HPLC指纹图谱及化学模式识别鉴别菟丝草药材

通过菟丝草药材的高效液相色谱指纹图谱,结合化学模式识别,鉴别菟丝草药材的产地来源;同时,测定了其中3种黄酮类组分的含量.采用Agilent HC-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以乙腈-0.3%磷酸为流动相,在柱温30 ℃,流速1.0 mL/min进行梯度洗脱,在360 nm检测波长下,获取菟丝草药材的HPLC图谱,在不同产地的样品中,获取了12个共有峰.通过菟丝草的HPLC指纹图谱,运用相似度分析,并经过化学模式识别即聚类分析和主成分分析法,可将样品按来源分成两类,不同样品表现出不同的特性.相似度分析和化学模式识别结果相互印证,均将样品分为两类.同时对药材中金丝桃苷、紫云英苷和槲皮素含量进行了测定,其相关系数均为0.997以上,重复性、稳定性、精密度均小于3%,平均加标回收率均在95%以上.结果表明,HPLC指纹图谱与化学模式识别结合,可准确、综合地对菟丝草药材进行产地鉴别,并确定了3种黄酮类有效成分的含量.     

G010617-07江苏太子参品系资源及其深层开发研究

鉴定证书编号苏科鉴字[2000]第223号 　　组织鉴定单位江苏省科学技术厅 　　权属单位中国药科大学 　　地址南京市童家巷24号(210009) 　　鉴定日期 2000.5.11 　　该成果收集了江苏、安徽、山东和福建产的14个药材样品(10个栽培品,4个野生品),对它们进行了植物形态和生药性状比较,发现不同产地样品有一定的差异性,染色体核型研究表明种质具多种性;对各地产品进行了TCL分析,同工酶分析、氨基酸、微量元素、多糖和环肽类成分分析研究比较;在药效学研究中,证明各地太子参均具有清除自由基作用,江苏宜兴等8个产地的太子参对小鼠脾虚及细胞免疫功能低下均有改善作用.为扩大利用资源,该成果还对太子参的地上部分作了氨基酸含量分析,结果表明氨基酸种类及总氨基酸含量与块根相似. 　　……     

不同产地白花蛇舌草活性成分含量的比较研究

探讨产地对白花蛇舌草(Hedyotis diffusa Willd.)活性成分的影响.用苯酚-浓硫酸法测定白花蛇舌草中多糖含量及用RP-HPLC测定白花蛇舌草中氨基酸的含量.结果表明:不同产地白花蛇舌草中多糖含量有极显著差异,其中福建和河南产的白花蛇舌草多糖含量较高,云南、广西、海南、广东、江苏和湖南的含量均较低.白花蛇舌草所含氨基酸中,各组分之间的含量不同,差异极显著,其中赖氨酸含量最高,苯丙氨酸含量最低;每一组分的含量在产地之间都有变化,不同组分含量变化程度不同,含量变化最大为苯丙氨酸,变异系数为67.98%,甘氨酸的含量变化最小,其变异系数为22.42%;白花蛇舌草中总氨基酸和各类氨基酸的含量在不同产地也有变化,氨基酸总量在产地之间差异极显著,进行栽培种植的产地,其白花蛇舌草中氨基酸总量较高,表现为:湖南>河南>广西>江苏>广东>海南>云南>福建,白花蛇舌草野生生长的产地,其白花蛇舌草中必需氨基酸占氨基酸总量的百分比较大,必需氨基酸、半必需氨基酸和支链氨基酸占氨基酸总量的百分比大小分别为:云南>海南>福建>广东>湖南>广西>河南>江苏;河南>广西>福建>广东>海南>湖南>江苏>云南;广西>河南>福建>海南>广东>湖南>云南>江苏.     

聚类分析法对不同产地半夏药材质量的综合评价

目的:综合比较、评价不同产地半夏药材的质量。方法:采用电位滴定法、紫外分光光度法、硫酸-蒽酮法和酸性染料比色法对不同产地半夏药材中的总有机酸、氨基酸、多糖和生物碱含量进行测定,并采用聚类分析法对测定结果进行综合评价。结果:不同产地的半夏药材中总有机酸、氨基酸、多糖和生物碱的含量差异较大。结论:半夏药材的质量受产地影响较大,经聚类分析可将39份来源不同的半夏药材分为Ⅲ类,第Ⅰ类产地主要为云南、贵州地区,这类药材中总有机酸、氨基酸、多糖和生物碱的含量普遍偏低,综合质量较差;第Ⅱ类产地为甘肃,质量居中;第Ⅲ类产地为四川,这类药材中各主要成分的含量较高,综合质量较好。     

