考马斯亮蓝法测定蛋白质含量中的细节问题

蛋白质含量测定是生物学实验的一项重要内容。该文采用考马斯亮蓝法测定了植物中可溶性蛋白质含量,介绍了考马斯亮蓝法测定蛋白质含量的原理、试剂、仪器设备和操作步骤,着重介绍了实验操作过程中应注意的细节,分享了本实验室积累的经验。实践表明,该实验使得蛋白质含量测定结果的准确性和稳定性大大提高,拓展了学生的专业知识,提高了学生的实验技能。     

考马斯亮蓝G-250染色法测定草乌中可溶性蛋白质含量

采用考马斯亮蓝G-250染色法对草乌药材中可溶性蛋白质含量进行了测定,建立了快速、灵敏的测定蛋白质的方法.结果表明,考马斯亮蓝G-250染色法简单、迅速,且相对较为准确,是测定低浓度蛋白质含量的有效方法.     

豆腐柴蛋白质及氨基酸含量测定

实验采用考马斯亮蓝G—250比色法和茚三酮比色法分别测定恩施产豆腐柴可溶性蛋白质和总氨基酸的含量，结果表明：豆腐柴叶中蛋白质含量为115μg/g，氨基酸含量为628.34μg/g．     

考马斯亮蓝法快速测定乳品中蛋白质含量

采用考马斯亮蓝G-250染料染色法对市售乳品中蛋白质进行测定,在595 nm波长处测定溶液的吸光度。实验结果表明,标准蛋白质在10～80 μg/mL之间呈现良好的线性关系。该法简便快速、灵敏度高、重现性好,是测定乳品中蛋白质的有效方法。     

用考马斯亮蓝测定植物粗提液中可溶性蛋白质含量方法的研究

用木立芦荟的叶片为材料,以牛血清白蛋白为参照,对蛋白质与考马斯亮蓝G-250结合后的光吸收稳定性,不同的蛋白质溶剂、植物粗提液等对光吸收的影响进行了研究。结果表明：蛋白质与考马斯亮蓝结合后,在595nm处的光吸收值不很稳定,通过降低仪器的灵敏度可以提高光吸收的稳定性；以0.02～0.5mol·L~(-1)pH为6.8的磷酸缓冲液、0.1～1.0mol·L~(-1)pH为6.8的Tris-HCI缓冲液为蛋白质溶剂,对蛋白质与考马斯亮蓝结合后的线性无影响；芦荟叶片粗提液中的其他成分对其中可溶性蛋白质与考马斯亮蓝结合后的线性亦无显著影响。     

交联聚合物中蛋白质含量的测定

蛋白质含量的测定是蛋白质研究中必不可少的手段.一般可利用蛋白质的物理性质,如折射率、比重、紫外吸收等进行初步的测定.进而采用化学方法进行严格的定量分析.以往的化学分析方法,如定氮法、双缩脲法[1]、Folin-酚试剂法[2~3]、考马斯亮蓝法[4]等,均是对蛋白质的溶液进行测量     

蛋粉中蛋白质含量测定方法的比较

用５种方法和２种溶剂对鸡蛋粉中可溶性蛋白质含量进行了测定。结果表明，考马斯亮蓝Ｇ－２５０比色法是一种比较适用的测定方法，溶剂以ＮａＣｌ溶液好于水。     

忍冬不同器官3种活性成分的测定

研究忍冬不同器官绿原酸、维生素C和可溶性蛋白质含量，对进一步了解忍冬药用价值具有重要的意义。采用高效液相色谱法测定绿原酸含量；2，6-二氯酚靛酚滴定法测定维生素C含量；考马斯亮蓝G-250法测定可溶性蛋白质含量。结果显示忍冬花和花蕾中绿原酸、维生素C和蛋白质含量均较高。     

聚丙烯酰胺凝胶电泳快速显色方法的研究

通过对聚丙烯酰胺凝胶电泳的固定方法、时间、染色液种类、染色方法及蛋白灵敏度的研究,确定了以10%三氯乙酸为固定液,室温固定10min的固定方法;染色液为：考马斯亮蓝G-250、95%乙醇和10%磷酸,染色时间为15min;蛋白质灵敏度与考马斯亮蓝R-250相当,达到0.1μg。     

光照对考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度影响的研究

通过考马斯亮蓝法测定在不同光照和孵育时间下对已知不同浓度的牛血清蛋白的影响.结果显示,在0~100μg/ml蛋白质浓度标准曲线测定范围内,黑暗环境测定蛋白质误差率最小.在黑暗和弱光条件下高浓度蛋白质组(50~75μg/ml)误差率最低显著低于低浓度蛋白质组(5~25μg/ml).在黑暗和弱光条件下浓度在50~75μg/ml范围内的蛋白质与染料孵育30 min以内时误差率较低且较稳定.因此,采用考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度时,环境光照、待测样品浓度以及染料与蛋白质孵育时间等是决定实验结果准确性的重要因子.     

考马斯亮蓝法快速测定菜籽粕中可溶性蛋白质的含量

采用考马斯亮蓝G-250染色法对菜籽粕中可溶性蛋白质含量进行测定,在波长595 nm处测定其吸光度.实验表明,可溶性蛋白质含量在10~100μg/mL之间呈现良好的线性关系,通过此法测得菜籽粕中可溶性蛋白的平均含量为5.30%.方法简便快速、灵敏度高、重现性好,是测定菜籽粕中可溶性蛋白质的一种有效方法.     

