解其形态变化，流式细胞仪了解其增殖行为，结果发现1）加载24h后SMMC－7721 G2－M期8．63％，对照组15．92％；2）加载72h后SMMC－7721铺展投影面积缩小；3）加载24h后SMMC－7721分裂指数0．46，对照组0．55。加载可部份抑制SMMC－7721的生长。