秦艽药材与饮片标准汤剂的质量传递性研究

建立了15批秦艽药材与饮片标准汤剂的HPLC指纹图谱,流动相为乙腈-0.1%醋酸,检测波长为254 nm。同时,结合含量测定、出膏率,进行药材、饮片标准汤剂的质量传递性研究。药材、饮片标准汤剂的指纹图谱与各自对照图谱相似度良好,以龙胆苦苷为参照峰,确定共有峰5个,指认5个色谱峰。15批药材、饮片标准汤剂平均出膏率分别为20.43%、19.71%,龙胆苦苷、马钱苷酸从药材到饮片的平均转移率为80.56%、80.98%,未出现离散数据。结果表明,采用物质群整体控制的指纹图谱与出膏率、含量测定指标相结合的模式,建立的药材、饮片标准汤剂的质量控制及传递性研究,可为经典名方以及中药配方颗粒研究提供参考。     

反相高效液相色谱法评价烟台苹果中游离氨基酸

利用反相高效液相色谱法对烟台境内多地红富士苹果中游离氨基酸含量进行检测和分析.色谱条件为:Capcell PAK C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,3μm),以10 mmol/L磷酸氢二钠和10 mmol/L硼酸钠的缓冲溶液(pH 8.2)为流动相A,乙腈-甲醇-水(45∶45∶10,V/V/V)为流动相B,梯度洗脱,流速1.5 mL/min,外标法定量,检测波长为338 nm和262 nm.在10¹ 000 pmol/μL浓度范围内,17种氨基酸线性关系良好(R2>0.999),峰面积的精密度(RSD):1.47%1 000 pmol/μL浓度范围内,17种氨基酸线性关系良好(R2>0.999),峰面积的精密度(RSD):1.47%³.84%,回收率91%3.84%,回收率91%¹11%.8种烟台红富士苹果中游离氨基酸总量为47.0111%.8种烟台红富士苹果中游离氨基酸总量为47.0¹40.9μg/g,必需氨基酸的含量比例为6.6%140.9μg/g,必需氨基酸的含量比例为6.6%²9.5%,不同产地苹果中氨基酸含量在极差0.05水平上有显著性差异,对测定值分别进行聚类分析和主成分分析,8种不同产地的苹果样品可分为3类.     

RP-HPLC法测定不同产地两面针中氯化两面针碱含量

采用反相高效液相色谱法,以R eliasil C18(4.6 mm×250 mm,5μm)为色谱柱,乙腈-水-三乙胺-磷酸(25¨75¨1¨1)为流动相,在271 nm检测波长的条件下,分析广西邕宁、武鸣、靖西、平果、马山、昭平、大新、那坡、扶绥、龙虎山,共10个不同产地的两面针药材中氯化两面针碱的含量。结果表明,广西区内10个不同产地的两面针药材样品中,氯化两面针碱的含量为0.36%~1.03%,含量差异比较大,其中以邕宁(1.03%)、靖西(0.71%)、马山(0.69%)、武鸣(0.67%)等地的含量较高,昭平(0.36%)、那坡(0.44%)等地的含量较低。该方法测定两面针中氯化两面针碱的平均回收率为97.55%,RSD为1.15%(n=6)。     

五指毛桃指纹图谱的高效液相色谱-质谱联用研究

建立了高效液相色谱-电喷雾串联质谱(HPLC - ESI - MSn)法确定五指毛桃指纹图谱的方法.采用C18柱,水(A)-甲醇(B)溶液为流动相,梯度程序洗脱.4个产地的五指毛桃样品分离得到16个“共有蜂”,通过质谱鉴定出10种成分,通过样品“共有峰”含量及特征峰,以评价不同产地五指毛桃的优劣,并为五指毛桃药材的质量...     

不同产地文冠木中槲皮素与总黄酮含量的比较研究

采用反相高效液相色谱法(HPLC)和紫外分光光度法测定不同产地文冠木中槲皮素和总黄酮的含量.结果显示HPLC测定槲皮素含量在0.40μg/mL-8.0μg/mL范围内与峰面积线性关系良好(r=0.9992),平均加样回收率为99.00%,(RSD=2.44%);7个不同产地的文冠木中槲皮素含量为0.0088%-0.0143 %,总黄酮以芦丁计在8μg/mL-48μg/mL范围内与吸光度呈良好的线性关系(r=0.9993),平均加样回收率为101.3%,(RSD=1.45%);7个不同产地的文冠木中总黄酮含量为3.27%-10.57%.不同产地的总黄酮含量分布与槲皮素基本相似,其中以内蒙古鄂尔多斯产文冠木中的槲皮素和总黄酮含量最高,安徽毫州产的最低.该方法准确、灵敏、稳定,可用于文冠木药材的质量监控与评价.     

