光合细菌对烟草与药用植物科间远缘杂种后代农艺性状及品质的影响

为扩大烟草种质资源的范围以及缓解吸烟与健康的矛盾,利用普通烟草品种沙姆逊与药用植物罗勒和紫苏进行科间远缘杂交育种,选育出新型烟草品系香料型罗勒烟和香料型紫苏烟,研究了喷施光合细菌菌液对其农艺性状及品质的影响。光合细菌菌液由Rhodospirillium、Rhodopseudomonas、Rhodobacter、Chromatium和Chlorobium等菌株发酵培养,菌液含菌数达5×109个·mL-1。在苗期和大田以1∶200的比例对烟叶叶面喷施光合细菌菌液,能够促进新型烟草的生长,提高烟叶的产量;对外观质量的改善不显著,但对烟叶内在化学成分的含量及其协调性具有显著的影响,能够同时降低烟碱并增加钾的含量。评吸结果显示,光合细菌处理后的新型烟草香味独特,余味纯净,劲头适中。     

大豆遗传转化研究

用苯酚-氯仿-异戌醇-RNase法从草决明、玉米、栽培大豆周89⑦-2-Al、花生、豫豆12等作物幼叶中分离提取DNA，用柱头涂抹法将DNA导入栽培大豆，导入后的当代大豆成荚率为30%～40%，其后代（D1～D4）主要在株高、生育期、叶色、抗病抗倒状性和产量等性状上出现变异，其突变率为2%～4%。以大豆89⑦-2-2Al，玉米90-1和花生为供体的DNA导入受体周So3-1，周86①-1-1等组合的后代变异株，其抗病性提高，生育期缩短5～7d，产量比受体（ck）增加10%，SOD同工酶检测其变异株均多一条供体的谐带或谱带强弱有变化。     

芦笋中芦丁的提取和测定

采用正交试验法对芦笋中芦丁的最佳提取工艺做了研究,找出最佳提取条件为料液比1 g:30 mL,浸提温度为75～80℃,浸提时间为6 h,乙醇浓度为70%.采用紫外可见分光法检测芦丁的含量,不用加显色剂,直接以258 nm作为最大吸收波长,结果表明,在最佳条件下,芦笋中芦丁的平均含量稳定在2.62%左右,该方法的平均回收率为99.73%,标准偏差为0.97%.试验方法样品处理简单,准确度高,精密度好,很适合于芦笋中芦丁提取和测定.     

烟株不同叶位及接种方式对TMV传播的影响

为进一步弄清烟草普通花叶病毒病的传毒规律.试验以烟草品种K326为材料,连续3a以不同接种方式对健康烟株进行TMV接种试验.结果表明:烟草普通花叶病不通过烟叶气孔传毒,而是通过微伤口、大伤口和叶面与叶面接触渠道传播病毒,而且病毒人口离生长中心越近,病毒传播表现的速度更快,病毒的潜伏期为15～30 d,且在接种30～45d内,烟叶的发病率有一高峰值;烟草普通花叶病毒在烟株的幼嫩叶片上更易传播,症状表现在接种以上的叶片上,带病症的老叶片随着烟株的生长,症状会慢慢消失;在20～35℃的范围内,高温高湿有利于病毒的侵染和症状的表现.杜绝烟草幼嫩叶片摩擦伤口和TMV接触,是防治烟株上TMV传播的有效途径.     

连续流动法测定新鲜烟叶中的直链淀粉和支链淀粉

烟叶中直链淀粉和支链淀粉的含量与烟叶的品质和产量有着重要的关系,检测新鲜烟叶中淀粉含量,对于掌握烟株生长和烟叶品质有重要意义.直链淀粉和支链淀粉是烟草中较难测定的成分.研究以高氯酸为提取剂,建立了一种快速、准确测定新鲜烟叶中直链淀粉和支链淀粉的分析方法.方法的操作步骤是,采用液氮研磨剪碎的鲜烟叶,用乙醇-饱和氯化钠溶液脱色,40%高氯酸溶液提取,直链淀粉采用在线氢氧化钠碱液分散二次进样显色,选择波长600 nm的滤光片,支链淀粉采用直接进样显色,选择波长570 nm的滤光片,连续流动法测定烟草中2种淀粉含量.直链淀粉和支链淀粉的检出限分别为0.49 mg/g和0.37 mg/g,平均回收率分别为111.97%和104.41%.方法对两种淀粉的相对标准偏差均在5%以内.     

