应用层流柜饲养裸鼠的体会

裸鼠是先天性胸腺缺陷动物 ,T细胞缺乏 ,是现今进行人癌异种移植的理想动物。然而由于裸鼠的饲养条件要求较高 ,使其应用受到了很多的限制。我们教研室经过几年的探索 ,在无菌实验室内使用层流柜 ,再加上比较严格的管理制度 ,成功地饲养裸鼠 18批次 ,5 6 0余只 ,都顺利地完成了实验。所以 ,在实验室条件下使用层流柜短期饲养裸鼠是可行的     

小型裸鼠屏障设施与管理

小型裸鼠屏障设施与管理王兆绰，肖旭光，王洁良北京医科大学实验动物科学部（北京学院路１０００８３）先天性无胸腺小鼠（裸鼠）系免疫缺陷动物，必须在严格的微生物环境控制下，即屏障改施内才能存活。最初，由于裸鼠实验研究的需要，１９８２年我校病理教研室首先建立...     

过滤帽鼠盒饲养繁殖裸小鼠的观察

<正> 无胸腺小鼠(以下简称裸小鼠),系免疫缺陷动物,饲养于SPF环境中,能接受多种人类癌细胞移植。近年来我国病理学家和免疫学家用裸鼠做动物模型,在医学生物学研究中进行了大量的工作,在癌症机理研究方面取得了可喜成就,某些项目已进入国际先进行列。国内对裸鼠的需求量不断增加。过滤帽鼠盒可做为最简易的屏障用于饲养SPF动物,近年来国内外虽有这方面的介绍,但对其用来繁殖动物的安全性及使用时间的长短,未见详细报导。本文就过滤帽鼠盒性能,裸小鼠饲养繁殖的效果及微生物检测等几方面进行探讨。现将结果报告如     

免疫缺陷小鼠的微生物学控制

<正> 一、概论: 自1966年Flangan首先对先天性无胸腺小鼠——裸鼠(Nude Mice)进行研究以来,至今科学家们已开发出许多免疫功能缺陷的动物模型,其中包括:B细胞缺陷小鼠,NK细胞缺陷小鼠,无胸腺大鼠(裸大鼠Nude Rat),胸腺功能缺陷豚鼠等。这类动物,特别是裸小鼠在免疫学、肿瘤学及生物医学其它领域的研究方面,已得到日益广泛的应用。由于免疫缺陷动物极易感染     

六年中裸鼠繁殖群动物自发性肿瘤发病情况研究

对饲养于SPF条件下的466只Nc系自育选留的繁殖群小鼠自发性肿瘤发病情况进行了6年观察研究,其中包括纯合子雄鼠(nu/nu)164只,杂合子雌鼠(nu/+)302只。每只动物的平均观察时间均达7个月以上,淘汰时均详细解剖学检查,检出病变者进行病理组织学及透射电镜观察确诊。多数肿瘤病例结合裸鼠间可移植性鉴定。共检出自发性肿瘤7例,发生于纯合子裸鼠(♂,nu/nu)5例,杂合子裸鼠(♀,nu/+)2例。本结果表明,在相同饲养环境条件下,裸鼠(♂,nu/nu)的自发性肿瘤发病率(3.04％)比其同系的有胸腺杂台裸鼠(♀,nu/+)(0.66％)明显增高,两者发病比较有显著性差异(P<0.05),且前者的平均发瘤鼠龄比后者为短。结果支持了免疫功能缺陷的裸鼠比其同系免疫功能正常鼠有更高的自发性肿瘤发生的观点。且表明了Nc系裸鼠的自发性肿瘤以恶性上皮性肿瘤为主。此外作者针对前人的观察结果,提出了对一裸鼠群体的自发性肿瘤发病率的正确评价,必须是在相同的生存环境条件下,相同的观察时间内与其相同品系或相同基因背景的有胸腺小鼠进行比较,并经详细的病理学检查,才能得出较客观可靠的结论这一见解。     