不同产地海蒿子、羊栖菜中无机元素的含量分析与评价

 通过分析不同产地海蒿子、羊栖菜中无机元素含量及分布特征,以期为海藻药材有害元素限量标准制定、海藻资源的综合开发利用提供理论依据。海藻样品经灰化或消解处理后,采用微波消解-电感耦合等离子体-原子发射光谱法、碘离子选择性电极法分析了不同产地海藻药材的30 种无机元素,并运用主成分分析法对海藻药材进行了综合评价。结果表明,不同产地海藻含有19~26 种无机元素,无机元素平均含量按由高到低的顺序依次为K>Ca>Na>Mg。25 批海藻样品中,有害元素Cu 平均含量为7.83 mg/kg,Hg 为1.54 mg/kg,Pb 为3.07 mg/kg,Cd 为3.02 mg/kg,As 为109.35 mg/kg,Al 为1434.26 mg/kg。海蒿子、羊栖菜中大部分元素无显著性差异。主成分综合评分法显示,山东烟台海蒿子样品H₄、H₃和浙江温州羊栖菜样品Y₅、Y₆综合排序较高,表明在仅考虑无机元素含量的情况下,这4 种海藻样品品质较好。     

2个海域野生三疣梭子蟹肌肉中营养成分比较

通过分析比较2个不同海域野生三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)肌肉的营养成分,对其营养价值进行综合评价。采用国家标准方法测定肌肉中的水分、灰分、粗蛋白、粗脂肪、脂肪酸、氨基酸、矿物质元素、核苷酸、甜菜碱和胆固醇,根据联合国粮农组织(FAO)标准进行营养品质评价,并针对营养组成、风味物质含量同产地之间的关联进行对比分析。结果表明:2个不同海域的三疣梭子蟹在蛋白质、氨基酸、核苷酸、甜菜碱等营养组成上差异显著。浙江台州海域野生雄蟹肌肉蛋白质含量、必需氨基酸含量和总氨基酸含量均高于山东日照海域野生雄蟹,差异显著(P＜0.05);浙江台州海域野生三疣梭子蟹肌肉中肌苷酸含量、甜菜碱含量均显著高于山东日照海域(P＜0.05)。研究发现,2个海域野生三疣梭子蟹肌肉中营养成分含量存在一定差异,并对其风味及营养价值产生影响,可能与环境因素、遗传基因、摄食饵料等因素有关。     

蕨麻猪猪肉营养成分研究

对甘南州12头健康蕨麻猪的猪肉样品进行营养成分测定.用常规方法测定常量营养素,等离子体发射光谱仪分析矿物元素,氨基酸分析仪测定氨基酸并计算AAS.结果表明:与甘肃白猪猪肉相比,甘南蕨麻猪猪肉水分含量高12.32%(P0.01)、干物质含量低26.55%、脂肪含量低49.45%(P0.05)、蛋白质高7.02%、灰分低8.8%.K、Fe、Cu、Zn含量分别为385.50mg/100g、1.06mg/100g、0.27mg/100g、10.40mg/100g,蕨麻猪猪肉氨基酸评分较高.甘南蕨麻猪猪肉细嫩多汁、低脂肪、优质蛋白,矿物质含量丰富,适口性好,营养价值高,具有很高的开发价值.     

山羊FGF5基因cDNA分子克隆及序列分析

采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,首次从山羊脑组织总RNA中扩增出成纤维细胞生长因子5(FGF 5)基因的cDNA编码序列.通过对序列的分析表明,克隆的山羊FGF 5cDNA编码序列与其他动物的序列具有高度的同源性.与G enbank中人和小鼠序列比较,山羊与人和小鼠的FGF 5核苷酸序列的同源性分别为91%和87%.编码的氨基酸序列比较,山羊和人的相似性为87%,山羊与小鼠的相似性为83%.如FGF s家族的其他成员一样,山羊的FGF 5蛋白也有一信号肽序列.山羊FGF 5基因外显子在编码氨基酸时,对同义密码子的使用表现有强烈的偏好性.不同物种对同义密码子使用的偏倚程度与偏好类型各不相同,也具有种属特异性.山羊FGF 5基因所编码的蛋白质中,20种氨基酸的含量差异很大,极性氨基酸含量高于非极性氨基酸含量.     