转几丁质酶基因烟草后代的遗传分析

本论文采用分子检测(PCR扩增、PCR-Southern杂交)与表型检测(接真菌实验、酶活力测定)相结合的手段，对花粉管通道法及载体法导入几丁质酶基因烟草后代的遗传表现进行研究。结果证明通过不同方法导入受体细胞基因组中的外源基因均能遗传给后代，并能在转化受体当代及后代中高效表达。但采用花粉管通道法导入的外源基因虽然能够遗传给后代，但分离比复杂，遗传规律性较差。而载体法导入的外源基因T1代x^2检测符合3：1的遗传分离比，遗传稳定性要好于DNA直接导入。因此，建立良好的遗传转化系统是外源基因稳定遗传和表达的前提。     

紫苏营养成分的研究

对紫苏植物的叶、茎、籽中营养成分进行了研究,结果表明:紫苏中含有8种人体必需氨基酸;紫苏叶片中粗蛋白含量较高,为27.8%,β-胡萝卜素含量为56.5 mg/kg;紫苏茎、叶中挥发油含量为0.57%;紫苏油中α-亚麻酸含量为62.73%;研究结果为合理开发利用我国紫苏资源提供了重要依据.     

高效液相色谱法测定吉祥草根茎中芦丁的含量

目的：建立吉祥草根茎中芦丁的含量测定方法.方法：采用高效液相色谱技术测定芦丁的含量,色谱条件为：Diamonsil C18（4.6 mm×250 mm,5μm）色谱柱,乙腈-0.1%磷酸水（28：72）为流动相,恒定流速为1.0 mL/min,检测波长为350 nm,柱温25℃.结果：吉祥草根茎中芦丁的含量为0.26%.芦丁在0.13～0.65 mg/mL范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系,r=0.999 9,平均回收率为99.87%,RSD（n=5）为1.41%.结论：该方法简便准确,重现性好,可以作为吉祥草中芦丁的含量测定方法.     

苜蓿花叶病毒RNA_23′端cDNA转基因烟草的研究

将克隆的苜蓿花叶病毒中国分离株(AlMV-Ch)RNA23′端cDNA重组到植物表达载体pROKII中,用三亲融合法导入农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)LBA4404,采用叶圆片法转化普通烟草,诱导再生小植株.经卡那霉素抗性筛选和PCR检测,证明AlMVRNA23′端基因已整合到转基因烟草的基因组DNA中.     

全自动加压溶剂萃取——高效液相色谱法测定洋葱中芦丁和槲皮素含量

通过与水浴回流法比较,建立了全自动加压溶剂萃取法,可简单、快速测定洋葱中保健活性物质芦丁和槲皮素含量.采用高效液相色谱仪在368nm波长处测定芦丁和槲皮素含量.色谱柱为C18柱,流动相为甲醇-磷酸溶液(58:42,体积比),以1.0ml/min流速等度洗脱,外标法定量.结果表明,在芦丁和槲皮素质量浓度为0.1～200mg/L时,其线性相关系数均大于0.999.在2.0～100mg/kg的添加水平下,芦丁和槲皮素的平均回收率分别为83.5%～94_2%和84.8%～91.2%;相对标准偏差分别为2.9%～7.4%和4.2%～6.9%(n=6).全自动加压溶剂萃取法的检出限(LOD),芦丁和槲皮素分别为0.05,0.03mg/kg.定量限(LOQ),芦丁和槲皮素分别为0.2,0.1mg/kg.研究建立的运用全自动加压溶剂萃取仪提取、高效液相色谱测定洋葱中芦丁和槲皮素的方法,线性良好,重现性较好,灵敏度较高,能够满足蔬菜和水果等农产品中芦丁和槲皮素的快速检测.     

