CHP与钙调神经磷酸酶的活性调节

作为惟一受Ca2 调节的蛋白磷酸酶,钙调神经磷酸酶(CN)在多种生物学过程中发挥关键性的调控作用,包括T细胞活化,记忆的形成,心肌肥大的发生,细胞周期调控等.CN的丝/苏氨酸蛋白磷酸酶活性受Ca2 /Calmodulin等诸多生物因子的共同调节,其中钙调神经磷酸酶B亚基同源蛋白(CHP)是最近研究较多的CN调节分子之一.近年来CN的研究进展主要体现在其生物学功能,相关信号传导通路及活性调节等方面.     

钙调神经磷酸酶

钙调神经磷酸酶是一种依赖Ca^2 －CaM的磷蛋白磷酸酶。主要存在于脑组织神经元中，由催化亚基A和调节亚基B1：1组成。钙调神经磷酸酶是一个侈底物的磷蛋白磷酸酶。它的活性还受到Ni^2 和Mn^2 等金属离子的调节。     

荧光光谱法研究钙调神经磷酸酶与其激活剂的相互作用

应用荧光光谱法研究了钙调神经磷酸酶 (CN)激活剂JJYD对CN的激活作用 .实验表明 ,JJYD确实对CN有一定的激活效应 ,其最佳激活质量浓度为 0 .2g·L- 1,激活率为 (14 9.9±0 772 ) % ;JJYD对CN的内源荧光有较强的猝灭作用 ,形成的复合物所产生的静态猝灭是引起CN荧光猝灭的主要原因 ,进一步依据荧光猝灭结果确定了JJYD CN复合物的结合常数K及结合位点数n ,证明二者有较强的结合力 .     

钙调神经磷酸酶B亚基高表达条件及产业化研究

重组人CNB高表达大肠杆菌已由本室构建成功,摇瓶发酵液表达量可达100mg·L-1. 通过改进培养基配方及摇瓶表达工艺,使CNB在摇瓶发酵液中表达量达到500mg*L-1以上.在高表达量的基础上,又进行了产业化改进,以蒸馏水添加无机盐取代了原配方中的自来水,并提高了表达量.     

阿托伐他汀对压力负荷下钙调神经磷酸酶参与心肌肥大的影响

研究在压力负荷下阿托伐他汀对钙调神经磷酸酶介导的心肌肥大的影响.选用SD大鼠随机分为3组:假手术组(n=10)、单纯模型组(n=10)和阿托伐他汀组(n=10).大鼠通过腹主动脉缩窄建立压力超负荷模型,8周后测定左室重量指数,B超检测左室形态结构,Westernblot检测心肌CaN蛋白表达,RT-PCR法检测心肌CaNmRNA水平.结果①单纯模型组和阿托伐他汀组心肌肥厚指数明显高于假手术组,阿托伐他汀组心肌肥厚指数明显低于单纯模型组(P<0.05).②单纯模型组和阿托伐他汀组心肌CaN蛋白及CaNmRNS表达水平高于假手术组(P<0.05),阿托伐他汀组低于单纯模型组 (P<0.05).说明阿托伐他汀可能参与干预钙调神经磷酸酶介导的通路,从而抑制心肌肥厚的形成.     

血脑屏障对钙调神经磷酸酶B亚基及其降解肽段阻碍作用的研究

应用1,3,4,6－四氯－3α,6α二苯基苷尿（Iodogen)法对钙调神经磷酸酶B亚基进行1125I标记,获得了比活度为740MBq.mg^-1,放化纯度为95．7％的125I标记的钙调神经磷酸酶B亚基,标记率高达85％,利用该标记物研究血脑屏障对其进入脑的阻碍作用,结果显示血脑屏蔽能够阻止完整的钙调神经磷酸酶B亚进入脑,但是它的降解肽段能够透过血脑屏障进入脑组织。     

钙离子对钙调神经磷酸酶B亚基结构和功能的影响

应用原紫外CD光谱、内源荧光光谱以及ANS荧光光谱探究了Ca~(2+)对钙调神经磷酸酶(CN)调节亚基(CNB)结构和功能的影响.结果显示:Ca~(2+)能够激活CN磷酸酶活性提高到约1.5倍;CD谱显示结合Ca~(2+)后CNB出现α-螺旋含量上升、无卷曲含量下降、分子有序性升高等现象;!源荧光光谱显示结合Ca~(2+)导致CNB结构更加紧凑;ANS荧光光谱显示Ca~(2+)结合导致其疏水性增强.结合Ca~(2+)后,CNB分子有序性升高,结构更加紧凑,疏水表面暴露.这些结构变化促进了其与CNA的结合并激活了CNA的磷酸酶活性.     

