大鼠肝细胞的快速分离和原代培养

本文介绍一种快速分离大鼠正常肝细胞的方法,从刺杀动物到接种肝细胞总共只需用二小时。接种培养后,在有地塞米松的培养基内,肝主质细胞能存活到一周左右。从32例大鼠分别取材的肝细胞培养中,11例(34%)两周内出现克隆性增殖上皮细胞集落,其中的8例(25%)四周内长成汇合状态。所有能长成汇合状态的细胞群体都来源于150g以下的大鼠。本文对肝细胞的两种主要类型以及它们的亲缘关系进行了讨论。     

麻疯树花粉萌发条件分析及percoll分离体系的建立

为了研究离体条件下,不同培养条件对麻疯树花粉萌发的影响,取盛花期麻疯树花粉,分别在不同琼脂浓度、蔗糖浓度、温度、不同时间段下,检测麻疯树花粉萌发情况.结果表明,麻疯树花粉更易在3%的琼脂浓度、10%的蔗糖浓度、25～30℃的条件下萌发,并以此建立了优良的麻疯树花粉萌发培养基(3%琼脂+10%蔗糖+无机液体培养基).进一步研究显示,一天中的不同时间,麻疯树花粉活力不同,具有两个活力高峰期,分别为上午10～11点和下午16～17点.同时,采用Percoll密度梯度离心法对麻疯树花粉进行分离和筛选,结果表明,该方法可以有效的分离麻疯树花粉,不同层花粉活力不同,其中第六层花粉萌发率可高达90%以上,而前五层花粉萌发率均在30%以下.     

离心选矿机在硅藻土提纯中的试验研究

离心选矿机主要用于有色及黑色金属矿选厂,在非金属矿分选厂鲜有应用。本文通过采用离心选矿机对长白硅藻土的中试试验研究,找出了离心选矿机在分选硅藻土时存在主要问题并加以改进,对离心时间、离心转速等因素进行了试验研究。最终硅藻土SiO2含量达到86%以上,不仅有效地进行了硅藻土的提纯,而且解决了常规重力提纯耗时长、冬天影响生产等问题,创新了离心选矿机在非金属矿分选领域的应用,同时对今后大规模工业生产奠定了良好的基础。     

有机物的分离与提纯

文章简要论述有机物的分离与提纯中一般应遵循的原则。     

果胶酶的分离提纯及某些性质研究

本文报导了一种制备高纯度果胶酶的方法,用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测得其分子量为32000,用等电聚焦电泳法测得其等电点为pH8.0～8.2,用圆二色谱测得此酶呈无规则卷曲构象。     

二氧化碳提纯分离过程中的能量利用研究

气田二氧化碳在其提纯分离过程中,随着压力、温度的变化,往往会发生状态的改变,伴随着这些状态的变化,通常会发生一定的能量转移,在一般情况下,这是些能量的移入或移出都需要借助于外设备及介质才能完成。本文通过探索提馏塔顶气体二氧化碳能量回收利用,研究出适合目前二氧化碳提纯装置的能量利用效率最大化方案。     

降膜结晶分离提纯对二甲苯

降膜结晶是一种重要的对二甲苯提纯方式。以含有75%(质量分数)对二甲苯的混二甲苯为原料,研究降膜结晶分离提纯对二甲苯过程,考察挂膜、进料速率、预冷温度、结晶温度、降温速率等工艺条件对结晶过程的影响,以及发汗终温、升温速率对发汗过程的影响。研究结果表明:当结晶条件为挂膜、进料线性喷淋密度360.53 mL/(m·min)、预冷温度25℃、结晶温度15℃、降温速率0.15℃/min时,以及发汗条件为升温速率1℃/min、发汗终温10℃时,可获得纯度高于99.50%的对二甲苯产品。     

大鼠正常肝和再生肝的肝细胞分离、鉴定及纯度、活性分析

按Higgins等方法制作大鼠2/3肝切除(parital hepatectomy,PH)模型,用两步灌流法分散肝脏细胞,用60%Percoll密度梯度离心分离肝细胞,用免疫组织化学方法定性、定位再生肝(regenerating liver,RL)、分散的肝脏细胞及分离的肝细胞中白蛋白(albumin,ALB)和葡萄糖-6-磷酸酶(glucose-6-phosphatase,G-6-P),用蛋白免疫印迹方法定量肝细胞的ALB和G-6-P,用RT-PCR定量肝细胞的ALB和G-6-P mRNA.初步证实纯化的细胞中,ALB和G-6-P阳性细胞占96%以上;PH后各时间点纯化的肝细胞的ALB和G-6-P mRNA量稳定,相应的蛋白量亦稳定.表明改进后的分离肝细胞方法具有收率高、纯度高、活性好等特点.     

天然香料分离提纯的研究进展

随着分离技术的日益更新,天然香料的分离提纯技术也得到了快速发展.通过介绍天然香料分离提取的传统方法和新兴方法,如水蒸汽蒸馏法、超临界流体萃取法、微波辅助萃取法、分子蒸馏法、微胶囊-双水相萃取法以及酶法和膜分离等,论述了近年来天然香料提取技术的发展状况,通过应用实例简要分析了各方法的优缺点,并对分离提取技术的发展前景进行了展望.     

