苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)感染菜青虫(Pieris rapae)幼虫的组织病理研究

本文从大体观察、显微观察和超微结构等方面对感染苏云金芽孢杆菌后的菜青虫幼虫进行了组织病理学研究。菜青虫在摄入苏云金芽孢杆菌后立即停食,30分钟后就在中肠上皮细胞中发现线粒体的脊内空间扩大、粗面内质网局部膨胀,微绒毛开始膨大并部分溶解。感染后1—2小时可见中肠上皮细胞靠近微绒毛一方出现较大的空泡,线粒体的空间进一步扩大,内质网的网膜慢慢分离。到第4小时,中肠上皮细胞的病变加剧,显微镜下看到细胞开始解体,电镜观察到线粒体开始破裂,内质网膜糊断裂。以后细胞迅速解体,到第8小时仅存基底膜,但其它组织基本完整。第10小时以后,观察到基底膜开始破裂,细菌进人血腔.脂肪体肌肉等组织均遭破坏,此时幼虫中部渐渐变黑,下痢并开始死亡。     

应用免疫酶标电镜技术对水仙花时病毒的检测

免疫酶标电镜技术是把免疫酶标技术与电镜技术结合起来，一种灵敏度较高的检测植物体内病毒的有效方法，本实验就是运用该方法对水仙花叶病毒进行检测．     

利用HPLC测定二硫苏糖醇(DTT)对苏云金芽孢杆菌伴胞晶体降解的影响

利用 HPLC测定二硫苏糖醇 (DTT)对苏云金芽孢杆菌伴胞晶体降解的影响。结果表明 ,放置时间对DTT溶液的变化影响显著 ,随着 DTT放置时间的延长 ,2个峰的保留时间都随之延长。利用不同浓度的 DTT降解 Bacillusthuringiensis,伴胞晶体时 ,其检测结果都出现保留时间小于 1 5.0 0 min的 4个主峰 ,与 DTT单独添加在 Na2 CO3 - HCl缓冲液 1 h后检测的保留时间大于 2 5.0 0 min的 2个峰明显不同 ,也比伴胞晶体单独添加到 Na2 CO3 - HCl缓冲液 1 h后检测的结果多了 1个新峰 ,并且峰高显著增加 ,这表明 DTT对晶体起到降解作用。峰 1和峰 4的保留时间与 Na2 CO3 - HCl缓冲液所测到的色谱特征峰相近 ,峰 2和峰 3为 Na2 CO3 -HCl缓冲液不具有的。在用不同浓度的 DTT在 37℃下降解 B.t.伴胞晶体 1 h后 ,立即用 HPLC进行检测的结果表明峰 2高于峰 3,峰 2的高度与 DTT的浓度成正相关 ;放置 2 4 h后所有处理中峰 2的高度都下降 ,峰 3的高度都高于峰 2 ,峰 2 (Y1 )和峰 3(Y2 )的峰高都与 DTT的浓度 (x)成指数增长 ,Y1 =1 9.1 33e0 .0 1 4 8x (R2 =0 .970 8)和 Y2 =2 9.0 62 e0 .0 1 68x(R2 =0 .9589) ;上述结论表明在 DTT的作用下 ,伴胞晶体不断地被降解 ,使得峰3不断增高 ,DTT的消耗 ,使得峰 2下降 ;随着 DTT浓度的增大 ,     

酶联免疫吸附测定法检测苏云金杆菌187菌株晶体蛋白的研究

本文采用液体双相法分离苏云金杆菌以色变种187菌株产生的伴孢晶体,然后碱解提取具体物活性的晶体毒素蛋白作为抗原,以ELISA间接法测定,最低检测阀值为1ng/ml。最敏感的检测区间为10~(-6)—10~(-9)g/ml。此区间内,抗原浓度的负对数值与ELISA的吸光值呈直线关系,其直线回归方程为(?)=6.457-0.3x。     

苏云金杆菌187菌株对致乏库蚊(Culex pipiens fatigans)幼虫中肠细胞影响的超微结构观察

本文采用电于显微镜技术,对感染苏云金杆菌187,菌株的致乏库蚊幼虫进行了细胞病理学观察。发现在感染二小时以内,线粒体嵴内空间加大或内嵴模糊消失,粗面内质网网膜出现空泡并逐步扩大。微绒毛和细胞膜溶解,细胞解体。存感染2小时以后,中肠上皮细胞核内染色质向中央集中而远离核膜,基膜内褶明显萎缩和消失,褶内空间显著变小。     

双亲灭活原生质体融合技术在苏云金杆菌菌种选育上的应用(Ⅱ)——融合产物的鉴定

在双亲灭活原生质体融合选育苏云金杆菌新菌株的过程中,最终筛选出一株毒力效价较双亲分别提高４１％和１１７％的新菌株３＃。该菌株的酯酶同工酶谱及晶体蛋白多肽均与双亲有显著不同。     

一株苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)的分离与鉴定

利用醋酸盐对苏云金芽孢杆菌芽孢萌发的选择性抑制特性，采用选择性培养基从土壤中分离苏云金芽孢杆菌，对分离菌株的个体形态，生理生化特点进行了分类研究，确定该菌株即为苏云金杆菌，采用改进的培养基培养伴胞晶体，证明该培养基可在48h内产生大量的伴胞晶体。     

187菌株感染致乏库蚊(Culex pipiens fatigans)幼虫的组织病理学研究

本文报导致乏库蚊感染187菌株后所发生的组织病理变化。致乏库蚊幼虫取食187菌后,在显微镜下可以看到显著的病理变化。病变主要发生在中肠的前区和后区。但前区的病变不同于后区。在前区,细胞膨胀,顶端的细胞质高度液化,但食膜仍然完好,上皮细胞仍保持单层结构。在后区,中肠损伤更为严重,细胞溶解和脱落,上皮单层结构瓦解,围食膜破裂,其内含物扩散到肠腔。     

苏云金杆菌SD－5菌株晶体蛋白的研究

研究了ＳＤ－５菌株伴孢晶体结构多肽组成和抗原特性，分析了氨基酸组成并进行了糖蛋白的检测．结果表明：ＳＤ－５晶体蛋白主含Ｍｗ１３５０００、Ｍｗ６５０００两条多肽，另见有－Ｍｗ２４００００的弱带，不同方法处理的样品，电泳图谱有一定差异；ＳＤ－５晶体蛋白抗血清与其晶体抗原形成两条沉淀线，而与７２１６、ＨＤ－１形成一条沉淀线；ＳＤ－５晶体蛋白由１８种氨基酸组成，不含糖蛋白成分．     

杆菌对松干蚧的致病机理

<正>用杆菌液喷洒松干蚧后期卵囊后,经12～72小时孵化的,杆菌可侵入消化道,并形成孢子。这些松干蚧孵化后经过一段期间,潜伏在消化道的杆菌孢子变为营养体,分泌毒素先溶解细胞膜,再溶解细胞核膜。破坏肠道、侵入体腔的杆菌,传播到身体各处。破坏组织顺序为:结缔组织、脂肪体、肌肉、神经等。由于在肛门附近也先发现杆菌,并因消化道经肛门至外界并无阻隔,据信杆菌在其胚胎末期是经由肛门侵入消化道的,并有一明显潜伏期。用杆菌液喷洒已孵化5小时的松干蚧若虫(爬行若虫)虫体,在湿度很高甚至积水情况下,杆菌可侵入气管系统,并分泌毒素溶化部分气管壁,进入体腔。较快促使其致病。据信由于湿度大或积水使其气门开放而让杆菌有机会侵入气管系统。