降低聚腺苷二磷酸核糖聚合酶活性对外源癌基因诱导的NIH3T3转化的逆转作用研究

用ＰＡＲＰ酶抑制剂苯甲酰胺（ＢＡ）处理经ｃ－Ｈａ－Ｔ２４－ｒａｓ活化癌基因转染的ＮＩＨ３Ｔ３细胞得到转化细胞系，结果表明：经苯甲酸胺处理的细胞系，其细胞凝集、血清依赖性、形态特征等均发生了改变，呈现出正常细胞的特征．Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交结果表明，已整合到细胞基因组中的外源Ｔ２４～ｒａｓ基因发生了丢失．     

点突变ras癌基因全cDNA真核表达重组体的构建及诱导NIH…

将活化癌基因Ｔ２４－ｒａｓ的ｃＤＮＡ序列正向插入真核载体ｐＭＡＭｎｅｏ，构建成重级同粒ｐＭＡＭｎｅｏ－Ｔ２４－ｒａｓ，将该质粒转染ＮＩＨ３Ｔ３细胞，通过药物筛选，建成细胞系３Ｔ３（Ｔ２４）Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交证明外源Ｔ２４－ｒａｓ基因已整合于受体细胞染色体中，３Ｔ３（Ｔ２４）细胞表现出形态学方面的明显变化；具失去接触抑制能力，且在裸鼠体内致瘤等恶性行为，本文构建的Ｔ２４－ｒａｓ基因真核表达重组体和     

点突变ras癌基因全cDNA真核表达重组体的构建及诱导NIH3T3细胞转化的研究

将活化癌基因Ｔ２４－ｒａｓ的全ｃＤＮＡ序列正向插入真核载体ｐＭＡＭｎｅｏ，构建成重组质粒ｐＭＡＭｎｅｏ－Ｔ２４－ｒａｓ．将该质粒转染ＮＩＨ３Ｔ３细胞，通过药物筛选，建成细胞系３Ｔ３（Ｔ２４）．Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交证明外源Ｔ２４－ｒａｓ基因已整合于受体细胞染色体中．３Ｔ３（Ｔ２４）细胞表现出形态学方面的明显变化：具失去接触抑制能力，且在裸鼠体内致瘤等恶性行为．本文构建的Ｔ２４－ｒａｓ基因真核表达重组体和建立的转化细胞系可用于肿瘤的诊断、预防、治疗及抗肿瘤药物的筛选、评估等研究．     

逆转录病毒载体介导的Anti—ras核酶对T24ras转化3T3细胞 …

突变ｒａｓ基因存在多种人类肿瘤细胞中，本文将可特异性切割１２位点突变ｒａｓ（Ｔ２４ｒａｓ）之核酶Ｒ８通过逆转录病毒载体导入Ｔ２４ｒａｓ转化的ＮＩＨ３Ｔ３细胞，以期检测核酶在细胞内对其靶基因的作用，结果表明Ｒ８可特异性地切割突变ｒａｓｍＲＮＡ导致转化细胞生物学特性的细胞形态，生长速度等在一定程度上发生逆转。     

逆转录病毒载体介导的Anti-ras核酶对T24ras转化3T3细胞的抑制作用

突变ｒａｓ基因存在于多种人类肿瘤细胞中,本文将可特异性切割１２位点突变ｒａｓ（Ｔ２４ｒａｓ）之核酶Ｒ８通过逆转录病毒载体导入Ｔ２４ｒａｓ转化的ＮＩＨ３Ｔ３细胞,以期检测核酶在细胞内对其靶基因的作用．结果表明Ｒ８可特异性地切割突变ｒａｓｍＲＮＡ,导致转化细胞生物学特性如细胞形态、生长速度等在一定程度上发生逆转     

