漆树漆酶的催化氧化作用：Ⅺ原儿茶酸酯类的漆 …

用分光光度法对原儿茶酸甲酯，正丁酯，正辛酯底物在不同ｐＨ条件下的离解和漆酶催化氧化反应进行了考察，测定了它们在ＰＨ＝８．０时的反应速度常数。结果表明，不为漆酶所喜爱的亲水性底物，经过适当疏水化处理，可以有效地改善其反应性和提高漆酶的催化活性。     

漆树漆酶的催化氧化作用(Ⅻ)——儿茶酚胺氧化中间体的捕获

在静止条件下，用分光光度法对３个儿茶酚胺底物的漆酶催化氧化行为进行了考察．ＥＳＲ结果证明，这些底物在弱碱性条件下的漆酶催化反应经历了半醌自由基阴离子的阶段，Ｍｇ２＋离子的存在，提高了邻苯半醌自由基的动力学稳定性．结果还表明，儿茶酚胺底物的漆酶催化氧化产物，结构十分复杂，用二苯乙二胺只能捕获到少量对位羟基化的邻醌．     

漆树漆酶的催化氧化作用（Ⅻ）：儿花酚胺氧化中间体…

在静止条件下，用分光光度法对３个儿花酚胺底物的漆酶催化氧化行为进行了考察。ＥＳＲ结果表明，这些底物弱碱性条件下的漆酶催化反应经历了半醌自由基阴离子的阶段，Ｍｇ＾２＋离子的存在，提高了邻苯半醌自由基的动力学稳定性。     

漆树漆酶的催化氧化作用：Ⅵ.漆酶的催化氧化反应机理研究

在静止条件下，用分光光度法研究了底物２，３－二氟基－５，６二卤氢醌的漆酶催化氧应，考察了底物离解与反应的关系，考察了半醌自由基的形成和衰减动力学，测定了不同ｐＨ条件下的表现反应速度常数、米氏常数、半醌自由基的形成速度常数和半醌自由基的衰减速度常数，探讨了环境对半醌自由基形成与衰减的影响，鉴定了反应最终产物的结构，结果证明：１）、底物的一级离解种是底物参与反应的必要形式；２）、半醌自由基阴离子是酶反     

生命金属离子对漆酶催化活性的影响

以５,６二氯２,３二氰基氢醌为底物,在ｐＨ＝４．４０条件下,用分光光度法考察了１１种生命金属离子（Ｎａ＋、Ｋ＋、Ｃａ２＋、Ｍｇ２＋、Ｍｎ２＋、Ｆｅ２＋、Ｃｏ２＋、Ｃｕ２＋、Ｃｒ６＋、Ｎｉ２＋、Ｚｎ２＋）存在下的漆酶催化氧化反应,发现Ｆｅ２＋离子对漆酶的催化活性显示出抑制作用,探讨了其抑制特征、抑制位点和作用方式．结果表明,Ｆｅ２＋离子对漆酶催化活性抑制属竞争性抑制过程,Ｆｅ２＋离子的抑制作用是通过还原漆酶反应产物半醌自由基阴离子来完成的．Ｆｅ２＋离子漆酶复合物的解离常数（Ｋｉ）经测定为１７．５×１０－６ｍｏｌ·Ｌ－１．     

漆树漆酶的催化氧化作用：Ⅷ.四卤代氢醌的漆酶催化氧化

在静止条件下，对四卤代氢醌（ＴＸＱＨ２，Ｘ＝Ｃｌ，Ｂｒ，Ｉ）的漆酶催化氧化行为进行了考察结果证明，四卤代氢醌的酶反应具有几个明显特征：１）一级离解种是底物参与反应的必要形式；２）半醌自由基阴离子是反应的产物；３）半醌自由基经歧化转变成相应的醌；４）整个反应过程呈现出连串反应属性，这些特征反映了漆酶催化氧化反应的共性，结果还表明，由于卤原子的吸电子作用不强，不能使自由电子有效地离域，生成的半醌自由基     

漆树漆酶的催化氧化作用：Ⅶ.稀土金属离子对漆酶催化…

以５，６－二溴－２，３－二氰基氢醌为底物，在ｐＨ４．０－６．０条件下，用分光光度法考察了稀土金属离子对漆酶催化活性的抑制作用，探讨了抑制特征，抑制位点和作用方式。结果表明，稀土金属离子对漆酶催化活性的抑制属竞争性抑制过程。稀土金属离子的抑制作用是通过它 与漆酶活性中酸性氨基酸残基中的ω－羧基阴离子的配位相互作用实现的；在这种作用下，ω－羧基阴离子于对底物酸羟基的氢键或碱化催化作用补削弱，使酚羟基中     

