阿的平荧光猝灭法测定DNA

在室温条件下，阿的平能嵌入DNA的碱基对之间，而阿的平荧光大幅猝灭，酸性介质下，激发波长348，428或449nm，碱性介质下激发波长为362或422nm,发射波长均为502nm，基于此对核酸进行定量测定，方法简单，快速，灵敏，对于双链或单链小牛胸腺DNA，线性范围0－4μg/mL，检测限0．03μg/mL，共存物质干扰小，在不同浓度ctDNA存在下，温度对荧光光猝灭的影响结果显示猝灭方式为静态猝灭。     

大黄酸与核酸作用的共振光散射特征及机理研究

基于在pH 1.7的KCl-HCl缓冲液中核酸对大黄有效成分大黄酸481 nm处共振光散射信号的猝灭现象,建立了测定核酸的共振光散射新方法.在最优条件下,该方法对小牛胸腺DNA和酵母RNA的线性范围、检测限分别为0.045～9.0μg/mL,33.9 ng/mL和0.060～9.0μg/mL,45.9 ng/mL.该方法已用于核酸合成样品和实际样品中ctDNA和yRNA的测定,结果令人满意.此外,还通过计算机模拟对大黄酸分子与核酸分子结合前后分子平面性的变化进行了考察,探讨了分子平面性变化与共振散射光猝灭之间的关系.     

利用柔红霉素—Cu（Ⅱ）荧光光度法测定核酸

研究了在Cu(Ⅱ）的存在下柔红霉素与DNA或RNA的荧光猝灭反应，发现单、双链DNA及RNA均能大幅猝灭柔红霉素-Cu（Ⅱ）二元体系的荧光，最佳PH值范围为5.4-7.1，最大激发和发射波长分别在505和555nm。在最佳条件下，测定双链DNA线性范围为0-0.6μg/mL,检测限为0.008μg/mL,相对标准偏差在3.0%以内。温度的影响和吸收光谱证实了DNA对此二元体系的荧光猝灭机理为静态猝灭机理。     

中氮茚衍生物-花菁离子缔合平衡体系在核酸测定中的应用

应用中氮茚衍生物-花菁离子缔合平衡体系建立了一种测定痕量核酸的方法.中氮茚衍生物的最大发射波长在385nm,在一定量花菁存在下,其荧光强度显著猝灭,核酸的加入又可使其荧光回复.在最佳条件下,荧光回升与核酸浓度成正比.标准曲线线性范围:小牛胸腺DNA(CTDNA)为2-500ng/mL;鱼精子DNA(FSDNA)为2-400ng/mL.相应的检测限:CTDNA为0.92ng/mL;FSDNA为0.85ng/mL.应用本法对3个实际样品进行了测定,结果令人满意.     

三聚氰胺荧光猝灭法测定维生素K_3

在pH 7.0的缓冲体系中,维生素K3使得三聚氰胺的荧光发生明显猝灭.在激发波长为256 nm,发射波长为366 nm处,三聚氰胺荧光猝灭程度在一定范围内与维生素K3的浓度成正比,从而建立了荧光猝灭法测定痕量维生素K3的新方法.方法的线性范围为0.10-10.00 mg/L,检出限为0.085 mg/L,方法已应用于实际样品的测定.     

两种吖啶酮衍生物的合成及其与DNA的相互作用研究

目前用有机荧光小分子做核酸探针的的方法研究非常活跃,而寻找有效的核酸探针试剂又是研究的重点.吖啶酮化合物是很强的荧光试剂,而以它们作为荧光试剂测定DNA的方法国内外还较少报道,所以本文合成表征了新的吖啶酮衍生物,研究它们与小牛胸腺DNA结合的情况,发现DNA对这类物质具有较强的荧光猝灭效应.     

