假单胞菌引起罗氏沼虾黄鳃、黑鳃病的研究

对高密度养殖条件下患细菌病的罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)作了初步研究,病虾症状为食欲下降,黄鳃或黑鳃、断须、断腿,有的甲壳上有黄色或黑色的斑块,取上述典型症状的病虾鳃部和肝胰腺组织进行细菌分离、纯化和保种,经鉴定,该病原菌为恶臭假单胞菌和铜绿假单胞菌．将分离菌进行回接感染,发现有很强的致病作用,且产生与自然发病相似的症状,从再感染的病虾体内分离的细菌经鉴定也为恶臭假单胞菌(P．putida)和铜绿假单胞菌(P．aeruginosa),由此可认为它们是此次发病的病原菌．药敏实验发现,铜绿假单胞菌对环丙沙星、氟哌酸氯和庆大霉素的敏感性较强恶臭假单胞菌对庆大霉素,环丙沙星、卡那霉素、强力霉素和新生霉素较为敏感．     

热带植物花卉红掌叶腐病病原菌的分离与初步鉴定

用PDA和肉汤蛋白胨琼脂培养基平板,从云南省西双版纳红掌叶腐病病灶上分离到6株形态不同的细菌,经初步鉴定,其中5株分别属于伯克霍尔德氏菌属(Burkholderia),假单胞菌属(Pseudomonas),黄单胞菌属(Xanthomonas),棒杆菌属(Corynebacterium),另外1株其属分类地位还不确定.     

刚竹秆褐腐病病原形态及分子鉴定

刚竹秆褐腐病在南京地区发生较普遍,影响竹林生长。其主要危害刚竹属的淡竹(Phyllostachys glauca)、黄槽刚竹(Ph. viridis f. houzeauana),其中以淡竹受害最为严重。笔者通过对刚竹秆褐腐病病组织分离培养、人工接种试验、分离菌形态学观察及采用通用引物ITS1/ITS4扩增,对扩增出的约559 bp的片段进行ITS序列分子鉴定,最终将在淡竹和黄槽刚竹等上发生的病原鉴定为木贼镰刀菌(Fusarium equiseti (Corda) Sacc.)。     

腐浆中细菌的鉴定及其生物膜活性研究

纸机运转过程中的腐浆障碍主要是由系统内微生物所引起的。从UPM常熟纸厂PM2纸机机架的腐浆里筛选得到10株细菌N1、N2……N10,通过对其形态特征、生理生化特性以及16SrRNA序列分析,初步鉴定N1、N3为鞘氨醇单孢菌(Sphingomonas azotifigens)、N2为腐败假单孢菌(Pseudomonas putrefaciens)、N4为未培养细菌(uncultured bacterium)、N5为Filimonas lacunae、N6为Asticcacaulis excentricus、N7为少动假单孢菌(Pseudomonas paucimobilis)、N8为Siphonobacteraquaeclarae、N9为不解糖鞘氨醇单孢菌(Sphingomonas pruni)、N10为Flectobacillus Larkin。将分离后的10株细菌分别回接到含细小纤维的回接试样中,检测腐浆细菌的生物膜对细小纤维的絮聚情况,结果显示N5、N8、N10对细小纤维有很大的絮凝沉淀作用,由此推断这3株细菌的生物膜活性强,是腐浆中的有害细菌。     

基于传统分离和高通量测序的健康和患锈腐病西洋参根际土壤微生物群落分析

探究健康和患锈腐病西洋参根际土壤微生物的群落多样性和可培养菌株分离，以期为西洋参锈腐病发生机制及防控提供参考。利用传统分离技术和高通量测序技术分析健康和患锈腐病西洋参的根际土壤，探究其微生物的群落组成及多样性变化。经由传统分离技术合计得到24株细菌和25株真菌，优势菌属包括假单胞菌属(Pseudomonas)、芽孢杆菌属(Bacillus)和青霉菌属(Penicillium)。高通量测序结果显示，健康和锈腐病土壤中细菌群落均以蓝细菌门(Cyanobacteria)和变形门(Proteobacteria)为主；患锈腐病组有所降低的为蓝细菌门(Cyanobacteria)、软壁菌门(Tenericutes)和变形菌门(Proteobacteria),大幅上调的为拟杆菌门(Bacteroidetes)、酸杆菌门(Acidobacteria)、放线菌门(Actinobacteria)与厚壁菌门(Firmicutes)。健康和锈腐病土壤内所含的真菌群落以子囊菌门(Ascomycota)为主，被锈腐病感染后有所上调的为担子菌亚门(Basidiomycota)、子囊菌门(Ascomycota)与被孢...     