抗氧化剂Isoverbascoside对MGC80—3细胞抗氧化活性和癌？…

以苔酚蓝拒染法,核黄素－ＮＢＴ还原法、ＤＴＮＢ还原法及ＲＮＡ斑点杂交分析法分别对经不同浓度Ｉｓｏｖｅｒｂａｓｃｏｓｉｄｅ（Ｉｓｏｖ）处理的ＭＧＣ８０－３细胞的Ⅱ期抗氧化酶（超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化氢酶）生和Ｎ－ｒａｓ、ｃ－ｍｙｃ及ｐ５３基因表达作了检测,结果显示：经Ｉｓｏｖ处理后,细胞生长明显受抑;Ⅱ期抗氧化酶活性较处理前明显上升,癌基因Ｎ－ｒａｓ、Ｃ－ｍｙｃ的表达较处理前下降,     

研究聚ADP核糖基化作用与细胞恶变关系的双基因真核表达重…

本文将聚ＡＤＰ核糖聚合酶基因１．４ｋｂ部分序列反向插入真核表达载体ｐＭＡＭｎｅｏ和ｐＳＭＧ中，同时１２位密码子突变的活化ｒａｓ癌基因也一同克隆到上述载体中，从而获得具有不同真核基因筛选标记的双基因真核表达重组ｐＭＡＭｎｅｏ－Ｃｌ．４－Ｔ２４，ｐＭＡＭｎｅｏ－Ｃｌ．４－ａｒＴ２４，及ｐＳＭＧ－Ｃｌ．４－Ｔ２４，上述质粒的构建成功为研究聚ＡＤＰ核糖基化作用与细胞恶变的关系提供了一种新的分子模型。     

Ha—ras和Ki—ras癌基因转染和细胞对小鼠细小病毒杀伤敏感…

为研究Ｈａ－ｒａｓ和Ｋｉ－ｒａｓ癌基因转染和细胞对小鼠细小病毒（ＭＶＭ）杀伤敏感性间的关系，两个细胞株，即Ｋｉ－ｒａｓ癌基因转株ＤＴ和Ｈａ－ｒａｓ癌基因转化细胞株ＲＥＦ４－３，被用来作为研究材料，体外细胞集落形成率和细胞在裸小鼠体内的成瘤能力测定显示，和对照细胞ＮＩＨ／３Ｔ３相比之这ＲＥＦ４－３和ＤＴ对ＭＶＭ的杀伤作用更敏感，同时，ＤＮＡ杂交和蛋白免疫沉淀实验结果也显示，在ＲＥＦ４－３和ＤＴ细胞中     

亚硒酸钠对人胃腺癌细胞中c-Ha-ras和-cerbB2癌基因及其蛋白的影响

应用细胞原位杂交和免疫胶体金技术，观察亚硒酸钠处理人胃腺癌细胞前后，ｃ－Ｈａ－ｒａｓ和－ｃｅｒｂＢ２癌基因转录水平及其产物Ｐ２１和Ｐ１８５癌蛋白表达的变化，结果表明，两种癌基因在ＭＧｃｘ８０－３细胞中活跃表达，亚硒酸钠能抑制ｃ－Ｈａ－ｒａｓ和－ｃｅｒｂＢ２癌基因的转录水平及Ｐ２１和Ｐ１８５癌蛋白的表达，这对于诱导胃癌细胞向正常细胞方向逆转具有重要意义。     

重组PAI—2基因在NIH3T3细胞中的活性表达

构建了人ＰＡＩ—２ｃＤＮＡ睥达质粒，以ＮＩＨ３Ｔ３为转染宿主细胞，ＮｏｒｔｈｅｒｎＢｌｏｔ，ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ和ＰＡＩ活性扩散试验结果表明人ＰＡＩ—２ｃＤＮＡ可以在ＮＩＨ３Ｔ３细胞中正确表达出ＰＡＩ—２蛋白，且具有抑制ＰＡ的活性，同时未能检测到ＮＩＨ３Ｔ３细胞表达ＰＡＩ—２蛋白质．为探讨ＰＡ—ＰＡＩ—２系统的调控机制打下基础．     

