蛹虫草中抗HIV-1活性成分的研究

以蛹虫草子实体为材料,经水提醇沉后获得沉淀样品P和上清样品L,初步抗HIV-1蛋白酶检测显示活性成份集中在样品L中.进一步利用大孔吸附树脂和高压液相对L进行分离纯化,并对纯化样品的体外抗HIV-1蛋白酶活性和抗HIV-1逆转录酶活性进行了测定.结果显示,L经大孔吸附树脂和高压液相分离纯化后得到三种物质均具有抗HIV-1蛋白酶活性f1,f2和f3,其中f1对HIV-1蛋白酶抑制作用最强,比L提高了约29%;三种物质对HIV-1逆转录酶均有一定的抑制作用.     

银杏叶中有效成分的微波提取及抗氧化活性研究

用正交试验设计优选出银杏叶黄酮类化合物的微波提取工艺,并采用化学发光法对银杏叶的粗提物、正丁醇萃取物及其余水层清除自由基和抗氧化性能进行了研究.结果表明:当固液比(m/m)为1∶30,微波中档400 W浸提时间为1 h,然后70℃水浴浸提1 h,黄酮的提取率最高.3种提取物均有较强的抗氧化活性.其中粗提物的抗氧化活性比正丁醇萃取物好,同时发现萃取后的水层部分虽然黄酮类化合物含量很低,但也有较强的抗氧化活性.证明银杏叶提取物是一组复杂的、而又有相互协同增效作用的混合物,进一步分离纯化可能对提高其抗氧化活性作用不显著.     

藏药革叶兔耳草粗提物的抗氧化活性研究

用工业乙醇提取革叶兔耳草全草粉末,减压浓缩得到乙醇浸膏,用蒸馏水溶解后,依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,浓缩分别得到石油醚、乙酸乙酯、正丁醇的粗提物;采用DPPH法研究4种不同溶剂粗提物的抗氧化活性.试验结果表明:革叶兔耳草4种不同溶剂的粗提物均有一定的抗氧化活性,且抗氧化活性与粗提物的质量浓度呈一定的量效关系.尤其是乙醇粗提物具有较强的抗氧化活性,可作为一种新的自由基清除剂和天然抗氧化剂.     

天花粉蛋白抗人免疫缺陷病毒1型研究

目的检测用基因工程方法制备的天花粉蛋白抗人免疫缺陷病毒1型的活性。方法将人免疫缺陷病毒1型在细胞系中培养,加入天花粉蛋白后,观察细胞病变情况,检测P24抗原及逆转录酶的活性。结果加入天花粉蛋白的细胞始终未见细胞病变,P24抗原及逆转录酶检测均为阴性;阴性对照组细胞在第7 d以后均出现人免疫缺陷病毒1型感染典型细胞病变,P24抗原及逆转录酶检测均为阳性;阳性对照组始终未见HIV-1感染典型细胞病变,逆转录酶的活性检测和P24抗原检测结果均为阴性。结论天花粉蛋白在培养细胞系中可以有效地抑制人免疫缺陷病毒1型。     

莲藕抗氧化多糖的抗HIV-1整合酶作用研究

利用乙醇沉淀、凝胶过滤等方法从莲藕中分离纯化得到具有抗氧化活性的多糖复合物LB2,经分析,LB2分子量为18.8 kD,由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖和木糖这五种单糖组成,其比例为2:8:7:8:1.LB2显示出较强的抑制HIV-1整合酶体外3'切割活性,可作为一种新型HIV-1整合酶抑制剂.     

6-(1-萘甲基)取代S-DABO类逆转录酶抑制剂的3D-QSAR研究

以活性化合物15为例,采用分子对接的方法模拟了化合物与HIV-1逆转录酶的作用,从而探讨了系列6-萘甲基取代S-DABO类化合物的作用机制.并基于分子对接后的活性构象,应用比较分子力场分析(CoMFA)和比较分子相似因子分析(CoMSIA)法对该类化合物的三维定量构效关系进行了研究,建立了有较好预测能力3D-QSAR模型,为该类化合物进一步的结构优化提供理论指导.     

