lL-1α在IgAN肾组织中的表达与疾病进展的关系

目的探讨IL-1α在IgAN肾组织中的表达与疾病进展的关系.方法对36例经光镜、免疫荧光、电镜等病理诊断为IgAN的肾组织进行了IL-1α免疫组织化学检测.结果IL-1α主要表达于肾小管上皮细胞内(近曲小管31/36;远曲小管25/36).在肾小球的毛细血管腔内侧(15/36)和肾小球靠球囊壁的肾小囊腔(10/36)亦可见IL-1α的表达.在肾小球系膜区无明显增宽时,IL-1α的表达率高.结论IL-1α在IgAN肾组织内主要位于肾小管上皮细胞内.在IgAN的进展过程中,IL-1α的表达率增强,此期如选用IL-1α受体拮抗剂进行治疗,可控制IgAN的进展.     

豹猫肾脏的组织结构观察及AQP-1、bFGF和BMP-7在肾脏中的表达

利用切片法观察豹猫(Prionailurus bengalensis)肾脏的组织结构,应用免疫组织化学法检测水通道蛋白-1(AQP-1)、碱性成纤维细胞生长因子(b FGF)和骨形态发生蛋白-7(BMP-7)在肾脏中的表达。结果显示:豹猫和大多数哺乳类肾脏的组织结构一样呈长而扁的菜豆形,表面有致密的结缔组织构成的被膜,肾实质可分为皮质和髓质,髓质和皮质之比为1.6∶1。肾实质由肾小体、肾小管和集合管构成。肾小体可分为出血管极和尿极,血管球由毛细血管缠绕形成,外包有肾小囊。近曲小管长且管腔不规则,刷状缘明显。远曲小管和集合管管腔较大,腔面无刷状缘,细胞界限较清楚。肾小管和集合管上皮细胞都呈AQP1和b FGF免疫反应阳性,肾小管、集合管上皮细胞和肾小球上皮细胞都呈BMP-7免疫反应阳性。结果表明:AQP-1、b FGF和BMP-7在调节肾脏水平衡、维持肾功能及保护肾脏方面可能具有重要作用。     

川金丝猴肾的组织结构观察及Bax蛋白的表达

为观察川金丝猴肾的组织结构及其相关蛋白Bax的表达,制作石蜡切片,采用H.E染色观察川金丝猴肾的组织结构特征,用免疫组织化学法检测Bax蛋白在肾组织中的表达.结果显示:川金丝猴和多数哺乳类肾的组织结构相似,外观呈蚕豆形,表面包以致密的结缔组织被膜,肾实质由外周的皮质和内部的髓质构成;肾小体数量较多,周围有很多近曲小管和远曲小管,近曲小管管腔不规则,有明显刷状缘,远曲小管则无刷状缘,集合管管腔较大,细胞界限清晰,肾小管和集合管上皮细胞都呈Bax蛋白免疫反应阳性;川金丝猴的肾主要由肾单位和集合管构成,Bax蛋白参与川金丝猴肾小管和集合管上皮细胞的凋亡,调控川金丝猴肾的发育过程.     

口服蛋氨酸造成的大鼠肾间质纤维化模型及其机制研究

目的:研究口服蛋氨酸造成的大鼠肾间质纤维化模型及叶酸的治疗作用,同时观察同型半胱氨酸对人近曲小管上皮细胞增殖的影响,并初步探讨其机制。方法:24只普通SD大鼠随机分成三组,分别灌以双蒸水,蛋氨酸,蛋氨酸+叶酸,120天后处死大鼠,测定血浆同型半胱氨酸浓度,观察肾间质纤维化程度及检测组织中E-钙连接蛋白的表达;同时培养人近曲小管上皮细胞,观察同型半胱氨酸单独处理及叶酸联合处理后细胞的增殖情况及α-平滑肌肌动蛋白、E-cad的表达。结果:(1)蛋氨酸组血浆同型半胱氨酸水平较对照组显著升高,肾间质出现一定程度的纤维化,组织中E-cad的表达显著下调。(2)细胞中E-cad的表达显著下调、α–SMA的表达显著增高,细胞增殖明显。(3)叶酸治疗能显著减轻蛋氨酸所致的高同型半胱氨酸血症和肾间质纤维化,上调E-cad的水平,降低α-SMA的表达,抑制细胞的增殖。结论:通过口服蛋氨酸促发高同型半胱氨酸血症能诱导肾间质纤维化,其机制可能与肾小管上皮细胞的异常增殖及肾小管上皮转分化有关;叶酸能对抗这一作用。     

