暴马桑黄GPS基因克隆及响应茉莉酸甲酯诱导表达研究

【目的】对参与暴马桑黄(Sanghuangporus baumii)三萜合成途径的关键酶牻牛儿基焦磷酸合酶(GPS)基因进行克隆及诱导表达分析，以期深入探究暴马桑黄三萜合成分子机理。【方法】采用PCR扩增技术克隆暴马桑黄GPS基因cDNA全长及启动子，利用生物信息学软件对序列进行分析；采用qRT-PCR技术分析不同浓度茉莉酸甲酯(MeJA)对暴马桑黄GPS基因转录水平的影响，并用分光光度计测定不同浓度MeJA诱导下暴马桑黄三萜含量的变化。【结果】将克隆得到的暴马桑黄GPS基因和启动子分别命名为SbGPS和SbGPS启动子。基因分析发现SbGPS基因cDNA序列全长1 617 bp,共编码538个氨基酸，没有信号肽和跨膜结构。SbGPS启动子分析结果显示，除了含有CAAT-box、TATA-box等典型的启动子作用元件，还含有茉莉酸甲酯响应元件。荧光定量分析及三萜含量测定结果表明，SbGPS基因表达和三萜含量均随着MeJA浓度增加而呈现出先上升后下降的趋势，并且二者变化趋势基本一致，呈显著正相关。【结论】通过对SbGPS基因的克隆及诱导表达分析发现，该基因在暴马桑黄三萜生物合成途径中具有...     

桑树桑黄与杨树桑黄的分子辨别

为准确鉴别桑黄(Sanghuangporus)近缘种桑树桑黄(S.sanghuang)与杨树桑黄(S.vaninii)、暴马桑黄(S.baumii),本研究基于核糖体基因rDNA内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)序列分析技术,对桑黄真菌进行了系统发育分析与近缘种的分子辨别研究.结果表明,在NJ系统发育树上,23个桑树桑黄、11个杨树桑黄和6个暴马桑黄菌株各自以很高的Bootstrap支持率聚为了三个独立的分支,种间差异明显.依据桑树桑黄和杨树桑黄的rDNA ITS序列差异,设计两对引物Sv_U1/Sv_L和Sv_U2/Sv_L,均可特异性地扩增杨树桑黄478 bp和651 bp的ITS片段,而不扩增桑树桑黄的ITS片段,因而可用于两个桑黄近缘种的快速分子辨别.本研究为探讨桑黄孔菌属真菌的系统发育关系提供了参考,并为桑黄种间的准确辨别提供了一种有效的分子辅助手段.     

马桑化学成分及活性研究进展

马桑为马桑科马桑属植物, 马桑有种类繁多的化学成分.本文介绍了马桑的天然生物活性成分及其神经毒作用、致病作用、治疗精神病和杀虫抑菌等作用以及其杀虫、抑菌、致痫等作用机制,展望了其发展趋势和应用前景.     

药用植物中四环三萜皂苷合成生物学研究进展

萜类化合物是药用植物中结构和生物活性多样化的一类大分子化合物,是自然界中广泛存在的次级代谢产物,主要应用于食品、保健品、医药等领域。生物信息学和分子生物学研究的不断深入,极大促进了药用植物四环三萜皂苷的生物合成途径解析与关键功能基因的挖掘鉴定。本文对常见药用植物四环三萜皂苷的生物合成学研究现状展开论述,重点介绍以药用植物四环三萜皂苷为代表的几类化合物的分子合成机制和生物合成研究进展,为人工构建、优化微生物“细胞工厂”,高效合成稀有、高附加值的四环三萜类化合物,推动药用植物资源可持续利用等提供参考。     

