黄曲霉毒素高污染区肝细胞癌P53基因高频率定点突变

用聚合酶链反应及限制性片段长度多态性（ＰＣＲ＿ＲＦＬＰ）分析技术，对广西黄曲霉毒素高污染２例肝细胞癌（ＨＣＣ）进行分析，检查Ｐ５３基因第７外显子的２４９密码子的突变频率。结果发现３６／５２例ＨＣＣ中２４８密码子有集中的点突变，频率为６９．２％。Ｐ５３基因突变热点与乙型肝炎病毒感染无关。提示黄曲霉毒素Ｂ１是突变热点的主要原因。     

原发性肝癌P53基因第249密码子突变的研究

用聚合酶链反应－限制性片段长度多态性（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）技术对７例原发性肝细胞癌（ＰＨＣ）进行Ｐ＾５３基因第２４９密码子突变的检测。结果：７例肝细胞癌中３例有Ｐ＾５３基因第２４９密码子突变，突变率达４２．９％。     

重组人钙调素的表达及其McAb的制备与精子CaM定位

用基因重组技术构建人钙调素基因Ⅲ（ｈＣａＭⅢｃＤＮＡ）表达载体ｐＢＶ／ｈＣａＭⅢ,并在大肠杆菌ＤＨ５α中经热诱导获得可溶性ＣａＭ蛋白的高效表达．将纯化的重组ｈＣａＭ与异型双功能剂ＳＰＤＰ及鼠血清白蛋白（ＭＳＡ）交联,免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠,用常规细胞融合技术制备单克隆抗体（ＭｃＡｂ）,得到３株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞．间接ＥＬＩＳＡ和斑点免疫结果证实,三种单克隆抗体均与自制的ｒｈＣａＭ和ＣａＭ标准品起特异反应．用免疫组化法对精子中ＣａＭ定位,发现ＣａＭ主要分布于精子头颈部,不育组ＣａＭ＋精子率（（４５．０±７．５）％）显著低于生育组（（６８．５±１０．５）％）．     

Ⅱ,Ⅲ期乳腺癌综合疗法对比分析（附69例报告）

对Ⅱ、Ⅲ期乳腺癌６９例综合方法疗效对比分析。全组５年生存率５３６％，Ⅱ期７８％，Ⅲ期４７２％，Ⅱ期各组（Ｓ，Ｓ＋Ｃ，Ｓ＋Ｒ，Ｓ＋Ｒ＋Ｃ）无显著差别；Ⅲ期各组Ｓ１４２％，Ｓ＋Ｃ３３％，Ｓ＋Ｒ４７３％，Ｓ＋Ｒ＋Ｃ６０％（Ｐ＜００５）说明综合治疗方法对生存率有影响，增加放疗对Ⅲ期尤为显著；加放组淋巴区胸壁３年复发率与未加放组比为１∶２（９／５０：７／１９），其复发平均时间为３１８∶１３５（月），说明加放对局部控制效果的肯定。增加化疗（ＣＭＦ／ＣＡＦ／ＣＥＦ）与未加化疗比生存率有改变，前者为５９５％（２２／３７），后者为３３３％（３／９），而除Ｓ组外，增加化疗使Ｓ＋Ｒ＋Ｃ达６０％，Ｓ＋Ｒ４７３％组无显著性差别（０２５＞Ｐ＞０１０）。Ｓ＋（Ｓ＋Ｃ）与（Ｓ＋Ｒ）＋（Ｓ＋Ｒ＋Ｃ）组５年生存率，前者为３６８％（７／１９），后者为６０％（３０／５０）。     

肿瘤相关基因对大肠肿瘤临床诊断及预后应用的研究

目的 探讨Ｒａｓ,Ｐ５３基因对大肠肿瘤的早期诊断及预后的临床应用价值。方法 用聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）ＥＢ染色技术对２５例大肠肿瘤原发灶组织进行了Ｋｉ－,Ｎ－ｒａｓ第１处显子和Ｐ５３基因５～８外显子的点突变进行检测。息肉性腺瘤组织中１／２（５０％）发生了Ｋｉ－ｒａｓ点突变。在大肠癌组织中,存在Ｎ－ｒａｓ点突变、Ｋｉ－ｒａｓ点突变、Ｐ５３基因５～８外显子突变,大肠肿瘤组织存在     