中华蟾蜍泌尿系统组织学的初步研究

1999年12月至2001年6月采用常规组织学方法对中华蟾蜍（Bufo gargarizans)的泌尿系统作了研究。结果表明：肾实质主要由肾小体和肾小管组成。肾脏中，后段的肾小体较多，多分布在肾脏周缘。肾小管由颈段，第一近曲小管，第二近曲小管，间段，第一远曲小管，第二远曲小管和集合管组成；输尿管位于肾脏后段外缘，其上皮为假复层柱状上皮或移行上皮；中华蟾蜍的膀胱为泄殖腔膀胱，膀胱内壁具大量发达的绒毛，绒毛表面是移行上皮，在其中分布有许多杯状细胞，膀胱具有重吸收水分的功能。     

TGF-β/Smad7信号通路在狼疮肾炎患者肾损害中的作用研究

系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus, SLE)是一种全身性自身免疫病,以多系统、多脏器损害为特征,肾脏损伤是SLE的重要脏器受损之一,影响预后,是风湿病领域的研究热点。本课题将以狼疮肾炎(lupus nephritis,LN)为研究对象以期发现TGF-β/Smad信号通路在狼疮肾炎发病中的作用及Smad7对该通路的影响。各入组60例LN为实验组及原发性肾小球肾炎患者作为健康对照,(1)探讨LN病人TGF-β、Smad基因的表达。(2)通过MTT、ELISA、PT-PCR、免疫组化方法对狼疮肾炎、原发性肾小球肾炎患者血清、尿液、肾组织中TGF-β、Smad、Smad7的表达差异,以期发现TGF-β/Smad信号通路在狼疮肾炎发病中的作用及Smad7对该通路的影响。ELISA法检测两组患者血清、尿液中TGF-β的含量,观察组较对照组含量高,P<0.05,有统计学意义。RT-PCR半定量分析发现TGF-β、Smad7 mRNA表达观察组与对照组比较差异有显著性(P<0.05),患者肾组织TGF-β、Smad7蛋白主要表达在皮质肾小管上皮细胞内...     

鞣花酸对顺铂引起小鼠急性肾损伤的影响

目的:研究鞣花酸(EA)对顺铂引起小鼠急性肾损伤的减轻作用,探讨其可能的机制.方法:将32只雄性昆明小鼠随机分为对照组、模型组、EA给药组(10,30 mg/kg),给予顺铂(25 mg/kg)建立小鼠急性肾损伤模型,观察EA给药后的改善作用.取小鼠血清并用试剂盒测定尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)和肾组织中总超氧化物歧化酶(T-SOD)、丙二醛(MDA)及还原型谷胱甘肽(GSH)水平.用HE和Tunel染色观察肾脏病理结构变化和细胞凋亡,用Western blotting测定肾组织中促凋亡蛋白(Bax)和抗凋亡蛋白(Bcl-2)的表达.结果:与模型组比较,EA均能不同程度地降低血清中BUN,SCr,MDA,TNF-α和IL-1β水平,增加肾组织中GSH和T-SOD的活性;下调肾组织中Bax,上调Bcl-2的蛋白表达水平;改善顺铂所致的病理变化.结论:EA对顺铂引起的肾损伤具有保护作用,这与EA的抗氧化、减少炎症反应和抑制肾小管上皮细胞凋亡有关.     

