癌症与DNA甲基化异常

DNA甲基化是哺乳动物基因组最常见的修饰方式,它存在于生物体正常的生理过程,DNA异常甲基化和疾病的发生发展有关.该文综述了癌症中存在着的DNA的异常甲基化现象,即抑癌基因的高度甲基化,低表达,及癌基因的低甲基化,高表达,检测这些基因的甲基化状态可以为癌症的早期诊断及治疗提供参考依据.     

nm23-H1基因对乳腺癌细胞MCF-7S增殖及移动特性的影响

目的：探讨nm23—H1基因转染乳腺癌细胞后对其增殖和转移能力的影响。方法：用人nm23—H1基因与真核表达质粒pcDNA3．1(—)构建成重组表达质粒pcDNA3．1—NMHl，转染人乳腺癌细胞MCF—7S，经G418筛选4周后，筛选出稳定表达nm23—H1的细胞株，绘制其生长曲线，检测其增殖、移动能力，用SPSS统计软件处理实验数据，分析nm23—H1基因对乳腺癌细胞的作用。结果：与对照组相比，转染nm23—H1基因的MCF—7S细胞的对数生长期延长，细胞增殖速度减慢，移动距离缩短，克隆形成率降低。结论：nm23—H1基因在乳腺癌细胞的体外实验中有抑制癌细胞生长、增殖、转移能力的作用。     

邻苯二甲酸二丁酯（DBP）诱导肿瘤细胞凋亡机制的初步研究

邻苯二甲酸二丁酯（DBP）在体外对肺巨细胞癌细胞（PG）和人早幼粒白血病细胞（HL-60）的增殖有明显的抑制作用;经DBP处理过的PG细胞,DNA断裂,在琼脂糖凝胶电泳上呈现出特异的断裂带;流式细胞术分析表明,DBP能提高PG细胞的凋亡率,并且随作用时间的延长而增大;斑点杂交的结构显示,被DBP处理过的HL-60细胞中某些原癌基因、抑癌基因和肿瘤抑制基因的mRNA表达水平都有所下降,这提示DBP对HL-60细胞增殖抑制作用的机制之一可能是通过抑制这些癌基因和突变的抑癌基因的表达来实现的。     

癌基因和抑癌基因在肺癌中的研究进展

肿瘤发生是一个多步骤多阶段的过程。外源性致癌物诱导机体某些易感细胞的遗传物质，使之发生变化，进而获得一种具有选择生长优势和克隆扩增的异常增殖细胞即肿瘤细胞。其关键因素在于细胞染色体上原癌基因激活（和）肿瘤抑制基因的失活。本文就近年来与肺癌发生、发展相关的癌基因和抑癌基因研究现状予以综述。1癌基因癌基因亦称显性癌基因，普遍存在于各种生物细胞中。在正常情况下，它的表达受到严格的程序控制，当细胞受到外界致癌因素作用后，原来处于静止状态的癌基因即被激活而发生某种基因突变或其它改变，使基因表达失去控制，使…     

丙型肝炎病毒感染与ras,p53基因表达的相关性

为了探讨丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染与肝细胞癌（ＨＣＣ）的关系以及ＨＣＶ可能的致癌机理，采用免疫组织化学方法及巢式ＰＣＲ法检测了１３６例肝细胞癌等肝病组织中的ＨＣＶＮＳ３抗原、ＨＣＶＲＮＡ及Ｐ２１、Ｐ５３蛋白。结果表明，肝细胞癌及癌周肝组织中有ＨＣＶＮＳ３抗原及ＨＣＶＲＮＡ检出，支持ＨＣＶ与ＨＣＣ的关联。Ｐ２１在ＨＣＣ、肝炎后肝硬化、慢性肝炎、体质性黄疸各组中的检出率随病变的加重而逐渐增高，在ＨＣＣ的癌及癌周组织中Ｐ２１呈致密的过量表达，提示ｒａｓ癌基因的激活在ＨＣＣ的发生过程中起一定作用。Ｐ５３的阳性率较Ｐ２１低，但ｐ５３的突变似乎也是肝癌发生的协同因素之一。组织中Ｐ２１的过量表达与ＨＣＶＮＳ３抗原阳性检出呈正相关，ＨＣＶＮＳ３抗原与Ｐ２１的这种关联提示，ＨＣＶ感染作为ＨＣＣ的密切相关因素之一，可能通过激活某些癌基因或使某些抑癌基因突变而致肝细胞癌变     