肝细胞性肝癌P53基因多态性定点突变

对Ｐ５３阳性的８例肝细胞性肝癌（ＨＣＣ）广西科学，１９９５，２（１）：５５～５７）中的７例的Ｐ５３基因进行ＤＮＡ单键构象多态性分析（ＳＳＣＰ）和ＰＣＲ扩增物直接测序。结果，７例均在Ｐ５３第７外显子第２４９编码区的３号位发现异常。１例在２４９编码区的第３碱基微小丧失引起乱码突变；另６例在此位点同时出现突变的Ｔ和Ｃ带，成为的多态性突变形式。外显子５、６、８和９没有异常。估计除黄曲霉毒素Ｂ１外可能有别的致癌因素协同作用造成此种多态性。认为南宁地区是继中国江苏启东和莫桑比克后的第３个ＨＣＣＰ５３基因２４９编码区有集中突变热点的地区。     

猪脾来源的免疫抑制组分制备及其性质的初步研究

以猪脾为原料,经提取、等电点沉淀、加热变性除杂蛋白及超滤等步骤,得到了具有免疫抑制作用的组分,其中,相对分子质量〈５ｋＤ（ＳＩＳＥ－ｐ１）和５￣１０ｋＤ（ＳＩＳＥ－ｐ２）的组分具有较强的免疫抑制活性,体外试验在６．８μｇ／ｍＬ的浓度下对植物凝集素（ＰＨＡ）诱导的人处周血淋巴细胞转化的抑制率分别为５９．８％和６１．７％。用ＤＥＡＥ－纤维素离子交换层析对ＳＩＳＥ－ｐ１进行分离,生物活性研究表明用含０．     

P53与结直肠癌的表现观察

用套式聚合酶链式反应—单链构象多态分析法对３０例结肠癌的ｐ５３基因突变进行了观察，检测了第５～８四个外显子，发现２１例有ｐ５３基因突变（７０％）。３０例肠癌按临床Ｄｕｋｅｓ分期：Ａ期２例皆有突变，Ｂ期１１例有突变者６例（５５％），Ｃ期８例有突变者５例（６３％），Ｄ期９例有突变者８例（８９％），按病理分型则１３例有１１例突变（８５％），管状腺癌６例有ｐ５３基因突变４例（６７％），低分化腺癌５例中检出３例有突变（６０％），在６例粘液腺癌中测出３例有突变（５０％）。从临床分期看愈晚突变率愈高。而病理分型恶性程度高者突变率反低，这是因为缺失率未计数之故。最后讨论了突变率与预后的关系     

艾蒿和野艾蒿精油的化学成分

应用ＧＣ／ＭＳ／ＤＳ鉴定了艾蒿和野艾蒿精油化学成分。鉴定出艾蒿３７个化合物,主要成分为桉叶油素（３９．５７％）、樟脑（５．５２％）、龙脑（８．４６％）、胡椒脑（７．２９％）、α－毕澄茄烯等。野艾蒿精油鉴定出３３个化合物,主要成分为桉叶油素（２０．９６％）、金合欢烯（１４．０４％）、樟脑（７．３５％）、２,６,６－三甲基,２,４－环庚二烯酮－１（１０．６１％）、香草醛（７．６６％）。这两种蒿属植物精油都含有较多的桉叶油素、樟脑和龙脑。     

