布鲁菌病的研究进展

布鲁菌病(Brucellosis)是由革兰阴性布鲁杆菌(Brucella)引起的一种全球范围内广泛分布的人畜共患慢性细菌性传染病.该病是全身性传染病可侵犯到人体的各个组织器官,故感染者的临床表现多种多样,需要与许多非感染性和感染性疾病相区别.近年来由于国际旅行和感染农产品在非疫区的输入,使得该病又重新成为全球关注的焦点.文章就布鲁菌病的临床表现、并发症及防治做一综述.     

和林格尔县布鲁氏杆菌病疫情及畜牧养殖模式调查

布鲁氏杆菌病是一种人畜共患的传染病,既严重影响畜牧业发展,也威胁人类健康.本研究对和林格尔县的布鲁氏杆菌病流行现状和个体畜牧养殖模式进行了调查研究,结果发现:农牧民仍是主要患病人群."重点职业人群"与对照组在预防意识、生活习惯、卫生条件、职业暴露方面存在诸多显著性差异.在布鲁氏杆菌病防控中应注意农牧民的作用.     

布鲁菌DK63426基因缺失株的构建及生物学特性研究

目的本研究构建了羊布鲁菌16M DK63_426基因缺失株,分析其在细胞内的生存繁殖和致炎能力。方法以羊布鲁菌16M株基因组为模板,利用融合PCR技术将DK63_426基因的上下游同源臂和卡那抗性基因融合,连接到克隆载体上,通过基因重组构建布鲁菌16M DK63_426基因缺失株16MΔDK63_426,观察布鲁菌亲本株16M和16MΔDK63_426的生长变化趋势,建立侵染小鼠巨噬细胞RAW264. 7模型,检测亲本株和缺失株16MΔDK63_426在胞内的生存能力,检测IL-6、TNF-α细胞因子释放量。结果成功构建了16MΔDK63_426;在体外相同培养条件下该缺失株与亲本株生长趋势相似,培养12 h即进入对数生长期,30 h进入平台期; 16MΔDK63_426在浸染RAW264. 7细胞12 h胞内存活率极显著低于亲本株(P0. 01),在浸染8 h时IL-6的分泌量缺失株组均显著低于亲本株(P0. 05),TNF-α的分泌量缺失株组均显著高于亲本株(P0. 05),在侵染12 h时IL-6的分泌量缺失株组均极显著低于亲本株(P0. 01),TNF-α的分泌量缺失株组均极显著高于亲本株(P0. 01)。结论 DK63_426基因的缺失可影响布鲁菌的胞内存活,影响相关炎症因子的表达,为布鲁菌感染机制的研究奠定理论基础。     

羊布鲁菌外膜蛋白Omp22的原核表达及鉴定

布鲁菌外膜蛋白Omp22与布鲁菌致病性相关,又可诱导机体免疫反应。为进一步研究Omp22的特性,对其进行原核表达,并初步鉴定。根据Genbank序列,设计并合成羊布鲁菌外膜蛋白Omp22引物。以羊布鲁菌M5株基因组DAN为模板,PCR扩增并克隆入原核表达载体pGEX-4T-1中。酶切鉴定正确后,测定序列;将重组质粒pGEX-4T-1-Omp22电转化大肠杆菌DH5α中,诱导表达,并采用羊布鲁菌兔免疫血清,Western-blot初步检测融合蛋白GST-Omp22表达情况和免疫学特性。结果PCR扩增出约660bp目的条带,与预期相符;酶切鉴定和测序结果表明,成功构建了pGEX-4T-1-Omp22原核表达载体;优化诱导温度,结果表明,在25℃诱导表达时,该融合蛋白大部分出现在上清中;Western-blot结果证实,GST-Omp22可与羊布鲁菌兔免疫血清特异性结合。说明成功构建了Omp22蛋白原核表达载体并进行了可溶性表达;该融合蛋白可与羊布鲁菌兔免疫血清特异性结合。Omp22蛋白的表达,为进一步研究布鲁菌的致病机制以及疫苗研制奠定基础。     