漆酶与各种类型底物反应性能的微量热法研究

在厌氧条件下，用ＬＫＢ－２１０７Ｂａｔｃｈ微量热系统研究了在２９８．１５Ｋ０．１ｍｏｌ／Ｌ磷酸盐缓冲溶液（ｐＨ７．４）中漆树漆酶与５种底物的反应，测定了各反应的反应焓变△Ｈｍ米氏常数Ｋｍ，酶底复合过程的吉布斯自由能△Ｇ０复合物中电子转移速率常数ｋ２，以及漆病对各种底物的催化活性ＥＡ．讨论了相同的实验条件下，各种酶底复合物的稳定性，底物官能团及其位置对酶反应中的电子转移速率和非酶反应中自由基聚合形式     

漆酶的分子生物学研究及其应用

白腐菌所分泌的木质素降解酶主要有3种：木质素过氧化物酶、锰依赖过氧化物酶和漆酶．漆酶是近年来研究较多的一种含铜的多酚氧化酶，在白腐菌中普遍存在，也存在于少数低等真菌和植物中．漆酶多为酸性蛋白，含4个铜离子，形成3个活性区域；表面一些氨基酸被不同程度地糖基化．漆酶可催化的底物迭250种，铜离子结合区域在其催化氧化过程中起决定性作用．运用PCR技术cDNA文库技术，越来越多的漆酶基因被克隆，目前已克隆到的漆酶基因有大约20个．许多来源地基因都是以家族地形式存在于染色体上的．已研究的漆酶基因中都含有10个左右的内含子，这些内含子在活性域位置上有比较高的保守性．一些特珠序列存在与否决定了该酶的表达形式-诱导型或组合型．目前已有部分漆酶基因的异源表达获得成功．本文还介绍了漆酶在环境保护、造纸工业、食品工业等方面的应用．对近年来漆酶的研究进展进行了综述．     

漆树漆酶的催化氧化作用：Ⅸ.含叔丁基的儿茶酚类底物…

用分光光度法对６个含叔丁基的儿茶酚类底物在不同ＰＨ条件下的离解和漆酶催化氧化行为进行了考察，测定了它们的在ＰＨ８．０时的反应速度常数。结果表明，叔丁基的疏水性较好地适应了漆酶对底物疏水程度的要求，使这类底物更容易为漆酶所包结；漆酶活性中心周期的酸性氨基酸残基中的羧基阴离子所提代的ＰＨ环境和质子转移作用，促进了这类底物的离解，使这类底物能在远低于基一级离解所需ＰＨ的环境中进行反应，速度常数数据显示，     

漆树酶催化氧化愈创木酚

研究了漆树酶对愈创木酚的催化氧化,采用半制备HPLC及TLC对反应产物进行分离纯化,用光谱分析法鉴定产物结构.结果表明:漆树酶能使愈创木酚聚合为低分子聚合物,其中2种产物经鉴定为愈创木酚的四聚体和五聚体.     

漆酶和漆酶/介体体系对AOCC浆的改性和纤维表面变化

利用NS51003漆酶对美国旧瓦愣纸箱（AOCC）浆进行生物酶改性，研究了漆酶用量对AOCC浆强度性能的影响。研究结果表明，在最佳酶促反应条件下，即：浆料浓度5％；pH7；反应温度室温；反应时间1h；通空气时，漆酶最佳用量为16U／g。同时还发现，漆酶处理过程中加入介体（丁香酸甲酯MS）后，与单独用漆酶处理相比，AOCC浆的湿抗张强度和湿环压强度均得到进一步的明显提高，这说明介体MS对促进漆酶处理AOCC浆有显著的效果。对漆酶处理和空白的浆样与手抄片进行扫描电镜分析的结果表明，经过漆酶处理后，纤维表面状况发生了明显的变化。     

漆酶处理国产OCC纸浆增强成纸强度

采用漆酶处理国产旧瓦楞纸箱(LOCC)原料增加纸浆强度,对漆酶处理国产OCC纸浆最佳工艺条件进行优化.在最优条件下,采用扫描电镜(SEM)分析了漆酶处理前后成纸纤维表面的形态差异,并利用纤维形态分析仪(Fiber-Tester)分析了漆酶处理前后浆料中纤维形态学参数的变化.研究结果表明漆酶处理国产OCC纸浆最佳工艺条件为:酶用量24 U/g(相对于绝干浆),pH 6.0,温度45,℃,浆浓3%,通空气条件下反应2,h.漆酶在最优条件下处理国产OCC纸浆时,干抗张指数提高11.5%,湿抗张指数提高12.2%,干环压指数提高7.5%,湿环压指数提高幅度最大为20.6%;漆酶/白水体系在最优条件下处理国产OCC纸浆时,干抗张指数提高10.0%,湿抗张指数提高27.0%,干环压指数提高10.5%,湿环压指数提高幅度最大为24.9%.经过漆酶处理后的纤维表面呈现凹凸不平的现象,纤维形态学参数无明显变化;而经过漆酶/白水体系处理后的纤维间产生更多的连接膜,纤维的粗度由空白试样的136.7 mg/m提高至140.6 mg/m.     

