ERLIN2蛋白高表达与结肠腺癌患者不良预后的相关性

为了探究ERLIN2蛋白与结肠腺癌发生和发展的关系,利用免疫组化染色法分析了82例结肠腺癌样本以及癌旁组织中的ERLIN2表达水平,根据结肠腺癌中ERLIN2表达水平的高低将82个样本分为ERLIN2高表达组和低表达组.分析ERLIN2表达高低与患者年龄、性别、肿瘤T分期等的相关性以及2组患者的疾病无进展生存期.利用shRNA稳定敲低结肠癌细胞系HCT116和HT29中ERLIN2的表达,分别利用MTT、克隆形成以及Western Blot分析ERLIN2与肿瘤细胞增殖的关系.免疫组化结果显示,在82例结肠腺癌样本中,40例样本的ERLIN2高表达,42例样本的ERLIN2低表达,ERLIN2蛋白高表达与较高的结肠腺癌T分期和较高的临床分期具有相关性(P 0.05),ERLIN2高表达组患者有较差的总生存期和疾病无病生存期.稳定敲低ERLIN2后,结肠癌细胞系HCT116和HT29的增殖速度均显著下降,集落形成数减少,增殖标记物Ki67和PCNA的水平明显下调(P 0.05).由此认为,ERLIN2蛋白在结肠腺癌中的异常高表达与行结肠腺癌根治性切除术患者的不良预后相关,可通过调节结肠癌细胞的增殖水平在肿瘤发展过程中起重要作用.     

硒蛋白硫氧还蛋白还原酶2(TXNRD2)在肿瘤组织中的表达及其对生存预后的影响

目的:以硒蛋白硫氧还蛋白还原酶2基因(TXNRD2)为研究靶点,探讨TXNRD2与肿瘤微环境中的免疫细胞及免疫浸润的相关性,旨在揭示TXNRD2对人类恶性肿瘤发生和发展的影响,为肿瘤的免疫治疗和预后预测提供新的靶点。方法:从癌症基因组图谱(TCGA)数据库,基因型-组织表达(GTEx)数据库,癌症细胞系百科全书(CCLE)和人类蛋白质图集等采集数据,描述33种肿瘤中TXNRD2的表达、预后、免疫微环境、免疫新抗原、肿瘤突变负担(TMB)和微卫星不稳定性(MSI)。采用Kaplan-Meier Plotter分析TXNRD2在肿瘤中的差异生存曲线。采用单因素和多因素COX回归分析皮肤黑色素瘤(SKCM)和脑下级脑胶质瘤(LGG)的总体生存率(OS)的影响因素,采用多因素回归和Nomogram列线图建立SKCM、LGG预测评分模型。结果:TXNRD2在多种肿瘤中普遍高表达,且其可以预测多种肿瘤患者的生存率。同时,TXNRD2表达水平与肿瘤免疫浸润、肿瘤微环境和免疫肿瘤抗原明显相关。单因素COX回归分析显示,TXNRD2、年龄、种族和pTNM-stage是SKCM患者的总生存期的危险因素,T...     

乳腺癌中PTEN蛋白表达及其与ER和PR表达的相关性

目的 探讨乳腺癌中FFEN抑癌基因表达和ER、PR表达之间的关系。方法采用免疫组化S-P法分别检测80例乳腺癌及癌旁组织中PTEN蛋白及ER、PR的表达：结果PYEN蛋白在乳腺癌组织中的阳性表达率显著低于癌旁组织，两者相比差异有显著性（P〈0．01）：PTEN蛋白在淋巴结转移组中的阳性表达率明显低于淋巴结无癌转移组（P〈0．01）。PTEN蛋白分别和ER、PR在80例乳腺癌中的表达呈正相关（P〈0.05；P〈0．05）。结论PTEN蛋白的表达缺失与ER、PR表达失衡在乳腺癌的发生、发展中起重要作用。     