血卟啉与脱氧核糖核酸相互作用的荧光光谱研究

在25°C,37°C和42°C测定了脱氧核糖核酸（DNA）对血卟啉（HP）的荧光猝灭光谱,研究了在模拟人体生理条件下,血卟啉（HP）与脱氧核糖核酸（DNA）结合反应的特征,计算了荧光猝灭常数和热力学参数。结果表明,随着DNA浓度的增加,HP-Zn的荧光猝灭越来越严重,通过可计算表明脱氧核糖核酸（DNA）与血卟啉（HP）的猝灭常数较大,说明脱氧核糖核酸（DNA）与血卟啉（HP）的结合作用较强,为血卟啉用于临床提供了理论依据。     

DNA与荧光分子BCDO相互作用研究

近年来,在DNA检测中荧光光谱法被广泛应用.新型荧光探针化合物的发现成为当前研究的热点,本文以自主发现的荧光分子4H,4'H-2,2'-双色烯-4,4'二酮(简称BCDO)为荧光探针,采用荧光猝灭法,通过体系荧光光谱的测定,对其与小牛胸腺DNA的作用方式进行了研究.通过DNA溶液浓度对荧光分子BCDO的影响实验,F0/F～C曲线的绘制,发现BCDO与DNA的相互作用为静态猝灭过程,其猝灭常数Kq在106～108数量级之间,大于106数量级,说明两者之间有很强的亲和能力.由Na+对BCDO-DNA体系的影响实验进一步说明了BCDO与DNA之间的相互作用方式为静电作用.     

荧光猝灭法测定六偏磷酸根离子的浓度

基于阳离子荧光染料吖啶橙(AO)与负电性的六偏磷酸根离子(SHMP)之间的静电作用,建立了一种测定SHMP浓度的荧光分析法.在pH=7.2的BR缓冲溶液中,SHMP能够有效猝灭AO在550nm处的荧光,且荧光强度的变化与SHMP的浓度在一定范围内呈良好的线性关系,相关系数r=0.996 6,线性范围为8.0×10~(-7)~1.12×10~(-5 )mol/L.进一步研究表明,SHMP对AO荧光的猝灭过程为静态猝灭.该方法操作简单、快速,线性范围宽,适用于饮料中SHMP添加剂浓度的测定.     

紫杉醇与牛血清白蛋白的相互作用研究

采用荧光光谱法和紫外可见吸收光谱法研究了紫杉醇(Taxol)与牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin,简称BSA)的相互作用.在生理条件下(含0.10 mol/L NaCl的Tris-HCl缓冲溶液,pH7.40),以286 nm为激发波长,在288～500 nm波长范围内,测定荧光光谱,BSA有较好的荧光效应,紫杉醇对BSA有荧光猝灭作用.测定了不同温度下紫杉醇与BSA的表观结合常数和结合位点数,根据不同温度时结合常数的大小推测紫杉醇对BSA的荧光猝灭类型是静态猝灭.     

派罗宁GS双峰双波长光度法测定核酸

 采用光度法研究了派罗宁GS与核酸的结合反应,结果表明在pH 6.0左右的介质中,派罗宁GS与核酸在室温下能迅速结合形成紫红色复合物,该复合物在570 nm处有正吸收峰,在540 nm处有负吸收峰.据此,建立了1个测定核酸的双峰双波长光度分析新方法.用该方法测定小牛胸腺DNA(ctDNA)、鱼精子DNA(fsDNA)、酵母RNA(yt RNA)及热变性ctDNA(Dct DNA)的检出限均低于0.011μg/mL.方法简单、快速,试剂及反应体系稳定、选择性好、准确度高,用于4个合成试样的分析,回收率为96.1%~103.0%.     