超滤法分离浮萍多糖的工艺

探索超滤法分离浮萍中免疫活性成分浮萍多糖的工艺.通过煎煮、超滤、脱蛋白、乙醇沉淀等步骤对浮萍多糖进行提取分离,硫酸-苯酚法和硫酸-蒽酮法测定提取液和样品中的总糖含量,考马斯亮蓝G250比色法测定其蛋白质含量.得到浅褐色粉末,纯度53.5%,蛋白质含量1.2%,收率6.43%.该方法可以简单、快速、有效地对浮萍多糖进行分离.     

基于误差传递规律的手机比色法测定坚果中水溶性蛋白质

考马斯亮蓝-G250和牛血清蛋白反应生成蓝色络合物,蛋白质浓度与产物的颜色深度存在对应关系.在误差传递规律基础上利用手机比色法,考察了光照和手机类型等影响取样的外在因素,建立了蛋白质含量测定的新方法.实验表明,在最优测定条件下,间接测量值XB与蛋白质浓度在1～7 μg/mL范围内存在明显的线性关系,标准样品测定的相对标准偏差为3.47%(n＝8),检出限为0.67 μg/mL.对花生、葵花籽、南瓜子等坚果的水溶性蛋白质进行加标回收实验,回收率在100.3%～107.5%之间,该方法简便快捷、灵敏度高、回收率好,可用于坚果中水溶性蛋白质含量的测定.     

偶氮胭脂红G分光光度法测定蛋白质的研究

 偶氮胭脂红G在酸性介质中与蛋白质迅速结合,生成一紫红色复合物,该复合物在570nm处有最大吸收,且其吸光强度与牛血清蛋白(BSA)、人血清蛋白(HSA)、免疫球蛋白(IgG)的质量浓度至少在15.0μg/mL范围内有线性关系.依此建立的测定蛋白质的光度分析新方法不受蛋白酶和大部分其它共存物质的影响,具有较好的选择性和较宽的线性范围,同时方法快速、稳定,用于人血清样品中总蛋白含量的测定,所得结果与测定蛋白质的经典方法考马斯亮蓝G-250法基本一致.     

Tween-80增敏过氧化氢氧化考马斯亮蓝催化荧光法测定痕量锰

基于室温下考马斯亮蓝可发射强而稳定的荧光,Mn2 能灵敏催化过氧化氢氧化考马斯亮蓝使体系的荧光增强,据此建立了Tween-80增敏过氧化氢氧化考马斯亮蓝催化荧光法测定痕量锰的新方法.其线性范围为0.01-2.00(ng/mL),工作曲线的回归方程为△F=2.306 100.6 C Mn2 (ng/mL),相关系数r=0.9989,检出限为7.5×10-12g/mL.本法成功用于自来水和江水中痕量锰(II)的测定.同时探讨了催化过氧化氢氧化考马斯亮蓝离子缔合物荧光反应机理.     

南充产半夏的蛋白质提取与鉴定研究

该文以南充产半夏的干燥块茎为研究对象,采用植物活性蛋白质提取试剂盒提取其总蛋白,通过用考马斯亮蓝快速染色法测定蛋白质浓度,然后用12%的SDS-PAGE变性胶分析南充产半夏的蛋白质组分,再用蛋白质质谱仪测定半夏蛋白质的类型和分子量,结果得到南充产半夏特有的两种约22kD和15kD的含量较高的蛋白质组分,且发现暂未被相应数据库收录。这为南充产半夏组分的类型与功效的进一步研究奠定了基础。     

一种适合杨树叶片的蛋白质提取方法

高质量的蛋白样品制备是进行双向电泳的前提条件.杨树叶片中因含有丰富的多酚、色素、多糖等物质,给蛋白质的提取带来了困难.为了找到一种适合杨树叶片的蛋白质提取方法,以南林895杨为实验材料,采用三氯乙酸-丙酮沉淀法对杨树叶片蛋白质进行提取.对所提取的蛋白分别用考马斯亮蓝染色法和银染法进行检测,得到了良好的双向电泳图谱.     

催化NaIO4氧化考马斯亮蓝G褪色光度法测定痕量锰

基于弱酸性条件下高碘酸钠能氧化考马斯亮蓝G褪色,锰对此褪色反应具有显著的催化作用,由此建立了催化高碘酸钠氧化考马斯亮蓝G褪色光度法测定痕量锰的新方法.锰含量在0.80～16.0μg/L范围内与△A值符合比尔定律,线性回归方程△A=0.0175 C_(Mn~(2+))(μg/L)0.014,r=0.9997,检出限为5.31×10~(-10)g/mL。该方法用于茶叶和人发中痕量锰的测定,结果满意。     

广西容县沙田柚与蜜柚营养成分的比较研究

[目的]对广西容县沙田与柚蜜柚两种柚子的蛋白质、总糖、维生素C、脂肪及灰分含量进行比较,为本地柚子资源的开发利用提供参考依据．[方法]分别用考马斯亮蓝法、蒽酮比色法、钼酸铵法及酸水解法测定蛋白质、总糖、维生素C及脂肪含量,高温灰化法测定灰分．[结果]实验表明沙田柚4种成分（蛋白质、总糖、维生素C、脂肪）含量均比蜜柚高,但蜜柚灰分含量较沙田柚高[结论]．总体上看沙田柚比蜜柚营养成分高．     

佳辐占和广陆矮4号水稻叶片蛋白质的双向电泳比较研究

应用双向电泳技术研究比较两种不同品质水稻(佳辐占和广陆矮4号)叶片的蛋白质组分的差异.两种水稻叶片提取的蛋白质的双向电泳图谱斑点清晰,形态规则.采用考马斯亮蓝染色获得约400个斑点,银染图谱约800个斑点.两种水稻的蛋白质图谱考马斯亮蓝染色图谱存在5个显著差异点,银染图谱存在11个显著差异点.