癌基因AVIL在肝癌中的表达及其预后分析

为探究Advillin(AVIL)基因在肝细胞癌(HCC)中的表达水平及其与患者临床特征、预后的关系,回顾性收集76例肝细胞癌患者的癌及配对癌旁组织,利用免疫组化法对AVIL蛋白表达水平进行检测;采用χ~2检验分析AVIL表达差异与患者临床特征的关系,运用Kaplan-Meier进行生存分析,并通过Cox单因素及多因素探索影响患者生存预后的相关因素。结果表明:AVIL在肝细胞癌组织中高表达(P0.01),其表达水平与BCLC分期及Edmondson分级有关(P0.05);AVIL高表达患者的生存时间显著低于低表达患者(P0.05);Cox单因素法提示AVIL表达水平、BCLC分期、肿瘤大小、有无癌栓、有无多灶性、甲胎蛋白(AFP)表达水平、谷草转氨酶(AST)表达水平、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)表达水平、有无肝外转移与肝细胞癌患者预后相关(P0.05);然而Cox多因素法提示AVIL表达水平并不是预测肝细胞癌患者预后的一个独立因素(P0.05)。综上可知,AVIL基因在HCC中高表达并与BCLC分期及Edmondson分级有关,其高表达提示肿瘤恶性程度高、预后不良,但AVIL不作为影响肝癌预后的独立因素,研究结果为寻找肝细胞癌诊断及判断预后的分子标志物提供了新的方向。     

ZP2蛋白在小鼠卵巢颗粒细胞中的表达

目的:在蛋白质水平确定小鼠卵巢的颗粒细胞内是否表达透明带蛋白.方法:制作小鼠卵巢组织的冰冻切片,免疫荧光实验用抗ZP2抗体检测小鼠卵巢颗粒细胞中是否存在ZP2蛋白,荧光显微镜下对卵巢切片的荧光信号拍照,通过灰度分析评估小鼠卵巢的颗粒细胞中的荧光信号,检测小鼠卵巢颗粒细胞内的ZP2蛋白.结果:实验组卵巢切片颗粒细胞区抗透明带ZP2抗体标记的荧光信号灰度值(1. 88±0. 57)明显比对照组(1. 20±0. 11)强.结论:小鼠卵巢颗粒细胞也表达透明带ZP2蛋白.     

Brd4在HPV E2蛋白转录调节中的作用

人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）引起的宫颈癌患者日益增加，而HPVE2蛋白在宫颈癌发生和发展过程中起着重要作用，对其功能尚在研究中，本文就近年对Brd4在HPVE2蛋白转录调节中的作用研究作一综述。     

MAL2在乳腺癌中的差异表达及预后分析

目的:通过数据挖掘分析T细胞分化蛋白2(MAL2)在乳腺癌(BC)中的表达及意义.方法:通过Oncomine、基因表达谱交互分析(GEPIA)及人类蛋白质表达图谱(HPA)数据库分析MAL2在正常乳腺组织和BC组织中的表达情况;应用GEPIA分析MAL2表达与BC预后的相关性;应用STRING分析MAL2表达与上下游蛋...     

人补体调节蛋白基因MCP和DAF的克隆及其在E. coli中的表达

人膜辅基蛋白MCP(membrane cofactor protein)和降解加速因子DAF(decay-accelerating factor)是免疫排斥反应中补体系统活性调节的重要蛋白．以PCR的方法分别从成人肝cDNA文库和胎儿骨髓cDNA文库中扩增得到MCP和DAF基因，克隆入载体pUC19，再以所构建质粒为模板，以PCR的方式在二基因间加入编码柔性连接肽的DNA序列，构建融合基因MCP-DAF，并克隆入pUCl9质粒．将MCP、DAF及MCP-DAF亚克隆至大肠杆菌表达载体pET-32a( )或pET-32b( )，构建表达载体MCP-pET32a，DAF-pET32b及MCP-DAF-pET32a，分别导入E．coli BL21菌株中表达，得到预期分子质量大小的蛋白．     

四膜虫金属硫蛋白MTT2在大肠杆菌中的表达与纯化

金属硫蛋白是一种在多种生物中存在的多功能蛋白,纤毛虫金属硫蛋白在结构和功能上具有物种特殊性。从四膜虫Tetrahymena elliotti中鉴定到一种新的金属硫蛋白基因Te-MTT2,该基因全长273bp,无内含子,编码90个氨基酸。为了分析Te-MTT2的功能,分别构建了重组质粒pGST-Te-MTT2和pSUMO-Te-MTT2并转化大肠杆菌BL21.0.05mmol/L IPTG诱导大肠杆菌BL21/pGST-Te-MTT2和BL21/pSUMO-Te-MTT2表达融合蛋白GST-Te-MTT2和SUMO-Te-MTT2.GST-Te-MTT2的表达量占到总蛋白的16.7%,其中29.9%可溶;SUMOTe-MTT2的表达量占到总蛋白的14.2%,其中76.2%可溶。SUMO-Te-MTT2经Ni柱亲和纯化获得电泳纯的蛋白。85℃,15min温浴后,SUMO-Te-MTT2蛋白在10mmol/L PBS溶液中稳定存在。结果表明SUMO表达系统提高了Te-MTT2的可溶性表达,Te-MTT2的表达纯化为进一步分析其生物学功能奠定了基础。     

