共振光散射光谱法测定微量蛋白质

利用光吸收和共振光散射(RLS)光谱研究了铝试剂(ATA)与蛋白质在水溶液中的相互作用.在pH2.50时,蛋白质可使弱的ATA光散射信号曾强.基于这种现象,我们运用RLS技术,建立了测定纳克级蛋白质的方法.该方法简单、实用、灵敏.BSA的线性范围为0.010~27.4μg/mL,HSA的线性范围为0.010~30.5μg/mL.BSA的检测限为10.7 ng/mL,HSA的检测限为10.2 ng/mL.对实际人血清样品中的蛋白质进行了测定,其结果与临床方法一致.氨基酸、金属离子或其它共存化合物的干扰很小.     

共振光散射光谱法测定水产品中的汞

探讨了微乳液的增稳作用及对汞-四硫氰基二氨合铬酸铵乳浊体系的共振光散射(RLS)光谱,该体系的RLS光谱强度与浓度成正比.在最佳的测定条件下,线性范围为0-20.5μg/ml,相关系数r=0.9996,检出限为0.028μg/ml.用此法测定了水产品中的汞,加标回收率为96.0%-103%.     

核固红共振光散射光谱法测定蛋白质

共振光散射技术用于分析化学是近年来十分活跃的研究[1,2],目前用于蛋白质测定的共振光散射(RLS)探针主要是三苯甲烷类、卟林类、偶氮类染料,此外还有金属络合物、黄酮类和无机酸根等[3].     

锌试剂-蛋白质体系的共振光散射光谱研究

 在pH 3.0的B-R缓冲溶液中,锌试剂能与蛋白质结合形成复合物.此结合反应能显著加强锌试剂的瑞利光散射信号.详细研究了此结合反应的最佳反应条件,并以此反应为基础,利用共振瑞利散射光技术,建立了一个测定蛋白质的新方法.该方法对牛血清白蛋白(BSA)、人血清白蛋白(HSA)以及免疫球蛋白测定的线性范围分别为0.25~12.5,0.10~15.0μg/mL和0.10~12.5μg/mL,检出限均小于0.05μg/mL,且大量的常见金属离子、氨基酸等共存物质不干扰测定.方法具有很高的灵敏度、很好的选择性及重现性.用于血清样品中蛋白质的测定,结果满意.     

酸性铬深蓝共振光散射光谱法测定蛋白质的研究

基于人血清白蛋白 (HSA)对酸性铬深蓝共振光散射的增强效应 ,拟定了一种新的测定HSA的共振光散射法 .在pH =3.78的B R缓冲溶液中 ,酸性铬深蓝与蛋白质结合 ,产生强烈的共振光散射 ,在λ =36 5nm处 ,共振光散射强度较大 ,且共振光散射强度与蛋白质的浓度成线性关系 ,线性范围为 0 .0～ 12 .0 μg mL ,检测限可达 0 .13μg mL .该法简便、快速 ,用于人体血清样品蛋白质的测定 ,结果令人满意 .     

二碘荧光黄共振光散射光谱法测定蛋白质

在pH4.41 Britton-Robinson缓冲介质中,白蛋白（BSA）与二碘荧光黄（DIIF）作用形成复合物,使最大波长377 nm的共振光散射光谱得到加强,根据其共振光散射的增强效应,可用于蛋白质的定量测定.研究了复合物反应的适宜条件,结果表明：在优化的条件下,蛋白质浓度在0.0-5.0μg/mL范围内与共振光散射强度呈良好的线性关系,方法的检出限为0.027μg/mL.用于合成样品中蛋白质的测定,获得满意结果.     

变色酸2R共振光散射光谱法测定蛋白质

基于人血清白蛋白（HAS）对酸性偶氮染料变色酸2R的共振光散射的增强效应，拟定了一种新的测定HSA的共振光散射法。在pH=4.10的条件下，变色酸2R本身只有极弱的光散射，但它与蛋白质的结合物却有强烈的共振光散射作用，在λex=λcm=420nm处，光散射有最大的散射强度，并且光散射强度与蛋白质HSA的浓度成线性关系，线性范围为0．0－10．0μg/mL，检测限可达0．12μg/ml。该法简便、快速，用于人体血清样品蛋白质的测定并与考马斯亮蓝法比较，结果令人满意。     

用共振光散射光谱法测定痕量阳离子表面活性剂的研究

在pH值2.0的B-R缓冲液中,痕量的溴化十六烷基三甲基胺(CTMAB)的加入导致K2HgI4共振光散射强度增加,在λex=λem=422 nm处,得到一个共振散射峰,其强度与CTMAB的浓度成线性关系,据此建立了一种测定水中阳离子表面活性剂的共振光散射光谱法.方法的线性范围为0.02-6.50 mg/L,检出限为0.15 μg/L.该方法简便快速,灵敏度高,对实际样品进行了测定,得到了满意的结果.     