烤烟叶面微生物5种水解酶的产生、温度稳定性及其在烟叶人工陈化中的应用

研究了烤烟叶面微生物菌株5种水解酶（β 淀粉酶、糖化酶、纤维素酶、果胶酶和蛋白酶）的诱导产生及其温度稳定性,结果发现培养基中分别添加0.2%的5种水解酶相应的诱导物,对所研究的烤烟叶面微生物菌株5种水解酶的产生均具有诱导作用.5种水解酶在60?℃时均不稳定,易失活;50?℃时,除果胶酶外,其他4种水解酶的温度稳定性较好.在对5种水解酶60?℃保温2?h过程中所取的样品测定酶活时发现,60?℃反应所得的酶活都高于各自酶活测定常规方法中所用温度反应所得的酶活.用烤烟叶面微生物及其产生的5种水解酶组合成6种不同配方,对2个品种的烤烟进行了为期6个月的人工陈化试验,结果是人工陈化2个月后试验样品评吸总分普遍高于对照样品.本研究为进行烤烟人工陈化以缩短烤烟自然陈化周期、改善烟叶内在品质奠定了基础.     

紫苏甲醇提取物的体外抗氧化及抑菌活性研究

研究了紫苏不同部位(苏叶、苏梗、苏子)中的多酚、黄酮含量,并考察了紫苏甲醇提取物的抗氧化及抑菌活性。结果表明,苏叶中的多酚、黄酮含量均为最高,分别为1.34、0.72mg/g,其次为苏子、苏梗;苏叶甲醇提取物清除DPPH能力及铁还原能力最强;苏梗甲醇提取物对ABTS自由基具有较好的清除效果。抑菌试验结果表明,苏叶提取物的抑菌效果最好,对敏感菌株大肠杆菌的MIC、MBC值分别为40、80μg/mL。紫苏叶是一种较好的天然抗氧化剂和防腐剂资源。     

我国烤烟产值产量质量及其与气候年景关系的研究

利用 1953～ 1993年我国烤烟单位面积产值、产量和上中等烟比重资料 ,划分我国烤烟高低产值、丰歉和优劣质年景 ,研究高低产值年烤烟产值与产量及中等烟比重之间的关系 ,为烤烟生产获得最佳经济效益提供依据 .结果表明 :高产值年型在产量上为正常或丰收年景 ,在质量上大多为正常或优质年景 ;低产值年型则相反 ,在产量上大多为歉收年景 ,在质量上大多为正常或劣质年景 .就全国范围而言 ,现阶段烤烟单产 170 0kg/hm2 左右、上中等烟比重 50 %左右、气象产量 180kg/hm2左右、上中等烟气象比重 2 %左右 ,烤烟生产经济效益最佳 .在主攻烤烟质量上 ,各地发展不平衡 ,一些地区仍需努力提高上中等烟比重 .     

对应因子法研究烟叶氨基酸含量与香吃味品质的关系

利用对应因子法对不同等级烟叶中氨基酸含量与香吃味的关系进行了探索。研究发现不同氨基酸对其惯量主轴贡献不同 ,轴 1主要体现了香型的变化 ,轴 2则主要体现了吃味的变化 ;其中苏氨酸、丝氨酸、脯氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸对香型的贡献大 ,天冬氨酸、酪氨酸、赖氨酸与精氨酸则对吃味的贡献高 ;谷氨酸、脯氨酸对香吃味有不良贡献     

不同类型烟草品质性状间关系的研究

对５１份烤烟和５７份晒烟材料的总糖、还原糖、总氮、蛋白质、烟碱、糖碱比和总粒相物等７个化学成份测试结果进行分析，结果表明：烤烟的糖类物质和糖碱比比晒烟高，而晒烟的总氮、蛋白质、烟碱含量高于烤烟，两类烟草总粒相物含量相近，晒烟在所有性状上具有较广泛的变异性；烤烟在所测７个化学成份中绝大多数具有极显著的相关性，而晒烟化学成份之间具有显著相关性的相对少一些；逐步回归分析结果表明，烤烟中对总粒相物影响最大的为总糖和糖碱比，而晒烟则为总糖和蛋白质，通过对一、二种化学成份的测定可以较好地预测总粒相物的含量；聚类分析表明，烤烟材料可以较好地归为两类，晒烟材料则有相当部分难以归类。这些结果对于在卷烟叶组配方中提高产品安全性，更好地利用现有材料具有重要参考价值。     

钾肥对皖南红壤烟叶含钾量及烟碱含量的影响

试验结果表明,皖南植烟红壤的烟叶含钾量随施钾量的增加而增加．烟株成熟期根系附近土壤速效钾、交换性钾含量与烟叶含钾量呈明显正相关．增加钾肥用量可以降低烟叶钙含量,提高烟叶Ｋ／Ｃａ值．烟叶氮和烟碱含量随施钾量增加有下降的趋势．施钾量与烟叶还原糖的相关性不明显．     