天然抗氧化剂Isoverbascoside对人胃腺癌细胞生长和超微结构的影响

ＭＧｃ８０－３细胞经２０μｍｏｌ／Ｌ抗氧化剂ｌｓｏｖｅｒｂａｓｃｏｓｉｄｅ处理后，细胞生长曲线与分裂指数显著下降，倍增时间延长，生长抑制率达５７．８％．电镜观察结果表明：ｌｓｏｖｅｒｂａｓｃｏｓｉｄｅ处理的细胞，核质比例下降，核形规则，核仁体积缩小，数量减少，核内异染色质减少；线粒体形态结构典型；细胞表面微绒毛减少等显著变化．说明天然抗氧化剂Ｉｓｏｖｅｒｂａｓｃｏｓｉｄｅ改变了ＭＧｃ８Ｏ－３细胞的恶性表型特征，具有明显的诱导分化作用．     

天然抗氧化剂Isoverbascoside对人胃腺癌细胞生长和超微…

ＭＧｃ８０－３细胞经２０μｍｏｌ／Ｌ抗氧化剂Ｉｓｏｖｅｒｂａｓｃｏｓｉｄｅ处理后，细胞生长曲线与分裂指数显下降，倍增时间延长，生长抑制率达５７．８％，电镜观察结果表明，Ｉｓｏｖｅｒｂａｓｃｏｓｉｄｅ处理的细胞，核质比例下降，核形规则，核仁体积缩小，数量减少，核内异染色质减少，线粒体形态结构典型，细胞表面微绒毛减少等显变化，说明天然抗氧化剂Ｉｓｏｖｅｒｂａｓｃｏｓｉｄｅ改变了ＭＧｃ８０－３细胞的     

农药生物测定新方法的研究：I.几种有机溶剂对中国棉铃虫

将溶解蓝紫色结晶物的溶剂改为ｐＨ４．５的３％ＳＤＳ异丙醇，实验结果更为准确、可靠用改进的ＭＴＴ方法研究了丙酮、二甲亚砜、Ｎ，Ｎ－二甲基甲酰胺、乙酸乙酯、乙醇、二甲苯等有机溶剂对中国棉铃虫细胞系（ＢＣＩＲＬ－ＨＡ－ＡＭＩ）生长的影响，结果表明，除二甲苯外，用０．５％浓度（体积比）处理２４ｈ，其细胞存活率与空白对照无显著差异；１％浓度时，其细胞存活率仍在９０％以上，依次为：９５．８％，９２．５％，９４     

亚硒酸钠对人胃腺癌细胞中c—Ha—ras和c—erbB2癌基因及其蛋 …

应用细胞原位杂交和免疫胶体金技术，观察亚硒酸钠处理人胃腺癌细胞前后，ｃ－Ｈａ－ｒａｓ和ｃ－ｅｒｂＢ２癌基因转录水平及其产物Ｐ２１和Ｐ１８５癌蛋白表达的变化。结果表明，两种癌基因在ＭＧｃ８０－３细胞中活跃表达，亚硒酸钠能抑制ｃ－Ｈａ－ｒａｓ和ｃ－ｅｒｂＢ２癌基因的转录水平及Ｐ２１和Ｐ１８５癌蛋白的表达，这对于诱导胃癌细胞向下沉细胞方向逆具有重要意义。     

视黄酸对BEL—7402细胞酶活性及基因表达的影响

人肝癌ＢＥＬ－７４０２细胞分别以５μｍｏｌ／Ｌ、２０μｍｏｌ／Ｌ和５０μｍｏｌ／Ｌ的视黄酸（ＲＡ）处理后,细胞生长明显受抑,平均细胞群体倍增时间延长,并呈ＲＡ浓度及处理时间依赖性关系．经２０μｍｏｌ／ＬＲＡ处理的细胞中,ｒ－谷氨酰转肽酶（ｒ－ＧＴ）活性自给药后第２天即持续下降,至第６天降至４４．５％,而酪氨酸－α－酮戊二酸转氨酶（ＴＡＴ）活性则持续增高,至第６天较对照组高近１倍．经２０μｍｏｌ／ＬＲＡ处理５ｄ后,ＲＮＡ斑点杂交分析表明ｐ５３基因转录加强,而Ｎ－ｒａｓ基因表达下降,提示该两基因的表达变化可能在ＢＥＬ－７４０２细胞的生长抑制及逆转过程中起重要作用,有关机制尚待深入研究．     