胎儿甲状旁腺在裸鼠体内培养的研究

移植前组织培养能延长移植物在终宿主体内的存活时间,目前较普遍的是采用组织液培养,但这种培养方法有许多缺点:培养环境难以稳定,培养液易受污染,移植物易交性坏死,因此,有必要寻找一更可靠的培养方法。裸鼠是一种无胸腺鼠,没有T淋巴细胞,对异种移植物不排斥,近年广泛地被用于肿瘤学及免疫学研究,但应用于器官移植尚不多见。 Sollinger等人发现成人甲状旁腺(PTG)在裸鼠体内培养120天,PTG结构完好,但作为较理想的供体胎儿PTG能否在裸鼠体内存活尚无人知。本实验将胎儿PTG 23块分别在裸鼠肾包膜下培养10—30天,通过光镜及电镜观察,发现PTG结构完整,无变性坏死,无淋巴细胞浸润。应用裸鼠体内培养14天的胎儿PTG行临床移植治疗甲状旁腺功能低下症三例,移植疗效良好,证明经裸鼠体内培养14天的胎儿PTG仍可发挥较好的功能。另外,发现一例甲状旁腺瘤在裸鼠体内培养42天,其结构完整,无淋巴细胞浸润,与培养前的新鲜组织无明显差别。我们认为裸鼠可作为PTG移植物的一种理想培养工具,为移植体内培养开辟了一个可靠的新途径。     

六年中裸小鼠繁殖群动物自发性肿瘤发病情况研究

对饲养于ＳＰＦ条件下的４６６只ＮＣ系自育选留的繁殖群小鼠自发性中瘤发病情况进行了６年观察，研究其中包括纯合子雄鼠（ｎｕ／ｎｕ）１６４只，杂合了雄鼠（ｎｕ／＋）３０２只。每只动物的平均观察时间均达７个月以上，淘汰时均详细解剖学检查，检出病变者进行病理组织学及透射电镜观察确诊。多数肿瘤病例结合裸鼠间可移植性鉴定。共检出自发性肿瘤７例，发生于纯合子裸鼠（♂，ｎｕ／ｎｕ）５例，杂合子裸鼠（♂，ｎｕ／＋）２例。本结果表明，在相同饲养环境条件下，裸鼠（♂，ｎｕ、／ｎｕ）的自发性肿瘤发病率（３．０４％）比其同系的有胸腺杂合子裸鼠（♀，ｎｕ／＋）（０．６６％）明显增高，两者发病比较有显著性差异（Ｐ＜０．０５），且前者的平均发瘤鼠龄比后者为短。结果支持了免疫功能缺陷的裸鼠比其同系免疫功能正常鼠有更高的自发性肿瘤发生的观点。且表明了ＮＣ系裸鼠的自发性肿瘤以恶性上皮性肿瘤为主。此外作者针对前人的观察结果，提出了对一裸群体的自发性肿瘤的正确评价，必须是在相同的生存环境条件下，相同的观察时间内与相同品系或相同基因背景的有胸腺小鼠进行比较，并经详细的病理学检查，才能得出较客观可靠的结论这一见解。     

秃发动物模型研究进展

应用动物模型研究人类的秃发已有很长的历史,在男性秃发的研究中,人们建立了短尾猴模型,AGA小鼠模型及用于大批药物筛选的毛发周期转换测定法。实验动物的先天性无毛也一直受到关注,不但有数量众多的大、小鼠先天性无毛突变的报道,而且有胸腺缺失的裸鼠这一特殊模型。近几年关于生长期脱发和斑秃的动物实验研究也发展迅速,而建它于生物支持系统上的离体皮肤模型,又为秃发研究提供了新的途径。     

人类肿瘤治疗实验研究

<正> 一个高转移的人肺巨细胞癌移植瘤PG已在无胸腺裸鼠体内建立。在各种遗传背景的裸鼠体内,包括BALB/cA、NIH、C57BL/6J、615/PBI等,PG肿瘤细胞皮下接种后,均可发生自发转移,局部淋巴结转移率为94％(110/117),肺转移率为83％(97/117)。这种高转移特性在五年多时间内连续100多代移植过程中仍保持不变。为了研究肿瘤转移的遗传机制,我们从PG瘤细胞中提取高分子量DNA片段,用磷酸钙共沉淀的方法转染NIH/3T3小鼠纤维母细胞。经过连续两轮转染,获得的转化细胞能在裸鼠体内成瘤。其中一个转化克隆TF87-2-10皮下接种裸鼠后,能自发转移至肺。DNA分子杂交显示该细胞基因组中整合有人DNA序列。说明该转化细胞转移表型的     

装配式恒温恒湿洁净室生产繁殖裸鼠小结

<正> 裸鼠(BALB/c—nu/nu)属于缺乏T细胞的免疫缺陷动物,是免疫学、肿瘤学等科研中不可缺少的动物模型。由于裸鼠缺乏胸腺,抵抗力极低,易感染各种疾病,在普通环境中很难存活,只有在屏障系统或隔离器内才能正常的生存,繁衍后代。为此,我们于1980年建立了屏障系统“装配式恒温恒湿洁净室”。1983年曾对其中部分高     