基于转录组数据对糙苏三萜皂苷合成途径的研究

糙苏为我国民间常用的传统草药,具有消肿、续筋接骨、祛风化痰、通络止痉、安胎等作用,三萜皂苷类化合物为其主要的生物活性成分.对糙苏组织转录组测序,挖掘其三萜皂苷生物合成途径相关基因,探究糙苏三萜皂苷化合物生物合成的分子基础.利用Trinity软件对测序结果获得的Unigenes数据进行过滤组装,并结合KEGG、GO数据库对Unigenes进行注释,预测糙苏三萜皂苷代谢的生物合成途径关键基因.结果获得了参与萜类化合物骨架生物合成的Unigenes数量为73条,39条Unigenes编码19个与萜类生物合成的关键酶,且有23条基因参与萜类物质骨架代谢途径(途径编号为ko00900),19条基因参与了倍半萜类物质代谢途径(途径编号为ko00909),涉及萜类物质骨架合成代谢途径相关酶共有15种,以及三萜代谢途径相关酶有10种.本研究获取了糙苏的三萜皂苷合成相关候选基因核苷酸和氨基酸序列,为糙苏三萜皂苷物质体外表达和生物合成奠定理论基础.     

四种生物覆盖植物的自然分解及养分释放动态

利用网袋法对白栎、马桑、白茅和蕨等4种生物覆盖植物的自然分解和养分释放动态进行了研究。结果表明：植物种类不同,其水分、氮、磷、钾含量存在差异,其中以白栎叶中氮、磷含量和白茅钾含量最高,分别达28.50、1.77和15.91 g/kg,而马桑嫩枝中含水量较高为82.70%。在2年的自然分解过程中,白栎、白茅、蕨和马桑的分解速率分别为96.61%、100%、96.49%和100%,以生长季节月分解速率较高,非生长季节时较低。覆盖植物前期分解较快,后期分解较慢。半衰期以白栎最小为50 d,马桑最大为300 d。白栎残留物中的含氮量较高,白茅残留物中含磷量较高,分别为17.22和0.83 g/kg,蕨残留物中的含钾量较高为4.71 g/kg,马桑的氮、磷、钾含量稳定性较高。     

Fermi/GBM单峰长暴的FWHM相关关系研究

本文选取26个已知红移的单峰Fermi/GBM长暴,采用KRL模型拟合光变曲线计算出半峰全宽FWHM,探讨了FWHM相关的关系。发现伽马暴的FWHM与峰值能量Ep相关性不强,未明显发现之前利用BeppoSAX、Swift暴得到的结果。这意味着FWHM与峰值能量Ep的相关关系可能受探测仪器选择效应的影响。同时利用这些Fermi/GBM伽马暴样本,通过重新对FWHM与持续时间T做相关分析,结果发现,FWHM与T90、T50都存在较强的幂律关系,其相关系数分别为R=0.85、R=0.72。这表明FWHM与T90、T50存在这密切关系,同利用BeppoSAX、Swift暴得到的结果一致。     

马桑提取物的抑菌作用和抑菌机理的初步研究

马桑（Coriariasinica Maxim）为双子叶植物纲木兰亚纲马桑科（Coriariaceae）马桑属（Coriaria Linn）植物，多年生落叶有毒小乔木或灌木，野生．生长于山坡或山沟中．产于温带，广泛分布于河南、四川、贵州、云南等地．据研究报道，马桑全株有毒，其提取物对多种咀嚼式害虫具有明显的拒食和胃毒作用，马桑叶粉的30倍水浸液对马铃薯晚疫病孢子发芽有抑制作用；30倍水煮液对棉苗轮纹斑病菌和樱顶病菌袍子发芽也有抑制作用．     

河南马桑中氨基酸和微量元素的测定

采用氨基酸自动分析仪对河南马桑中的氨基酸进行分析,用原子吸收的方法对植物中所含的微量元素进行测定.测定出马桑中18种氨基酸的含量及微量元素K、Ca、Fe、Mn、Cu、Zn的含量.马桑中含量最高的氨基酸是谷氨酸,占氨基酸总量的12.09%.微量元素中钙的含量最高,达45 mg/g.     

