红豆杉胚源细胞株的培养和紫杉醇的生产

研究了建立适用于紫杉醇生物合成的红豆杉 ( Taxus chinensis)胚源细胞株的方法 .红豆杉成熟种子 ,用自来水冲洗 9d,培养 1 0 d,萌发率可达 1 0 0 %.已萌发的种胚在诱导培养基中培养 6d,愈伤组织的诱导率达 1 0 0 %,使用红豆杉茎源细胞株看护培养诱导出的愈伤组织使愈伤组织的继代成活率提高一倍 .红豆杉茎源细胞株生长 1 5d的条件培养液也能使愈伤组织继代成活率提高 60 %.对建立的胚源细胞株进行了筛选和培养 ,其中细胞株 E2和 E3生长快 ,紫杉醇含量也较高     

东北红豆杉细胞悬浮培养研究

东北红豆杉（Taxus cuspidata sieb et zucc)幼茎诱导的愈伤组织经多次继代培养，选择生长旺盛，紫杉醇含量高的愈伤组织进行细胞悬浮培养，建立了东北红豆杉细胞悬浮系，同时，对影响愈伤组织进行细胞悬浮培养，建立了东北红豆杉细胞悬浮系，同时，对影响愈伤组织继代培养及细胞悬浮培养的条件进行了研究，确定了适合愈伤组织生长的条件以及影响细胞悬浮培养的主要因素。     

8种基因型的高羊茅的组织培养与植株再生

以8个品种的高羊茅下胚轴为外植体，分别在诱导培养基D1、D3、D5和D9上培养，除D1培养基上的愈伤组织的出愈率为51．3％外，其他诱导培养基上的出愈率均为100％．其中在D5培养基上继代3个月左右，获得了胚性愈伤组织，此胚性愈伤组织在F1分化培养基上的分化率达到70％～80％．在较长时间的继代培养中，D3培养基可以保持愈伤组织的高分化率．     

曼地亚红豆杉愈伤组织诱导和继代培养中抑制褐化的研究

对曼地亚红豆杉茎段和叶片的愈伤组织诱导条件和愈伤组织继代培养条件进行了探讨,同时对愈伤组织继代培养中的褐化问题进行了分析.结果表明:具有较强分生能力的新生茎段和叶片能够得到很高的诱导率,与NAA相比,2,4 D在诱导中作用显著.含有3mg/L2,4 D+0 5mg/LNAA+0 2mg/L6 BA的MS培养基有利于愈伤组织的诱导.在继代培养中,2,4 D比NAA对愈伤组织生长的促进作用显著,6 BA对愈伤组织生长的促进作用极显著.在继代培养中发现在第20天就开始转移继代和提高愈伤组织与培养基接触面的氧气供给能够较好克服褐化.在含有5mg·L-12,4 D5+0 5mg·L-16 BA+1g·L-1AC的B5培养基上,愈伤组织细胞增殖倍数最大,达到4 7,褐化也得到部分控制.     

大花君子兰幼嫩子房培养再生植株的研究

以大花君子兰(Clivia miniata)的幼嫩子房组织为外植体,在附加2mg/LKT和lmg/L2,4-D的MS基本培养基上培养,诱导愈伤组织的频率可达90％以上,诱导出的愈伤组织经同一诱导培养基长期继代培养后可以“一次成苗”。胚性愈伤组织在2～6年的继代培养过程中,其增殖生长与苗的分化同时进行,分化频率随着继代培养的延长而上升,经长期继代培养后,已建立了具有持久高分化潜力的胚性愈伤组织无性系,由无性系不断分化产生的大量再生植株,移栽到盆钵中能够成活,并且生长良好。     

籼稻9311成熟胚再生体系

建立9311水稻高效再生体系,将有利于人们以9311水稻为受体进行遗传改良及籼型水稻基因功能的研究．报道了9311成熟胚高效再生途径．以9311成熟胚为外植体,设计了5类（N6DP,N6DA,MSDP,MSDA和MSDAP）共13种不同愈伤组织诱导培养基,比较了9311成熟胚在不同培养基中愈伤组织的诱导以及初始愈伤组织被继代后的表现．结果显示：9311成熟胚在添加2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-D）的所有培养基中都能够形成愈伤组织;将最初被诱导的愈伤组织进行继代培养,在前4类培养基上诱导的初始愈伤组织,不论被分别继代于与原培养基成分相同的新鲜培养基上,还是被继代于MSDAP培养基上,继代后的愈伤组织都相继褐化死亡,而将从MSDAP培养基上诱导的初始愈伤组织继代在MSDAP培养基上,愈伤组织很少出现褐化现象,并且能够较快地增殖．由此表明,MSDAP培养基是9311成熟胚合适的愈伤组织诱导培养基和增殖培养基．采用MSDAP培养基培养,9311水稻成熟胚愈伤组织诱导率达87．5％．分化率为46．7％．再生植株的比例为23．3％、     

