斜纹夜蛾微孢子虫在昆虫细胞系的体外培养

以受斜纹夜蛾微孢子虫(Nosema sp.)感染的斜纹夜蛾幼虫血淋巴感染草地贪夜蛾传代细胞系,建立了感染斜纹夜蛾微孢子虫的体外传代细胞.以这种体外细胞培养试验证明,斜纹夜蛾微孢子虫不能在37℃下发育,最适发育温度为25℃.用光学显微镜及电子显微镜的研究证明,斜纹夜蛾微孢子虫整个生活周期都以一对双核存在,母孢子以二分裂形成两个孢子母细胞;孢子具有一对双核的孢质、极管及极质体;极管为12～13圈,为典型的微粒子属.     

斜纹夜蛾核多角体病毒感染甜菜夜蛾细胞的研究

 研究发现斜纹夜蛾核多角体病毒（Spodoptera litura nucleopolyhedrovirus,SpltNPV）不能成功感染同属甜菜夜蛾（S. exigua,Se）昆虫,为深入研究SpltNPV在离体Se301细胞中的感染进程以及病毒感染失败的原因,对感染后Se301细胞进行DNA复制、病毒基因转录以及病毒蛋白表达等检测。结果显示被感染的Se301细胞中病毒完成了DNA的复制和病毒早、晚期基因转录,但检测不到极晚期基因多角体基因（polyhedrin）的表达,病毒的蛋白表达受阻从而影响了病毒完成复制周期。 研究发现病毒蛋白表达受阻是SpltNPV在Se301细胞中无法形成子代病毒,完成整个病毒复制的主要原因,这为深入研究其感染失败机理奠定了坚实基础。     

甲醛致斜纹夜蛾SL-1细胞DNA损伤作用的研究

为了研究甲醛致昆虫细胞DNA-蛋白质的交联作用（DNA—protein crosslinks,DPC）和DNA的断裂作用,以斜纹夜蛾SL-1细胞为材料,采用KCI-SDS沉淀法和彗星实验来检测液态甲醛染毒后SL-1细胞中DPC的含量及DNA的断裂效应．KCISDS沉淀法的结果表明,低浓度的液态甲醛（25μmol／L,125μmol／L）不能引起DPC,较高浓度（625μmol／L）可以引起明显的DPC（P〈0．01）;而彗星实验的结果则显示甲醛在低浓度（5μmol／L,25μmol／L）时可以引起DNA链的断裂（P〈0．01）,在较高浓度（625μmol／L）时尾部DNA％和尾矩比空白对照显著降低（P〈0．01）,表明此时甲醛所致的DPC掩盖了DNA断裂的作用．结论是甲醛在较高浓度时可以导致明显的DPC作用,而在低浓度时以DNA断裂为主．     

柴胡细胞悬浮培养

柴胡愈伤组织的诱导以适当浓度的２，４－Ｄ和细胞分裂素的配合使用效果较好。在细胞悬浮培养过程中，细胞生长的情况是接种后的９￣１８天迅速生长，１８天后基本停止生长；ｐＨ值随培养的进程由开始时的５．８逐渐降至４．９（第９天），然后又出现回升。对培养液的检测表明：未分化出根的柴胡培养细胞也能生成柴胡皂甙。     

生物反应罐Vero细胞微载体灌流培养

用7L生物反应罐,3g/L Cytoedx 1,φ＝50％溶解氧,40－50r/min搅拌速度进行细胞培养,培养48h开始灌流。连续动态测定葡萄糖含量、渗透压变化及pH值,同时观察细胞形态、增殖情况。连续3批7L规模灌流培养表明,细胞贴附率高,增殖速度快,细胞形态良好,细胞群体倍增数达4．7。结果表明生物反应罐灌流培养法是一种快速、规模化制备细胞的有效方法。     

斜纹夜蛾几丁质酶家族基因鉴定与时空表达分析

昆虫GH18家族几丁质酶属于多基因家族,在昆虫的蜕皮与变态过程中发挥着至关重要的作用,它催化表皮几丁质的降解.斜纹夜蛾是一种重要的农业害虫,危害290多种植物,但对其几丁质酶未深入研究.本文通过斜纹夜蛾转录组学分析,发现了12种潜在的几丁质酶,分属于8类.对这些几丁质酶在斜纹夜蛾变态发育时在表皮、中肠以及脂肪体的时空表达分析结果表明,SlCht5, SlCht9和SlCht2的表达水平在幼虫转化为蛹时上调表达,说明这些几丁质酶可能参与了斜纹夜蛾变态时期的脱皮作用;而其他几丁质酶的表达具有组织特性,说明它们可能有着不同的功能,如SlCht6仅在中肠和脂肪体中表达,SlCht11,SlCht12 和 SlCht16主要在中肠和表皮表达,SlIDGF2仅在表皮有表达,SlIDGF3和SlCht9在三大组织均有表达.本研究对斜纹夜蛾几丁质酶家族基因的鉴定和时空表达作了初步的分析,为研究它们在斜纹夜蛾发育中的功能与调控打下基础.     

