激素和添加物对蝴蝶兰组培快繁的影响

以蝴蝶兰人工授粉的果荚种胚和组培苗的叶片、茎尖为外植体,进行组织培养快速繁殖研究.结果表明,果荚种胚是最好的外植体材料,1个果荚可培育出上万个原球茎.种胚诱导原球茎最佳激素组合为:6-BA 0.3mg/L+NAA 0.2 mg/L;原球茎增殖最佳激素组合为:6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L;2%蔗糖和10%香蕉泥可以显著促进原球茎增殖;原球茎分化最佳激素组合为:6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L;诱导生根IBA 0.5mg/L最佳;炼苗后移栽苗成活率达95%以上.优化后的蝴蝶兰组织培养条件,可为蝴蝶兰快速繁殖工厂化生产提供参考.     

白芨种子的高效萌发及其无性繁殖体系的构建

为实现白芨的快速繁殖,以白芨的成熟蒴果为材料,在MS、1/2MS、KC、VW添加6-BA及椰汁乳的培养基上进行无菌播种.种子萌发后形成的原球茎接种到不同培养基上进行扩增繁殖,建立白芨无性繁殖体系.结果表明:种子萌发最佳培养基为液体培养基1/2MS+6-BA 1.0 mg·L-1,添加10%的椰汁乳能有效提高萌发率,促进原球茎的生长;无性繁殖最佳培养基为MS+6-BA1.0 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1.此无性繁殖体系的建立有助于白芨的相关研究和产业化.     

铁线莲‘朱卡’组织培养技术及再生体系的建立

【目的】以铁线莲‘朱卡’(Clematis ‘Julka’)的带芽茎段为起始材料,通过组织培养方法建立再生体系。【方法】利用腋芽诱导—不定芽增殖—生根和愈伤组织诱导—增殖—分化—生根两种途径,建立该品种的组织培养再生体系,形成铁线莲‘朱卡’完整植株。【结果】铁线莲‘朱卡’组织培养最适宜灭菌条件为质量分数10%次氯酸钠溶液灭菌12min;带芽茎段诱导腋芽最适培养基为MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 1.0 mg/L,不定芽增殖最适培养基为MS+IBA 0.20 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+GA₃ 0.2 mg/L;带芽茎段诱导愈伤组织最适培养基为MS+NAA 0.05 mg/L+6-BA 2.0 mg/L,愈伤组织增殖最适培养基为MS+NAA 0.20 mg/L +6-BA 2.0 mg/L,愈伤组织分化最适培养基为MS+NAA 0.03 mg/L+6-BA 3.0 mg/L;最佳生根培养基为1/2 MS+IBA 0.3 mg/L。【结论】首次用两种器官发生方法建立了稳定高效的铁线莲‘朱卡’再生体系。直接形成不定芽时增殖倍数可达5.52。诱导愈伤组织途径的器官发生中,愈伤组织分化率可达76.7%,分化不定芽平均数超过3。两种途径诱导生根率都在90%以上。     

蝴蝶兰类原球茎诱导、增殖及植株再生条件初步研究

为优化蝴蝶兰类原球茎诱导和增殖再生条件,以蝴蝶兰品种‘红太阳’无菌播种形成的原球茎为材料,研究了取材时间、植物生长调节剂(6-BA、NAA)、碳源等对类原球茎诱导和增殖及分化再生的影响,结果表明,生长45d的蝴蝶兰原球茎最适于类原球茎诱导和增殖培养。最佳的类原球茎诱导和增殖培养基为:花宝1号3.5g/L+6-BA 5.0mg/L+NAA 0.7mg/L+白糖20g/L+琼脂6.0g/L+活性炭2.0g/L,pH为5.4-5.8,最高增殖系数可以达到17.33,比已报道的最高增殖系数提高了35.39%;类原球茎最佳分化培养基为:花宝1号3.5g/L+6-BA 3.0mg/L+NAA 0.5mg/L+白糖20g/L+琼脂6.0g/L+活性炭2.0g/L,pH为5.4-5.8,最高分化率可达96.67%,生根率最高可达到92%。     

