双水相非离子表面活性剂萃取法分离胆固醇氧化酶

ＴｒｉｔｏｎＸ－１１４是一种常用的表面活性剂。双水相萃取分离法适合于分离具有一定疏水特性的水溶蛋白质。在研究了其浊点，浓度，ｐＨ值，分离时间和分离温度等影响因素后，得到了分离胆固醇氧化酶的优化条件。可以直接对发酵上清液进行处理，一次萃取可使酶液体积缩小１０倍，总酶活回收率为７０％。     

人溶菌酶的双水相萃取法分离

采用双水相体系直接从重组巴氏毕赤酵母发酵上清液中分离人溶菌酶,研究了体系中聚乙二醇(PEG)平均分子量,PEG、硫酸钠和氯化钠浓度,pH对人溶菌酶和总蛋白的分配系数、相体积比、萃取率和纯化因子的影响。结果表明:在PEG 4000、N a2SO4和N aC l质量分数分别为0.08、0.13、0.06,pH为5.6时,在室温下的双水相萃取率达96.63%,纯化因子为6.5。     

双水相萃取法分离纯化月季花色素

采用PEG400/Na2SO4双水相体系分离纯化月季花色素,确定了月季花色素的双水相体系组成为25％PEG400与18％Na2S04,并通过实验探讨了温度、色素粗提液体积、pH值对萃取效果的影响.结果表明,色素粗提液体积对萃取效果影响最大,其次为pH值和温度.最佳萃取条件为:pH2.0;粗提液体积1mL;温度30℃.在此条件下,月季花色素的萃取率为98.45％.双水相萃取法是分离纯化植物色素的有效方法.     

双水相萃取法富集分离地木耳中的藻蓝蛋白

采用聚乙二醇(PEG4000)/硫酸盐双水相体系,经一次萃取从地木耳细胞破碎液中富集分离藻蓝蛋白.分别考察萃取时间、硫酸盐种类及浓度、PEG4000浓度、溶液pH值和离子强度对双水相萃取分离地木耳中藻蓝蛋白的影响.结果表明:在萃取时间为30 min,Na2SO4的质量分数为15％,PEG4000的质量分数为12％,加入...     

胆固醇氧化酶的三相分离及其血清总胆固醇的测定

对一株胞外胆固醇氧化酶高产菌COX4-8进行了三相分离,结果表明:最优分离条件为:硫酸铵-异丙醇沉淀,硫酸铵饱和度为70%,异丙醇与发酵上清液的体积比为0.8∶1时,pH值为9,在20℃下静置30min,12 000r/min离心10min,纯化倍数4.5倍,回收率高达95%.酶动力学方法检测胆固醇氧化酶测定血清总胆固醇含量,其线性回归方程为y=0.006 4x+0.002 7,R2=0.965 4,线性范围0~7.16mmol/L.结果表明了该酶具有作为临床诊断试剂的潜力,并为临床上利用酶动力学方法测定血清总胆固醇含量奠定了实验基础.     

双水相体系中金属离子萃取分离现状及展望

本文讨论了聚合物—盐—有机试剂双水相体系的特点和研究现状，概述了该体系用于萃取分离金属离子的进展状况，提出了这种体系需进一步解决的问题。     

正负离子混合表面活性剂的双水相系统

实验测定并绘制了正离子型表面活性剂十二烷基硫酸钠（SDS）和负离子型表面活性剂十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）混合表面活性剂水溶液的双水相相图,考察了温度和外加盐溴化钠对双水相区域的影响,并用电镜观察了双水相的微观结构,结果表明,该系统可以在SDS或CTAB过量的两个区域形成双水相,属于最低临界共溶温度（LCST）类型,温度升高导致双水相区域扩大,溴化钠的加大使双水相区域扩大并向混合比增大的方向移动,加入溴化钠后,对CTAB过量区双水相的平衡有明显的促进作用,加快了分相速度。     

三相分离甾短杆菌胆固醇氧化酶及其性质

三相分离(TPP)是将硫酸铵与叔丁醇混合后形成有机相、中间沉淀相和水相。在20°C,调节发酵上清液的pH至6.0,加入硫酸铵使终浓度为400 g/L,溶解后加入与上清液等体积的叔丁醇,静置1 h分相,胆固醇氧化酶在有机相和水相之间形成蛋白沉淀,12 000 r/min离心10 min收集中间蛋白相,用pH 7.5,10 mmol/L的磷酸缓冲液溶解。结果表明:利用三相分离技术从乳化体系中分离纯化胆固醇氧化酶,比酶活提高了3.49倍,收率达93%。回收的酶液进一步经过DEAE-Sepharose Fast Flow纯化,比酶活从3.56 U/mg提高到30.15 U/mg。该酶最适反应温度为60°C,最适反应pH为7.5,酶的等电点为8.5,该酶在37°C,pH 6.0~8.0较为稳定。Hg2 和Ag 离子完全抑制胆固醇氧化酶的活性。     

非离子表面活性剂

现有的非离子表面活性剂品种繁多,例如净洗剂6501,化学名称为椰子油烷基乙二酰胺。其主要原料配比为椰子油52％,二乙醇胺48％。它的亲水基为多元醇,憎水基由一个长的碳氢链烷基组成,外观呈琥珀色粘稠液体状,与其他表     