靶向HIV-1细胞受体基因CCR5的人工miRNA的构建与鉴定

趋化因子CCR5是HIV-1入侵机体细胞的主要辅助受体之一,通过抑制CCR5的表达可以在一定程度上阻断HIV-1的复制进程.miRNA介导的RNA干扰相比经典的siRNA在应用中具有更多的特点.本研究的目的是构建可特异有效靶向CCR5的人工miRNA元件.本研究以CCR5基因序列为模板设计了14个miRNA靶序列,以天然miR-30a为基础骨架通过靶序列区替换构建人工miRNA元件.通过将miRNA表达质粒与携带靶序列区的报告质粒的共转染抑制实验检测不同miRNA的抑制效率,结果显示miCCR-13A具有较好的抑制效率和特异性.进一步将miCCR-13A表达载体转染CCR5阳性的HIV-1受体细胞株TZM-b1,RT-PCR检测显示miCCR-13A可在细胞中获得有效表达,同时应用免疫流式细胞术检测显示在miCCR-13A转染细胞相比对照细胞的CCR5蛋白的检测活性明显降低.进一步的研究显示miCCR-13A在细胞中不会影响细胞活性和干扰素效应相关基因osa1和stat1 mRNA水平,具有良好的特异性.本研究获得的可特异靶向CCR5的人工miRNA元件可为进一步的抗HIV-1研究提供重要基础.     

针毛鳞盖蕨不同溶剂萃取物抗氧化及其抑制α-葡萄糖苷酶活性研究

以针毛鳞盖蕨为研究对象,用体积分数95%乙醇提取后,依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇3种有机溶剂萃取得各萃取物,分别测定其多酚含量,通过DPPH·和ABTS~+·清除法及PNPG法评价针毛鳞盖蕨乙醇粗提物及不同溶剂萃取物的体外抗氧化活性及降血糖活性.实验结果表明,在各萃取物中,乙酸乙酯萃取物的多酚含量最高(34.8%);针毛鳞盖蕨乙醇粗提物及各萃取物均具有一定的抗氧化和抑制α-葡萄糖苷酶活性.其中,乙酸乙酯萃取物具有显著的DPPH·清除能力、ABTS~+·清除能力及α-葡萄糖苷酶活性抑制能力,且其α-葡萄糖苷酶抑制活性IC_(50)=(5.3±0.8)μg/mL高于阳性对照阿卡波糖IC_(50)=(103.7±5.1)μg/mL.     

清开灵注射液体外抑制HIV-1作用

目的:研究清开灵注射液(QKL)体外抑制HIV-1的作用.方法:用MTT比色法检测QKL对H9/HIV-1ⅢB细胞(慢性感染HIV-1ⅢB的H9细胞)和MT-2细胞的毒性;采用荧光染料Calcein-AM标记的H9/HIV-1ⅢB细胞和系列稀释的QKL作用后.与MT-2细胞混合培养,2 h后在荧光下计数融合细胞数目,评价QKL对两种细胞早期融合的影响;用MTT法检测QKL对HIV-1ⅢB急性感染的MT-2细胞的保护作用;用HIVp24抗原试剂盒检测HIV-1ⅢB感染的MT-2细胞的培养上清p24抗原的含量,分析QKL对HIV-1复制的影响.结果:QKL对H9/HIV-1ⅢB细胞和MT-2细胞的CC50分别为1/50.76和1/36.97;抑制H9/HIV-1ⅢB细胞和MT-2细胞早期融合作用的EC50=1/235.29,SI=6.36;对HIV-1ⅢB感染的MT-2细胞保护作用的EC50=1/144.93,SI=3.92;抑制p24抗原产生作用的EC50=1/175.44,SI=4.75.结论:QKL体外有抗HIV-1活性,作用机制可能是多靶点的,可抑制病毒进入细胞和胞内复制.     

柠檬桉树脂中多酚的提取纯化及抗氧化活性

为提高柠檬桉树的综合利用率,采用乙醇作为提取剂对柠檬桉树脂中的多酚进行初步提取,分别用乙酸乙酯萃取提纯法、醇提水沉—正丁醇萃取提纯法对粗提物进一步纯化,得到质量分数分别为28.31%和39.65%的多酚纯化物;定性实验表明,柠檬桉树脂的提取物中含有多酚物质;抗氧化活性实验表明抗坏血酸(VC)的总抗氧化能力最强,其次为粗提物,再次为醇提水沉—正丁醇提纯物,最后为乙酸乙酯纯化物。各提纯物的活性表现为多酚纯化物的质量分数越大,其抗氧化能力越大;多酚粗提物的抗氧化能力较提纯物更强,表明多酚粗提物中可能含有其他更强抗氧化能力的化学成分。     

