超声波提取沙田柚花粉管可溶性蛋白的初步研究

探讨了利用超声波破碎法提取花粉管可溶性蛋白．通过不同的功率、工作强度的组合,选出破碎效果较好的一组参数进行超声波法提取,经SDS—PAGE检测提取蛋白,结果表明：与常规研磨法相比,超声波提取法结果稳定、可靠性强、操作简便,大大缩短提取时间．     

沙田柚离体花粉管的培养研究

探讨了沙田柚花粉离体(invitro)萌发的优化条件,结果表明,最适合沙田柚花粉离体萌发的培养基组分为:15%蔗糖,0.02%硫酸镁,0.01%硝酸钾,0.03%硝酸钙,0.01%硼酸,20%PEG-6000,pH5.6.     

沙田柚花粉管在花柱中的生长途径及其识别

应用辣根过氧化物酶酶标ConA电镀细胞化学方法观察了沙田柚不同发育时期1／2花柱通道细胞的结构与功能,结果表明,四分体至双核期,是壁物质,胞间质和糖蛋白合成期,双核至开花期,通道细胞分化成熟,壁物质降解,角质层下腔形成并贮存胞间质,糖蛋白呈颗粒状定位于质膜与壁之间电子透明层中,授粉后1－3d,通道细胞逐步衰老,糖蛋白定位地纤维外壁,未见胞间隙形成,花粉管是从几个相邻通道细胞角隅处的角质层下腔和纤维外壁之间生长通过,自交花粉管因胼胝质在壁上添加而停止生长,花粉管生长道路决定于引导组织细胞壁的厚薄及角质层破裂时间,此外,讨论了纤维外壁上的糖蛋白对花粉管与花柱的识别作用。     

沙田柚柱头表面结构及花粉管进入柱头细胞的研究

采用光学显微镜、扫描电镜及透射电技术对沙田柚柱头表面结构及其花粉萌发后花粉管进入柱头细胞途径的观察，结果如下：１）沙田柚的柱头突细胞为棒状，柱头表面正中有一大型开口的柱头结构，当柱头发序成熟后分泌出大量的粘液，故属湿型柱头。２）不论自交或异交，沙田柚的花粉落到花柱头上都能萌发，通过柱头乳突细胞间隙进入柱头，且沿着柱头区薄壁细胞间隙进入花柱，其自交不亲和性反应发生在花粉管通过花柱时，故沙田柚自交不亲     

沙田柚自交花柱S1-RNase的免疫胶体金定位

采用免疫胶体金标记抗体技术成功地检测了沙田抽自交花柱中存在的Ｓ１－ＲＮａｓｅ结果表明：沙田柚自花授粉后１,２,３ｄ１／２处花柱段的Ｓ１－ＲＮａｓｅ分别定位于内质网、高尔基区、纤维内壁和纤维外壁;同时分析了自花授粉后１－３ｄ的Ｓ１－ＮＲａｓｅ的动态变化,及其参与沙田柚自交不亲和返应的可能机理,为高等植物自交不亲和机理的解释丰富实验证据。     

沙田柚各器官特异蛋白质的研究

利用SDS-PAGE对沙田柚(Citrus grandis var.Shatinyu Hort.)的茎、叶、花萼、花瓣、花药、花柱和子房的可溶性蛋白质进行比较分析,检测到茎中的分子质量31.0 ku,叶中的56.0 ku,花药中的59.0 ku,58.0 ku, 44.0 ku,37.2 ku,36.0 ku,35.5 ku,33.0 ku,21.0 ku,15.4 ku,花柱中的43.0 ku, 38.5 ku,子房中的33.5 ku的蛋白质分别为各器官的特异蛋白质.对茎、叶、花药、花柱的全蛋白质进行IEF-SDS-PAGE双向电泳分析结果也确定了相应于各自SDS-PAGE上特异蛋白质带的特异斑点,而且,SDS-PAGE图谱上的一条蛋白质带在IEF-SDS-PAGE双向图谱上呈现等电点不同而分子质量相同的几个斑点.各器官的蛋白质含量以花药的最高,花萼的为最低.     