鸡血白蛋白的制备与性质研究

本文采用硫酸铵-辛酸钠法制备鸡血白蛋白,并比较了几个工艺条件,结果以等体积（鸡血浆）饱和硫酸铵、辛酸钠浓度0.0017g／ml、pH5．0为最佳．白蛋白经毛细管电泳为一条谱带;紫外光吸收测定在280nm处有最大吸收峰;氨基酸组分分析有17种氨基酸;红外光谱分析（IR）具有蛋白质的特征吸收峰;荧光光谱分析激发峰在280nm处,荧光峰在313nm处;差示扫描量热分析（DSC）在60．5℃处有一宽大的吸热峰．     

离子对液相色谱法测定食品馅料中的二氧化硫脲

建立了高效液相色谱法测定食品馅料中二氧化硫脲的检测方法。样品中的二氧化硫脲经稀盐酸超声提取后,以AthenaC18-wp柱（250mm×4．6mm,5um）为分析柱,甲醇和0．0025mol／L四丁基硫酸氢铵溶液为流动相,采用二级管阵列检测器,在269nm波长下进行检测,紫外光谱定性,外标法定量。二氧化硫脲在0．004×0．120g／L质量浓度范围内与其峰面积呈良好线性关系,线性相关因子R=0．9999。以3倍信噪比所相当的含量值为检出限,方法最低检出限为5×10-4／kg。4种空白样品在2个不同加标水平下的回收率均在103％～112％之间,相对标准偏差RSD均小于4％。该方法可用于食品馅料中二氧化硫脲的检测分析。     

谷氨酸发酵废醪菌渣营养分析及其RNA的提取

以豆粕、花生粕、棉籽粕为对照,测定了谷氨酸发酵废醪菌渣的主要营养成分,并用浓盐法提取其RNA。结果表明,谷氨酸发酵废醪菌渣蛋白质质量分数为430 g/kg,仅次于豆粕,高于花生粕和棉籽粕;游离氨基酸和赖氨酸含量明显高于3个对照样品,分别为对照样品的6~7倍和7~8倍;游离氨基酸包括必需氨基酸赖氨酸(Lys)、缬氨酸(Val)和亮氨酸(Leu)等5种,而对照样品中游离氨基酸只2~3种;粗纤维、粗脂肪和总糖含量明显均低于对照样品;谷氨酸发酵废醪菌渣中RNA质量分数为68.8 g/kg,高于啤酒酵母菌。提取得到的RNA制品纯度达到67.7%,与市售酵母RNA纯度相近。     

新型偶氮染料中间体2-氨基-5-氨甲基-1-萘磺酸合成条件的研究

2-氨基 - 5 -氨甲基 - 1-萘磺酸 (氨甲基吐丝酸 )是一种新型活性偶氮染料中间体 ,文献报道大多采用首先把 2 -氨基 - 1-萘磺酸的氨基乙酰化保护 ,然后氨甲基化及水解反应的合成方法 ,其不仅合成步骤长 ,而且需要在高压反应釜中进行。这样的制备条件在实验室操作以及进一步中试及工业化的生产中存在很大局限性。针对这种情况 ,本研究工作对反应条件进行系统的研究后 ,改用直接将 2 -氨基 - 1-萘磺酸氨甲基化合成 2 -氨基 - 5 -氨甲基 - 1-萘磺酸 (氨甲基吐丝酸 )的方法 ,去掉了氨基乙酰化反应 ,使反应步骤简化 ;去掉了高压操作 ,使整个反应过程容易操作。改进的合成方法反应条件温和 ,整体收率稳定 ,维持在 87.2 % ,获得了较好结果。     

苏铁（Cycas revoluta）种子核仁中氨基酸成分分析

对苏铁种子核仁中氨基酸成分进行分析,苏铁种子中含有17种氨基酸,其中总氨基酸（TAA）和必需氨基酸（EAA）含量分别为8．16S2．91．其两种氨基酸的比例与标准蛋白质存在一定的差距,但是苏铁种子药用氨基酸和鲜味氨基酸的含量分别为68g和27．7老,对苏铁种子的开发利用具有重要意义．