桑色素-铝离子-核酸三元体系的研究及其分析应用

用分光光度法研究了桑色素-铝离子-核酸三元体系。在pH 3.25的Britton-Robinson介质中, 桑色素在250,300和350nm处有吸收峰。铝离子的加入使桑色素350nm处的吸收峰下降, 在419nm处出现桑色素-铝络合物的吸收峰。再往桑色素-铝离子二元体系中加入核糖核酸或脱氧核糖核酸, 则进一步引起桑色素350nm吸收峰的降低,419nm处的吸收大大加强, 同时在370nm处有一等色点。419nm处吸光度的增加值与加入的核酸量在一定范围内成正比, 基于此建立了在较宽范围内测定核酸的方法。其线性范围分别为：ρ(ct DNA), 0.71～35.4μg/mL;ρ(fs DNA), 0.64～25.6μg/mL;ρ(y RNA), 0.94～28.4μg/mL。     

高效毛细管电泳法测定葛根及其制剂脑得生片中葛根素和大豆苷元含量

利用高效毛细管电泳法(HPCE),配以二极管阵列检测器测定葛根及其制剂脑得生片中葛根素和大豆苷元的含量。以未涂层弹性石英管柱(57 cm×75μm,有效长度50 cm)为分离通道,60 mmol/L硼砂-硼酸(pH9.0)为电泳缓冲溶液,分离电压为25 kV,毛细管柱温25℃,检测波长254 nm。葛根素和大豆苷元浓度与峰面积分别在0.2～1.2 mg/mL和0.1～0.6 mg/mL范围内呈良好的线性关系,检出限(S/N=3)分别为27.5 ng/mL和12.7 ng/mL,该方法简便、快捷、灵敏,可用于葛根和脑得生片的快速常规检测。     

DNA聚合与RNA转录联用分子机器的改进

建立了一个集成DNA聚合和RNA转录过程,能够重复产生RNA适体片段,并结合孔雀石绿产生荧光信号的分子机器,并探索了此分子机器在检测DNA方面的应用.转录产生的大量孔雀石绿适体序列被释放到溶液中,并可以与孔雀石绿结合产生荧光,实现信号的放大.85μL体系中的聚合转录的最适条件为：DNA聚合酶10 IU（0.118 IU·μL-1）,RNA聚合酶60 IU（0.706 IU·μL-1）,反应时间为3h.在上述条件下,荧光信号随着引发DNA用量的增加而增大.     

HPLC法测定保健食品葛枳胶囊中葛根素的含量

目的:建立葛枳胶囊中葛根素的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱Diamonsil C18(5μm,4.6mm×200 mm),流动相为甲醇-36%乙酸-水=25∶3∶72,流速为0.8mL.min-1,检测波长为250nm。结果:葛根素在0.063 68～0.700 5μg范围内线性关系良好,r=0.999 9,平均回收率为103.39%,RSD为2.49%。结论:该方法专属性强,准确可靠,重复性好,可用于葛枳胶囊中葛根素的质量控制与分析。     

总RNA提取方法的比较与分析

用TRIZOL法、CTAB法和改良的热硼酸盐法从水稻叶片中提取总RNA,结果表明用这三种方法提取总RNA的OD260nm／OD280nm值分别为1．896、1．992和1．657。琼脂糖电泳表明,用改良的热硼酸盐法提取的RNA降解严重,用TRIZOL法提取的总RNA有部分降解,而CTAB法提取的总RNA完整、未降解,可用于后续实验。因此CTAB法更适于从水稻叶片中提取总RNA。     

通过DNA聚合剪切放大体系提高RNA的检测灵敏度

基于循环的DNA剪切循环放大分子机器构建了一个RNA传感器。该分子机器以RNA为输入,产生大量的DNA片段,并替换报告探针上的荧光DNA从而产生荧光信号,实现对靶RNA浓度的放大检测。本分子机器分为两部分,反应部分和报告部分。在反应部分,以靶RNA为输入条件,以一个特殊设计的探针为反应模板引发一个自发连续的DNA聚合-剪切反应网络,重复产生大量信号DNA链;这些信号DNA链进入报告部分,通过杂交替换反应从一个报告探针上替换下带有荧光DNA序列,释放到溶液中。这样通过剪切产生的大量DNA适体序列被释放到溶液中,并替换报告探针上的荧光DNA,实现信号的放大。