Vero细胞的微载体培养——放大过程中的接种工艺

概述了用微载体系统培养贴壁细胞放大过程中的接种方法,研究了球转球的工艺条件,并建立了球转球的动力学模型。用此方法成功地在国产５０Ｌ生物反应器中培养Ｖｅｒｏ细胞,细胞密度达１．１×１０＾７ｃｅｌｌｓ／ｍＬ。     

影响Px细胞微载体培养因素的研究

研究了细胞生长过程中微载体的种类、浓度及细胞接种量对培养Ｐｘ细胞的影响。以ＧＴ－３为微载体，当细胞接种量为２．０×１０＾５细胞／ｍＬ，微载体浓度为２．０ｍｇ／ｍＬ，温度为２８℃时，第６天细胞密度可达１．０×１０＾６细胞／ｍＬ，为接种量的５倍，细胞生长旺盛，形态正常。     

粉纹夜蛾5BI细胞的悬浮培养

报道了粉纹夜蛾５ＢＩ细胞在转瓶系统悬浮培养及血清浓度，细胞接种浓度，非离子表面活性剂Ｐｌｕｒｎｉｃ－Ｆ－６８等对细胞生长的影响与作用，实验结果显示：５ＢＩ细胞能够搅拌条件下，在含５％血清培养基中正常生长增殖，当血清浓度降至２％时。细胞生长速率产生较明显变化，ＰｌｕｒｏｎｉｃＦ－６８对细胞生长有显著的保护作用，５ＢＩ细胞适宜于悬浮培养和进一步放大培养。     

水稻花粉悬浮培养及其在育种上的应用

评估了２０个水稻品种离体花粉悬浮培养产生愈伤组织和再分化植株的能力，并进行了花粉悬浮培养试验，结果表明；品种之间反应差异很大。来源于日本的“黎明”（粳稻）最敏感。“黎明”植株再分化的频率达８４．１％。在愈伤组织的形成和植株再分化过程中，除其它一些因子外，基因型的差异有一定制约作用。通过水稻花粉悬浮培养诱导出的新品系“Ｎ１０”，其特征有：早熟，穗大，株高（９０～１００ｃｍ），产量高和抗稻瘟病等。     

草木樨状黄芪和光棘豆细胞悬浮培养的最佳培养基

利用不同培养基进行草木樨状黄芪和光棘豆愈伤组织的细胞悬浮培养,筛选出适合这两种植物细胞悬浮培养的最佳培养基S_(12),该培养基能抑制褐化,维持细胞的胚性生长。     

巴戟天细胞悬浮培养生产蒽醌类物质的研究

巴戟天细胞在含NAA0．25mg／L，Kt0．025mg／t,的B5培养基中进行悬浮培养，细胞比生长速率为0．140天^-1，倍增时问为118．8小时，蒽醌含量可达151．27mg／L，为细胞干重的0．81％。巴戟天细胞中蒽醌含量是巴戟天根的2．17倍，蒽醌的比生产速率是巴戟天根的79．3倍。在固体培养愈伤组织中其蒽醌含量和比产率则分别是巴戟天根的6．1倍和209倍。     

成单玉米悬浮细胞系的建立及植株再生

作者利用成单玉米１５,１８号的幼胚诱导的愈伤组织,系统地研究了愈伤组织的改良、悬浮细胞系的建立及植株再生。结果表明,通过调节２,４－Ｄ的浓度、调节盐离子浓度、加入一定浓度的ＮａＣｌ、添加一定量的ＫＴ、ＧＡ３、ＮＨ４ＮＯ３以及采用液体适应培养等改良措施,选择得到了颜色鲜黄、小颗粒状结构、不分泌粘液、生长较迅速和易于悬浮的松脆愈伤组织;在悬浮培养初期,经过高浓度２,４－Ｄ的启动,先后建立了５个悬浮细胞     

滇紫草细胞发酵培养形成紫草色素

测定了滇紫草细胞发酵培养过程中细胞生长、色素形成、碳源、氮源、重要无机离子和ｐＨ值的动态变化，为设计适合于紫草细胞发酵培养的反应器和进行紫草细胞发酵培养提供了依据     

斜纹夜蛾NPV-DNA限制性内切酶分析及多角体蛋白的某些理化性质

斜纹夜蛾NPV-DNA经限翩性内切酶EooRI和BamHI完全消化,分别产生22条和15条片断,测得DNA平均分子量为75.26×10~5道尔顿。多角体蛋白经超离心,Sepharose 6B柱层析纯化,PAGE为一条均匀带;高碘酸-schiff反应阳性,多角体蛋白含有多糖;多角体蛋经显示酸性类脂的Niles兰染色呈阴性。