发根农杆菌A4转化黄瓜获得发状根再生植株

研究以黄瓜栽培品种津研四号为试材,比较了培养基中添激素对自然生根及发状根诱导的影响。无菌苗子叶及下胚轴经发根农杆菌Ａ４侵染后２周诱导出发状根,发状根在无激素的ＭＳ筛选培养基上能够自主生长,在附加ＢＡ２．０ｍｇ／Ｌ,ＮＡＡ０．２ｍｇ／Ｌ的筛选分化培养基上分化出不定芽,ＧＵＳ染色表明转化植株呈阳性反应。     

发根农杆菌A4对骆驼刺的遗传转化

用野生型发根农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｒｈｉｚｏｇｅｎｅｓ）Ａ４菌株感染骆驼刺（Ａｌｈａｇｉ ｐｓｅｕｄｏａｌｈａｇｉ）无菌苗的子叶和下胚轴,１５ｄ左右在感染部位诱导出发根。将发根切段放在附加２．０ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ和０．５ｍｇ／Ｌ６ＢＡ的ＭＳ培养基上诱导愈伤组织,在３．０ｍｇ／Ｌ６ＢＡ的ＭＳ培养基上进一步分化形成完整植株,冠瘿碱检测结果表明,不仅在初生发根中,在次生发根、来源于发率的愈     

发根农杆菌A_4菌株转化红豆草途径及转化组织植株再生研究

将生长２０ｄ的红豆草（ｏｎｏｂｒｙｃｈｉｓｖｉｃｉａｅｆｏｌｉａ）无菌苗的下胚轴切成０．５～１ｃｍ片段，倒插在含２，４－Ｄ的固体ＭＳ培养基上预培养两天；然后转至无激素培养基上，用发根农杆菌Ａ４，（ＡｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｒｈｉｚｏｇｅｎｅｓＡ４）菌悬液感染切面，１０ｄ后长出许多发状根。这些发状根在无激素培养基上继代培养，生长旺盛，且产生许多次生侧根，将次生根切段后，在含２，４－Ｄ的ＭＳ培养基上诱导愈伤组织，进一步分化形成完整植株，初生根、次生根、愈伤组织，以及再生植株叶片均含有农杆碱和甘露碱，而未转化的对照愈伤组织则没有。另外对Ｃｕ２＋促进发状报生长的作用进行了研究。     

不同培养基对芦荟茎再生植株形成的研究

以芦荟茎为材料,经消毒后,接种晃同的培养基上,材料经初代培养,继代培养和生根培养,最后形成再生植株,可以发现,培养基不同,芽的分化率有显著不同,结果以ＭＳ＋６ＢＡ２＋ＮＡＡ０．２组合的培养基效果最好。     

超声波辅助的发根农杆菌对黄瓜的遗传转化

由于超声波处理可在外植体上产生许多微小伤口,从而提高农杆菌与外植体之间的接触面积,提高农杆菌对外植体的转化频率。用野生型发根农杆菌（Agrobacterium rhizogenes)A4菌株感染黄瓜（Cucumis sativus L.) 无菌苗的子叶和下胚轴,建立了黄瓜的发根遗传转化体系。同时,对超声波处理时间、外植体放置方向、预培养时间、外植体类型、乙酰丁香酮的添加与否等影响因素进行了研究。结果表明,采用外植体在添加0．5mg/L NAA和2mg/L 6-BA的MS培养基上预培养4d,超声波处理2s,共培养3d,在预培养共培养期间子叶上表皮向下可以取得最佳的转化效果,发根诱导率为94．7％。乙酰丁香酮对发根诱导频率影响不明显。冠瘿碱检测表明,发根确定能合成农杆碱。     

不同外植体和激素对哈密瓜植株再生的影响

近年来对哈密瓜离体培养的研究越来越多 ,已用子叶、离体胚、花药和原生质体诱导出了再生植株。一般情况下 ,哈密瓜的不定芽多以高浓度的 6 ＢＡ诱导外植或原生质体产生愈伤组织 ,然后通过继代培养产生不定芽 ,但诱导率很低 ,且畸形和玻璃化苗多 ,难以获得再生植株。在诱导生根方面 ,多采用在生根培养基上使用低浓度的生长素类物质 ,如ＩＡＡ、ＩＢＡ和 2 ,4 Ｄ等。但在外植体和激素对哈密瓜再生植株形成中的作用研究较少。我们以ＭＳ为基本培养基 ,添加不同浓度的 2 ,4 Ｄ和 6 ＢＡ(ＭＳ + 2 ,4 Ｄ 0 .5 ,ＭＳ + 6 ＢＡ 0 .2 ,ＭＳ +…     

发根农杆菌转化胀果甘草的研究

利用发根农杆菌R1601对药用植物胀果甘草(Glycyrrhiza inflat Bat)进行转化,诱导其产生发根.在发根诱导过程中,分别用不同菌液浓度、不同浸染时间对胀果甘草子叶、胚轴进行转化处理,统计、比较各条件下的发根率,为发根进行液体悬浮培养以及随后的规模性培养提供数据基础.结果表明,用稀释2倍的茵液浸染子叶8 min时,发根诱导率最高,为56.49%.     

