黄瓜DNA的提取研究

报道提取黄瓜DNA的新方法以满足制备黄瓜DNA传感器之需要．提取黄瓜DNA的最优条件：细胞提取液为4．0mL，饱和KCl溶液为1．0mL，0．6倍样液体积的酚／氯仿／异戊醇溶液，0．6倍体积的氯仿／异戊醇溶液，0．55倍体积的异丙醇，黄瓜DNA的得率为0．36mg／g．     

土壤细菌DNA的抽提及分析

应用不同的方法从土壤中分离细菌DNA，以紫外分光光度法及琼脂糖凝胶电泳法分析所得细菌DNA的纯度与得率，比较不同的细菌收集缓冲液、细菌裂解缓冲液、细菌裂解过程及不同的抽提修饰步骤对土壤细菌DNA抽提结果的影响，确定了最佳的土壤细菌DNA抽提方案，以该方案对土壤细菌DNA进行了大规模的抽提，所得产物的A260／A280为1．68，A260／A230为0．87，得率ω(DNA／干土)为1.90μg／g。在土壤细菌中加入1μg标准λDNA进行了3次回收实验，平均回收率为82．33％。     

濒危植物刺桫椤RAPD反应体系的优化

以高盐SDS法提取濒危植物刺桫椤(Alsophila spinulosa)嫩叶总DNA，进行RAPD分析，分别研究了模板DNA、引物、dNTP、Mg^2 和Taq DNA聚合酶用量以及反应体积对反应结果的影响．筛选并建立了适合于利桫椤RAPD扩增的反应体系：反应体积10μL，内含2ng/μL模板DNA，2．0mmo1/L MgCl2,0．3μmo1／L引物，300μmo1／L dNTP，0．5u Taq DNA聚合酶．     

菜心基因组DNA提取及RAPD反应体系的优化

用改良的CTAB法提取菜心基因组DNA,并利用紫外分光光度法测定其纯度和含量,用琼脂糖凝胶电泳法检测DNA的降解状况和纯度．结果表明:此法提取的DNA具有典型的天然DNA分子的标准紫外吸收光谱特点, 且适于进行RAPD分析．RAPD分析的优化反应体系为:25μL的反应液中含有0．8 U的Taq酶,0．28 μmol／L primer,30 ng的DNA,2．0 mmol／L Mg2 ,0．20 mmol／L dNTPs．PCR扩增循环为94℃、5 min;94℃、1 min; 36℃、1 min;72℃、2 min,37个循环;72℃延伸10 min．     

Ce(Ⅲ)-ALC络合物与鱼精子DNA相互作用的电化学与光谱研究

用电化学方法和荧光光谱法，UV光谱法对Ce(Ⅲ)—ALC络合物与鱼精子DNA的相互作用进行了研究，发现在在pH为4．3的六次甲基四胺((CH2)6N4)缓冲溶液中，Ce(Ⅲ)—ALC络合物与鱼精子DNA(hsDNA)以嵌入方式生成一种电化学非活性络合物Ce(Ⅲ)—ALC—DNA，导致Ce(Ⅲ)—ALC的峰电流降低，峰电流在一定范围内与DNA的浓度成线性关系，线性范围为1～10μg／mL，相关系数为0．997，检测限为O．1μg／mL，因此该法可以用于DNA的测定。     

东南景天DNA提取方法的比较

以超积累生态型、非超积累生态型东南景天（SedumalfrediiHance）的嫩叶为材料，采用CTAB法、SDS法、尿素法、柠檬酸钠法提取DNA，比较不同方法提取DNA的效率．结果表明，采用4种方法提取超积累生态型东南景天和非超积累生态型东南景天的DNA，其OD260／OD280的比值在1．8～2．0之间；除柠檬酸钠法外，其余3种方法提取的DNAOD26。／OD230的比值均大于2．0；其DNA浓度和得率都是尿素法〉CTAB法〉SDS法〉柠檬酸钠法，从琼脂糖凝胶电泳图来看，也是尿素法效果最好．因此，认为尿素法适合于超积累生态型和非超积累生态型东南景天DNA的提取．     