烤烟营养元素分布特征的主组分分析

以烤烟为对象,按田间试验和盆栽试验测定其不同生育期叶、茎、根的生育期叶,磷,钾,钙,镁,铁,锰,锌、铜、硼１０种元素含量。运用化学计量学中的主组分分析方法,讨论了这些营养元素分布特征,表明,各部位有特征元素,硫,磷,钾,钙,镁等中常量元素,在烟叶中有较高的浓度分布,而烤烟中的铁,锰,锌,铜,硼等微量元素则在根部有较高的浓度分布。提示在进行烤烟矿质的植株诊断时要十分注意不同部位的差异,也说明了可将化     

导入大豆总DNA改良大麦籽粒营养品质

利用花粉管通道法和基因枪法将大豆总DNA直接导入大麦。采用微量凯氏定氮法和氨基酸自动分析仪进行大麦后代籽粒蛋白质含量和氨基酸含量分析。结果显示：(1)经花粉管通道法导入大豆总DNA获得的大麦后代有6个单株籽粒蛋白质含量明显超过对照(12．91％)，它们是18．23％，16．61％，16．42％，16．58％，16．22％和16．38％，占总数比例的7．06％；(2)经基因枪法导入大豆总DNA共获得12个单株籽粒蛋白质含量明显超过对照(13．29％)，它们的蛋白含量分别为16．70％，16．52％，17．9l％，19．59％，17．44％，18．56％，18．46％，17．3l％，16．5l％，18．8l％，18．8l％和19．02％，占总数比例的8．33％；(3)籽粒氨基酸含量分析显示在高蛋白变异后代中，随着籽粒蛋白质含量增加的同时，籽粒总氨基酸和各种必需氨基酸含量也有明显提高．经直线相关分析显示，导入大豆总DNA的后代籽粒赖氨酸等6种必需氨基酸含量与总氨基酸含量呈极显著正相关关系。本试验结果充分说明，直接导入大豆总DNA有可能提高大麦籽粒的蛋白质含量及质量。     

转AlNHX1基因大豆后代遗传稳定性及耐盐性分析

为了获得耐盐性有所提高的转AlNHX1基因大豆后代材料,以已获得的转AlNHX1基因的6个株系中的3个株系后代为研究对象,通过分别对这3个株系转基因大豆各后代进行PCR分子检测并结合耐盐性鉴定,以分析外源基因在转基因大豆中遗传稳定性和耐盐性.结果表明:AlNHX1基因在转基因植株的后代中遗传;选取3个株系中部分阳性植株做耐盐性检测,结果表明:转基因大豆耐盐性状均好于野生型大豆.在150mmol/L NaCl胁迫下,转基因大豆叶片中维持了相对较高的K+/Na+比值,相对含水量较野生型提高了9%,而渗透势降低了39%,表明转基因大豆具有较好的吸水和保水能力;在盐胁迫下,超氧化物歧化酶(SOD)与过氧化物酶(POD)活性较野生型大豆分别提高了45%与69%.综上,通过耐盐筛选获得的转AlNHX1基因大豆具有较强的耐盐性.     

施氮量、有机肥配施比例对烤烟产质量影响的研究

烤烟K326施氮量、鸡粪有机肥配施比例试验表明:A282处理现蕾期、打顶期农艺性状最好,能够保证顶叶充分开面,倒2叶、倒4叶、倒6叶干鲜比性状最好,烤后烟叶工业可用性高。A2B2、A2B3处理烟叶产量、产值、均价、上等烟比例、中上等烟比例等经济性状都较好,经济效益较高。施氮量、有机氮比例与各部位烟叶化学成分相关性并不一致。A2B3处理下部烟叶烟碱低,总糖适宜,糖碱比高;中部烟叶还原糖和两糖比较高,烟碱适宜;上部烟叶蛋白质和烟碱较低,有利于减少烟叶刺激性,其余化学成分较协调,各部位工业可用性较高。因此,采用施氮量9 kg·666．7m-2、配施鸡粪有机肥30-40％的处理组合较适合光泽县烟叶生产需要。