葡萄胚性愈伤组织无性系的建立、保持及其植株再生的研究

以葡萄“胜利”品种的花药、花丝为外植体，采用附加２ｍｇ／１６－ＢＡ和０．５ｍｇ／１２，４－Ｄ的改良Ｂ５培养基诱导葡萄胚性愈伤组织，诱导频率约为２０％．具有胚性的愈伤组织，经过五年以上的继代培养，至今无性系仍保持着很强的分化和再生植株的能力．激素成份对胚性愈伤组织的建立、长期保持、胚状体发生及产生丛生芽均有明显影响．利用一种简易高效的试管苗移栽技术，使葡萄试管苗的移栽成活率高达９５％以上．     

玉米胚性愈伤组织诱导和植株再生的研究

采用生产上推广的14个基因型的玉米为材料,由幼胚诱导出胚性愈伤组织并再生植株。其中原齐722×5003等单交种在适宜条件下,胚性愈伤组织的诱导率可达90%,愈伤组织分化苗频率高于80%。在加有1ppm 6BA 和0.1%活性碳的改良 N_b 培养基上,分化出的幼苗长成健壮的小植株。接种幼胚的大小和基因型、基本培养基成份及蔗糖浓度、激素种类和浓度等对胚性愈伤组织的诱导、继代和分化幼苗均有明显的影响。另外,将培养7-8天的幼胚抉碎,可显著提高胚性愈伤组织的诱导率,并能使较大的幼胚产生胚性愈伤组织。随着胚性愈伤组织继代次数的增多,再生植株中畸形苗频率也升高     

高蛋白籼稻品系H28胚培养力的初步研究

以籼稻Ｈ２８优良品系为材料，通过胚培养诱发愈伤组织并继代培养，最适的诱导培养基为ＭＳ＋２ｍｇ／Ｌ ２，４－Ｄ，在此培养基上产生的愈伤组织具有较强的分化能力，将愈伤组织转移到分化培养基，光照培养１７ｄ后，在ＭＳ＋０．２５ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ＋１ｍｇ／Ｌ ＢＡ的分化培养基上，愈伤组织的芽分化率可达４０％。在分化培养基上培养１０ｄ后，将愈伤组织转移到无激素或低浓度激素的培养基上，其分化出苗率有明显的提高。     

铁线莲'Multi-Blue'体细胞胚诱导和植株再生

以铁线莲品种'Multi-Blue'的茎尖为外植体,1/2MS为基本培养基,进行胚性愈伤组织和体细胞胚的诱导及植株再生条件的选择.结果表明:茎尖外植体在1/2MS+TDZ(1.0mg/L)+NAA(0.5mg/L)+2%蔗糖+0.7%琼脂的固体培养基中培养时可形成淡黄色块状至颗粒状愈伤组织,经继代培养后可逐渐形成胚性愈伤组织;体细胞胚诱导以1/2MS+TDZ(0.2mg/L)+IBA(0.1mg/L)+ABA(0.3mg/L)+CH(0.5g/L)为佳,诱导率可达96%;而适宜的体细胞胚萌发培养基为1/2MS+6-BA(0.2mg/L)+IBA(0.05mg/L).体胚再生植株经驯化后,移栽成活率可达80%以上.     