PKM2和ALDOA在胃癌中的表达与病理特征的相关性

目的 检测M2型丙酮酸激酶(PKM2)和醛缩酶A(ALDOA)在胃癌组织中的表达,分析胃癌组织中PKM2和ALDOA的表达水平与其病理特征之间的关系。方法 应用免疫组织化学法检测30例胃癌组织中的PKM2和ALDOA的表达水平,并与临床病理特征的关系进行相关性分析。结果 免疫组化显示,PKM2在胃癌组织中的高表达率为57%,ALDOA的高表达率为60%;在浸润深度T₁～T₂胃癌组织中的PKM2高表达率低于T₃～T₄组,在Ⅰ～Ⅱ期中的高表达率低于Ⅲ～Ⅳ期胃癌,低分化组低于高分化组(P<0.05);ALDOA的高表达率在浸润深度为T₁～T₂的胃癌组织中低于T₃～T₄组,在低分化组中低于高分化组(P<0.05);但胃癌组织中PKM2和ALDOA的表达与患者的性别、年龄、肿瘤大小、有无淋巴转移和有无神经、血管侵犯等因素无明显关联(P>0.05)。结论 PKM2和ALDOA在胃癌组织中的高表达与胃癌的发生...     

S100β 蛋白与缺血性脑卒中预后的相关性

目的通过对急性缺血性脑卒中(IS)患者血清S100β蛋白含量的分析,结合Rankin量表(mRS)评分,探讨S100β蛋白与急性缺血性脑卒中预后的相关性,为临床医师评估神经功能预后及死亡提供依据,制定诊疗方案.方法 IS患者92例,于发病24 h及7 d测定血清S100β蛋白水平,发病6个月后进行改良Rankin量表(mRS)检测.结果 IS患者发病24 h内血清S100β蛋白浓度升高,7 d后浓度下降,且与6个月后改良的mRS评分成正相关(r=0.732,P0.05; r=0.687,P0.05).结论血清S100β蛋白浓度变化能反映IS患者的病情变化趋势,进而推测患者6个月后神经功能转归结局.     

PCNA和Bcl-2蛋白在牙龈组织中的表达

给实验动物狗分别行金合金、不含Be的镍铬合金、含Be的镍铬合金全冠修复，建立实验动物模型．采用ICP-MS（电感耦合等离子体质谱仪）检测戴冠前后牙龈组织中金属离子的质量分数，同时应用免疫组化EnVision二步法检测PCNA（增殖细胞核抗原）、Bcl-2（B细胞白血病脯巴瘤基因2）蛋白在牙龈组织中的表达．结果表明，镍铬合金全冠戴用后，牙龈组织PCNA，Bcl-2蛋白表达明显，而金合金全冠戴用后表达不明显．FENA蛋白表达率与Ni，Cr，S及Be离子质量分数正相关，而Bcl-2蛋白表达率与离子质量分数无明显的相关性．     

Survivin基因在胃癌组织中的表达及其与凋亡的相关性研究

目的研究胃癌组织中Survivin基因的表达及其与凋亡的关系。方法应用免疫组织化学SP法检测30例正常胃粘膜及120例胃癌组织中Survivin基因的表达;采用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记（TUNEL）技术,检测其凋亡指数。结果30例正常胃粘膜组织Survivin基因均不表达,胃癌组织中Survivin阳性率为62．5％（75／120）,二者有显著性差异（P〈0．01）;Survivin基因表达与组织分化程度和TNM分期密切相关（P〈0．05）。胃癌组织凋亡指数（AI）和TNM分期、组织分化程度密切相关（P〈0．05）。Survivin基因表达水平与凋亡指数呈显著负相关（P〈0．01）。结论Survivin基因在胃癌的发生发展过程中可能起重要作用。Survivin基因的表达可抑制胃癌细胞凋亡、促进胃癌细胞增殖。     

C-反应蛋白与冠状动脉粥样硬化相关性研究

目的研究C-反应蛋白与冠状动脉粥样硬化斑块的相关性.方法选择89例原发性高血压患者,应用B型超声测所有病例颈动脉内膜粥样斑块,用免疫学方法测定血液中C-反应蛋白浓度.分析斑块与C-反应蛋白浓度的关系.结果粥样斑块Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ级C-反应蛋白浓度高于粥样斑块0级(P<0.05).结论原发性高血压患者血液中C-反应蛋白浓度增高与颈动脉粥样硬化关系密切.     