水溶性有机介质中漆树酶催化氧化对茴香胺

采用分光光度法,考察不同水／水溶性有机溶剂体系中漆树酶的催化氧化性能,以及影响反应的因素．研究结果表明,漆树酶在醇溶剂中的活性要强于在非醇溶剂中,醇分子中羟基数量对漆树酶活性也有影响．在温度45℃,pH值为7．5,体积比为1：1的水／丙三醇溶液中,漆树酶的活力最高,活力比达150％以上,超出漆树酶在纯水中的活性．以漆树酶催化氧化对茴香胺,采用TLC和HPLC分离纯化反应产物．根据光谱分析法,鉴定主要产物为偶氮茴香醚．     

白地霉产漆酶条件优化及对偶氮染料的脱色

从印染废水中筛选出一株产漆酶的真菌,经鉴定为白地霉(Geotrichum candi-dum).对该白地霉M3产漆酶的条件和所得漆酶对偶氮染料的脱色能力进行研究.结果表明:葡萄糖、氯化铵为白地霉M3产漆酶的最佳碳源和氮源,产漆酶优化培养基包含2g/L的葡萄糖、1.5 g/L的氯化铵、0.015 mmol/L的愈创木酚和0.05 mmol/L的硫酸铜.使用5 L机械搅拌式发酵罐和7 L气升式发酵罐在优化培养基条件下培养白地霉M3,最高漆酶酶活分别达到23.8和36.9μmoL/(s·L),气升式发酵罐更适合白地霉M3产漆酶.获取的粗漆酶液处理偶氮染料1.5 h后,脱色率达到90.2%;可见-紫外光谱扫描分析表明白地霉M3所产漆酶能降解偶氮染料.     

酪氨酸酶和漆酶的直接电化学研究

首次报道了吸附在活性炭表面的酪氨酸酶(Tyr)和漆酶(Lac)能进行准可逆的直接电化学反应，并保持对氧还原的电催化作用．本文所用的固定酶的方法具有简单、易于操作和酶活性保持良好等优点，可用于研究氧化还原蛋白质和酶的直接电化学和用于制备生物燃料电池的催化剂．     

漆酶催化降解氯酚类有机污染物

采用漆酶为催化剂,研究2,4－二氯酚、4－氯酚和2－氯酚的催化降解机理,探讨了反应时间、pH值、反应温度、氯酚浓度以及漆酶浓度对其降解效果的影响和最适降解条件。结果表明,漆酶催化氧化2,4－二氯酚的能力最强,其降解率10h内达到94%,4－氯酚为75%,2－氯酚为69%。2,4－二氯酚发生反应的最适pH值在5.2～6.0之间,4－氯酚在5.5附近,2－氯酚在4.5～5.5之间。漆酶对氯酚的降解率随着漆酶浓度、反应温度的升高而增大,但随着氯酚浓度的升高,不同氯酚的变化趋势并不相同。漆酶降解2,4－二氯酚的反应属于一级反应,反应活化能约为44.8 kJ·mol^-1。另外,利用戊二醛交联壳聚糖制成载体来固定化漆酶,固定化漆酶的活性虽低于自由漆酶,但稳定性明显增强,连续6d用其降解2,4－二氯酚,6h降解率始终在60%以上。     

修饰性载体固定化漆酶

采用壳聚糖铜固定化和交联酶聚集体的方法固定化漆酶.探索了固定化前后漆酶的最适温度、pH,热稳定性和金属离子对其活性的影响,交联漆酶聚集体制备的条件.结果为:游离漆酶的最适温度是20℃,最适pH是4.6;壳聚糖铜固定化漆酶的最适温度是25℃,最适pH是4.0;交联漆酶聚集体的最适温度是15℃,最适pH是3.6.固定化后漆酶的热稳定性提高,不同金属离子影响固定化漆酶的活性,其中K+的激活作用尤为明显.制备交联漆酶聚集体最适戊二醛浓度为1%,最适交联时间是2 h.     

漆树酶催化氧化香草醛

研究了漆树酶催化氧化香草醛的行为，考察影响反应的因素，采用HPLC对反应过程进行监测，用光谱分析法鉴定产物结构，结果是漆树酶催化氧化香草醛最佳条件是31℃，pH值7．40，可见漆树酶能较好催化氧化香草醛，在适当条件下能得到纯净产物：甲氧基对苯醌。     

漆酶的特性和应用研究进展

漆酶是一种结合多个铜离子的蛋白质,属于铜蓝氧化酶,存在菇、菌及植物中。漆酶可存活于空气中,发生反应后唯一的产物就是水,因此本质上是一种环保型酵素。由于这几年环保逐渐被人们所重视,因此漆酶也成为众多学者的研究对象。简要介绍了漆酶的特性和应用研究进展。