米曲霉(Aspergillus oryzae)沪酿3.042内切型纤维素酶的分离纯化与鉴定

为了解米曲霉纤维素酶在物料分解过程中的作用,从米曲霉沪酿3.042成曲中提取粗酶液,利用DNS法分析了粗酶液中外切酶、内切酶及β-葡萄糖苷酶的活力.用刚果红染色法确定了沪酿3.042成曲粗酶液中含有4种内切型纤维素酶,分别称为Cx酶Ⅰ,Cx酶Ⅱ,Cx酶Ⅲ和Cx酶Ⅳ.经DEAE-Cellulose-52离子交换层析,0.15,0.20,0.25,0.30mol/L NaCl洗脱峰均测得内切型纤维素酶活性,制备电泳纯化得到4个内切型纤维素酶组分,SDS-PAGE结果显示,Cx酶Ⅰ,Cx酶Ⅱ,Cx酶Ⅲ为单体酶,分子质量分别为31 800,34 000,26 000u,Cx酶Ⅳ含有4个亚基,分子质量分别为14 000,23 600,26 000,33 500u.粗酶液中内切型纤维素酶的最适反应温度为50℃,最适反应pH值为4.0.     

三种兽药添加剂对赤子爱胜蚓体内纤维素酶和SOD酶的活性影响

研究了土壤生物赤子爱胜蚓(Eisenia foetida)分别暴露于兽药添加剂喹乙醇、阿散酸和土霉素后,其体内纤维素酶活力和超氧化物歧化酶(SOD酶)活力随剂量和时间的变化.结果表明,阿散酸在浓度高于1 000 mg/L、土霉素在浓度高于125 mg/L范围内对蚯蚓体内纤维素酶活力有抑制作用.高浓度的阿散酸(>500 mg/L)对SOD酶活力有促进作用,喹乙醇对蚯蚓体内SOD酶活力具有明显的促进作用,500 mg/L时就表现出极显著性差异(P<0.01),并随浓度升高而增强.实验表明采用赤子爱胜蚓体内的纤维素酶和SOD酶作为生物标志物来评价兽药添加剂对土壤环境生态系统的潜在影响和危害,具有十分现实的意义.     

赤子爱胜蚓纤溶酶活性的研究

研究了赤子爱胜蚓纤溶酶活性的提高条件及酶的最适作用条件。以纤维蛋白平板法测定赤子爱胜蚓纤溶酶活性。结果表明，纤溶酶在温度(57～59)℃，pH在8.0时，酶活性较稳定。赤子爱胜蚓纤溶酶干燥粉末浸泡在氯化钠等溶液中，可提高纤溶酶活性4-5倍。     

赤子爱胜蚓(Eisenia Foelide)纤维素酶的初步研究

将赤子爱胜蚓整体组织匀浆的抽提液,经Sephadex G-75凝胶过滤、DEAE-Sepharose CL-6B离子交换及在FPLC仪上用Mono Q柱分离,可以纯化到多种组分的纤维素酶,研究了它们的酶学性质,证明均为C_X酶。     

蚯蚓纤溶酶同工酶的分析

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）分析了赤子爱胜蚓和秉氏环毛蚓的两个不同部位的纤溶酶同工酶酶谱。表明纤溶酶主要存在于蚯蚓的内容物中,秉氏环毛蚓内容物中的纤溶酶种类多于赤子爱胜蚓。提示用秉氏环毛蚓内容物提取蚯蚓纤溶酶,效果较好。     

北京城市园林中赤子爱胜蚓体内有机氯农药污染研究

选取北京具有代表性的23个公园及生活小区作为采样区,研究各采样区中赤子爱胜蚓体内持久性有机氯农药滴滴涕(DDTs)和六六六(HCHs)的含量和来源.结果表明,赤子爱胜蚓体中的DDTs和HCHs总浓度分别为18.97-11 129.75 μg·kg-1和0.65-44.78μg·kg-1.赤子爱胜蚓体内存在较高浓度DDTs暗示其可能对公园的生态系统和食物链有潜在危害.根据DDTs各异构体含量特征比(P,P'-DDE/p,p'-DDT平均值:5.07;o,p'-DDT/p,p'-DDT平均值:0.76).可以推断出部分园林环境中很可能有新的污染源存在.     

赤子爱胜蚓处理有机固体废弃物的生长曲线拟合与分析

为研究蚯蚓处理有机固体废弃物(污泥)的生长发育规律,本实验以35±2日龄的赤子爱胜蚓作为实验材料,利用污泥饲养,对7 d、14 d、21 d、28 d、35 d、42 d、49 d的体重和繁殖性状进行测定,得到了赤子爱胜蚓生长的相关参数,分析其生长速度,结果表明幼蚓在接种初期0-14 d生长较快,日增重大,性成熟即接种21 d以后,生长速度变得缓慢,生长中期即接种28~42 d蚯蚓生长平稳,末期生长速度缓慢.通过比较拟合度(R~2)发现MMF、Gompertz和Logistic等几种曲线模型拟合度达到0.94以上,其中Gompertz模型的拟合结果更接近实际测量值,拟合效果最佳.赤子爱胜蚓的Gompertz模拟方程为:Wt=0.3507e~(-0.2096e-0.1192t).     