应用微生物群落分子指纹图谱指导筛选一株杨树灰斑病生防菌

杨树灰斑病是由杨棒盘孢菌(Coryneum populinum Bres.)引起的重要病害.运用拮抗微生物来防治杨树灰斑病已成为国际上的重点研究领域.本研究利用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳技术(PCR-DGGE)分析了同一苗圃中健康小黑杨、感病但未发病小黑杨及发病小黑杨叶际的细菌微生物群落,在健康小黑杨及感病但未发病小黑杨叶际发现一株优势菌YY-1.该菌在发病小黑杨叶际未检测到.利用地高辛标记探针指示,获得YY-1的纯培养并通过16SrDNA测序,分子鉴定该菌为蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus).对峙实验结果显示,该菌对杨树灰斑病病原菌杨棒盘孢菌具有较强的拮抗作用,可作为杨树灰斑病的生防菌.     

羊布鲁菌外膜蛋白OMP2b的克隆，原核表达及纯化

研究羊布鲁菌外膜蛋白 OMP2b 基因的克隆,原核表达,以及纯化。根据羊布鲁菌 M5株外膜蛋白 OMP2b 蛋白基因序列设计引物,扩增出大小约为1130bp 的目的基因片断,克隆入融合表达载体 pGEX-4T-1,构建重组质粒 pGEX-4T-1-omp2b。在大肠埃希菌中将该蛋白表达并用亲和层析法纯化。用 Western-blot 分析方法鉴定纯化蛋白。结果成功构建了 pGEX-4T-1-omp2b 原核表达载体并在大肠埃希菌中表达了 omp2b 基因,纯化后所获得的蛋白与目的蛋白大小一致且与兔抗布鲁菌血清发生特异性反应,说明其为布鲁菌 OMP2b 蛋白。本研究成功构建了 pGEX-4T-1-omp2b 原核表达载体,并且在大肠埃希菌中进行表达,纯化的 OMP2b 蛋白具有良好的免疫原性。     

平菇黄腐病病原菌分离与鉴定

本实验主要是对平菇黄腐病病原菌进行研究。从感染黄腐病的平菇幼菇子实体中分离得到2种具平板生长优势的革兰氏阴性杆状细菌(编号为G1和G2),通过对平菇子实体回接感染实验,发现细菌G1感染的平菇子实体病灶与自然感染的黄腐病状况一致,因此认为该菌就是导致平菇黄腐病的主要病原菌。经采用传统的生理生化实验与16s rDNA序列分析以及Biolog微生物自动鉴定系统分析鉴定,确定该菌为荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)。     

羊布鲁菌外膜蛋白Omp25d的原核表达、鉴定及纯化

研究羊布鲁菌外膜蛋白Omp25d基因的克隆,原核表达,以及纯化,根据羊布鲁菌M5株外膜蛋白Omp25d蛋白基因序列设计引物,扩增出大小约为650bp的目的基因片断,克隆入融合表达载体pGEX-4T-1,构建重组质粒pGEX-4T-1-Omp25d。在大肠杆菌中将该蛋白表达并用亲和层析法纯化。用Western-blot分析方法鉴定GST-Omp25d蛋白。结果成功地构建了pGEX-4T-1-Omp25d原核表达载体并在大肠杆菌中表达了Omp25d基因,纯化后所获得的融合蛋白与兔抗布鲁菌血清发生特异性反应。表明研究成功构建了pGEX-4T-1-Omp25d元和表达载体,并且在大肠杆菌中进行表达,纯化的融合蛋白具有良好的免疫原性。     

基于矩信息的不确定投资组合优化问题

在已知随机变量的部分矩信息的条件下,对带有机会约束的投资组合优化问题进行研究.首先,对初始机会约束进行鲁棒性处理,得到分布鲁棒机会约束优化问题;然后,通过引入条件风险价值(CVaR)来近似地表示分布鲁棒机会约束,给出最坏情况下的CVaR近似且表明其精确性.     