白芨高效再生体系建立及工厂化育苗技术研究

以白芨种子为外植体,1/2MS或MS为基本培养基,通过添加不同浓度配比的植物生长调节剂,筛选最适合原球茎的诱导、芽的增殖与分化以及生根培养的条件。最适宜白芨原球茎诱导的培养基为1/2MS+1.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA;原球茎的芽增殖的最适培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,增殖倍数达6.6;最佳分化培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA+50.0 g/L土豆泥;最佳生根培养基为1/2 MS+0.5 mg/L NAA+70.0 g/L香蕉泥,生根率达100%;炼苗基质配方以黄土∶腐植土∶锯木粉按体积比4∶4∶2,白芨苗移栽成活率高。以白芨种子诱导原球茎获得的高效再生技术体系可以在白芨产业化发展中推广应用。     

6-BA与NAA不同浓度配比对大花蕙兰原球茎诱导的影响

以大花蕙兰茎尖为外植体,研究6-BA与NAA浓度梯度配比对大花蕙兰原球茎的诱导、增殖及分化的影响.结果表明:6-BA 1.0mg/L+NAA 0.5mg/L浓度配比下,大花蕙兰茎尖存活率达到93.3%;6-BA0.8mg/L+NAA 0.4mg/L浓度配比下,原球茎诱导率达到85.8%;6-BA 1.0mg/L+NAA 0.3mg/L浓度配比下,原球茎增殖系数达到4.59;6-BA 0.8mg/L+NAA 0.5mg/L浓度配比下,原球茎出芽率达到87.5%.首次报道采用6-BA 0.8mg/L+NAA 0.5mg/L浓度配比组合适合大花蕙兰茎尖培养,可同时获得较高的原球茎诱导率(80.8%)和出芽率(87.5%),比目前已报道的最佳原球茎诱导率(72.7%)和出芽率(76.7%)提高8%以上.     

白芨的无菌萌发与组织培养

以白芨成熟蒴果为材料,在不同培养基上进行无菌播种,种子萌发后利用组织培养方法进行无性系繁殖.试验结果表明:种子萌发的最佳培养基为1/2MS+6-BA1.0mg/L+1%活性炭;丛生芽增殖的最佳培养基为MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.15mg/L;不同于已有的研究结果,1/2MS+0.5mg/LNAA用于生根的效果不佳,有待进一步研究.     

碳源对不同产地香樟体细胞胚胎发生及植株再生的影响

【目的】 探究渗透调节物质种类及其不同浓度对香樟体细胞胚胎发生及植株再生的影响,为提高香樟体胚诱导率、优化体细胞胚胎发生体系奠定理论基础。【方法】 以7月初在湖南省郴州、长沙、娄底及怀化市采集的香樟(Cinnamomum camphora L.)的未成熟合子胚为试验材料,分析不同碳源种类、浓度及组合方式对香樟体胚诱导、芽萌发、生根等方面的影响。【结果】 适合香樟的体胚诱导培养基为MS+1.0 mg/L的6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)+0.3 mg/L的2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)+1.0 mg/L 链霉素+15 g/L 蔗糖+30 g/L 山梨醇+6.5 g/L 琼脂+700 mg/L水解酪蛋白;增殖培养基为MS+15 g/L 蔗糖+30 g/L 山梨醇+6.5 g/L 琼脂+700 mg/L 水解酪蛋白;芽萌发培养基为MS+0.1 mg/L 苯基噻二唑基脲(TDZ)+0.5 mg/L 萘乙酸(NAA)+0.1 mg/L 吲哚丁酸(IBA)+15 g/L 蔗糖+15 g/L 山梨醇+6.5 g/L 琼脂;生根培养基为MS+1.0 mg/L IBA+15 g/L 蔗糖+15 g/L 山梨醇+6.5 g/L 琼脂。【结论】 经过改良,添加15 g/L蔗糖和30 g/L山梨醇的组合碳源,香樟体胚的诱导率明显提高;添加15 g/L蔗糖和15 g/L山梨醇的组合碳源处理的新植株生根条数多、主根明显,生长状况更优。     