细胞凋亡与肿瘤治疗

细胞凋亡与许多疾病特别是肿瘤的发生发展有关，许多癌基因与抑癌基因参与细胞凋亡过程。对细胞凋亡以及在肿瘤治疗中的有关系进行了综述。     

转基因小鼠与肿瘤研究

转基因小鼠的出现有力地推动了肿瘤研究的发展。具有癌症倾向的转基因小鼠,是从DNA水平开展有关人类恶性肿瘤发生、生长、转移和防治研究的良好活休模型。肿瘤形成与控制细胞生长和分化的多种基因特别是癌基因、抑癌基因的遗传改变有关。在利用转基因小鼠进行实验研究时,对由相同结构基因建立的不同转基因小鼠家系在癌基因表达上的时空差异性,应当给予足够的重视。此外,实现转基因动物生产的专业化、产业化,将会加速我国生命科学领域中转基因动物应用研究的进程。     

磷脂酰乙醇胺N-甲基转移酶2的表达抑制大鼠CBRH-7919肝癌细胞的增殖

利用磷酸钙沉淀法将重组的质粒ｐＣＭＶ５－ｐｅｍｔ２与ｐＳＶ－ｎｅｏ共转染,经Ｇ４１８筛选免疫细胞化学和免疫印迹法检测蛋白表达。获得稳定表达ＰＥＭＴ２的阳性克隆。     

癌基因与抑癌基因

癌基因和抑癌基因都存在于正常的细胞中,癌基因可以通过病毒感染,非病毒因子诱发等多种途径被激活,然后诱导触发一系列与细胞生长分化有关的基因表达,从而至病,抑癌基因的丢失,突变,失活,也会导致细胞的癌变。     

肝癌基因治疗机制研究

肝癌是由多基因突变引起的,故用基因工程的手段进行肝癌的基因治疗是目前医学界研究的热点.主要研究了肝癌基因治疗中的免疫基因治疗、抑癌基因治疗、自杀基因治疗、反义基因治疗、耐药基因治疗、联合基因治疗的机制.     

一些神经营养因子对神经干细胞的增殖和分化的影响

胚胎和成年哺乳动物脑内存在能分化为神经元和神经胶质细胞的细胞干细胞,从成年脑和胚脑分离的神经干细胞能在体外分裂并进一步分化成神经元和胶质细胞,许多生长因子,如成纤维细胞生长因子和表皮生长因子等都参与了这一分裂、分化过程。对神经干细胞的增殖及分化产生一定的影响,但在不同的情况下,它们对增殖及分化的作用不同。     

孕激素对子宫内膜上皮细胞增殖调控机制研究进展

子宫内膜是卵巢激素的主要靶器官,女性进入青春期后,在下丘脑垂体的调节下,雌激素、孕激素出现周期性分泌,子宫内膜的形态和功能也随之发生改变.黄体期,血清中上升的孕激素可拮抗雌激素的作用,抑制子宫内膜上皮细胞的增殖,使其分化为具有分泌功能的上皮细胞.孕激素抑制子宫内膜上皮细胞增殖并促使其分化的机制主要是:一方面孕激素通过降低子宫内膜上皮细胞雌激素受体(ER)的表达,降低颗粒细胞分泌细胞色素P450芳香化酶的表达和活性,增加17β-HSDII在子宫内膜局部的表达和活性,增强雌激素代谢,从而抑制雌激素对子宫内膜上皮细胞的促增殖作用,间接抑制子宫内膜上皮细胞的增殖;另一方面孕激素通过与子宫内膜上皮细胞的孕激素受体结合后进入核内,调节细胞周期调控蛋白、原癌基因等参与细胞周期调控的分子表达,直接抑制子宫内膜上皮细胞的增殖并促使其分化.     

维甲酸镍配合物(Ni(RA)2·3H2O)抗白血病HL-60细胞的研究

为了开发一种新型高效的维甲类抗癌药物,在无水、无氧、避光条件下合成了维甲酸镍的配合物,通过元素分析、摩尔电导、红外光谱、紫外光谱、差热及核磁共振氢谱测定了配合物的组成、结构和性质,其分子式为Ni(RA)2·3H2O.采用MTT比色法、克隆形成法及NBT还原试验分别研究了该配合物及全反式维甲酸(ATRA)对HL 60细胞增殖及分化的影响.结果表明,二者均能抑制HL 60细胞增殖并诱导其分化,尤其该配合物的作用明显强于全反式维甲酸(p<0.01).同时采用MTT比色法研究了维甲酸与配合物对正常Vero细胞的毒性,发现配合物对该细胞生长无明显抑制作用,与对照组相比p>0.05.     