6种杀菌剂对胶孢炭疽菌和长柄链格孢菌的室内毒力测定

正长柄链格孢菌(Alternaria longipes)和胶孢炭疽菌(Glomerella cingulata Spauld. H. Schrenk)是引起板栗内腐病的主要致病菌[1～3]。苯醚甲环唑、咪鲜胺、唑醚戊唑醇、精甲噁霉灵、嘧霉异菌脲、异菌氟啶胺是目前农业上常用的杀菌剂,具有高效、安全、低毒、较强广谱性的特点,本试验选择上述6种杀菌剂采用菌丝生长速率法对长柄链格孢菌和胶孢炭疽菌进行室内毒力测定。     

生姜提取物的防污活性研究

以翡翠贻贝(Perna viridisLinnaeus)足部收缩实验和白脊藤壶(Balanus albicostatasPilsbry)金星幼体附着抑制实验检测了生姜(Zingiber officinaleRoscoe)不同组分的防污活性.实验结果表明,在翡翠贻贝足部收缩实验中,生姜的六种提取物防污活性高低及其与硫酸铜的防污活性比较结果如下:乙醇冷提组分=乙醇热提组分>乙酸乙酯热提组分>乙酸乙酯冷提组分>硫酸铜>水冷提组分>水热提组分;在白脊藤壶金星幼体附着抑制实验中,生姜的六种提取物的防污活性高低排序如下:乙醇热提组分>乙醇冷提组分>乙酸乙酯冷提组分>乙酸乙酯热提组分>水冷提组分>水热提组分.本研究结果表明生姜的乙醇冷提组分、乙醇热提组分、乙酸乙酯冷提组分和乙酸乙酯热提组分均具有较高的防污活性,揭示了生姜在海洋防污中有很大的应用和发展潜力,为寻找新型的环保型海洋防污材料以及进一步研究提供了理论依据.     

法治现代化建设思路新探--对人治现象经济学分析引起的反思

江泽民同志在党的十六大报告中明确指出，依法治国和以德治国相辅相成，实行依法治国和以德治国相结合是建设有中国特色社会主义必须坚持的十条基本经验之一；从而进一步强调“依法治国”的重要性，并把“以德治国”置于同等重要地位。要探索社会主义法治建设的新思路就必须在对古代社会人治现象进行经济学分析的基础之上，在肯定法治是历史必然的前提下，对中国社会转型期的法治现代化建设进行成本分析，进而实现“德治”和“法治”共同发展，以降低法治建设的成本。     

缩略构词中的辩证法

缩略构词是汉语新词的重要来源之一。缩略构词中蕴涵着辩证法,表现在:(1)结构的趋简性与繁复性的统一;(2)意义的还原性与不可还原性的统一;(3)构造的理据性与非理据性的统一;(4)意义的明确性与模糊性的统一;(5)意义的多源性与单一性的统一;(6)缩略过程中的构件损伤与保存的统一;(7)缩略构词可以走向仿造构词。     

胰岛素抵抗及高血糖对GFAT活性的影响

分别观察了胰岛素抵抗和高血糖水平对己糖胺途径限速酶GFAT活性的影响.在alloxan高血糖小鼠模型中,与正常对照组比较,血清果糖胺水平升高了15.9%,肾组织GFAT活性升高了32.8%;经胰岛素治疗后,血清果糖胺水平降低了9.7%,其肾组织GFAT活性也降低了l9.4%.在高糖高脂饲料诱导的胰岛素抵抗的IR小鼠中,与同批正常对照组比较,正糖钳实验中稳态时葡萄糖输注率G IR值降低了69.3%,胰岛素耐量实验中的AUC值升高了38.1%,其肾脏组织GFAT活性也增加了26.6%.在胰岛素诱导的具有胰岛素抵抗的IR-H IR c细胞模型中,与正常H IR c细胞比较,其10、25 nmol/L胰岛素诱导的葡萄糖摄取能力分别降低了25.3%、21.1%,而GFAT活性分别增加了29.7%、46.5%.可见,GFAT活性与一段时间的平均血糖水平和胰岛素抵抗状态密切正相关.     

茯苓水提液对小鼠学习记忆的影响

目的研究中药茯苓水提液对小鼠学习记忆的影响.方法通过跳台法观察茯苓水提液对东莨菪碱所致记忆获得障碍模型小鼠和30%乙醇所致记忆再现障碍模型小鼠的影响.结果 1)茯苓水提液能减少东莨菪碱所致记忆获得障碍模型小鼠5 min内学习及记忆实验的错误次数,延长潜伏期,P<0.05,P<0.01,差异有统计学意义.2)茯苓水提液能减少30%乙醇所致记忆再现障碍模型小鼠测试实验中5 min内错误次数,延长潜伏期,P<0.05,P<0.01,差异有统计学意义.结论茯苓水提液能改善化学药物所致学习记忆障碍模型小鼠的学习记忆能力.     