密度梯度离心法检测脱落肿瘤细胞对恶性胸腔积液的诊断价值

胸腔积液是临床常见征象，其良恶性质的临别是临床上尚未解决的难题之一。本试验对３６例恶性胸腔，３０例结核性胸腔积液分别用密度梯度离心法，常规离心涂片法检测脱落肿瘤细胞，并对其中２２例恶性胸液患者行胸膜活组织检查。     

从人胎胰腺分离完整胰岛的方法

采用 Hanks’(4℃)液自胰管灌注使胰腺膨胀,或用多点注射法使胰腺浆膜扩张,整个胰腺则清晰可见,此时迅速摘除并清除它周围的血管及结缔组织,用Hanks’液清洗整个胰腺并将它快速剪碎,然后加入胶原酶、胰酶消化,再经过滤和 Ficoll 密度梯度离心,使人胎胰腺中的胰岛有效地被分离并将其收集。胰岛的纯度达80％,通过体外活染,表明胰岛具有活性。通过放免法测定,游离胰岛及胰岛分散为单个细胞的分泌能力正常,在离体中对葡萄糖急性刺激能产生反应。     

大鼠胰岛分离和纯化方法的比较及改进

目的对大鼠胰岛进行分离和纯化。方法胶原酶V内消化法分离胰岛,在通过Histopaque分离液1119、1083、1077配合使用HBSS缓冲液对胰岛进行纯化。结果该方法能够得到充足的胰岛,每只大鼠能够获取(758±55)个胰岛,纯度大于95%,并且与Ficoll法相比操作更加简单。结论胶原酶V内消化联合Histopaque法分离和纯化大鼠胰岛是一种简单有效的方法。     

一种快速分离和鉴别诺氟沙星的物理学方法

根据诺氟沙星在水中不溶下沉、在氯仿中不溶上浮的现象，建立了一种快速分离和鉴别诺氟沙星的物理学方法。方法(1)以水作参比用比重瓶法测定诺氟沙星的密度；(2)取原料药和胶囊剂内容物分别置于刻度试管中，加入氯仿。充分振摇使药粉混悬后静置，观察药粉由动态到静止的时间和上浮与下沉的大体数量。结果(1)诺氟沙星密度D^21为1．4260，RSD为0．1718％；(2)纯诺氟沙星在氯仿中1—2min全部上浮；合格胶囊内容物绝大部分上浮。少量下沉；不合格和掺假的胶囊内容物则相反；上浮粉末的数量均与诺氟沙星的含量呈正相关。结论试验证明：可以利用诺氟沙星与掺假物或辅料的密度之间的差异。与氯仿混合后静置，能分别浮于上层或下沉的物理学现象，创建一种用于分离或鉴别诺氟沙星的快速操作方法。     

神经酰胺类物质的分离纯化及应用

神经酰胺是一类重要的生物活性物质,也是细胞内重要的脂质第二信使.系统分析了神经酰胺类物质的结构、分离纯化和测定的方法等,介绍了其在食品、医药、化妆品等方面的应用,针对化学合成的神经酰胺的局限性,提出了从植物中提取天然的神经酰胺及其发展前景.     

烟草叶肉原生质体分离和纯化研究

实验比较了从烟草K326叶片分离叶肉原生质体的若干影响因素.结果表明,质壁分离的时间、酶液浓度、渗透压及酶解时间是影响原生质体产量和质量的决定性因素.研究结果对建立高效的烟草原生质体再生系统及其遗传操作有参考价值.     

紫芝多糖的纯化及组分分析

紫芝（Ganoderma Sinense)多糖是紫芝抗肿瘤的主要成分，不同浓缩方法对多糖提取率及结构有较大影响。以超滤法浓缩为最佳，三氯乙酸法除蛋白比常用的Sevage法效果更好，利用DEAE纤维素离子交换层析和SephadexG－100凝胶层析对粗多糖多离纯化得到5种不同的多糖组分PW1，PW2，PJ，PW3，PS，并对各组分的组成，分子量和解性进行了测定。     

用密度梯度离心分离的大白鼠胚胎海马细胞类型移植存活

在灭菌条件下,用机械解离法将15—20天的胚胎Wistar大白鼠的海马制成细胞悬浮液,并于4℃,用不连续的ficoll-urografin密度梯度离心法分离出不同的层次。大细胞在上层,小细胞在下层,分别加以收集、洗涤与再悬浮。5微升的每种细胞悬浮液分别注入4月龄Wistar雌性大白鼠的右侧海马,而同体积的生理盐水注入左侧作为对照。三周之后,对5只大细胞接受者与5只小细胞接受者作检查,每组各有2只动物见有移植物良好地存活。存活的大细胞主要是海马CA3区的大锥体细胞,此外还有乙酰胆碱酯酶阳性的大细胞,可能是齿状门CA4区的大多形细胞。存活的小细胞主要是乙酰胆碱酯酶阳性的小多形细胞与篮状细胞,此外还有形似齿状回的颗粒细胞和海马CA1区的小锥体细胞。根据本实验,只要作一些改进,被分类的移植细胞有可能在成鼠的脑内存活得更多更好。     

硫酸软骨素酶的分离纯化及部分性质

通过细胞破碎、硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose FF和Sephacryl S-200柱层析,首次从粘质沙雷氏菌中提取出硫酸软骨素酶.纯化倍数11.46,比活为81.23 U/mg蛋白.提取液经PAGE和SDS-PAGE检测,呈现一条带.该酶相对分子质量为71.2 KD,亚基分子质量为35 KD,该酶为2个相同亚基组成.等电点为7.19,最适pH值7.5,最适温度为40 ℃,以4-硫酸软骨素为底物测得Km值为3.98×10^-4 mol/L.     

黏细菌分离纯化的研究进展

黏细菌属于原核生物,作为一种可产生丰富而有用的次级代谢物的微生物类群而受到研究者青睐,由于分离纯化黏细菌相当困难和耗时,并且难于培养,同时方法特殊,极大地限制了对这类微生物物种资源的开发,其应用研究较其他的微生物类群更为落后.所以,探索更好的分离纯化黏细菌的方法非常重要.对黏细菌的分离、纯化、纯度检验和菌种保藏等方面已有研究做了较为全面的综述,希望能对研究黏细菌者有一些帮助.