锁阳三萜咀嚼片的工艺研究

以富含3种三萜成分的锁阳乙醇提取物为原料,研制锁阳三萜咀嚼片.探讨锁阳三萜咀嚼片的加工工艺和相关技术,确定出锁阳三萜咀嚼片的配方(质量分数)为:30％锁阳三萜、15％奶粉、17％糖粉、27％玉米淀粉、10％微晶纤维素、0.22％甘草酸、0.78％柠檬酸等,制得口感好、表面光滑美观、色泽均匀、硬度好、咀嚼性优良的新型锁阳三萜咀嚼片.另外,建立了超高效液相-四极杆质谱联用方法测定提取物及咀嚼片中3种三萜的含量.     

De novo pyrimidine biosynthesis is required for virulence of Toxoplasma gondii

Toxoplasma gondii is a ubiquitous protozoan parasite that is responsible for severe congenital birth defects and fatal toxoplasmic encephalitis in immunocompromized people. Fundamental aspects of obligate intracellular replication and pathogenesis are only now beginning to emerge for protozoan parasites. T. gondii has a fragmented pathway for salvaging pyrimidine nucleobases derived from the parasite or host cell, and this limited pyrimidine salvage capacity is funnelled exclusively through uracil phosphoribosyltransferase. Disrupting the function of this enzyme does not affect the growth of T. gondii tachyzoites, which suggests that the de novo pyrimidine biosynthesis pathway may be necessary for growth. We have examined the virulence of T. gondii mutants that lack carbamoyl phosphate synthetase II (uracil auxotrophs) to determine whether de novo pyrimidine biosynthesis is required in vivo. Here we show that T. gondii uracil auxotrophs are completely avirulent not only in immune-competent BALB/c mice but also in mice that lack interferon-gamma. A single injection of the uracil auxotroph into BALB/c mice induces long-term protective immunity to toxoplasmosis. Our findings indicate the significance of the de novo pyrimidine biosynthesis pathway for the virulence of parasitic protozoa, and suggest routes for developing vaccines and chemotherapy.     

毛冬青叶三萜酸提取纯化研究

以毛冬青叶为原料,齐墩果酸为标准品,用香草醛比色法测毛冬青叶三萜酸的含量,通过单因素试验和正交试验相结合的方法考察了提取次数、料液比、乙醇浓度、提取时间对毛冬青叶三萜酸提取的影响。结果表明,提取的最佳工艺条件为料液比1∶16,乙醇浓度70%,提取时间90min,提取2次,在此条件下所得三萜酸含量为6.18%。此方法简单易行,为进一步开发利用毛冬青叶提供科学依据。     

Roles of a sustained activation of NCED3 and the synergistic regulation of ABA biosynthesis and catabolism in ABA signal production in Arabidopsis

ABA, acting as a stress signal, plays crucial roles in plant resistance to water stress. Because ABA signal production is based on ABA biosynthesis, the regulation of NCED, a key enzyme in the ABA biosynthesis pathway, is normally thought of as the sole factor controlling ABA signal production. Here we demonstrate that ABA catabolism in combination with a synergistic regulation of ABA biosynthesis plays a crucial role in governing ABA signal production. Water stress induced a significant accumulation of ABA, which exhibited different patterns in detached and attached leaves. ABA catabolism followed a temporal trend of exponential decay for both basic and stress ABA, and there was little difference in the catabolic half-lives of basic ABA and stress ABA. Thus, the absolute rate of ABA catabolism, i.e. the amount of ABA catabolized per unit time, increases with increased ABA accumulation. From the dynamic processes of ABA biosynthesis and catabolism, it can be inferred that stress ABA accumulation may be governed by a synergistic regulation of all the steps in the ABA biosynthesis pathway. Moreover, to maintain an elevated level of stress ABA sustained activation of NCED3 should be required. This inference was supported by further findings that the genes encoding major enzymes in the ABA biosynthesis pathway, e.g. NCED3, AAO3 and ABA3 were all activated by water stress, and with ABA accumulation progressing, the expressions of NCED3, AAO3 and ABA3 remained activated. Data on ABA catabolism and gene expression jointly indicate that ABA signal production is controlled by a sustained activation of NCED3 and the synergistic regulation of ABA biosynthesis and catabolism.     