甘肃陇西黄芪根腐病病原菌的分离与鉴定

黄芪根腐病是严重影响黄芪产量的病害之一,为确定其致病的主要致病菌,本实验对采自甘肃陇西的黄芪根腐病病株以组织分离、离体根部接种、盆栽实验法进行病原菌的分离和致病性测定.结果获得了5株黄芪根腐病致病菌,并通过培养特征、显微形态及rDNA ITS序列分析综合鉴定,确定菌株G2、G3、G4为茄腐镰刀菌(Fusarium solani),G5、G6为尖孢镰刀菌(Fusarium xoysporum).     

牛蛙"白内障"病病原的初步研究

从患"白内障"病的牛蛙肝脏、心脏、眼睛等器官中分离到A 1 L、B 4 H、B 2 E3株细菌.各以108CFU/mL的浓度进行肌肉注射健康蛙,剂量为0.2mL.发现B 2 E分离菌可使实验蛙100%产生与自然发病相似的"白内障"症状,死亡率达70%,可确认该菌为"白内障"病的致病菌.该分离菌大小为(0.3～0.5)μm×(0.6～0.8)μm,短杆状,极生单鞭毛,革兰氏阴性,无芽孢,无荚膜,主要生理生化特性是葡萄糖产酸、产气;氧化酶、赖氨酸脱羧酶、精氨酸脱羧酶阳性;鸟氨酸脱羧酶阴性;能在TCBS培养基上生长、培养基呈绿色,但不能在6%NaCl蛋白胨水上生长.根据其主要生理生化特性,初步鉴定为气单胞菌(Aeromonassp.).药敏试验结果表明,该菌对链霉素等敏感,对氨苄青霉素、青霉素G、先锋霉素V等不敏感.     

平菇栽培中病原菌的调查研究

防治病虫害是搞好食用菌生产的重要环节。作者于1986～1988年在新乡市(县)范围内进行了平菇栽培中病原菌的调查研究。分离、鉴定出病原细菌3属:病原真菌13属。调查发现,平菇栽培中病原菌极易发生且具有规律性:在菌种培植和菌丝发育阶级最易污染杂菌,主要是真菌和细菌;在子实体形成和成熟采收阶段,除部分杂菌继续蔓延外,害虫逐渐盛行,给平菇生产造成极大危害。由于平菇特有的栽培方式和食用特点,采取“以防为主、综合防治”的方法,更具有特殊意义。     

桃杏果实内生细菌多样性分析及软腐病原菌的分离与验证

为了解桃和杏采后果实内生细菌群落组成,并对潜在病原细菌进行筛选与验证,为其贮藏保鲜、软腐病害防治等相关研究奠定基础,利用高通量测序技术,对新疆地产油桃和库车小白杏采后果实内生细菌群落组成进行分析;同时,利用微生物传统分离培养,采用16S rDNA序列分析对潜在病原细菌进行分子鉴定,并利用离体接种法和再分离法,对相关菌株的致病能力进行验证。研究结果表明,油桃和库车小白杏内生细菌共包括128个操作分类单元,涉及9个门117个属,其中变形杆菌门(Proteobacteria)为绝对优势菌门,其次为厚壁菌门(Firmicutes)和拟杆菌门(Bacteroidetes);在属水平上,油桃以泛菌属(Pantoea)、芽孢杆菌属(Bacillus)、假单胞菌属(Pseudomonas)、拟杆菌属(Bacteroides)等菌属为优势菌群;库车小白杏以葡糖杆菌属(Gluconobacter)、泛菌属(Pantoea)、克里斯滕森菌(Christensenella)、普氏菌属(Prevotella)等菌属为优势菌群。通过分离筛选获得了1株潜在采后致腐病原细菌XAAS-P1,经分子鉴定初步确定其归属于泛菌属(Pantoea)。XAAS-P1对采后油桃和库车小白杏均具有较强的致腐能力,并呈现出与自然软腐一致的病状。接种4d后,XAAS-P1致腐率可达100%,与阴性对照组相比,接种组样品的软腐现象提前了1d。对接种组病灶中的微生物进行再分离、鉴定,结果显示,菌株XAAS-P1是病灶组织中的绝对优势菌群,证明了菌株XAAS-P1是导致采后油桃和库车小白杏软腐变质的主要病原细菌。研究表明,桃和杏果实中存在丰富多样的内生细菌,其内生泛菌XAAS-P1可导致采后油桃和库车小白杏的软腐变质。     