流苏石斛原球茎诱导初步探究

通过植物组织培养技术对流苏石斛种子、茎段诱导原球茎因子进行初步探究.实验表明:以种子为诱导材料,在MS基本培养基中添加6-BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L的诱导效果较好,诱导率达84.9%;以茎段为诱导材料时,在MS+6-BA3.0 mg/L+NAA0.5 mg/L+TDZ0.4 mg/L的培养基上诱导率高达93%,以添加100g/L的马铃薯汁能更好地提高原球茎的诱导率,诱导率高达95.2%.     

外源植物激素对黄连种子后熟与萌发的影响

应用正交设计及方差分析方法研宄外源植物激素CA3、NAA、6-BA对黄连种子胚率、裂口率、发芽率影响；结果表明胚率受三种激素共同影响，裂口率受到CA，和NAA的显著影响，发芽率受到NAA的显著影响。其中5号处理组合(CA3 5mg/L，NAA0．5mg／L，6-BA0．1mg/L)能显著提高胚率、裂口率及发芽率，是促进黄连种子后熟与萌发的最优激素组合。     

蕙兰CYMBIDIUM FABERI ROLFE种子无菌培养的研究

对蕙兰种子无菌培养过程的观察表明，其种子萌发先形成小球体，再由小球体发育成小苗，其途径有三条：一是由小球体经原球茎发育成小苗；二是小球体伸长成根茎后发育成小苗；三是小球体先形成根茎，在根茎四周分化出许多原球茎，再由原球茎形成小苗。低温预处理有利于种子萌发。种子萌发和小苗的形成需要生长素和细胞分裂素的适当配合，其中以ＭＳ＋６－ＢＡ０．５ｍｇ／１＋ＩＡＡ１．５ｍｇ／１对种子萌发最佳，苗生长以ＭＳ＋６－ＢＡ１．０ｍｇ／１＋ＮＡＡ０．５ｍｇ／１为好。液体振荡培养采用ＭＳ＋６－ＢＡ１．０ｍｇ／１＋ＩＡＡ１．５ｍｇ／１时，原球茎月增殖８－１０倍以上。     

芒萁组培技术体系的优化

【目的】芒萁(Dicranopteris pedate)是尾矿及酸性边坡修复的优良植物。优化芒萁组培技术,提高组培效率,可为困难立地修复提供大量芒萁孢子体。【方法】以芒萁孢子为外植体,研究外植体收集时间、消毒时间与孢子萌发率的关系;通过改变培养基中无机盐浓度、蔗糖浓度及植物生长调节剂类型及浓度,研究孢子萌发、原叶体增殖、孢子体生成3个过程的最佳培养基配方。【结果】春季2—4月采集的芒萁孢子萌发活性最强;孢子诱导萌发最佳处理为DKW+5%(质量分数) NaClO消毒15 s,萌发率97.15%,20 d原叶体可见;原叶体最佳增殖培养基为1/2 MS+蔗糖5 g/L+6-BA 0.5 mg/L+KT 0.5 mg/L,30 d质量增殖倍数为7.28;孢子体诱导生成最佳培养基为1/2 MS+蔗糖30 g/L+NAA 1.0 mg/L,第8天孢子体即可产生,生成率53.33%。【结论】芒萁孢子活性与生长区域、生成月份存在关联性,广州地区3月的孢子活性最强;在幼孢子体的瓶苗生成率较低的情况下,研发原叶体绿色球状体(prothallus green globular body, PGGB)高效增殖...     