BALB/c突变鼠生物学特性的初步研究

在BALB/c的生产群中,1罐(1:1交配)繁殖鼠生下2只被毛短而稀的仔鼠。该仔鼠成年后进行兄妹交配,后代出现三种表型:被毛紧披,有胸腺,生长快,繁殖力高的全毛小鼠;完全无毛,无胸腺,生长慢,性成熟晚,产仔数低的裸鼠;被毛短而稀,有胸腺,生长较快,繁殖力较高的中间态。对这些突变鼠进行交配试验,结果表明:此种突变和常规裸基因的突变一样,由单对基因控制,三种小鼠的基因型为:全毛(+/+)、全裸(nu/nu)和中间态(nu/+),在该突变鼠的生产中,可及早将全毛小鼠淘汰掉,保留裸鼠和中间态进行繁殖,使裸鼠生产简便易行。     

褪黑激素与地塞米松对小鼠胸腺发育影响的生物化学与细胞生物学研究(Ⅰ)——褪黑激素对小鼠胸腺细胞大分子掺入能力及超氧化物歧化酶活性的影响

研究胸腺细胞体外培养条件下的~3H-Tdr、~3H-Ura及~3H-Phe的掺入能力,并对胸腺组织超氧化物歧化酶(SOD)的活性进行了测定。与对照组相比,经褪黑激素(Melatonin)处理的动物,其~3H-Tdr、~3H-Phe的掺入量分别增加57.1％与42.8％,~3H-Ura的掺入量变化不明显(1.10～1.48×10~)-2)dpm/cell);SOD活性增加了12.5％;同时发现,实验组动物的胸腺-体重比提高了14.1％。结果表明,褪黑激素对延缓小鼠胸腺的随龄退化有一定的效果。     

其它

<正> T细胞抗原受体(TCR)是由可变的α和β链组成的异二聚体,α和β链与稳定的单链复合物CD3非共价结合,TCRα和β链的基因译成的密码是经过再排列的,并在个体发育时表达。在胸腺微环境内,TCR遗传正常,最近证实在先天性无胸腺裸鼠,也发现TCR表达。 TCR的功能是胸腺内可变的α和β链选择定型的。在无胸腺鼠只有少数V_β链被利用。这种限制的异原性是DNAβ链重排列的限制型和对不同V_β亚区的单克隆抗体可变染色型所证明。此外,无胸腺鼠的T细胞对各种抗原的反应功能分析表明,与缺乏无性     

SPF裸鼠在简易裸鼠饲育室培育的探讨

利用旧动物室改造成具有恒温、恒湿、洁净的饲育室,配合无菌操作技术,应用层流架饲养从上海肿瘤所引进的SPF裸鼠,经过四年对动物育种,饲养和无菌操作技术进行探讨。我们成功地培育了300只SPF裸鼠用于人胃高分化腺癌7911侈植瘤、人胃低分化腺癌MGC80-3裸鼠肝转移、人肝癌组织裸鼠移植瘤、人肝癌细胞株BEL-7102移植瘤、3.4苯丙吡诱发裸鼠皮肤癌等模型。在动物育种方面我们采用BALB/c非裸近交产生基因稳定核心群,BALB/c裸鼠与BALB/c核心群回交以保持BALB/c裸鼠基因的稳定性和一致,利用回交产生的雌性半裸鼠和维性全裸鼠生产裸鼠,淘汰半裸鼠。以此循环能准确断定仔鼠基因型,使留种,配种及繁殖方便准确。此繁殖方法生产断乳的仔鼠比杂交法断乳仔鼠平均体重增加2g,半裸雌鼠受孕率达82％,28和60日龄课鼠与同龄半裸或非裸鼠体重相差无几,已接近国内同行繁育裸鼠水平。在改造旧动物房繁殖裸鼠同时,我们严格采用无菌衣帽穿戴、消毒和无菌操作技术使层流架和房间每平皿菌落低于国外同类饲育室平均标准。     

第四届免疫缺陷动物实验学术交流会即将召开

<正> “全国第四届免疫缺陷动物实验学术交流会”订于1992年11月26—28日在广东省湛江市湛江医学院召开,会议将交流和讨论有关免疫缺陷动物实验室的建立、管理和裸鼠自发肿瘤的生物学特性;人肿瘤移植瘤模型的建立及有关研究;人癌裸鼠移植瘤的实验诊断及治疗;正常人胚组织裸鼠移植及诱癌研究;麻风杆菌裸鼠感染等问题。以进一步开拓研究领域,提高研究水平。     