免疫核糖核酸作用机制的研究──抗SRBCIRNA的电泳分离及分离组分对靶细胞的作用

报道了用聚丙烯酰胺凝胶电泳法和电泳洗脱法分离抗 ＳＲＢＣ ＩＲＮＡ及各分离组分的 活性．结果表明电泳能将ＩＲＮＡ分为３０多条带．沉降系数为８～１８ｓ的Ｆｒ２组分具有传递免疫反应的活性。测定了总ＩＲＮＡ及其各组分对 Ｔ细胞和 Ｂ细胞的作用，表明总 ＩＲＮＡ既能激活Ｔ细胞，亦能激活Ｂ细胞． Ｆｒ２－ａ能激活 Ｔ细胞，Ｆｒ２－２，Ｆｒ２－ｂ、 Ｆｒ２－ｃ和Ｆｒ２－ｄ都能激活Ｂ细胞、实验还表明ＩＲＮＡ不大可能作为抗体的直接模板。     

RATS1基因对人食管癌细胞c—myc基因表达的降调…

将含有ＲＡＴＳ１ｃＤＮＡ的真核表达载体ｐＣＤＶ１与含有ｎｅｏ抗性基因的表达载体ｐＤＯＲ－ｎｅｏ经Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ法共转染人食管癌细胞系ＥＣ１０９细胞。结果发现：转染ＲＡＴＳ１基因后的抗性克隆细胞生长受到抑制，形态发生明显改变，并且逐渐脱落死亡。经ＲＴ－ＰＣＲ分析发现，转染后有ＲＡＴＳ１基因表达的细胞克隆，ｃ－ｍｙｃ基因表达降低，两者呈反向相关，即ＲＡＴＳ１基因表达愈高，ｃ－ｍｙｃ基因表达降低愈     

广西肝癌中HBV感染与N-ras基因突变的研究

应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ和免疫组化法检测２９例广西南部肝癌组织中的Ｎ－ｒａｓ基因突变和ＨＢＶ感染状况，结果，肝癌中Ｎ－ｒａｓ基因在第２￣３７密码子之间的突变率为７９．３％，其中２２例有２￣５个突变位点，该基因突变也见于癌旁组织，肝组织中ＨＢｓＡｇ和ＨＢｓＡｇ和ＨＢｘＡｇ检出率分别为８６．２％和７９．３％，两者具有相关性，并与Ｎ－ｒａｓ基因突变率呈相平行的趋势。因广西南部的肝癌与ＡＦＢ１污染有关，本研究     

小麦叶绿体psbA基因的克隆及表达

用ＰＣＲ直接从小麦叶绿体基因组扩增到完整的ｐｓｂＡ基因，并构建了ｐｓｂＡ基因的克隆ｐＴＤ１Ⅱ。为研究ｐｓｂＡ基因在Ｅ·ｃｏｌｉ中的表达，将完整的ｐｓｂＡ基因正向插入高表达载体ｐＫＫ２２３－３中构建表达克隆ｐＫＴＤ１。含有重组表达质粒的转化细胞经ＩＰＴＧ诱导后提取总蛋白，经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，小麦叶绿体ｐｓｂＡ基因能在Ｅ·ｃｏｌｉ中表达３２ｋＤ的Ｄ１蛋白，表达的Ｄ１蛋白占细菌总蛋白的３％以上。     

无融合生殖油菜AMR—1的细胞胚胎学研究

油菜无融合生殖材料ＡＭＲ－１取自Ｂｒａｓｓｉｃａ ｎａｐｕｓ Ｓ４５与蓝花子属间远缘杂交后代的雄性不育株，具有兼性无融合生殖特性。作者着重对其雄性不育和胚胎的发生进行了较详细的研究，研究结果证明了ＡＭＲ－１的无融合生殖的性质并观察到无融合生殖的发生机制。