低强度脉冲超声对MC3T3-E1细胞增殖、分化和矿化的影响

 为了研究低强度脉冲超声促进MC3T3-E1细胞增殖、分化和矿化的有效性,初步筛选频率和强度参数,分别对细胞施加不同参数(频率、强度)的超声,采取CCK-8法检测细胞的增殖情况,碱性磷酸酶检测试剂盒检测分化效果,茜素红染色观察矿化效果。发现30mW/cm²和40mW/cm²的超声对细胞产生促增殖作用,50mW/cm²抑制增殖;1.5MHz和1.7MHz的较低强度组均较对照组的ALP活性有增加;1.5MHz,40mW/cm²的超声组矿化效果较其他组好。研究结果表明,低强度的脉冲超声可以提高成骨细胞株MC3T3-E1增殖、分化和矿化能力,可能是防治骨质疏松的可行手段之一。     

Regulation of microRNA on plant development and viral infection

THE FIRST MIRNA WAS IDENTIFIED IN C. ELEGANS AS EARLY AS IN 1993; THE IMPORTANCE OF MIRNAS, HOWEVER, IS RECOGNIZED ONLY RECENTLY AFTER THE DISCOVERY OF MIRNAS EXISTING UNIVERSALLY IN EUKARYOTIC ORGANISMS. THE SECOND MIRNA WAS IDENTIFIED IN 2000[1]. SINCE …     

MicroRNA及其靶基因在糖尿病肾病小鼠肾脏的表达

 验证与糖尿病肾病小鼠肾脏相关的microRNAs的表达并运用实时荧光定量PCR分析靶基因与糖尿病肾病的关系。以db/db小鼠为模型组（DN组）,db/m小鼠为正常组（NC组）,定期测量小鼠的体重、血糖、甘油三酯、总胆固醇及24 h尿蛋白排泄率。留取DN小鼠与NC小鼠肾脏组织,检测肾脏组织形态学染色及实时荧光定量PCR（qRT-PCR）。qRT-PCR验证差异表达的microRNAs及其靶基因的mRNA表达水平。血糖、24 h尿蛋白排泄率结果表明糖尿病肾病动物模型构建成功。与NC小鼠相比,DN小鼠肾脏miR-196a、miR-21、miR-200b表达明显升高,且差异有统计学意义（P<0.05）。miR-196a、miR-200b、miR-21的表达水平与血糖、甘油三酯、总胆固醇、24 h尿蛋白排泄率存在正相关关系（P<0.05）。利用miRNAs数据库预测miR-196a的靶基因有ANX1、HOXB7、PTEN、FOXO1、HOXB8、HOXA5等。与NC组比较,DN组ANX1、FOXO1的mRNA表达水平降低,且差异有统计学意义（P<0.05）。同时ANX1、FOXO1与24 h尿蛋白排泄率存在正相关（P<0.05）。MiR-196a可能通过调节ANX1、FOXO1的表达水平来参与糖尿病肾病的发生发展。     

葡萄糖对原代培养大鼠前体脂肪细胞增殖分化的影响

对分离自20日龄雄性SD大鼠附睾和肾周白色脂肪组织的前体脂肪细胞进行原代培养,采用MTT比色法、油红O染色提取法分别测定5～25mmol/L浓度葡萄糖对其增殖和分化的影响.结果显示,高浓度葡萄糖能有效促进大鼠前体脂肪细胞的增殖和分化(P0.05),并以15mmol/L浓度和20mmol/L浓度分别对增殖和分化的促进作用最强.     

基于混合核和加权SVM的microRNA前体识别算法

MicroRNA是一种单链RNA小分子,是由具有发夹结构的、更长的单链RNA前体经加工后生成.相比microRNA序列本身而言,其前体序列和二级结构隐含了更多的可识别特征与信息.因此可利用加权Levenshtein距离,结合其前体序列和二级结构构造一个指数核函数.结合SVM构造识别模型,鉴别真假前体.在用5折叠法得到最佳识别模型后,对人类数据进行测试.实验结果显示,新方法表现出了较好的识别精度,和较高的敏感性与特异性.     

猪前脂肪细胞增殖与分化的初步观察

从新生仔猪颈部皮下采集脂肪组织,用胶原酶Ⅳ消化分离前脂肪细胞,于37℃,5%CO2、饱和湿度下培养前脂肪细胞,通过MTT法、油红O染色及脂蛋白脂酶(LPL)活性测定对培养细胞进行鉴定.结果表明:培养3 d后,细胞增殖进入对数增长期,其生长曲线呈S形;分化的脂肪细胞内充满脂肪滴,细胞形态由梭形逐渐变为圆形;随着前脂肪细胞的分化,LPL活性显著下降.     

大豆苷元对体外培养大鼠成骨细胞增殖与分化的影响

目的探讨大豆苷元对体外培养大鼠成骨细胞的增殖与分化能力的影响.方法从新生大鼠颅骨中分离培养大鼠成骨细胞,加入不同浓度的大豆苷元溶液进行培养,48,72 h后用MTT法测定成骨细胞的增殖,PNPP法测定碱性磷酸酶活性及RIA法测定骨钙素含量.结果不同浓度的大豆苷元作用48,72 h后,测定OD值均高于阴性对照组;成骨细胞在大豆苷元的作用下,与阴性对照相比,碱性磷酸酶活性显著增高;成骨细胞BGP含量显著增加.结论大豆苷元具有促进体外大鼠成骨细胞的增殖以及分化的作用.