医学实验动物学在实验教学与科研领域里的重要位置不容忽视

在生命科学体系的研究中 ,实验动物学作为一门独立学科 ,具有独立的基本概念、基本内容及自身的理论体系 ,尤其是近几年来 ,医学实验动物学这一新兴学科的发展 ,转基因动物技术的问世 ,给这一领域开辟了广阔的应用前景 ,医学实验动物学是生命基础研究和生物高新技术研究、开发、应用的重要支撑条件 ,并在医学实验教学中具有重要的位置。为此 ,实验动物科技事业将从科学研究的支撑条件逐渐上升为前沿学科。必须转变旧的传统观念 ,改革旧的实验教学、科研模式 ,创建新型的医学实验动物学教学、科研新体系 ,为培养合格人才打下坚实的基础。     

净化室与层流架相结合饲养繁殖裸鼠经验

为创造一个净化环境饲养裸鼠,我们将旧动物房改造成11M~2和9M~2两间净化室,一间为裸鼠繁殖室,一间为裸鼠实验室。净化室空气经过初、中、高效三级过滤,由鼓风机送风,室内保持正压,净化室内放层流架饲养繁殖裸鼠。进入净化室的一切物品经过严格消毒后由传递窗传入,层层拆包进入层流架,工作人员洗澡后更换无菌服进入净化室。经过一年多的使用,取得了一定的效果。裸鼠繁殖平均产仔数6.8只,平均成活率80％,一年内进行了四次空气菌落检测,均达到100级净化标准。此外,还在实验室进行了裸鼠肿瘤实验,均取得满意的效果。通过一年的裸鼠繁殖,实验证明在外环境条件比较差的情况下,利用旧房屋改造建立裸鼠室是可行的。只要严格管理,合理操作,同样能取得满意的效果。     

原位移植建立裸鼠人胃癌转移模型

用原位移植方法建立裸鼠人胃癌转移模型。方法：以ＳＧＣ－７９０１人胃癌细胞株裸鼠皮下移植瘤组织块为材料,将其移植到裸鼠胃壁手术制备的粘膜小囊中。结果：该模型肿瘤生长潜伏期为３－４周,原位瘤沿胃壁呈浸润性生长,以后迅速增大,出现淋巴结及肝脏转移,并伴发幽门梗阻及癌性腹水等征象,荷瘤鼠生存期为１６－２４周。     

浅论实验动物工作的人才培养及《实验动物学》的教学

实验动物科学是现代生命科学发展新崛起的一门独立的综合性学科。本文通过我国实验动物科学教育工作状况的分析 ,阐述了发展实验动物科学必须重视《实验动物学》教学工作的观点 ;提出了发展实验动物科学须加速培养科技人才 ,提高职工专业素质的观点 ;总结了在医学院校开展多层次《实验动物学》的教学工作经验 ;并指出要充分调动科技人员的积极性 ,稳定和发展实验动物科技队伍的论点。关键词 :实验动物学 ;人才培训 ;教学关于在本科生中开设医学实验动物学课程的思考张玉珍(江西医学院实验动物科学部 ,南昌　 330 0 0 6)摘要 :开设医学实验动物学 ,总体教学思想是让学生了解实验动物学的概念、发展、实验动物的生物学特性 ,实验动物的饲养、管理、控制以及应用 ,掌握实验动物主要知识和主要技术 ,为在实验动物的研究及应用中打下基础。实验动物学具体可分为三大知识板块 :实验动物学基础知识 ;实验动物的基本特性和应用 ;实验动物的基本技能。这门课程的学习 ,使学生能在今后的医学生涯中 ,不断地探索实验动物领域 ,发展实验动物科学 ,更新自己的知识结构 ,激发科研热情 ,将实验动物学知识应用到医学临床和医学研究工作中去 ,让实验动物为人类作出更大的贡献。     

医学实验动物管理(软件) 实验动物设施条件(硬件)

实验动物的研究工作在国际上已成为一门独立科学，它是多种科学领域研究工作必须的重要手段和条件之一，医学实验动物管理（软件）及实验动物设施（硬件）两方面是否能达到实验动物质量控制的标准是衡量一个科研单位科学水平的重要标志，是科学发展的需要，也是实验动物工作发展的必然趋势，实验动物管理的好坏直接影响着科学成果的严密性与可靠性，针对实验动物管理（软件）及实验动物设施条件（硬件）这两方面和大家进行探讨。