棉花GhRGPL2基因分离鉴定及其在组织发育和逆境胁迫中的表达调节

在棉花cDNA文库中分离了1个RGP蛋白基因同源序列,命名为GhRGPL2,编码含有359个氨基酸的RGP蛋白.随后,分离获得GhRGPL2基因全序列,基因结构分析表明:它含有3个内含子,分别位于第106和107密码子之间,第190个密码子内部,第246和247密码子之间.Northern杂交分析表明.GhRGPL2在幼根和胚珠中表达量较高.而且,该基因的表达受胚珠发育调节.GhRGPL2基因在胚珠发育早期开始表达,在开花后10 d达到表达峰值,随后基因表达活性逐渐下降.在高盐和干旱胁迫下,GhRGPL2在棉花幼根中的表达量升高.     

Twist1蛋白在溃疡性结肠炎及其相关性结直肠癌的表达及意义

目的:探讨Twist1在溃疡性结肠炎(UC)、溃疡性结肠炎相关性结直肠癌(uc CRC)患者肠粘膜和UC模型细胞中的表达差异及其在UC癌变的可能机制.方法:收集我院进行肠镜检查的患者肠道标本及临床资料共59例,其中正常对照组13例,UC组35例和uc CRC组13例.采用免疫组化法检测Twist1蛋白表达情况.构建UC细胞模型,采用Western blot法检测Twist1和Bcl-2蛋白在不同时间点的表达差异.结果:UC组和uc CRC组中Twist1的表达率较正常对照组明显升高(P0.05),同时在uc CRC组中的表达率高于UC组(P0.05).Twist1蛋白在UC和uc CRC组织的表达与年龄、性别以及uc CRC肿瘤发生部位无明显关系(P0.05).在UC细胞模型中,Twist1蛋白表达量高于正常对照组(P0.05),Bcl-2的表达较正常对照组也有所提高(P0.05).结论:Twist1在"UC→uc CRC"的转变过程中起促进作用,其机制可能与抑制细胞凋亡等密切相关.     

红色荧光蛋白DsRed2基因在大肠杆菌中的表达和观察及其在本科实验教学中的应用

用PcR方法从质粒pDsRed2-1中扩增获得DsRed2,亚克隆到pMD19-T载体上,然后酶切将DsRed2分别插入到原核表达载体pET-Trx和pGEX-4T1上,转入E.coli BL21(DE3)中,用IPTG诱导表达.在LB平板培养基上或液体培养基中直接观察菌体颜色,最后用SDS-PAGE检测DsRed2蛋白的表达.结果显示构建的重组载体pET-Trx-DsRed2和pGEX-GsT-DsRed2在E.coli中成功表达,且不形成多聚体.LB平板培养基上和IPTG诱导24h后的液体培养基中都能直接观察到红色荧光,说明DsRed2可以作为原核表达系统的报告基因.     

凋亡基因Survivin在宫颈鳞癌中的表达及其相关性

目的:探讨不同分期宫颈鳞癌组织中Survivin基因表达的特征及其临床意义.方法:应用免疫组化法(S-P法)及图像分析技术检测凋亡基因Survivin在38例宫颈鳞癌的表达情况.0期9例、Ⅰ b期10例、Ⅱa期7例、Ⅱb期7例、Ⅲa期5例,将0期及Ⅰ b期合并为早期,Ⅱa期～Ⅲa期合并为晚期.结果:在早期和晚期宫颈鳞癌组织中均有凋亡基因Survivin的阳性表达,但表达强度不同,早期宫颈鳞癌组织中Survivin PU值为(20.65±4.57),而晚期宫颈鳞癌组织中Survivin PU值为(24.94±5.64),两者比较有统计学差异(P<0.05).结论:Survivin基因在宫颈鳞癌组织中异常表达与宫颈鳞癌的发生及临床分期相关.     

BHRF1蛋白在口腔鳞癌中的表达及其意义

目的:观察EB病毒BHRF1蛋白在口腔鳞癌的表达情况,探讨其临床意义.方法:收集临床标本共70例,其中正常口腔黏膜10例、口腔鳞癌60例,应用免疫组化SP法检测所有标本中BHRF1蛋白表达水平,并对结果进行统计分析.结果:口腔鳞癌组中BHRF1蛋白的阳性表达率为53.33%(32/60),显著高于正常口腔黏膜组(P0.05).其中,口腔鳞癌高分化组的阳性表达率为59.26%(16/27),中低分化组为48.48%(16/33),两者之间无统计学差异(P=0.815).结论:BHRF1参与口腔鳞癌的发生发展过程.