共振散射光谱法测定食盐中亚铁氰化钾

在酸性溶液中,亚铁氰化钾与锌离子作用生成K_2Zn_3[Fe(CN)_6]_2,体系的共振光振散射信号显著增强,体系在360nm处的共振散射光强度ΔI_(RLS)与亚铁氰化钾在0.074～18.421μg/mL范围内呈良好的线性关系,由此建立了共振散射光谱法测定亚铁氰化钾的分析新方法。所建立的方法线性方程为ΔI_(RLS)=208.11ρ-0.5503,相关系数R为0.9994,检出限(3σ)为0.032μg/mL。该法操作简单、灵敏度高,用于食盐中亚铁氰化钾的含量测定,结果满意。     

铁氰化钾共振瑞利散射光谱法测定链霉素

在稀HCl介质中,链霉素与K3[Fe(CN)6]在加热条件下反应生成结合产物,导致溶液的共振瑞利散射(RRS)强度显著增强,最大散射峰位于330 nm处.在0.04～3.2 μg/mI的质量浓度范围内,反应体系的RRS强度与药物的质量浓度成正比,反应具有较高的灵敏度,对链霉素的检出限(3σ)为14.0 ng/mL.研究了适宜的反应条件和影响因素,同时考察了共存物质的影响.据此,发展了以K3[Fe(CN)6]为光谱探针的灵敏、简便、快速测定链霉素的新方法.将该方法用于人血清和尿样中链霉素的含量测定,回收率在97.0%～103.5%之间.     

催化共振散射光谱法测定木瓜蛋白酶活力

木瓜蛋白酶催化水解酪蛋白生成小分子氨基酸和肽,剩余底物酪蛋白与三氯乙酸结合形成粒径约为1740nm的缔合物微粒。该微粒在360、400、420、470、520nm处产生5个共振散射峰,其中最强峰位于470nm。在选定条件下,随着木瓜蛋白酶量的增加,体系中剩余酪蛋白浓度降低,470nm处的共振散射光强度,Ⅰ470nm降低。木瓜蛋白酶的酶活力在0．024～4．8 USP／mL范围内与470nm处的共振散射光强度降低值△Ⅰ470nm呈现良好线性关系,检出限为0．0083 USP／mL。该共振散射光谱法用于嫩肉粉中木瓜蛋白酶活力测定,结果满意。     

邻苯三酚红-蛋白质体系的共振光散射光谱研究

本文研究了邻苯三酚红(PR)与蛋白质的结合反应。在pH3．3的Brium-Robiaon(BR)缓冲溶液中，PR与蛋白质通过分子间作用力形成缔合物，使最大波长约为385nm的共振光散射光谱得以加强。以PR为标记物根据其共振光散射的增强程度，可用于蛋白质的定量测定。对牛血清白蛋白，测定的线性范围为0-5．0mg／L。该方法已用于人尿样品中蛋白质含量的测定。     

铬黑T的共振光散射光谱及其机理研究

研究了铬黑T在不同条件下的共振光散射光谱,结果表明,它们的共振光散射强度受溶液pH影响较大.在一定的pH溶液中,体系的共振光散射强度在一定浓度范围内与铬黑T的浓度有线性关系.同时运用量子化学计算方法对它们分子间氢键进行了计算,理论计算表明:体系共振光信号增强的原因是分子通过分子间氢键聚合形成了超分子聚合体,这一理论计算结果和实验得到的光谱数据完全吻合,该工作对进一步研究共振光散射光谱法的理论提供了重要参考数据.     