周口地区油菜核盘菌分离鉴定及侵染分析

从河南省周口市采集感染菌核病的油菜,对菌核进行分离和鉴定.采用单孢分离法分离得到1个单菌系,对该单菌系进行了菌落和显微形态分析,初步鉴定该菌系为Sclerotinia sclerotiorum.利用真菌通用引物ITS1和ITS4对所分离的单菌系内转录间隔区(inter transcribed spacer,ITS)进行PCR扩增,得到540bp大小的片段,经过克隆测序和在GenBank中进行BLASTn分析,发现与部分S.sclerotiorum的ITS序列同源性达到100%,进一步鉴定该分离菌株为S.sclerotiorum.进化树分析显示,该菌系与来自意大利、日本及我国武汉地区的菌系聚为一支,说明周口菌系来源广泛.对该菌系侵染油菜叶片的细胞学和组织化学分析表明,该菌系对耐病和感病油菜品种的细胞反应相似,都没有H2O2积累,差别主要表现在耐病油菜上菌丝长度较短.     

平菇黄萎病病原菌的分离、初步鉴定及防治

对平菇黄萎病的病原菌进行了分离和培养 ,人工感染时获得了相似的症状 ,根据其形态和生理生化特性鉴定为假单胞菌 ,该菌的主要特性为杆状 ,G-,极生单鞭毛 ,过氧化氢酶、氧化酶和V .P反应为阳性反应 ,氧化葡萄糖产酸。并对黄萎病的防治作了初步的探讨     

桑青枯病病原G12-9内切葡聚糖酶基因的克隆和分类

桑青枯病是一种土传性细菌病害,从广东省桑园发生青枯病的桑树根部分离得到1株病原菌G12-9;经鉴定确定该菌为青枯菌（Ralstonia solanacearum）,该病原菌在TZC固体培养基上呈圆形及不规则圆形,菌落中央呈现淡红色,革兰氏染色成阴性。对G12-9分离株内切葡聚糖酶基因的克隆、序列测定及聚类分析结果表明,桑青枯菌G12-9内切葡聚糖酶属于糖基水解酶家族12。青枯菌最重要的致病性分泌系统为Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型分泌系统,内切葡聚糖酶属于细菌Ⅱ型分泌系统,内切葡聚糖酶对于青枯菌的定植及寄主植物的致病性有着非常重要的作用,明确该酶在糖基水解酶家族的分类地位对桑青枯病的防治具有重要意义。     

鳜暴发流行病病毒性病原研究

患病鳜肾脏、脾脏、肝脏、心脏、鳃中发现二十面体病毒粒子,肾脏和脾脏是其感染主要器官．成熟病毒粒子直径１５０ｎｍ,核心球状,直径１０５ｎｍ．受感染细胞肿大,直径为正常细胞３～４倍,细胞核萎缩,为正常细胞核直径１／３．病毒粒子部分纯化后,经腹腔人工感染,第７天开始死亡,１０ｄ内死亡率为１００％,表现与池塘养殖状态相同症状,并在人工感染鳜肾和脾中电镜观察发现大量相同病毒粒子,命名为传染性脾肾坏死病毒（ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓｓｐｌｅｅｎａｎｄｋｉｄｎｅｙｎｅｃｒｏｓｉｓｖｉｒｕｓ,ＩＳＫＮＶ）．     

毛竹枯梢病的发生发展规律研究

通过人工接种和野外定点试验，竹喙球菌（Ceratosphaeria phyllostachydis)在福建能以菌丝、子囊孢子及分生孢子三种形态越冬。1-3级感病侧枝上形成的有性子实体是主要的初侵染原，子囊孢子萌发后从伤口或自然孔口侵入当年新竹，它主要靠雨水溅散作用传播。在整个生长季节都能释放子囊孢子，以5-7月份释放量最多。温度、降雨量和降雨日是影响病害发生发展的主要因素。6月下旬出现症状，8月上旬至9月上旬为发病盛期，10月下旬以后基体停止信展，病菌进入越冬，毛竹枯梢病是一种具有多侵染点的病害。     

吉林地区病毒性肝炎分型分析

目的 了解吉林地区病毒性肝炎的型别分布及感染状况．方法 采用ELlSA法检测．结果 男性检出39例，女性检出21例，检出HAV23例，占38％；HBV25例，占42％，NCV6例，占10％；HVD未检出，HEV4例，占7％，HGV2例，占3％．乙型肝炎检出率最高，其次为甲型肝炎、丙型肝炎、戊型肝炎、庚型肝炎．丁型肝炎检出率为0．单纯感染56例；1例甲、丙、庚三重感染，1例为甲、乙二重感染．结论 甲、乙型肝炎仍为吉林地区人群感染的主要病原．     