滇越金线莲快速繁殖技术研究

通过滇越金线莲种子无菌诱导和茎诱导芽以及丛生芽增殖、生根等试验，得出结论：滇越金线莲种子在不含激素的Hyponex 1培养基上有较好萌发率，并且在添加10％椰乳后原球茎能分化出健壮的苗。外植茎在Hyponex 1＋6-BA 1mg／L＋NAA 0．01／L培养基上诱导产生芽的几率最高；最佳增殖培养基是Hyponex 1＋BA 0．5mg／L＋NAA 0．1mg／L；生根培养基是Hyponex 1＋6-BA0．05mg／L＋NAA0．1mg／L。     

入侵植物节节麦种子萌发及幼苗生长对盐碱胁迫的响应

【目的】节节麦入侵已严重威胁到我国小麦的安全生产,探明节节麦对盐碱生境的适应能力,为节节麦入侵扩散的进一步预测提供参考。【方法】研究了不同浓度[0(CK)、50、100、150和200 mmol/L] NaCl和Na₂CO₃胁迫对节节麦种子萌发及幼苗生长的影响。【结果】①随着两种盐处理液浓度的增加,节节麦种子发芽率、胚芽及胚根长度均呈持续下降的变化。当处理液分别达到150及100 mmol/L时,NaCl和Na₂CO₃胁迫中节节麦种子发芽率与CK差异显著,至200 mmol/L时,Na₂CO₃处理的种子不发芽。此外,相同浓度条件下,Na₂CO₃胁迫中发芽和生长指标均明显低于NaCl处理;②盐碱胁迫中,随处理液浓度的增加,节节麦脯氨酸含量和SOD活性呈显著增加的变化,而相对电导率和MDA含量在低浓度盐碱处理中较CK增加不显著,之后在高浓度的处理中则呈急剧增加的变化。由此表明,节节麦能够通过自身调节适应一定范围的盐碱胁迫。此外,相同盐处理浓度条件下,Na₂CO₃处理的上述指标均明显高于NaCl处理。【结论】综合分析表明,节节麦对盐碱生境具有一定的适应能力,而Na₂CO₃对其种子萌发及幼苗生长的抑制作用大于NaCl。     

红皮云杉体胚发生体系优化和超低温保存技术研究

[目的]通过对红皮云杉(Picea koraiensis)体细胞胚胎发生条件的筛选和超低温保存技术研究,建立其完整的体胚发生体系及超低温保存条件,为红皮云杉优良种质资源的大量繁殖及保存提供基础.[方法]以红皮云杉合子胚为外植体,以两种基本培养基、6种植物生长调节剂组合为培养条件,筛选胚性愈伤组织诱导的适宜条件.并将获得...     

高盆樱桃的组培快繁研究

【目的】通过对高盆樱桃外植体灭菌方法的筛选和培养条件的优化,解决高盆樱桃在快速繁殖中存在的丛生芽诱导率低、增殖率低、生根难等问题,为建立高盆樱桃组培快繁体系奠定基础。【方法】以高盆樱桃带芽茎段为外植体,探讨了外植体的灭菌方法、基本培养基类型(MS、1/2 MS和1/4 MS)以及不同外源激素(6-BA、NAA和IBA)对丛生芽诱导、丛生芽增殖、生根等过程的影响。【结果】高盆樱桃茎段在75%乙醇灭菌20 s,0.1%升汞灭菌300 s时,污染率最低。在MS培养基中添加1.2 mg/L 6-BA和0.1 mg/L IBA时,丛生芽诱导率最高(82.22%)。在MS培养基中同时添加0.8 mg/L 6-BA、0.06 mg/L IBA、0.08 mg/L NAA时丛生芽增殖效果最好,增殖率为7.32。1/2 MS+IBA(0.5 mg/L)培养基有利于生根,生根率达92.22%。【结论】高盆樱桃带芽茎段适宜的灭菌方法为75%酒精处理20 s后,再以0.1%升汞处理300 s; 丛生芽诱导的适宜培养基为MS+6-BA(1.2 mg/L)+IBA(0.1 mg/L); 丛生芽增殖的适宜培养基为MS+6-BA(0.8 mg/L)+IBA(0.06 mg/L)+NAA(0.08 mg/L); 适宜高盆樱桃生根的培养基为1/2 MS+IBA(0.5 mg/L)。以体积比为1(河沙):1(腐殖质):2(蛭石)的混合基质为移栽基质时,试管苗移栽成活率可达72.2%。该试验结果可为高盆樱桃的规模化生产提供一定的理论基础和技术支撑。     