发根农杆菌对烯茉莉插条不定根发生的影响

发根农杆菌R1601促进烯茉莉插条不定根发生,以A600为1的菌液促进效果最好,最适处理时间为60min,插条经100mg/LIBA处理1h后,再用菌液浸泡1h,插条不定根发生的效果好于单独菌液的处理或单独IBA的处理,经菌液处理的插穗叶光合速率增加,不定根内IAA水平提高。     

发根农杆菌A4对荞麦的遗传转化

用发根农杆菌Ａ４对荞麦的下胚轴和子叶进行离体转化,得到ＲｉＴ－ＤＮＡ表达的发状根。不同的培养环境对发状根的和生长有一定的影响,表现为发状根在液体培养基上比在固体培养基上生长更为迅速,且在培养基中含一定浓度的Ｃｕ＾２＋有助于发状根的形成。     

发根农杆菌介导云南萝芙木的遗传转化

用发根农杆菌A4分别感染云南萝芙木幼嫩的真叶和茎段,诱导出毛状根,并对毛状根进行了离体培养, PCR检测转基因毛状根和HPLC检测毛状根中利血平的含量．结果表明:这两种外植体的转化频率及诱导出的毛状根差异极大,幼嫩的真叶叶片比茎段更适合作转化外植体用．PCR检测结果表明,诱导毛状根的基因rolB和 rolC整合到云南萝芙木基因组中,HPLC含量检测表明毛状根中利血平的含量比自然根中利血平的含量有显著的增加,因此可以作为利血平来源生产的有效途径之一．     

抗生素敏感型番茄转化及再生体系的建立

研究了诱导不定芽分化及根发生的最佳激素配比,并进行了抗生素的敏感实验,确定了所试番茄品种为卡那霉素敏感型,6.5 mg/L的卡那霉素即可抑制外植体的再生.在工程农杆菌的侵染中,优化了预培养时间、菌液浓度、侵染时间、共培养时间以及筛选方式等相关转化条件,以期对此番茄品种建立起高效稳定的遗传转化及组织再生体系.     

根癌农杆菌介导苜蓿体胚转化及转基因植株再生

用含质粒载体pCAMBIA2301(带有受CaMV35S启动子调控的GUS基因和nptⅡ基因)的根癌农杆菌Agrobacterium tumefaciens转化晋南苜蓿Medicago sativa L.cv.Jinnan的体胚组织,发现负压处理有利于提高转化频率(可达35%),3批共158个体胚切块的转化实验共获得具有卡那霉素抗性的再生植株15株,经组织化学染色和分子检测,证实GUS基因已整合到转化植株基因组中,在芽、叶片、叶柄和根等组织中均有表达,并在土壤栽培过程中保持稳定的表达.     

多因子正交试验对发根农杆菌生物波培养基的筛选

用Ｌ１６（４＾５）正交设计考察了牛肉浸膏、酵母浸出汁、蛋白胨、蔗糖及琼脂５种ＶＥＢ细菌培养基成分对发根农杆菌Ａ４的生物波形成的影响,主差分析结果显示,各因子对菌落直径的影响都极显著,它们的作用大小依次为：琼脂,蛋白胨,蔗糖,牛肉浸膏,酵母梁出汁,各因子对生物波成环数的影响也都极显著,它们的作用大小依次为：蔗糖,牛肉浸膏,蛋白胨,酵母浸出讦,琼脂,筛选出的最佳波动波动培养基为２．０ｇ／Ｌ牛肉浸膏＋０     

花生再生和转化体系的初步研究

以4d龄的泉花10号花生小叶伤为外植体，从25种培养基中筛选出MS＋AgNO3(1.0) 6-BA5.0 NAA2.5培养基为最佳长芽点培养基，MS＋AgNO3(1.0) 6-BA5.0 NAA1.0培养基为最佳长愈伤组织培养基；以4d龄小叶，子叶，胚轴，及子叶与胚轴相连处为外植体在MS＋AgNO3(1.0) 6-BA5.0 NAA2.5培养基上培养，结果小叶是诱导长芽的最佳外植体；研究还发现儿茶酚对农杆菌侵染力有较大的影响。