内切葡聚糖酶的纯化及其基本性质

纤维素酶是自然界碳素循环中的一种关键酶,它可以将纤维素性材料,转化为可直接利用的葡萄糖,并可通过其它酶和酶系统的作用转化为乙醇及蛋白质。纤维素酶是多酶体系,包含外切葡聚糖酶、内切葡聚糖酶(Cx)及β-葡萄糖苷酶。其中内切葡聚糖酶含有若干种同工酶,能将可溶性纤维素转化为还原寡糖,是纤维素酶系中的重要组分,为了深入研究Cx酶的性质,本文对其中一种Cx酶进行了分离纯化,并对其基本性质进行了研究。 1实验部分     

蚯蚓过氧化氢酶的纯化及性质

赤子爱到胜蚓组织匀浆抽提液经硫酸铵盐析、透析浓缩后，用大柱制备电泳纯经得到两个过氧化氢酶，均为糖蛋白，Ｍｒ分别为３９００００、４０００００。用氧电极法测 得后者的表观Ｋｍ值为１４３ｍＭ，最适ＰＨ值８．０左右。     

蜗牛肠道细菌及其纤维素酶性质

为了探寻功能微生物,用几种不同培养基分离蜗牛肠道可培养细菌并筛选纤维素降解细菌,研究了纤维素酶学性质.结果表明,LB培养基培养蜗牛肠道细菌时菌落种类和数量最多,达3.3×104CFU/m L.刚果红染色显示,7种优势细菌全部具有产酶能力;菌S6粗酶液的内切葡聚糖酶(Cx)和滤纸酶(FPase)活性最高,分别为5.96和2.84 U/m L.对Cx酶学性质初步研究表明:该酶最适反应温度为35℃,在55~75℃时有较高的热稳定性;最适p H为6.0,在p H 3.0~8.0均有酶活力,p H 8.0相对酶活仍为60%;Mg~(2+)、Na~+、K~+和Ca~(2+)对酶反应具有促进作用,Zn~(2+)、Cu~(2+)和Mn~(2+)为酶反应的抑制剂.研究蜗牛肠道细菌的组成,从中分离高产纤维素酶菌株,为纤维素生物降解转化成可再生能源寻找新的思路.     

壳聚糖固定化蚯蚓纤溶酶及其性质

以壳聚糖为载体,戊二醛为交联荆,用吸附交联法固定蚯蚓纤溶酶,对蚯蚓纤溶酶的固定化条件及固定化酶的各种性质进行了研究,确定了酶固定的最适条件:1 g用pH为6.5的磷酸盐缓冲液浸泡的壳聚糖载体与5 mL体积分数为1%戊二醛在25℃交联8 h,充分洗去戊二醛之后,加入蚯蚓纤溶酶13 U,4℃吸附6 h,充分洗去未交联的游离酶,酶活力回收最高大约为63%,固定化酶的比活为0.082 U/mg.固定化酶,游离酶的最适温度均为50℃,游离酶的最适pH值为8.5,而固定化酶的最适pH值为8.0,固定化酶的热稳定性,pH稳定性均比游离酶有所提高,游离酶、固定化酶都能水解纤维蛋白原和纤维蛋白,固定化酶不再水解BSA.     

Study on Properties of Amylase From Serinicoccus Profundi sp.nov.strain MCCC 1A05965^T

Amylase is one of the important industrial enzymes.In this study,we obtained the crude amylase from Serinicoccus profundi sp.nov.strain MCCC 1A05965T.The optimal temperature for the amylase was 40℃.The optimal pH of the enzyme was around 8.0.The characterizations of the crude enzyme were unstable of heat and pH.Mn2+ increases about 35% of original activity.Mg2+,Ca2+ and some surfactants slightly inhibit the activity of enzyme.     

十二烷基硫酸铵对烟草多酚氧化酶的激活作用

本文对从新鲜烟叶中分离纯化了两种多酚氧化酶,分别命名为多酚氧化酶(PPO )和多酚氧化酶(PPO ),并对其活性做了深入研究,发现对大多数蛋白质有抑制作用的十二烷基硫酸钠(SDS)对其有激活作用。在SDS浓度为0.5mM的条件下,PPO 和PPO 的活性分别提高了50%和86%。在pH值为6.5,T=50℃时PPO 的活性达到最大,在此条件下加入SDS后PPO 的活性提高了29.6%。SDS与PPO 的物质的量比在1.2时,PPO 的活性达到最大。     

DNS法测定纤维素酶活力最适条件研究

鉴于纤维素酶研究和生产中,纤维素酶活力测定和酶活力单位的表示方法很不统一的现象,本文研究和分析了３,５－二硝基水杨酸法测定羧甲基纤维素酶糖化力的实验条件,如：温度、ｐＨ、酶促反应时间、ＤＮＳ显色时间、波长等．实验表明：在５０℃,ｐＨ４．６条件下酶促反应时间５ｍｉｎ,ＤＮＳ显色５ｍｉｎ,于４９０ｎｍ处测定ＯＤ值比较适宜．     