Lignin biosynthesis and its molecular regulation

Lignin biosynthesis has become increasingly highlighted because it plays an important role in the growth and development of plant, in the systematic evolution of plant and in the human life. Due to the progress in the field of lignin studies in recent years, the lignin biosynthesis pathway has been 修订日期:. Here we discuss some genetic engineering approaches on lignin biosynthesis, and conceive strategy to regulate lignin biosynthesis in order to use lignin resource more efficiently in agricultural and industrial productions.     

金属离子对过氧化氢酶的生物合成的影响

过氧化氢酶（ＥＣ１１１１６）是铁卟啉酶,其活性中心是血红素,能分解Ｈ２Ｏ２成Ｈ２Ｏ和Ｏ２．其最广泛的用途是作为抗微生物剂而用于食品加工中;其最常用的来源为动物和黑曲霉．在以前的有关产酶条件优化的文献中,过氧化氢酶基本上都是作为葡萄糖氧化酶的附...     

薄壳山核桃原花青素合成关键酶基因的克隆与表达分析

【目的】原花青素是广泛存在于植物中一种重要的次级代谢产物,其强抗氧化性增强了植物自身的抗逆能力,同时赋予植物清除人体自由基的保健作用。研究薄壳山核桃种仁中原花青素生物合成途径,对改良薄壳山核桃的种质与品质均具有重要意义。【方法】以薄壳山核桃‘波尼’115和135 d种仁混合样品为材料,通过RT-PCR扩增、克隆和测序后,获得了薄壳山核桃原花青素合成关键酶相关基因CiDFR、CiLAR和CiANR的基因序列,并进行了生物信息学分析和表达水平分析。【结果】CiDFR基因长1 148 bp,包含1 020 bp的开放阅读框(ORF),编码339个氨基酸;CiLAR基因长1 390 bp,包含1 050 bp的ORF,编码349个氨基酸;CiANR基因长度为1 104 bp,包含1 014 bp ORF,编码337个氨基酸。荧光定量PCR检测结果显示,CiDFR和CiANR基因在种仁发育中期(95～105 d)表达量较高,之后快速下降至较低值;CiLAR基因在95 d表达量较高,之后快速降低,在155 d样品中表达量又升至最高点。【结论】CiDFR和CiANR基因表达量与酚类代谢物含量变化相关...     

环己六醇在茶树儿茶素生物合成中的作用(英文)

术文利用放射性同位素生物标记法,对环己六醇在茶树儿茶素生物合成中的作用作了研究.提出了环已六醇至少通过两条路线参与儿茶素的生物合成;1.经由戊糖到PPP 途径;2.经由己糖到EMP 途径.然后,环已六醇逐渐转变形成莽草酸途径的先质,最后,通过莽草酸途径参入到儿茶素中.m—环已六醇直接形成茶多酚的可能性不大.     

枇杷花中三萜类化合物的提取工艺研究

采用索氏提取和超声波提取对枇杷花中的三萜类化合物的提取工艺进行研究。应用紫外可见分光光度法对枇杷花样品的测定波长、显色剂用量、显色时间和显色温度等进行选择,确定最佳的提取工艺条件为：测定波长504nm,显色时间10—90min,显色剂用量0.60—1.00mL,5%香草醛-冰醋酸溶液用量0.70mL,显色温度30—80℃。结果表明,采用索氏提取对枇杷花中的三萜类化合物的提取更彻底,晚钟枇杷花中三萜类化合物含量比早钟要高。     

花青素合成调节基因VlmybA2遗传转化水稻的研究

VlmybA2基因是从巨峰葡萄中分离出来的一个花青素合成调节基因。该基因通过编码myb相关转录因子,调节花青素合成途径中结构基因的表达。本研究采用农杆菌介导法将花青素合成调节基因VlmybA2转化水稻,研究该基因在水稻花青素合成途径中的作用。结果表明,转VlmybA2基因水稻根部出现红褐色条纹,而其他组织器官无明显表型差异。