非离子表面活性剂析相萃取的热力学性质

研究了在非有机溶剂萃取过程中，温度对小分子显色剂FPNS[3-(对甲酰基苯偶氮)-4，5-二羟基-2，7-萘二磺酸]的萃取率E的影响，发现其萃取方式符合聚氧乙烯型非离子表面活性剂的增溶理论；由分配系数lgD与1/T线性关系，直线的斜率可得△H^Ф，由热力学关系式可计算出△G^Ф和△S^Ф，用所得热力学函数值对不同金属离子的萃取结果进行了分析。     

浊点萃取-高效液相色谱法测定油脂中的胆固醇

建立了一种简单快速的采用浊点萃取-高效液相色谱法测定油脂中的胆固醇的方法.以非离子表面活性剂Triton X - 114为萃取剂,色谱柱为phenomenex C18,流动相为甲醇-乙醇等度洗脱,流速为0.8 mL/min,检测波长为206 nm.采用Triton X - 114进行浊点萃取,分别优化了影响萃取效率的表面活性剂的浓度、盐浓度、平衡温度及时间等条件.胆固醇的质量浓度在0.10～150μg/mL范围内与其峰面积成良好的线性关系(r=0.999 79),该方法的定性检测限为0.03 μg/mL(S/N=3),回收率为86.00％～93.50％,可以满足油脂中胆固醇含量的分离测定.     

双水相萃取红景天苷的研究

聚乙二醇(PEG)/盐的水溶液双相体系(ATPS)形成双相行为和双相分配行为的研究.研究了聚乙二醇(PEG)的分子量和质量分数,盐种类,盐的质量分数,离子强度,红景天初始浓度对红景天提取率的影响.并通过正交试验,确定最佳双水相PEG/(NH_4)_2SO_4体系的条件,产生一个简单的预处理方法为提取和测定红景天苷.当双水相体系是20%PEG1000,20%(NH_4)_2SO_4和1%KCl时,提取效果最好,提取率是95.32%.     

丙酮/(NH4)2SO4双水相体系提取芦丁影响因素研究

【目的】研究丙酮/(NH4)2SO4双水相萃取体系对分离槐米中芦丁的影响因素。【方法】利用正交设计法进行优化,并把28.57%的硫酸铵溶液与等体积的70%的丙酮混合溶液,调至pH=9形成的双水相,两相的体积比(V上/V下)是1.62。【结果】萃取体系的上相中芦丁含量达到95.92%。【结论】丙酮/(NH4)2SO4双水相萃取体系分离芦丁具有良好的选择性。     

N1923串级萃取分离La、Nd数学模拟

在较宽的酸度、稀土浓度、不同体系条件下探讨了N_(1923)萃取La、Nd的性能,详细地研究了在HNO_3介质中料液中酸度[H~+]_F、镧、钕浓度[La~(3+)]_F、[Nd~(3+)]_F对萃取平衡的影响规律,绘制了La、Nd萃取平衡等温线和分配比例数D~(-1)与平衡水相中镧总浓度[La~(3+)]_a,镧、钕萃取率E％与料液中酸度[H~+]_F关系图等,设计了计算程序用计算机进行数学模拟。并用N_(1923)进行串级萃取分离La、Nd,获得了纯度为99％以上的La、Nd产品,模拟式合理,萃取分离效果好。     

两相分配法制备甘草根质膜及其纯度鉴定

以甘草（Glycyrrhiza uralensis F．）根为材料,利用差速离心法获取细胞微粒体,通过水溶性聚合物Dextran T-500和PEG4000所构成的两相分配体系制备质膜．标志酶鉴定结果表明,上相中富含质膜,内膜污染较少,质膜纯度较高;下相中富含其它内膜．Western blot分析结果表明,在对应于水通道蛋白分子量大小的位置存在特异条带．实验证明,PEG-Dextran两相分配体系可获得较高纯度的甘草根密实正向型质膜囊泡．     

硫酸铵—乙醇双水相体系萃取分离Bi(Ⅲ)研究

研究了在硫酸铵存在下,乙醇与水能够分为醇/水两相,在分相过程中,Bi(Ⅲ)与I-及CTMAB+缔合生成BiI63-(CTMAB+)3,该三元缔合物能够很好地被乙醇相萃取.通过控制pH值,能够使Bi(Ⅲ)与Mn(Ⅱ)、Fe(Ⅲ)、Co(Ⅱ)、Ni(Ⅱ)、Zn(Ⅱ)、Al(Ⅲ)等常见离子完全分离.     

亲水有机相/含盐水体系萃取L-赖氨酸

以乙醇、磷酸氢二钾和水形成亲水有机相／含盐水体系．用该体系萃取分离L-赖氨酸,实验考察其可能性和影响因素．结果表明,赖氨酸在该体系的分配系数K,随体系成相磷酸二氢钾浓度的增加而减小,随体系pH值的增大而增大,而添加NaCl带来的影响却很小．该体系在ωk2HPO4=0．25,ωc2H5OH=0．20和pH=13时,赖氨酸的分配系数K可达12．8．这为赖氨酸的分离和精制提供了一种新可能。