α－淀粉酶水解液发酵生产麦角隐亭的研究

用５％麦粉的α－淀粉酶水解液培养麦角菌ＡＴＣＣ２００１９，结果其发酵液能产生麦角隐亭（５０．１６±２．４０）μｇ／ｍＬ，与３０％蔗糖的发酵培养基的产碱量（２０．７４±３．５３）μｇ／ｍＬ相比，两者有差异（ｐ＜０．０５）．在１０％蔗糖的培养基中，发酵第４天后补加５％麦粉的α－淀粉酶水解液，麦角隐亭的产量为（４７．１２±６．３４）μｇ／ｍＬ，也高于碳源为３０％蔗糖的产碱量（１９．８９±２．４０）μｇ／ｍＬ，两者差异显著，ｐ＜０．０１．而两种方法的菌丝体生长量均相差无几，ｐ＞０．０５．     

头颈部鳞癌中p53-mdm2基因异常的研究

目的:检测头颈部鳞癌患者p53基因突变、mdm2基因扩增的状况,了解其与头颈部鳞癌患者的性别、鳞癌分级、淋巴结转移等的相关性及两异常基因的相关性。方法:收集50例行手术切除的头颈部鳞癌患者的新鲜肿瘤组织及其相应的癌旁正常组织,提取标本DNA;用PCR-SS-CP-银染法检测p53基因第5~8外显子的突变状况;用dPCR法检测mdm2基因扩增情况;采用SPSS 10.0统计软件包行2检验分析实验结果。结果:在50例头颈部鳞癌患者标本中,检测出17例存在p53基因突变,突变率为34%,所有的癌旁正常组织未发现p53基因突变;在50例鳞癌标本中检测出6例标本存在mdm2基因扩增,扩增率为12%,其中有一例同时存在p53基因突变;p53基因突变、mdm2基因扩增与患者的鳞癌分级、淋巴结转移、性别等相关性分析结果均无统计学意义(P>0.05)。结论:p53基因突变与mdm2基因扩增在头颈部鳞癌中较常见,可能是头颈部鳞癌发生发展的主要分子机制。     

High frequency of p53 intronic point mutations in laryngeal squamous cell carcinoma

Intronic point mutations are rare and totally unknown for human laryngeal squamous cell carcinoma (LSCC). To explore the relationship of p53 gene intronic mutation to the development of human LSCC, DNA was extracted from both tumor tissues and matched normal tissues of 55 patients with LSCC in northeast of China. Polymerase chain reaction amplification-single strand conformational polymorphism (PCR-SSCP) combined with silver staining and DNA direct sequencing were used to detect mutations in exons 7～8 (p53E7 and p53E8) and introns 7～8 (p53I7 and p53I8) of p53 gene. The p53E7 mutation was detected in 17 out of 55 patients, and the p53I7 mutation in 21 patients. No mutation was found at p53E8 or p53I8 site. The difference between tumor group and paired normal group on the rates of both p53E7 and p53I7 mutations was statistically significant. The rate of p53I7 mutations in tumor tissue was higher than that of normal tissue, and so was that of p53E7. Sequence analysis revealed that most p53I7 mutations were at the nucleotides in the branch point sequence or the polypyrimidine tract in the 3′-splice acceptor site of the intron 7. The high incidence of p53 gene intronic mutation in LSCC indicates that genetic changes within the noncoding region of the p53 gene may serve as an alternative mechanism of activating the pathogenesis of human laryngeal squamous cell carcinoma. Mutations in the noncoding region of this gene should be further studied.     

32例肿瘤组织中p53基因突变的PCR-SSCP、银染色检测

目的　检测肿瘤组织中 p5 3基因的突变率 ,探索其在肿瘤发展过程中的作用 .建立PCR SSCP检测 p5 3突变的常规方法 .方法　检测 32例癌组织和癌旁组织 .用盐沉淀制备样品DNA ,以p5 3基因exon7设计引物 ,用PCR SSCP结合银染色显示结果 .结果　 32例肿瘤标本检出阳性 9例 ,阳性率 2 8.1% .4例癌组织和癌旁组织均为阳性 .其中 2 2例胃癌 ,检出 4例阳性 (占 18.2 % ) ,双阳性者 2例 .结论　p5 3基因突变在肿瘤中具有普遍性 ,癌组织和癌旁组织双阳性者 ,与肿瘤的扩散有关 .该检测方法简便易行 ,有助于对 p5 3基因突变的扫描检测 .     