大雪兰种子的共生培养研究

 为了促进大雪兰种子的快速萌发,筛选能有效促进大雪兰(Cymbidium mastersii Griff. ex Lindl.)种子共生萌发的菌根真菌,在兰-菌共生培养条件下,开展了共生种子萌发后的生物量、菌株重分离、三维菌丝网光学和电子显微镜观察,以及TTC种子活力等方面的测定.经研究表明:经过150 d兰-菌共生培养,2种春兰和墨兰根部的菌根真菌CLB111、MLX102均对大雪兰种子共生萌发有明显的促进作用,萌发率与对照均达到极显著差异.经共生培养后从种子中重分离获得原接种菌株;共生萌发种子经光镜及电子显微镜观察到大量菌丝侵入并在胚细胞中形成三维菌丝网,胚开始分化,种子表现出明显的活性;而对照组种子经重分离未获得原接种菌株、未发现菌丝侵入种子,且种子活力极低.由此,筛选出促进大雪兰种子萌发的有效菌株为CLB111、MLX102.大雪兰成株的菌根真菌与其种子共生萌发的菌根真菌是一致的,这与天麻不同;同时,能有效促进大雪兰种子萌发的菌根真菌有2种.试验表明,大雪兰的菌根真菌与促进种子共生萌发的菌根真菌不是绝对专一的,在一定条件下,不同的菌株对同一种大雪兰种子有明显的促进萌发作用.对于不同的生态条件下是否存在有差异性的问题,有待进一步研究探讨     

水杨酸对NaHCO3胁迫下桂西北喀斯特地区青冈栎种子萌发的影响

【目的】探讨外源水杨酸(SA)对NaHCO₃胁迫下青冈栎(Cyclobalanopsis glauca )种子萌发特征和生理特性的影响。【方法】研究两个SA浓度(0和0.50 mmol/L)和7个NaHCO₃浓度(0、24、48、72、96、120和144 mmol/L)共14个处理组合下,青冈栎种子萌发参数(发芽率、发芽指数和活力指数)、耐盐指数、相对盐害率、丙二醛(MDA含量)、抗氧化酶[超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)]活性以及渗透调节物质(可溶性糖、可溶性蛋白和游离脯氨酸)含量的变化。【结果】①无SA处理时,在各NaHCO₃胁迫浓度下,青冈栎种子萌发参数和耐盐指数均低于对照组,相对盐害率则显著高于对照组。经SA处理后,种子萌发参数和耐盐指数均高于无SA处理组,相对盐害率则低于无SA处理组;当NaHCO₃浓度为0~72 mmol/L时,萌发参数和耐盐指数高于对照组,且在NaHCO₃为72 mmol/L时,萌发参数和耐盐指数最高,而相对盐害率最低。②无SA处理时,随NaHCO₃浓度的增加,种子POD和CAT活性先增后减,SOD活性显著低于对照组,MDA含量迅速增加。经SA处理后,在各NaHCO₃胁迫浓度下,种子抗氧化酶活性显著高于无SA处理组,MDA含量显著低于无SA组;且在NaHCO₃为72 mmol/L时,SOD和POD活性最高。③无SA处理组,在NaHCO₃各胁迫浓度下,种子中渗透调节物质都高于对照组;经SA处理后,渗透调节物质有不同程度增加,且在NaHCO₃为72 mmol/L时,其渗透调节物质含量最高。【结论】在喀斯特地区进行青冈栎播种育苗时,用0.50 mmol/L外源SA浸种,对72 mmol/L NaHCO₃胁迫的缓解效应最好。