钙调磷酸酶B亚基钙结合位点的突变对B亚基结构和功能的影响

应用远紫外CD光谱、紫外差光谱、内源荧光光谱以及ANS荧光光谱,探究了钙调磷酸酶B亚基钙结合位点的突变对B亚基结构和功能的影响．结果显示:钙结合位点突变体Y105W激活CNA的能力强于CNB;而E110Q活化CNA的能力弱于CNB;Y105W和E110Q与Ca2+亲和性低于CNB;CNB和它的突变体二级结构趋于一致,但三级结构存在明显差异,这种差异可能是它们功能差异的结构基础．      

桃钙调磷酸酶B类似蛋白互作蛋白激酶基因家族鉴定与分析

钙调磷酸酶B类似蛋白互作蛋白激酶(CIPKs)在植物生长发育和抗逆过程中发挥着重要作用。为了对桃中CIPK家族基因进行系统分析,利用桃基因组数据库,通过生物信息学手段,鉴定桃CIPK家族基因的基因结构、染色体定位和编码蛋白,通过序列比对进行进化和分类分析。结果表明,桃基因组中含有18个CIPK基因,分布于桃的6条染色体上。MEME和Pfam保守结构域分析显示,桃CIPK蛋白均含有2个保守的PKinase和NAF结构域。进化树分析表明CIPKs可分为2个亚家族。Net Phos 2.0 Server结果显示Pp CIPKs存在着大量的丝氨酸(Ser)、苏氨酸(Thr)及酪氨酸(Tyr)潜在磷酸化位点。以上结果将为今后揭示桃CIPK蛋白的功能提供重要的理论基础。     

神经营养因子在肌肉运动中的功能及可能作用

神经营养因子是在神经系统中广泛存在并对神经细胞具有营养和支持功能的物质,在肌肉组织中也发现存在着多种神经营养因子,其对神经肌肉的生理功能也被不断地证实.对主要的肌源性神经营养因子在肌肉中的功能作了综述,并分析了其在运动过程中可能的作用.     

五禽戏和营养调控影响老年人心血管系统研究

采用试验法,研究健康生活方式改善老年人心血管系统的作用。研究结果表明,单纯的营养调控和单纯的五禽戏锻炼都能够改善老年人的心脏功能和血管功能,与对照组相比差异显著;五禽戏锻炼的效果优于营养调控,但不存在显著性差异;五禽戏锻炼和营养调控相结合对老年人心血管系统有着非常显著的改善作用,与对照组相比差异非常显著,与单变量控制组相比差异显著。建议老年人注意合理膳食、适量运动,尤其是健身气功类运动,采用积极健康的生活方式。     

一氧化氮在心血管活动调控中的作用

一氧化氮是20年来医学研究的热点之一，一氧化氮在心血管活动调控和许多心血管疾病如高血压、动脉粥样硬化、器官缺血再灌注损伤的病理机制中都有重要作用．其作用即有有利的一方面，又有有害的一方面．在一氧化氮合酶作用下产生的一氧化氮对机体具有保护作用。另一方面，受细菌内毒素或细胞因子等诱导，一氧化氮合酶表达上调并产生大量一氧化氮引起细胞损伤和循环衰竭．目前有许多临床实验正在评价一氧化氮在心血管疾病中的作用．     

论女性领导干部的角色冲突与调适

受历史发展进程和女性自身生理、心理的影响,女性领导干部这一特殊群体在当今时代面临诸多的角色冲突与困惑。女性领导干部必须学会必要的心理保健,以提高缓解和应对角色冲突的能力,从而促进社会的和谐与进步。     

长期有氧运动对原发性高血压患者心血管自主神经功能的调节

30名原发性高血压患者随机分为运动组和对照组.运动组进行24周有氧运动,对照组保持日常生活习惯不变.实验前后分别测定心率、血压、心率变异性(HRV)、血压变异性(BPV)和压力反射敏感性(BRS),探讨长期有氧运动对原发性高血压患者心血管自主神经功能的影响,以期为制定特异性的运动处方提供依据.结果发现,实验前,两组各指标均无显著性差异(P0.05).实验后,组内与运动前比较,运动组安静心率(P0.01)、收缩压(P0.05)和舒张压(P0.05)下降,HRV总功率(TP)、高频功率(HF)和标准化高频功率(HFn)升高(P0.01),HRVLF/HF降低(P0.01),BPV低频功率(LF)和标准化低频功率(LFn)降低(P0.01),BRS升高(P0.01),对照组所有指标均无显著性变化(P0.05);组间比较,运动组心率(P0.01)、收缩压(P0.05)和舒张压(P0.05)均低于对照组,HRV TP、HF、HFn和BRS高于对照组(P0.01),HRV LF/HF(P0.01)、BPV LF和LFn(P0.01)均低于对照组.结果提示,长期有氧运动可降低原发性高血压患者安静心率和血压,其机制可能与心血管自主神经功能改善有关,即心交感和交感缩血管神经调制减弱,迷走神经张力和压力反射功能增强,交感―迷走平衡呈现迷走优势.     