CHO细胞微核的激光扫描细胞仪自动化检测方法

 运用激光扫描细胞仪,采用FITC和PI两种荧光染料,结合细胞胞质分裂阻断微核技术,对环磷酰胺(CP)诱导的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞微核进行了检测,并将该方法与传统微核显微镜检法进行了比较,旨在探索CHO细胞体外微核的激光扫描细胞仪自动化检测方法.结果表明,激光扫描细胞仪方法能够准确识别胞质阻滞的双核细胞及双核细胞中的微核,环磷酰胺(CP)处理浓度与其诱导的双核细胞微核率成正相关,激光扫描细胞仪法与传统显微镜检法获得的微核率具有良好的相关性.激光扫描细胞仪检测方法能简便、经济、快速、高效地检测CHO细胞微核,适于体外培养细胞尤其是贴壁细胞微核的高通量检测.     

番茄红素粗提液中质量浓度测定方法的研究

研究不同测定方法对番茄红素粗提液质量浓度测定的影响.以丙酮、乙酸乙酯和正己烷在低温、避光条件下提取番茄红素,并在300～600 nm区间进行紫外可见光谱扫描,再用HPLC法测定粗提液中番茄红素质量浓度.丙酮粗提液300～600 nm区间的紫外可见吸收光谱图呈一宽峰,而乙酸乙酯和正己烷粗提液的紫外可见吸收光谱与番茄红素标准品相似.HPLC法证明丙酮粗提液中确实含有番茄红素.用紫外分光光度法和HPLC法测定同一丙酮粗提液中番茄红素质量浓度分别为4.76mg/mL和2.19 mg/mL.番茄红素丙酮粗提液的紫外吸收光谱图呈一宽峰并非受浸提方法的影响,可能与浸提溶剂有关,因此番茄红素的丙酮粗提液不能用紫外分光光度法进行质量浓度测定.     

阳桃四倍体植株诱导试验

利用秋水仙素对阳桃茎尖进行四倍体植株诱导．结果表明，浸泡法处理的效果最好，诱导频率最高可达29．6％，而混培法和点滴法较差．浸泡法以质量分数为0．002的秋水仙素处理25h为最适宜，混培法以质量分数为0．002的秋水仙素处理20d效果最好．秋水仙素诱导产生的变异植株经染色体倍性鉴定，其染色体数目为2n=44，属四倍体植株类型．同时，对阳桃二倍体和四倍体植株进行形态观察发现，四倍体植株叶色浓绿，叶面积增大，但叶长与叶宽的比值却减小，保卫细胞的长度、宽度．以及叶绿体含量也增大，气孔密度变小．     

芋花叶病毒检测试剂盒的研制

用IPTG诱导融合表达芋花叶病毒(Dasheen mosaic virus,DMV)CP基因的菌株,通过12%SDS-PAGE和5%~20%梯度SDS-PAGE二次制备电泳获得纯化的CP免疫家兔,获得经过Western blot分析为特异的抗CP血清.硫酸铵沉淀初步提取IgG,然后用Protein A-Red Sepharose亲和层析进一步纯化IgG,IgG与甘油1∶1混合获得效价1∶3 100的一抗,将一抗、羊抗兔二抗和4-硝基苯基磷酸二钠组成DMV检测试剂盒.用研制的检测试剂盒对芋、魔芋和马蹄莲叶片样品的间接ELISA检测表明,DMV在田间普遍发生,并确定研制的试剂盒完全可用于DMV检测.     

试析新闻标题中的悬念

近年来，新闻标题开始大胆地运用“悬念”。而这一技巧的表达，主要有7种方式一是利用“互相矛盾”的现象，制造标题的悬念；二是运用违反常理的手法，采用逆向思维，制造悬念；三是“映衬”，制造悬念；四是利用比喻、比拟修辞手法，制造悬念；五是巧用标点符号，制造悬念；六是凭借设问，制造悬念；七是采取其他方式，制造悬念。