隆肛蛙卵巢性类固醇激素的免疫细胞化学研究

目的 深入探讨两栖动物卵巢内不同性类固醇激素在卵子发育中的调控作用。方法 用免疫细胞化学方法对隆肛蛙不同发育时期卵泡的性类固醇激素雌二醇、孕酮和睾酮进行定位检测。结果 雌二醇在卵黄合成期的卵母细胞和滤泡细胞中表达为强阳性，而在趋于成熟的卵泡中表达减弱；孕酮在卵黄合成期和卵黄合成后期的卵母细胞和滤泡细胞中表达较强；睾酮在各期卵母细胞中的表达均较弱，仅在卵黄合成后期表达略有增强。结论 雌二醇与卵黄合成关系密切，而睾酮和孕酮在卵母细胞成熟中起着重要的调控作用。     

类固醇激素受体在扬子鳄睾丸表达的免疫细胞化学研究

用免疫细胞化学方法对雄激素受体(AR)、雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR) 在扬子鳄睾丸中进行定位研究.结果表明,三种类固醇激素受体在扬子鳄睾丸中都有分布:雄激素受体在睾丸的肌样细胞和支持细胞中呈阳性反应,雌激素受体在睾丸的间质细胞中呈 阳性反应,孕激素受体在睾丸的生精细胞中呈阳性反应.推测结果表明,雄激素受体在扬子 鳄精子发生过程有重要作用;雌激素受体可能在扬子鳄睾丸发育过程中影响睾丸间质细胞雄性激素的分泌,进而调节生精过程和精子发育成熟,孕激素受体可能通过转换成AR和ER来对精子发生进行调节.这些结果为证明性类固醇激素参与调节扬子鳄性腺生殖内分泌调控提供了重要的形态学新证据.     

一次免疫后抗体形成细胞发育的免疫细胞化学研究

本文以辣根过氧化物酶(HRP)与福氏完全佐剂混合成的乳液对雄性豚鼠作一次免疫,追踪腘淋巴结中抗体形成细胞的分化途径和变化。一次免疫后抗体形成细胞分化的途径与前文所述的二次免疫是相同的,只是免疫应答开始时间较二次免疫晚。在免疫后8天的皮质区和髓质区,同时出现分散的含抗体的阳性细胞,主要是浅棕色的小淋巴细胞和中淋巴细胞。从10天起,这二个区域的阳性细胞明显增加,细胞染色加深,至24天,阳性细胞大量增多达高峰,以棕色和栋褐色的前浆细胞和浆细胞为主,淋巴结的大部分区域充满着阳性细胞。从30天起,阳性细胞在皮质和髓质区都急副下降,至50天,淋巴结中只存在少数分散的阳性细胞,部分细胞成为不规则形的残留浆细胞。     

沙田柚S-RNase基因的克隆及序列分析

利用高通量测序技术对沙田柚自交和异交花柱进行转录组测序。通过差异分析得到沙田柚S-RNase基因序列。该基因全长为1 238bp(GenBank登录号为KP172529),开放阅读框(ORF)全长为834bp,共编码278个氨基酸,编码的蛋白质的相对分子质量为31.402kDa,理论等电点为5.30。S-RNase蛋白为亲水性蛋白,共有17个可能的磷酸化位点。氨基酸序列分析表明,其编码的氨基酸与柚Citrus maxima、沙糖桔Citrus reticulata和甜橙Citrus sinensis的同源性分别为99%、98%和96%。系统进化树显示沙田柚S-RNase基因与柚、沙糖桔和甜橙亲缘关系很近,属于同一进化分支。     

沙田柚果肉提取物指纹图谱的研究

用反相高效液相色谱法建立梅州沙田柚果肉正已烷和乙酸乙酯提取物的指纹图谱．用C18硅胶柱,甲醇-水／0．1％SAc作为流动相梯度洗脱,流速0．8ml·min^-1,检测波长254nm,梯度洗脱使沙田柚果肉提取物得到了较好的分离．达到指纹图谱的技术要求．结果表明：采用HPLC指纹图谱检测技术可有效的鉴别沙田柚的种类．     

广西容县沙田柚与蜜柚营养成分的比较研究

[目的]对广西容县沙田与柚蜜柚两种柚子的蛋白质、总糖、维生素C、脂肪及灰分含量进行比较,为本地柚子资源的开发利用提供参考依据．[方法]分别用考马斯亮蓝法、蒽酮比色法、钼酸铵法及酸水解法测定蛋白质、总糖、维生素C及脂肪含量,高温灰化法测定灰分．[结果]实验表明沙田柚4种成分（蛋白质、总糖、维生素C、脂肪）含量均比蜜柚高,但蜜柚灰分含量较沙田柚高[结论]．总体上看沙田柚比蜜柚营养成分高．     