脑内血管紧张素及其在延髓对心血管活动的调节

血管紧张素（angiotensins,ANG）包括ANGⅠ、ANGⅡ、ANGⅢ、ANGⅣ,其受体亚型有AT1、AT2、AT4三种。一般认为,脑内血管紧张素的功能是由ANGⅡ与AT1受体结合完成的,但目前认为,脑内正常心血管功能是由ANG（1—7）与其特异性受体（AT5？）结合完成的;还有人指出,ANCⅢ与ANCⅡ在中枢效应中起着同等重要甚至比ANGⅡ更重要的作用。延髓腹外侧区（ventrolateralmedulla,VLM）是中枢重要的心血管活动的调控区域,在VLM通过氨基酸类神经递质影响心血管活动,并导致某些高血压的发生。     

苹果花托中生长调节物质的变化及其在果实形成中的作用

本实验结果表明,授粉三天后苹果花托中的生长促进物质活性比未授粉的增加10倍多,而生长抑制物水平明显减低;授粉七天后的花托继续保持较高的生长促进物活性和低的抑制物水平,但未授粉的花托中抑制物质水平显著增加,促进物质活性几乎全部消失.用苹果花托中提取的类 GA 物质处理未授粉茄子子房,同 GA 一样明显促进子房的发育;而提取的生长抑制物处理已授粉的茄子,子房基本上停止了生长,据此讨论了生长调节物质在子房发育中的调控作用.     

声乐教学中的心理调控作用

在声乐教学中如何应用声乐教育心理学来提高教学效果，是每一位教师思考的课题。本揭示了心理调控在声乐教学中的重要作用。     

不同运动模式训练对糖调节受损老年人胰岛素敏感性和体能的影响

为了筛选出能够有效改善糖调节受损(IGR)老年人胰岛素敏感性和提升肌力、心肺耐力、平衡和步态表现的运动方案,招募75名IGR老年人,进行胰岛素敏感性、糖代谢、下肢肌力、耐力、平衡和行走能力等测试,然后进行随机分组,将受试者分为肌力训练组(M组)、心肺耐力训练组(C组)、平衡训练组(B组),按照每组训练方案进行为期12周的训练,各组训练皆以3~4人团体进行运动,每次30~40min,每周4次,总共48次训练,在最后一次训练干预结束后3d内进行后测,项目与前测一致.结果:C组和M组对于糖调节受损人群的空腹血糖、胰岛素、胰岛素抵抗指数均取得显著改善作用(p0.05),而平衡训练组虽具有一定改善,但差异无统计学意义(p0.05).各组髋屈曲肌、膝屈曲肌、踝跖屈肌和踝背屈肌肌力均有显著增加(p0.05).M组和C组的受试者在心肺耐力方面取得了显著改善.采用肌力训练和心肺耐力训练方案的老年人6min行走测试后测结果显著优于接受平衡训练的老年人(p0.05).M组、C组、B组受试者平衡能力均取得显著进步,且C组在串联行走测试的结果显著优于M组和B组(p0.05);心肺耐力训练组经过12周训练,行走速度、行走步频、步幅均显著增加(p0.05);肌力训练组和平衡训练组经过12周训练,行走速度、步频、步幅没有显著变化(p0.05),且心肺耐力训练组显著高于肌力训练组和平衡训练组(p0.05).得出心肺耐力训练后糖调节受损人群的胰岛素敏感性、下肢肌力、心肺耐力、平衡能力和行走能力等得到显著改善,肌力训练和平衡训练对下肢肌力、平衡能力有一定促进作用.     

染色质免疫沉淀技术（ChIP）在基因转录调控中的作用

目的研究体细胞水平蛋白（转录因子）与DNA（靶基因启动子区）的相互作用.方法用甲醛固定活细胞,在生理状态下,结合的蛋白质-DNA复合物呈交联状态,超声将DNA打断成不同大小的片段,用目的蛋白质特异性抗体免疫沉淀该蛋白质-DNA复合物,复合物65℃解交联,并分离纯化DNA,然后进行PCR扩增.结果PCR扩增出阳性条带.结...