盐度对星斑川鲽幼鱼鳃和肾细胞结构的影响

在实验室塑料水槽中,观察了盐度为0、8、16、24、32时星斑川鲽幼鱼(10.6±0.27 g)生长状况,并且利用显微镜和透射电镜研究了不同盐度驯化下星斑川鲽幼鱼鳃泌氯细胞和肾近曲小管上皮细胞的分布结构特征.在海水中,鳃丝和鳃小片上泌氯细胞数量多.超微结构显示,细胞内线粒体数量大,顶隐窝较深;随着渗透压的降低,向低盐过渡过程中星斑川鲽幼鱼鳃中的泌氯细胞个数变少,多见于鳃小片基部,细胞核大且明显,线粒体少,细胞表面顶隐窝变浅.在海水中,肾小球和肾小管出现不同程度的萎缩,近曲小管上皮细胞中线粒体数量少,刷状缘退化.随着渗透压的降低,向低盐过渡过程中星斑川鲽幼鱼肾小球充盈,肾小管发达,近曲小管上皮细胞中线粒体数量增多,刷状缘发达.     

镉对中国林蛙肾组织结构的毒性效应

采用不同剂量的Cd^2＋溶液对中国林蛙（Rana chensinensis）成体隔日皮下注射染毒，光镜下观察肾组织的显微结构变化．结果表明，在以每次剂量为0．1mg／kg的Cd^2＋溶液注射20次后，肾小管上皮细胞未发生明显变化；以每次剂量为0．25mg／kgCd^2＋溶液注射20次后，以及剂量为0．5mg／kg、1mg／kg和2．5mg／kgCd^2＋溶液注射10次后，肾近曲小管上皮细胞出现不同程度的浊肿、水样变性和脂肪样变等现象；在每次剂量为6mg／kgCd^2＋溶液注射4～7次、每次剂量为12mg／kg Cd^2＋溶液注射2～4次时，近曲小管上皮出现糜烂，远曲小管上皮也有不同程度的变性，肾小球发生变形．说明两栖动物的镉染毒，随着镉剂量的增加和处理时间的延长，肾组织损伤程度加重．     

Follistatin-like 1(FSTL1)在单侧输尿管结扎诱导的小鼠肾间质纤维化中表达上调

Follistatin-like 1(FSTL1)是一个可以被TGF-β1诱导产生的分泌型胞外糖蛋白,它在输尿管和肾组织中都有较高表达.缺失FSTL1会导致小鼠先天性输尿管积水和肾盂积水.本研究拟建立单侧输尿管结扎(unilateral ureteral obstruction,UUO)诱导的小鼠肾间质纤维化模型,探讨FSTL1在肾间质纤维化中的表达及其在病理发生过程中的作用.小鼠右侧肾脏行UUO手术,左侧肾脏作为对照,UUO术后14d小鼠被处死.HE和Masson染色检测肾间质纤维化程度;qRT-PCR和Western blot检测肾脏组织中纤维化特征分子,如α平滑肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、Ⅰ型胶原(typeⅠcollagen,COL1)和纤维连接蛋白(fibronectin,Fn),以及FSTL1的表达;免疫组化检测FSTL1表达和分布.UUO损伤的右肾组织表现出严重的间质纤维化,并且胞外基质(COL1,Fn)以及成纤维细胞活化标志物(α-SMA)的mRNA及蛋白表达水平也显著升高.同时发现,FSTL1的mRNA及蛋白表达水平在UUO损伤的右肾组织也显著升高,并且主要集中在肾小管上皮细胞中表达.因此推测,小鼠肾间质纤维化的病理过程可能与FSTL1表达上调有关,但其功能和确切作用机制还需进一步探讨.     