应用PCR－SSCP银染技术检测消化系统肿瘤的P53基因突变

应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染技术，初步研究了肝细胞癌、胃癌和大肠癌中Ｐ５３基因的第６和第７外显子的分子结构改变。对来自癌组织ＤＮＡ和正常组织ＤＮＡ的ＰＣＲ－ＳＳＣＰ电泳带迁移作对比分析，发现３０例肝癌病人中，６例肝癌样品电泳带迁移异常；２６例胃癌病人中，４例胃癌样品电泳带迁移异常；２９例大肠癌病人中，６例大肠癌样品电泳带迁移异常。依据ＤＮＡ单链构象与分子电泳迁移的关系，研究结果表明：该三组病人中，Ｐ５３基因第６、７外显子的突变率分别为２０．０％，１５．４％和２５．０％。同时，也间接提示了Ｐ５３基因突变可能是肝细胞癌、胃癌和大肠癌中一种较多见的分子结构改变。     

慢性粒细胞性白血病不同病期bcr-abl基因 P53基因突变研究

探讨 bcr- abl融合基因、P53 基因对 CML不同病期演变的作用 .采取 CML2 6例不同分期共30份标本 ,应用逆转录—聚合酶链反应 (RT- PCR)技术检测 bcr- abl融合基因 ,应用多聚酶变 .结果显示 2 4例 CML慢性期中 2 2例 bcr- abl基因 ( ) ,6例急变期中 5例 bcr- abl基因 ( ) ;CML慢性期未发现 P53 基因突变 (0 / 2 4 ) ,急变期发现 2例突变 (2 / 6 ) .2例 P53 基因突变中 ,1例 bcr- abl基因( ) ,1例 bcr- abl基因 (- ) .由此可得 P53 基因突变在 CML慢性期少见 ;P53 基因突变对部分 CML急变有一定作用     

子宫颈癌组织p16基因突变及其蛋白表达研究

目的研究子宫颈癌患者p16蛋白表达和p16基因缺失突变及点突变情况.方法利用免疫组织化学方法(SP法)、聚合酶链反应(PCR)和聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)分析技术,分别检测正常子宫颈组织30例、子宫颈癌前病变组织10例及原发性子宫颈癌组织28例,观察其p16蛋白表达和p16基因缺失突变及点突变状况.结果 1)在原发性子宫颈癌组织中为67.85%(19/28),明显低于正常子宫颈组织和子宫颈癌前病变组织(P<0.05);2)28例原发性子宫颈癌组织中有11例发生p16基因缺失突变,2例发生p16基因点突变,突变率为46.42%,正常子宫颈组织和子宫颈癌前病变组织未发现p16基因缺失突变和点突变.结论 1)p16蛋白缺乏与子宫颈细胞增殖失控及分化不良紧密相关.2)原发性子宫颈癌存在p16基因点突变,以低分化癌多见,但不是较频繁的事件;原发性子宫颈癌存在p16基因缺失突变,以低分化癌多见,是较频繁的事件.3)未发现p16蛋白表达与p16基因突变有相关性.     

SCN1A基因4号外显子突变筛选

目的：探讨癫痫人群及正常人群SCN1A基因突变情况．方法：共采集癫痫病人血液181份、癫痫病人脑组织38份,正常人血液120份．提取基因组DNA,针对SCN1A基因4号外显子设计1对引物,进行聚合酶链反应（PCR）扩增,琼脂糖凝胶电泳,选取适合条件的PCR产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,进行单链构象多态性分析,对个别PCR产物进行双向测序．结果：所有样本进行SCN1A的4号外显子筛选时,均未发现异常带出现．选取2例癫痫病人血液的PCR产物测序结果与基因组序列相比对,也未发现碱基改变．结论：癫痫是一种复杂综合征,研究的339癫痫患者中未发现SCN1A基因4号外显子突变．