淀粉的共振散射光谱研究

淀粉溶液在290,470和680nm处共产生3个共振散射峰．它是一种非线性光学介质,当激发波长为290nm时,淀粉超分子分别于290,580和870nm产生一个共振散射峰、一个1／2分频散射峰和一个1／3分频散射峰;当激发波长为680nm时,在680nm产生一个共振散射峰,而在340nm产生一个较该共振散射峰更强的2倍频散射峰,在227,450和907nm分别产生3倍频散射峰、3／2倍频散射峰和3／4分频散射峰．分频散射和倍频散射与共振散射有相似的散射行为．     

汞-雷氏盐体系共振光散射光谱及其特性分析

研究了微乳液的增稳作用对汞－ 雷氏盐乳浊体系的共振光散射（ＲＬＳ） 光谱, 该体系的ＲＬＳ光谱强度与浓度成正比, 峰值波长位于４００ｎｍ 处． 在最佳的测定条件下, 线性范围为０ ～１９－２μｇ／ｍ Ｌ, 相关系数Ｒ＝ ０－９９９８ , 检测限为０－０２３μｇ／ｍＬ．     

CdTe量子点共振瑞利散射光谱法测定血红蛋白

在pH 6.0的HAc-NaAc缓冲溶液中,血红蛋白与水溶性的CdTe量子点作用生成聚集体,引起体系共振瑞利散射的显著增强,其最大散射峰位于460 nm.研究pH值、量子点浓度、离子强度等条件对体系共振瑞利散射光强度的影响.结果表明,共振散射光强度与血红蛋白的浓度在6.6～189.2 mg/L范围内呈良好的线性关系, 线性回归方程为△IRRS = 139.9 + 1.123 C,相关系数为0.992 8,检出限为0.5 mg/L.用于实际样品测定,回收率为97.0%～103.4%范围内,相对标准偏差为3.2%～6.1%.据此建立了一种快速、灵敏测定血红蛋白的新方法.     

萘铬绿与蛋白质作用的共振光散射光谱研究

在pH3 50的酸性介质中,萘铬绿与蛋白质发生静电作用产生以342 0nm为特征峰的共振光散射(RLS)增强光谱.在此波长下,蛋白质的浓度与增强共振光散射强度(ΔIRLS)呈线性关系,据此建立了痕量蛋白质的共振光散射分析法,对BSA和HSA的检测限分别为3 62ng/mL和3 33ng/mL.方法成功地应用于尿样中总蛋白质分析.     

固黄O-CTMAB-DNA三元体系的共振光散射光谱的研究及应用

研究了脱氧核糖核酸(DNA)与阴离子染料固黄O(FYO)及阳离子表面活性剂溴化十六烷基三甲铵(CTMAB)三元体系的共振光散射光谱的特征.考察了各种影响因素,在优化条件下确立了共振光散射强度与鱼精DNA和小牛胸腺DNA以及变性后的鱼精DNA和小牛胸腺DNA浓度之间的关系,相应的线性范围分别为0.026～7.00 mg/L;0.025～7.00 mg/L;0.032～6.00 mg/L;0.031～8.00 mg/L,相关系数为0.999 1;0.999 6;0.998 1;0.999 6,检出限分为7.0,6.0,11.0,12.5 μg/L,基于共振光散射的增强,建立了一种测定DNA的新方法.图6,表4,参8.     

TAPP与DNA作用的共振光散射光谱校正

用吸收装置改变荧光分光光度计入射光的光路,获得光源的强度光谱和样品的透光光谱,并在同一台仪器上建立一种简单的分离表观吸收光谱中吸收和散射成分的方法.通过对TAPP(α,β,γ,δ-四-(对三甲氨基苯基)卟啉)与DNA作用的共振光散射光谱进行校正,结果表明,校正表观分子吸收后,灵敏度提高了2倍左右.校正仪器影响后,从F-2500和F-4500荧光分光光度计获得表观吸收光谱中分离出的TAPP与DNA作用的散射成分,其形状基本一致.     

共振光散射增强法测定痕量铅

基于铅可以对十六烷基三甲基铵(CTMAB)-四磺基锰酞菁(MnTSPc)-DNA共振光散射(RLS)体系产生强烈的敏化作用,从而建立了测定痕量铅的灵敏的RLS新方法.该法的线性为0.0-4.0×10-6mol/L,检出限3δ)为8.56×10-8mol/L,对1.0×10-6mol/L的铅标准溶进行连续9次平等测定,相对标准偏差为1.6%.我们用该法对实际水样进行了分析测量,效果良好.