去卵巢合并单侧输尿管结扎诱导小鼠肾脏病变的研究

为研究去卵巢合并单侧输尿管结扎引起小鼠肾脏的病理变化及可能机制,选取C57BL/6J雌性小鼠为研究对象,分别设立对照组和模型组.手术3周后,取肾脏样本.使用HE,Masson’s Trichrome两种方法进行肾石蜡切片染色,通过RT-PCR技术检测肾纤维化相关因子TGF-β,CTGF,VEGF,fibronectin,炎症因子MCP-1,RANTES,肾素-血管紧张素系统(RAS)组分肾素(renin)、肾素受体(renin receptor)、血管紧张素原(AGT)的mRNA表达.结果显示,模型组小鼠肾小球萎缩,肾小管腔隙体积增加、膨大,肾小管间质纤维化.模型组小鼠肾脏fibronectin,MCP-1,RANTES的mRNA表达都显著上调,RAS组分renin receptor的基因表达显著上调.研究表明,去卵巢合并单侧输尿管结扎通过上调肾脏肾素受体表达,诱发肾脏纤维化与炎症反应.     

柴胡皂苷-d防治大鼠肾小球硬化的实验研究

目的:观察柴胡皂苷-d对一侧肾切除加单克隆抗体1-22-3注射造成进行性大鼠肾小球硬化的防治作用。方法:18只大鼠一侧肾切除1d后,尾静脉注射单克隆抗体1-22-3造成大鼠进行性肾小球硬化。随机分为3组,每组6只。第一组给生理盐水作对照,另外两组分别腹腔注射柴胡皂苷-d1.8mg和0.6mg/kg体重/d。在代谢笼内取大鼠造模后第1、4、8、14和21d尿液,并动态观察造模后第1、5、10、14和18d收缩压变化。21d后处死全部大鼠,进行血生化和肾组织光学显微镜检查,并利用RT-PCR和免疫荧光的方法分析了药物对炎症硬化因子TGF-β、I型胶原、"-平滑肌肌动蛋白("-SMA)和炎症细胞在肾小球和肾小管间质表达与分布的影响。结果:柴胡皂苷-d在减轻肾小球病理损害的同时,抑制了TGF-β在肾小球内的表达和a-SMA沿鲍曼氏囊的分布。柴胡皂苷-d治疗组CD8 T细胞和巨噬细胞在肾小球周围和肾小管间质的浸润也明显减轻。结论:柴胡皂苷-d能够有效地防治大鼠肾小球硬化,可能与抑制了TGF-β在肾小球内的表达和炎症细胞在肾小球和肾小管间质浸润有关。     

TGF-β_1、Caspase-3和WT1在肾活检肾小球肾炎组织中的表达及临床病理意义

目的:探讨转化生长因子β1(TGF-β1)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)及肾母细胞瘤抑癌基因蛋白(WT1)在肾活检肾小球肾炎组织中的表达及其意义。方法:采用Envision法对40例肾小球肾炎组织及7例对照组肾组织进行TGF-β1、Caspase-3和WT1免疫组织化学染色标记、分析。结果:TGF-β1、Caspase-3、WT1在各种肾炎组织中均有表达,各实验组与对照组差异有统计学意义(P0.05)。TGF-β1在系膜增生性肾小球肾炎组的表达明显低于膜性肾病组(t=-4.131,P=0.002);Caspase-3在各组别中其表达差异无统计学意义;WT1在大量高蛋白尿组表达低于非大量蛋白尿组(t=-2.130,P=0.046);其余组别差异无统计学意义。WT1的低表达与TGF-β1、Caspase-3的高表达相关。结论:TGF-β1、Caspase-3表达的上调及WT1表达的下调与肾病理改变密切相关,蛋白尿和足细胞减少可能是肾脏病进展的预测因子及肾小球硬化的原因。     