铁线莲‘Multi Blue’体细胞胚诱导和植株再生

以铁线莲品种‘Multi Blue’的茎尖为外植体,1/2MS为基本培养基,进行胚性愈伤组织和体细胞胚的诱导及植株再生条件的选择。结果表明：茎尖外植体在1/2MS+TDZ(1.0 mg/L)+NAA(0.5 mg/L)+2 %蔗糖+0.7 %琼脂的固体培养基中培养时可形成淡黄色块状至颗粒状愈伤组织,经继代培养后可逐渐形成胚性愈伤组织;体细胞胚诱导以1/2MS+TDZ(0.2 mg/L)+IBA(0.1 mg/L)+ABA(0.3 mg/L)+CH(0.5 g/L)为佳,诱导率可达96 %;而适宜的体细胞胚萌发培养基为1/2MS+6-BA(0.2 mg/L)+IBA(0.05 mg/L)。体胚再生植株经驯化后,移 栽成活率可达80 %以上。     

香荚兰愈伤组织的培养及其香兰素形成的研究

香荚兰不同部位的外植体的愈伤组织的诱导率、形成速度及诱导状况明显不同，香荚兰预培养状况、激素的种类与浓度对愈伤组织的诱导与生长均有较大影响，愈伤组织继代培养周期以２８～３０ｄ为宜，薄层层析及高效液相色谱分析结果表明香荚兰愈伤组织及其培养物中存在着香兰素等香味复合物质     

不同外植体和激素对银杏愈伤组织诱导和生长的影响

以银杏胚的不同部位子叶、胚芽、胚轴、胚根为外植体,比较不同外源激素和培养条件对银杏愈伤组织诱导和继代培养的影响,结果表明子叶最易诱导愈伤组织,且在暗条件下诱导效果最好,2,4-D和队影响子叶的愈伤诱导能力;以茎段为外植体,发现生长素为茎段愈伤组织诱导所必需,且NAA诱导效果好于2,4-D;以叶片为外植体,发现生长素中的NAA诱导愈伤效果最好,雌雄叶的诱导能力相同.在愈伤组织生长过程中,NAA是子叶和茎段愈伤组织继代培养必需的,BA对茎段愈伤组织生长速.度无显著影响,但可使愈伤组织敛密,并有利于分化.MS 1 mg/LNAA 0.005 mg/LKT(或BA)的培养基对叶片愈伤组织生长最理想,雄叶愈伤生长较快,光照培养促进愈伤组织生长.     

虎杖愈伤组织的诱导及其白藜芦醇含量的变化

为了利用细胞工程开发虎杖悬浮细胞培养、积累白藜芦醇,必须探索虎杖松散型愈伤组织的培养基及其培养条件.以灭菌虎杖茎段、叶片、茎尖等为外植体,探讨9种激素组合在琼脂和珍珠岩固体培养基上诱导愈伤组织的出愈时间、出愈率、在继代培养中分化状况和白藜芦醇含量变化.结果表明:珍珠岩作为支撑物,诱导的愈伤组织比琼脂好;含有NAA或KT的培养基,诱导形成的愈伤组织在继代中均可分化;①号培养基(MS+2,4-D 4.0 mg/L+6-BA 2.0mg/L+3%蔗糖)对幼叶、茎段和茎尖等都有出愈时间早、出愈率高和愈伤组织生长速度快、松散,适宜于悬浮细胞的培养;愈伤组织白藜芦醇的含量与其外植体来源呈正相关,其中,由幼茎形成的愈伤组织白藜芦醇舍量(鲜重)最高,达到160 μg/g.     

簇毛麦（Haynaldia Villosa）的原生质体培养

簇毛麦的幼胚在含有９μｍｏｌ／Ｌ２，４－Ｄ的ＭＢ固体培养基上诱导产生愈伤组织，在相同的培养基上继代培养两个月后出现淡黄色的致密瘤状愈伤组织．在继代培养过程中，愈伤组织的分化能力丧失较快．继代培养一年左右，改变培养条件，可得到颗粒状及粉粒状愈伤组织．分别用这两种类型的愈伤组织建立悬浮培养细胞系．愈伤组织的形态结构与悬浮系的建立及原生质体培养密切相关．来源于颗粒悬浮系的细胞团块产生的原生质体分裂后可产生体细胞胚，而用粉粒悬浮系分离的原生质体不能持续分裂．     

东北红豆杉愈伤组织诱导及组织培养研究

东北红豆杉扦插苗幼茎愈伤组织的诱导频率B5－B组（86．7％）＞MS－A组（60．2％）＞MS－B组（37．0％）。MS培养基中2，4－D和NAA同时存在时，愈伤组织诱导效果比不含NAA的要好1．5－2倍。MS培养基是 愈伤组织生长的适宜培养基。经过几代的继代培养，愈伤组织的生长周期由35－40d缩短为15－18d。红豆杉树与扦插苗间、树的不同个体间，甚至同一树不同部位的幼茎在愈伤组织诱导及生长方面都存在较大差异。     