毛竹基腐病病原的研究

毛竹基腐病是于１９７５年在江苏省常熟市首次发现的新病害，现已知浙江，安徽，江西、湖北和四川均有分布，国外至今未见报道，经多年的分离培养试验，从病株组织内获得４种真菌和１种细菌的纯培养，通过竹笋期的室内，室外和有伤，无伤的多次反复接种和再分离试验，结果表明：这种细菌对毛竹不有任何致病力，茁芽短梗霉和交链孢对毛竹只有很轻微的致病力，仅造成局部组织的坏死，暗孢节菱孢和异孢镰刀菌对毛竹有极强的致病力，并能     

Enhanced late blight resistance of transgenic potato expressing glucose oxidase under the control of pathogen-inducible promoter

To engineer crop disease resistance by utilizing natural defense mechanism that was expressed in the incompatible host-pathogen interactions is expected to result in a durable and broad-spectrum resistance. In order to prove this viewpoint, we amplified the coding region of the glucose oxidase (GO) gene from Aspergillus niger via PCR and fused it to the pathogen-inducible promoter, Prp1-1. The chimeric gene was cloned into a plant expression vector and conjugated into Agrobacterium. Twenty-three transgenic potato plants were obtained by Agrobacterium-mediated transformation. The integration of GO gene was confirmed by Southern hybridization and the GO gene expression was identified with KI-starch color reaction. Phytophthora infestans inoculation revealed that the expression of the chimeric transgene was induced by pathogen infection. Most of the transgenic plants exhibited various degrees of enhanced disease resistance. Four of them had lesion sizes reduced to less than half of the non-transgenic controls. One plant showed disease resistance of the hypersensitive response. These results testified the feasibility of our strategy of expressing GO transgene under the control of the disease-inducible promoter in engineering crop disease resistance.     

鲟源豚鼠气单胞菌分离与强弱毒株病原生物学比较研究

从患慢性出血败血综合症的杂交鲟和达氏鳇病鱼标本中分离到一株优势菌,优势率80%,经回感和重分离确定为致病菌,并经生理生化和16SrDNA检测为豚鼠气单胞菌,命名为ZZF071029（简称ZF1029）,以豚鼠气单胞菌弱毒株ZF1029和强毒株XL2-T为研究对象,进行了菌落形态学、运动性实验、溶血性实验、小鼠致死试验、角膜毒力实验、药物敏感性实验等病原生物学相关实验。实验结果证明,病原菌运动性、溶血性、小鼠致死力、角膜毒力与菌株毒力和致病力正相关,并与所致杂交鲟和达氏鳇出血败血综合症急、慢性程度和致死率一致。     

鳖“黑斑病”病原的初步研究

对鳖黑斑病的病原分离、人工感染、生理生化、药物敏感试验等进行了研究和探讨,确定该病的致病菌为嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila）,该病的治疗宜采用环丙沙星、庆大霉素、氟嗪酸等。     

不同MHC-B单倍型SPF鸡对禽白血病的抗性研究

目的探索不同MHC-B单倍型SPF鸡对禽白血病(Avian leukosis,AL)的抗性差异,为建立AL抗性和易感鸡系提供实验依据。方法选择纯合G1、G5、G6鸡系及杂合G8鸡系雏鸡进行人工感染白血病病毒A亚群(Avian leukosis virus,ALV-A)RAV-1毒株实验,G8系雏鸡(6羽)作为对照。攻毒后对各鸡系的死亡率、病变率、血液中抗体水平以及外周血淋巴细胞的病毒载量等与抗性相关指标进行动态评估与统计学分析,最终确定抗性较强和较弱的鸡系。结果 G5系病变率和死亡率均明显高于其它攻毒鸡系,G1系最低,G6和G8系居中;G1系在攻毒后第5周开始,抗体效价一直高于其它鸡系,而G5系则最低,并且在攻毒后第8周至11周和第15周至18周,G1系的抗体效价显著高于G5系(P0.05);G1系的病毒载量在攻毒后第7周至15周,低于其它鸡系,而G5系自攻毒后第9周至13周,极显著高于G1系(P0.01)。结论 G1系在感染ALV后,死亡率较低,病变轻微,抗体保护力较强,且病毒的增殖较慢,因而其对AL具有较强的抗性,而G5系则相反较为易感。本研究不仅为建立AL抗性较强和较易感的鸡系提供了实验依据,而且对进一步阐明鸡主要组织相容性复合体(Major histocompatablity complex,MHC)多态性与AL抗病性的关系有重要作用。