晚期糖基化终产物对人肾小管上皮细胞增殖和凋亡的影响

目的: 研究晚期糖基化终产物(advanced glycation end products, AGEs)对人肾小管上皮细胞株(HKC)的细胞毒性作用.方法:以体外培养的HKC细胞为研究对象,采用MTT法测定不同质量浓度(0、50、100、200、400、800 mg/L) AGEs对HKC生长的抑制作用,应用流式细胞仪分析细胞的凋亡情况,RT-PCR分析不同浓度AGEs处理HKC后其IL-1β,TNF-α,HMGB1基因的转录水平变化.结果:AGEs质量浓度为100、200、400、800 mg/L时分别刺激HKC细胞24和48 h后,均能显著抑制细胞的增殖,且抑制作用具有时间和剂量依赖性.流式细胞仪分析发现,AGEs能促使HKC发生凋亡,凋亡率亦随AGEs浓度的增高而增加.RT-PCR方法检测显示,AGEs使HKC细胞IL-1β、TNF-α、HMGB1基因的表达上调.结论:AGEs可抑制人肾小管上皮细胞的增殖,并诱导其发生凋亡,此作用可能与其上调IL-1β、TNF-α和HMGB1基因的表达有关.     

大鼠急性肾功能衰竭模型功能及形态学改变

目的探讨急性肾功能衰竭(ARF)大鼠模型中的不同时段的肾功能及形态学的变化情况.方法将SD雄性大鼠后腿肌肉注射50%甘油,建构ARF模型,分别在1h,6h,12h,24h,36h,48h,72h,120h测定肾功能,观察肾组织形态学改变.结果建模后血清BUN6h开始上升,72h达高峰;血清Cr1h即开始升高,48h升至最高.肾组织24h后出现近曲小管上皮细胞崩解、坏死、尿液外渗;72h可见损伤部位再生的上皮细胞.结论通过肌肉注射甘油,可形成典型的急性肾小管坏死(ATN)模型.     

基于炎症因子网络探讨升清降浊方阻断CRF进展的机制研究

目的观察升清降浊方对CRF大鼠的作用机制。方法 SD大鼠160只,随机分为4组:即空白组,肾衰模型组,阳性药物对照组,升清降浊方组,每组40只。上述大鼠制作CRF模型,按相应组方给药28 d,采血后处死,取肾组织进行HE染色和电镜观察病理变化;采用全自动生化检测仪,对收集的血清样本进行肌酐(Scr)、尿素氮(Bun)和尿酸(UA)等生化指标检测,并进行用药前后数据对比;采用实时荧光定量PCR方法比较各实验组不同用药前后血液及给药后肾组织中的白细胞介素1(IL-1)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子(TNF-a)基因的m RNA表达水平差异,并取肾组织采用免疫组化和Western-blotting法测定大鼠肾IL-1、IL-6和TNF-a蛋白表达。结果升清降浊方组与空白组的IL-1、IL-6和TNF在两组间统计学检验情况比较,IL-1,IL-6实验组显著高于对照组,TNF实验组显著低于对照组,比值明显下降(P0.05);升清降浊方组与肾衰模型组、阳性药物对照组的肾功能指标情况存在显著性差异有统计学意义(P0.01);肾组织HE染色及IL-1、IL-6、TNF-a、免疫组化染色升清降浊方组与空白组、肾衰模型组、阳性药物对照组均间存在显著性差异。结论升清降浊方通过调控炎症因子IL-1、IL-6和TNF-α蛋白表达,从而阻断病情进展,改善肾功能。     

新型雌激素受体ERα36在张氏肝细胞和人肝癌细胞中的表达比较分析

研究新型雌激素受体ERα36在人肝细胞和肝癌细胞系中的差异表达具有重要的意义.以张氏肝(Chang Liv-er)、Caveolin-1基因沉默细胞株CAV7、人肝癌细胞系SMMC-7721和HepG2为实验材料,通过免疫印迹杂交法观察了不同细胞内ERα36蛋白的表达情况,并与典型雌激素受体亚型ERα66蛋白的表达进行了比较.结果发现:(1)几种细胞中均有ERα36蛋白的表达;(2)与张氏肝细胞相比,Caveolin-1基因沉默时ERα36表达明显增加(P0.01);(3)ERα36在SMMC-7721中表达水平较低,而在HepG2细胞中表达水平较高,与ERα66和Caveolin-1的表达水平相关.提示新型雌激素受体ERα36可能参与Caveolin-1介导的雌激素信号转导,而在肝细胞的恶性增殖过程中发挥一定的作用.     