香荚兰愈伤组织的培养及其香兰素形成的研究

香荚兰不同部位的外植体的愈伤组织的诱导率、形成速度及诱导状况明显不同，香荚兰预培养状况，激素的种类与浓度对愈伤组织的诱导与生长均有较大影响，愈伤组织继代培养周期以２８－３０ｄ为宜，薄层层析及高效液相色谱分析结果表明，香荚兰愈伤组织及其增减物中存在着香兰素等香味复合特质。     

日本结缕草茎节和愈伤组织再生体系的优化

分别以日本结缕草的成熟胚和茎节为外植体,建立并优化了2套组培再生体系.实验结果表明:利用成熟胚诱导愈伤组织,适宜诱导培养基为MS基本培养基添加2 mg/L 2,4-D配合0.2 mg/L 6-BA,诱导率为42.5%;继代培养可改善愈伤组织状态,增加胚性,其中增加培养基渗透压,并适当添加ABA(0.2 mg/L),可明显提高胚性愈伤组织比率;继代2次后的愈伤组织在3种细胞分裂素6-BA,KT,ZT适当配比的分化培养基上,分化率可达到50%~75%.在以茎节为外植体的组培体系中消毒处理和预培养是比较关键的环节;预培养时MS培养基效果优于1/2 MS,在MS基本培养基中添加0.25 mg/L KT,1.0 mg/L ZT和0.1 mg/L NAA为比较适合的芽诱导培养基,诱导率可达37.9%.同时,比较了两套再生体系的优缺点,为日后日本结缕草的遗传转化奠定基础.     

枸杞花药愈伤组织细胞悬浮培养与植株再生

采用枸杞花药进行离体培养,建立细胞系,诱导植株再生,结果在含不同激素的４种培养基上都诱导出愈伤组织,诱导率在１．７％￣１６．９％,愈伤组织在ＭＳ＋２,４－Ｄ０．５ｍｇ／Ｌ的固体培养基上获得大量单细胞,在液体培养基中获得含有大量胚状体的愈伤组织块,收集悬浮培养物转移到ＭＳ＋６ＢＡ０．２ｍｇ／Ｌ的固体培养基上,胚状体能够萌发形成大量绿色小芽,转入生根培养基（ＭＳ＋ＮＡＡ０．２ｍｇ／Ｌ）中,２０ｄ后得到     

抗松材线虫病马尾松体胚发生与植株再生条件的优化

【目的】为使抗松材线虫病马尾松(Pinus massoniana Lamb.)快速大规模繁殖,对抗性马尾松体细胞胚胎发生和植株再生条件进行优化。【方法】以抗病马尾松未成熟合子胚为材料,探讨胚性愈伤组织的诱导、增殖与维持、分化成熟以及萌发的合适培养条件,并对体细胞胚进行生根诱导,对再生植株进行壮苗培养以及驯化移栽。【结果】以LP为基本培养基,添加2.0 mg/L 2,4-D(二氯苯氧乙酸)和1.0 mg/L 6-BA(6-苄氨基腺嘌呤),抗性马尾松胚性愈伤组织诱导率最高达27.8%。在胚性愈伤组织增殖维持过程中,悬浮培养中的增殖系数和同步化程度都显著高于固体培养,且经过悬浮培养的细胞系分化能力更强。萌发过程中只有少量能顺利分化出根系,未能顺利分化出根的体胚于添加适量 IBA和 NAA的生根培养基中能够更好地生根。壮苗培养过程中,添加0.01 mg/L油菜素内酯有助于体胚苗的生长。体胚苗在驯化移栽时不同大小的苗移栽成活率相差较大,5 cm左右的体胚苗成活率最高达90.3%。【结论】生长素2,4-D和6-BA组合(2.0 mg/L和1.0 mg/L)对抗性马尾松胚性愈伤组织诱导率较好; 悬浮培养后的细胞系更利于诱导体胚,适宜浓度的IBA和NAA(1.0 mg/L和0.2 mg/L)能够促进体胚苗根系生长。在壮苗培养基中添加适量油菜素内酯能够促进抗性马尾松再生植株的生长,待苗长至5 cm左右移栽较好。