沙田柚种子化学成分的研究

从沙田柚种子中分离出一种柠檬苦素类似物，其结构经元素分析，ＭＳ，ＩＲ，￣１ＨＮＭＲ和￣（１３）ＣＮＭＲ确定为ｎｏｍｉｌｉｎ。     

龙舌兰抗炎作用的实验研究

目的 研究龙舌兰抗炎作用。方法 通过观察龙舌兰水提取液对大鼠棉球肉芽增生、醋酸引起小鼠毛细血管通透性增高及醋酸引起小鼠躯体疼痛的影响。结果 龙舌兰对大鼠棉球肉芽增生和小鼠毛细血管通透性增高及醋酸引起躯体疼痛均有显著的抑制作用。结论 龙舌兰具有抗炎作用。     

紫薇受粉习性及花粉管生长的研究

用脱色苯胺蓝对紫薇花粉和花粉管进行染色,在荧光显微镜下观察其自然条件下的受粉习性及花粉管生长行为,以确定花粉管通道的形成时期．结果表明,盛花期的紫薇在开花后1.5h内完成受粉,花粉落量多,受粉率为100％;开花后24h左右进行受精;单果种子数为36～50粒,认为可以用花粉管通道法转化紫薇,导入外源DNA的最佳时机为开花后24h左右.     

光敏核不育水稻花粉败育中淀粉和蛋白质含量的研究(英文)

在可育花粉的发育中,功能叶同化产物运往花药合成淀粉和蛋白质,淀粉含量增加显著,颖壳和花药可溶性糖减少。长日下功能叶生理机能并未下降,糖也可运往颖花,但在颖壳中积累,不育花药中淀粉含量增加不明显,可溶性糖含量略有下降。单核晚期前可育花药蛋白质含量先是下降,但双核期后又迅速上升;不育花药中则基本上一直呈下降趋势。游离氨基酸总量与蛋白质含量变化相吻合,脯氨酸含量在可育和不育花粉之间差异不大。作者认为,淀粉和蛋白质的合成障碍是长日诱导光敏核不育水稻花粉败育的基本原因,这种障碍是由其底物供应不足引起的;游离氨基酸的变化与花粉败育仅有间接关系。     

农杆菌介导川芎遗传转化体系的初步研究

本文优化了农杆菌介导的影响川芎遗传转化的相关因素较优的转化条件为: 以叶柄作为转化材料, 菌液浓度OD600为0.3, 侵染时间为15 min, 乙酰丁香酮(AS)的浓度为50μmol/L及共培养时间为2d, 并可得到最大瞬时表达率为76.7%.将共培养后的叶柄用含头孢霉素300mg/L的无菌水洗三次, 每次10min, 再将外植体转移至含Kan 50mg/L, Cef 300mg/L的筛选培养基上诱导愈伤组织, 可得到最大阳性愈伤诱导率为26.7%.     

刺槐属植物花粉亚显微形态的研究

利用扫描电子显微镜对刺槐属(Robinia L.)2种植物的花粉形态进行了观察和研究。结果显示该属花粉为长球形,具3孔沟,外壁具点状坑雕纹和脑纹状雕纹。这些特征种间差异明显,可以作为种间分类的依据。     

银边红雀珊瑚（Pedilanthus tithymaloides（L）Poir．var．cuculatus Hort．）快速繁殖研究

顶芽或腋芽在添加６－苄基氨基嘌呤（６－ＢＡ）３ｐｐｍ和萘乙酸（ＮＡＡ）０．５ｐｐｍ的ＭＳ培养基培养３０ｄ，长４～６ｃｍ，腋芽３～７个。此时，将它们分切成单芽切段，转到添加６－ＢＡ２ｐｐｍ的ＭＳ培养基，继代培养周期２１ｄ，繁殖系数５～８。芽长２～３ｃｍ时用添加吲哚丁酸（ＩＢＡ）１ｐｐｍ的ＭＳ培养基进行生根培养，培养２１ｄ，生根率８７％，移栽成活率９３％。