长吻鮠肾和膀胱的组织结构

长吻鮠的肾脏由肾小体、肾小管、集合管及拟淋巴组织等构成．肾小体在肾前段最多(2．2个／mm^2)，中段次之(约1．7个／mm^2)，后段最少(约1个／mm^2)；拟淋巴组织在肾的中后段逐渐增多；肾小球直径较小，在60～78μm之间；膀胱体积远比一般真骨鱼类大，移行上皮中有大型分泌细胞，最大径达100μm．纵肌和环肌同等发达，厚280～700μm。     

促肝细胞生长素改善单侧输尿管梗阻大鼠肾脏纤维化的研究

目的:研究促肝细胞生长素(hepatocyte growth-promoting factor,pHGF)改善梗阻性肾病肾小管间质纤维化的疗效和机制.方法:17只SD大鼠随机分为假手术组(SOR)、单侧输尿管梗阻组(UUO)和pHGF治疗组.给药组用促肝细胞生长素pHGF(30 μg·kg-1·d-1)大鼠腹腔注射,其余组给予等剂量生理盐水.14 d后收获大鼠.通过测定肾皮质羟脯氨酸含量比较纤维化改变;肾脏病理分析用H.E.和Masson染色,免疫组化检测TGF-β1,α-SMA,FN在肾组织中的表达.结果:肾组织羟脯氨酸定量UUO组明显高于SOR组,pHGF组,pHGF组介于二者之间,P＜0.01;Masson染色SOR组仅在血管和基底膜处有绿染的胶原纤维,UUO组胶原成分增多,而pHGF组较UUO组明显改善,P＜0.01.免疫组化显示pHGF能明显降低梗阻肾组织TGF-β1,α-SMA,FN的表达水平降低,与UUO组比较,P＜0.01.结论:pHGF能有效缓解梗阻性肾病肾小管间质纤维化.     

三七颗粒对STZ诱导的糖尿病模型大鼠足细胞转分化的影响

目的:研究三七颗粒对链脲佐菌素(STZ)诱导的1型糖尿病模型大鼠的肾脏保护作用和足细胞上皮-间充质转分化(EMT)的影响.方法:24只8周龄雄性大鼠,随机选取8只为对照组,其余大鼠1次性腹腔注射质量分数为55 mg/kg的STZ构建1型糖尿病大鼠模型.随后,将糖尿病模型大鼠随机分为模型组和三七颗粒组(8只/组).三七颗粒组大鼠每天给予质量分数为0.4 g/kg的三七颗粒水溶液灌胃,对照组、模型组给予等量蒸馏水灌胃,连续12周.灌胃12周末测定大鼠血糖,检测尿微量白蛋白、尿肌酐、血肌酐及肾脏病理损伤,采用免疫组化法检测肾组织足细胞转分化骨架蛋白(desmin)、肾病蛋白(nephrin)和α平滑肌动蛋白(α-SMA)的表达.结果:与对照组比较,造模72 h后模型大鼠血糖浓度≥16.7 mmol/L,表明1型糖尿病大鼠模型建立成功.与模型组比较,三七颗粒组大鼠的尿微量白蛋白/尿肌酐的值显著降低(P0.05);肾脏系膜增生面积率明显减少,肾脏足细胞足突融合数量明显减少(P0.05);肾组织中的desmin蛋白和α-SMA蛋白的表达显著降低(P0.05);nephrin蛋白的表达显著升高(P0.05).结论:三七颗粒可改善1型糖尿病模型大鼠足细胞的转分化程度,缓解肾脏病理损伤,降低尿微量白蛋白/尿肌酐的值,可能因此而延缓糖尿病肾病的进展.