嗜碱芽孢杆菌NTT33β-甘露聚糖酶的特性研究

本文研究了嗜碱芽孢杆菌（ Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｌｋａｌｏｐｈｉｌｉｃ） Ｎ Ｔ Ｔ３３β－ 甘露聚糖酶的产生条件和酶学性质．其产酶的最佳碳源为 １％ 槐豆角,最佳氮源为 １％ 蛋白胨＋ ０．２％ 酵母膏,发酵培养３６ｈ 产酶量最高（达 ６１．３ｕ／ｍ ｌ）．甘油、葡萄糖、甘露醇等对产酶有强的阻遏作用．经分离纯化后测得纯酶的分子量为３８．９ Ｋ Ｄ,等电点 ｐ Ｉ为３．０,酶反应最适 ｐ Ｈ 为 ９．０～１０．０,最适温度为８０℃,稳定 ｐ Ｈ 为６．０～９．０,稳定温度为６０℃以下,金属离子中 Ｃｕ２＋ , Ｂａ２＋ , Ｍ ｇ２＋ , Ａｌ３＋ , Ｃｏ２＋ 对该酶有一定的激活作用,而 Ａｇ＋ , Ｈｇ２＋ , Ｍｎ２＋ 对该酶有明显抑制作用     

黄酮类化合物的酶法去糖基化修饰研究

研究了纤维素酶和果胶酶在假酸浆提取物制取黄酮苷元过程的酶解工艺.依次对纤维素酶、果胶酶及复合酶进行了去糖基化修饰研究.结果表明,复合酶去糖基化作用相较于两酶单独作用效果更佳,其最佳工艺条件为:pH值为假酸浆提取物的自然pH值,酶解温度为40℃,含酶量为纤维素酶和果胶酶各0.5%,酶解时间4 h,还原糖浓度显著提高.     

甜叶菊化学成分及其甜度的研究

以工业化的提取分离工艺从甜叶菊干叶中分离提纯得到了甜菊糖苷粗品;利用正相硅胶层析柱以及葡聚糖凝胶、十八烷基硅烷键合硅胶、聚苯乙烯树脂等反相层析柱,分离纯化甜菊糖苷粗品得到5个化合物;再利用薄层层析色谱,质谱,核磁共振等分析手段对所得各单体进行了结构鉴定。结果表明分离得的5种化合物分别为6-羟基-11（β-D-吡喃葡萄糖基）-2-十二酮（-hydroxy-11-(β-D-glucopyranosyl)-2-cyclododecanone,Ⅰ）、莱鲍迪A苷（rebaudioside A,Ⅱ）、莱鲍迪B苷（rebaudioside B,Ⅲ）、莱鲍迪M苷（rebaudioside M,Ⅳ）和葡萄糖（glucose,Ⅴ）,其中单体Ⅰ为新的化合物。利用甜度定量预测模型对化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ进行甜度分析,其甜度分别为蔗糖的113.6、225.0、325.0、29.4倍。     

复合酶对仔猪的应用效果研究

对复合酶应用于仔猪养殖进行了试验研究.将60头50日龄仔猪随机分为3个处理组,即对照组、试验Ⅰ组、试验Ⅱ组.对照组喂基础日粮,试验组喂基础日粮+1000 g/t复合酶.经过30 d饲喂试验,结果表明:试验Ⅰ组较对照组日增重提高了28.9 g,计8.46%;试验Ⅱ组较对照组日增重提高了27.66 g,计8.1%.日采食量试验Ⅰ组较对照组增加了76.6 g,计8.06%;试验Ⅱ组较对照组增加了73.2 g,计7.71%.料重比试验Ⅰ组和Ⅱ组都较对照组下降0.4%,腹泻率试验Ⅰ组和Ⅱ组较对照组降低了74.9%.     

汞在罗丹明B-NaCl-丙醇水溶液中的绿色析相萃取分离和富集

研究了罗丹明B-NaCl-丙醇体系萃取汞的新方法.探讨了罗丹明B的浓度、NaCl的浓度、丙醇的浓度和酸度等对Hg(Ⅱ)萃取的影响,确定了萃取分离Hg(Ⅱ)的最佳条件,并讨论了Hg(Ⅱ)的萃取机理.当溶液中罗丹明B、NaCl和丙醇的浓度分别为0.27g/L、160g/L和30%(V/V)时,Hg(Ⅱ)的萃取率达到98.0%以上,实现了Hg(Ⅱ)与Pb(Ⅱ)、Zn(Ⅱ)、Ir(Ⅳ)、Ni(Ⅱ)、Ag(Ⅰ)、Rh(Ⅲ)、Cu(Ⅱ)、Cr(III)、Mg(Ⅱ)、Fe(Ⅲ)、Al(Ⅲ)和Co(Ⅱ)离子定量分离.