三种参对DNA氧化损伤保护作用的研究

利用CuSO4-Phen-Vc-H2O2-DNA化学发光体系，研究了红参、生晒参、西洋参对DNA氧化损伤的保护作用．探讨了DNA浓度、H2O2浓度、pH值等对DNA损伤发光强度的影响．实验发现，在DNA浓度为0．62μg／mL、H2O2浓度为1．1％、pH值为5．5等条件下，对DNA的保护作用为红参优于生晒参，生晒参优于西洋参．因为人参(红参和生晒参)所含的有效成分三醇皂甙的量比西洋参多，而红参由于加工过程不同，可产生新的抗氧化剂如maltol和水杨醛。     

龙眼基因组DNA提取及RAPD反应体系优化的研究

采用改良CTAB法提取龙眼幼叶基因组DNA,并以其为模板对影响RAPD扩增反应的主要因子采用单因素递进分析方法进行优化,建立了龙眼基因组DNA最佳RAPD反应体系,即在25μL的反应体积中,含20 ng模板, 1．0 U Taq DNA聚合酶,2．0 mmol／L MgCl2,各0．20 mmol／L dNTP,0．20μmol／L引物．     

建兰DNA的快速提取

用SDS高盐提取介质简便快速提取建兰(Cymbidiumensifolium)嫩叶DNA.提得的DNA分子大小约为48kb,A260/A280=1.77～1.86,DNA得率为每g鲜叶410～1145μg.提取的DNA无需经RNase处理,可直接用于限制性内切酶酶切和随机扩增多态DNA反应.     

安徽羽叶报春RAPD分析实验条件优化的研究

采用CTAB法^[1]从珍稀濒危植物安徽羽叶报春(Primula merrilliana)的幼叶中提取DNA，进行随机扩增多态DNA(RAPD)实验，通过Mg^2 、dNTP、Taq酶、模板浓度的优化，确立了RAPD反应的最佳体系(25μ1)范围为：Mg^2 浓度为2．0—2．5mmol／L，模板浓度为每个反应50—150ng，dNTP浓度为200—250μmol／L，Taq酶为1.5—2.0U，按照优化的RAPD条件进行的重复实验，重现性良好。     

一种从小麦干种子中快速提取DNA的优化方法

对植物组织DNA抽提是在分子水平上对植物进行系统分析与研究的基础性工作．本文提供了一种从小麦干种子中快速提取总DNA的优化方法．该方法不需液氮冷冻或是冻干组织脱水和水浴，用氯仿对材料进行预处理。使用1．5％的SDS抽提缓冲液和氯仿／异戊醇处理，并用预冷的无水乙醇沉淀DNA，即可在短时间内得到小麦基因组总DNA．实验证明，用该方法每300mg干种子可得到约30-40μg的总DNA，其产量和质量均适合进行SSR分析．     

枣树基因组DNA提取方法及RAPD体系的建立

以8个枣树品种的嫩叶为材料,比较了不同的DNA提取方法,结果表明：采用改良的CTAB法提取的DNA纯度和产率,虽然不比改良SDS的高,但适宜RAPD分析．在20μL反应体积中,RAPD分析的优化反应体系为：引物0．2pmol·L^-1、Mg^2＋2．0mmol·L^-1、dNTP200μmol·L^-1、TaqDNA聚合酶1．2U．改良的CTAB法是枣树RAPD分析基因组提取DNA的最好方法．     

芥蓝不同品种营养成分含量评价

对6个不同芥蓝品种营养成分进行了分析和评价。东方大叶芥蓝(鲜样)Vc的含量最高,达1．14mg／g,最低的为中迟登峰芥蓝,含量为0．72mg／g。β-胡萝卜素的含量,以中花芥蓝的含量最高,为0．01mg／g。芥蓝粗纤维、蛋白质的含量较低,但含有较丰富的矿物质和微量元素。芥蓝中可溶性糖以葡萄糖为主,果糖次之,蔗糖最少。根据平均营养价值评估方法对6个芥蓝品种进行营养评价结果,营养价值最高的为香港百花芥蓝和中花芥蓝,营养价值最低的为中迟登峰芥蓝。由于平均ANV值为6．52,芥蓝属于营养价值较高的蔬菜。     

珙桐休眠期种子高质量基因组DNA的提取及分析

在对传统CTAB法进行改进的基础上,提取了沙藏珙桐休眠期去中果皮种子高质量基因组DNA,琼脂糖电泳及紫外分光光度分析,表明其OD260nm／OD280nm在1．8—2．0之间,用所提取的基因组DNA作为模板,S17为引物,进行RAPD扩增,获得了清晰的扩增图谱．     