碳链长度对咖啡酸酯的抗氧化及抗增殖活性的影响

咖啡酸苯乙酯(caffeic acid phenethyl ester, CAPE)是蜂胶中的主要活性成分,具有显著的抗氧化及抗肿瘤活性.研究了具有不同边链长度的CAPE类似物(咖啡酸丁酯、咖啡酸己酯、咖啡酸辛酯和咖啡酸十六烷基酯)对水溶性偶氮引发剂2,2′-偶氮二(2-脒基丙烷)二盐酸盐(AAPH)诱导的血红细胞膜氧化损伤的保护作用.其抗氧化活性顺序为:咖啡酸辛酯>CAPE~咖啡酸丁酯>咖啡酸己酯>咖啡酸十六烷基酯.同时,测定了这些化合物抑制人肺癌细胞 A549增殖活性,其活性顺序为:咖啡酸丁酯>CAPE>咖啡酸辛脂>咖啡酸己脂>咖啡酸十六烷基脂.研究结果表明:与CAPE相比,咖啡酸辛酯的抗氧化活性和咖啡酸丁酯抑制A549细胞增殖活性优于母体分子.咖啡酸酯的抗氧化活性和抑制 A549细胞增殖的活性与其边链长度(亲脂性)并不呈简单的线性关系.“合适”的亲脂性和胞内的定位是影响化合物这些活性的重要因素.     

刺梨黄酮的精制及其抗氧化活性比较

以8种大孔树脂为筛选对象,研究大孔树脂对刺梨黄酮的吸附和解吸情况,并以芦丁标准品为对照,考察刺梨黄酮精制前后的抗氧化活性。结果表明:AB-8大孔树脂适用于刺梨黄酮的精制;经AB-8大孔树脂静态吸附精制后,刺梨黄酮质量分数达37.24%,为粗提物的4.4倍。抗氧化活性研究表明,刺梨黄酮的抗氧化活性与质量浓度之间有量效关系,且精制后刺梨黄酮的抗氧化活性显著高于粗提物。因此,刺梨黄酮有一定的抗氧化活性,可作为一种新型的天然抗氧化剂用于保健食品、化妆品和生物制药等行业。     

天葵几种粗提物对菜青虫、小菜蛾的拒食活性筛选

本文研究报道了天葵几种粗提物对菜青虫、小菜蛾的拒食活性筛选。经石油醚、氯仿、丙酮粗提物的拒食活性比较,结果表明石油醚粗提物的拒食效果较好,石油醚粗提物经进一步分离得油状和结晶粗提物,二者经拒食活性比较,结果表明石油醚油状粗提物的活性较强。     

不同品种肉桂中酚类物质抗氧化和抑制糖消化酶活性比较研究

为研究肉桂中酚类物质体外抗氧化活性和抑制糖消化酶活性,以台湾土肉桂、清化肉桂、云野肉桂和西江肉桂4个品种肉桂为研究对象,分析其游离态和结合态多酚含量、游离态和结合态黄酮含量以及游离态和结合态多酚粗提物抗氧化能力和体外抑制糖消化酶活性,并对肉桂游离态和结合态多酚、游离态和结合态黄酮含量与其体外抑制糖消化酶活性进行相关性分析。通过UHPLC-MS/MS法对4个品种肉桂游离态酚类化合物进行分析。研究结果表明:4个品种肉桂中总多酚和总黄酮含量分别为58.99～71.62mg/g和46.49～58.05mg/g,游离态多酚和黄酮含量明显高于结合态多酚和黄酮含量；品种对肉桂的抗氧化活性和糖消化酶抑制活性影响显著,其中台湾土肉桂的抗氧化活性和糖消化酶抑制活性都显著高于其他3个品种(P＜0.05)；游离态和结合态多酚含量、游离态和结合态黄酮含量与α-葡萄糖苷酶、α-淀粉酶和蔗糖酶的IC₅₀之间具有显著的负相关性(P＜0.05)。进一步通过UHPLC-MS/MS发现,原花青素类、槲皮素-3-O-葡萄糖苷和芦丁可能是肉桂抑制糖消化酶的主要活性物质。对不同品种肉桂生物活性差异的研究能够为肉桂的品种筛选、精深加工和高效利用提供理论参考。     

香蕉果皮黄酮抗氧化活性研究

以香蕉果皮黄酮粗提物和纯化物为研究对象,通过测定其处理食用猪油后的过氧化值、对超氧阴离子自由基(O2.-)和羟基自由基(.OH)的清除率及其还原能力,研究了香蕉果皮黄酮的抗氧化活性.结果表明:纯化前和纯化后的香蕉果皮黄酮均有较强的抗氧化作用,除了清除羟基自由基(.OH)的活性是后者强于前者外,其余的抗氧化性能显示为前者强于后者.随着黄酮添加量的增加,其抗氧化性能也明显增强.总体上,香蕉果皮黄酮的抗氧化活性强于茶多酚和二丁基羟基甲苯(BHT).     