渗调修复黄瓜陈种子基因组DNA损伤的RAPD研究

用Vc，CaCl2，PEG及其组合对自然老化的黄瓜种子进行渗调处理，利用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术对处理前后的种子基因组DNA多态性进行比较分析．结果表明：渗调作用可以修复黄瓜陈种子的DNA损伤．修复效果与种子贮藏时间有关，贮藏半年的种子渗调处理前后RAPD产物差异不明显，贮藏1～2a的陈种子修复的效果好，表现为分子量高的DNA重新合成，RAPD扩增条带增多，亮度增加；贮藏3a的陈种子修复效果不理想。     

用PCR扩增裸甲藻和微小原甲藻rRNA基因的方法研究

以赤潮种裸甲藻(Gymnodinium sp．)和微小原甲藻(Prorocentrum minimum)为试验材料，以不同方法提取其基因组并进行纯化，然后采用PCR方法扩增其rRNA基因，包括18S，28S和ITS片断，并进行扩增条件的比较和优化，得到两种藻的最佳DNA提取条件和PCR扩增条件．裸甲藻和微小原甲藻的DNA提取宜采用改良的CTAB方法；并需对粗提取的DNA用CTAB方法进行纯化．两种藻的最适模板浓度为纯化后模板1．0～2．0μL；最适Mg^2 浓度为2．0μL(25mmol／L)；ITS引物PCB扩增的退火温度为50℃，而18S三对引物的退火温度均为55℃，28S的退火温度为54℃最为适宜。     

Ca-ALC络合物和鱼精子DNA反应的电化学与光谱研究

在pH为6．0的六次甲基四胺缓冲溶液中,Ca—ALC(茜素)络合物与鱼精子DNA在室温下2min内结合生成了非电活性的超分子化合物,导致络合物的峰电流降低和峰电位的负移,峰电流值在一定范围内与DNA的浓度成线性关系,线性范围为0．1～3μg／mL,方法可以用于DNA的测定．和其它方法相比,该方法简便,快速,有较强的选择性和实用性．在加入DNA的条件下,电化学参数(电子转移系数α,标准速率常数Ks)显示了较大的改变．同时,结合荧光法和UV光谱法,推断反应的结合方式可能为嵌入结合．     

葡萄总DNA提取方法的比较研究

以葡萄幼叶为材料，分别采用溴化十六烷基三甲基铵(CTAB)法、高盐低pH法、简易法、高盐沉淀法和改良十二烷基硫酸钠(SDS)法5种方法提取总DNA，通过A260／A280值、琼脂糖凝胶电泳和RAPD对5种方法所得DNA溶液进行定量、定性分析和综合比较。结果显示高盐低pH法、高盐沉淀法综合效果较好，改良SDS法所得DNA纯度最佳。因此，在实际工作中还应根据实验目的选取最适合的方法。     

胡芦巴甾体总皂苷水提取液的澄清工艺研究

以薯蓣皂苷元的提取率为指标，应用L9(3^4)正交试验设计优化了从脱多糖、脱脂胡芦巴豆粉中提取甾体皂苷的工艺条件，并且筛选了ZTC澄清剂对胡芦巴甾体皂苷水提取液的澄清条件。实验结果表明，影响水提取的因素依次为：提取次数、提取温度、固液比以及提取时间；最佳水提取条件为：固液比1：10，在70℃下提取3次，每次120min。得出胡芦巴种子水提取液的澄清条件如下：ZTC1 1澄清剂的加入次序是先加B组分再加入A组分：澄清剂B和A的最佳用量分别为1．0g／L和0．5g／L；加入组分A或B后在80℃下作用30min即可达到澄清目的。     

水稻基因组DNA的RAPD扩增研究

通过对水稻RAPD反应条件比较研究，建立了对除草剂敏感致死水稻RAPD的最适反应体系和反应扩增程序，即在25止反应体系中，含10mmol／LTris-HCl(pH8．0)，10mmol／LKCI，8mmol／L(NH4)2804，0．05％NP-40，2．0mmol／LMgCl2，0．1mmol／L(each)dTNPs，20ng引物，20ng基因组DNA，1．5U的Taq酶。反应扩增程序为：94℃变性2min；扩增40个循环，每循环包括：94℃变性10s，40℃退火30s，72℃延伸1．5min；最终延伸5min。