微杆菌XL1胞外多糖发酵条件优化及其活性研究

为提高微杆菌Microbacterium XL1胞外多糖的产量,探究其生理活性功能,本研究采用单因素法优化微杆菌XL1发酵产胞外多糖的碳、氮源种类及添加量、温度、初始pH和发酵时间,并对微杆菌XL1胞外多糖的吸湿保湿性能、抗氧化活性以及酪氨酸酶抑制活性进行测试。结果表明,微杆菌XL1产胞外多糖的最佳条件如下：蔗糖为碳源、酵母提取物为氮源,蔗糖添加量为20%、酵母提取物添加量为0.3%,温度20℃,pH值为8.0,发酵时间24 h。在最佳条件下,胞外多糖产量最高达92 g/L,是优化前的3.2倍。同时,微杆菌XL1胞外多糖的吸湿、保湿性能与透明质酸相似,其对DPPH自由基、羟基自由基和铁离子的半数抑制浓度（IC₅₀）分别为1.2,0.8和0.3 mg/mL,对酪氨酸酶的抑制率可达55%。本研究提高了微杆菌XL1胞外多糖的产量,并证实微杆菌XL1胞外多糖具有优良的生理活性,对丰富微杆菌胞外多糖活性的研究有重要意义,可为其在化妆品和食品行业中的开发应用提供理论依据。     

荞麦黄酮的提取及其对食用油脂抗氧化作用的研究

将甜荞、苦荞粉碎后乙醇浸提法提取黄酮类化合物,其黄酮粗提物的得率分别为1.39%和2.76%,粗提物中黄酮含量分别为0.589%和3.22%.以BHT和Vc为阳性对照,研究两种荞麦黄酮粗提物对植物油和动物油的抗氧化效果.结果表明,两种荞麦黄酮粗提物具有显著的抗氧化性能,其中苦荞黄酮粗提物在两种油脂中的抗氧化性高于BHT和Vc.     

太子参提取物体外抗氧化活性研究

通过清除自由基、抗脂质过氧化活力测定,对太子参提取物体外抗氧化活性进行研究.结果表明,太子参水提取物、醇提取物、皂甙粗提物清除DPPH的IC_(50)值分别为6.13、3.61和2.89 mg/L,清除羟自由基的活力分别为70.9、77.3和871.8 U/mg,清除超氧阴离子自由基的活力分别为0.55、1.93和7.71 U/mg.对亚油酸氧化的抑制率分别为0.5%、24.2%和26.9%,对H_2O_2诱导血细胞溶解的抑制率分别为22.4%、33.2%、45.6%.太子参提取物具有明显抗氧化活性,皂甙粗提物活性优于水提取物和醇提取物.     

地黄功能因子提取物体外抗氧化活性及α-葡萄糖苷酶抑制活性研究

通过体外试验，探讨了DHTW抗氧化活性及α-葡萄糖苷酶的抑制活性，为地黄降糖功能因子的开发利用提供理论依据.采用紫外分光光度法(UV)测定DHTW清除DPPH、ABTS等自由基的能力，利用酶标仪测定DHTW抑制α-葡萄糖苷酶的活性.结果表明：(1)DHTW均具有抗氧化活性，质量浓度在0～6 mg/mL内，随着浓度的增加，抗氧化活性也不断增加，当溶液达到一定浓度后，抗氧化性趋于稳定.(2)DHTW的DPPH自由基清除能力IC₅₀值分别为：醇洗脱物DHY(0.087 mg/mL)、粗提物DHC(2.987 mg/mL)、水洗脱物DHS(3.024 mg/mL)，故自由基清除能力表现为：DHY>DHC>DHS.(3)DHTW的ABTS自由基清除能力IC₅₀值分别为：DHY(0.137 mg/mL)、DHC(1.463 mg/mL)、DHS(2.168 mg/mL),ABTS自由基清除率表现为：DHY>DHC>DHS.(4)DHTW对α-葡萄糖苷酶均有明显的抑制作用，其中，DHY有较明显的抑制能力，α-葡萄糖苷酶抑制活性明显优...     

HIV-1逆转录酶非核苷类抑制剂MKC分子结合位点的理论研究

1RT1蛋白是一个HIV-1逆转录酶核心蛋白,是抑制剂药物分子的作用靶点.非核苷类抑制剂MKC分子是1RT1蛋白中的配体分子.采用量子力学密度泛函理论,B3LYP计算方法,结合6-31G(d,P)基组,逐个计算MKC分子与其周围半径0.7 nm结构范围内的34个氨基酸残基相互作用和结合能,发现在1RT1蛋白中103Lys残基是MKC分子的结合作用位点,结合能值为-46.73 kJ·mol-1.该结合位点的发现将为进一步设计和寻找抗HIV-1逆转录酶抑制剂药物分子提供一些理论基础.