Cloning and sequence analysis of VP2 gene of infections bursal disease virus

用SPF鸡胚成纤维细胞繁殖鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV) J1C7毒株.用纯化的病毒颗粒提取RNA基因组.根据已报道的IBDV JD1株的VP2序列设计引物,利用反转录—聚合酶链式反应(RT-PCR)进行扩增,将获得的1359 bp片段克隆于pMD 18-T载体上.经过限制性酶切及PCR鉴定后,得到阳性重组质粒.对VP2基因进行全序列测定表明,克隆的VP2基因长1359 bp,编码452个氨基酸.J1C7株VP2蛋白高变区内两个亲水区与其他标准Ⅰ型毒株完全相同,而且具有弱毒疫苗株的特征性氨基酸:222P、256V、279N、284T、294L、299N,七肽区的氨基酸序列为SWS ARGS,因此,从分子水平上推断本研究的J1C7株为标准Ⅰ型毒株,且属于弱毒疫苗株.与已报道的IBDV VP2基因的氨基酸序列进行比对,结果表明,本研究的J1C7株与来自欧洲和中国的弱毒疫苗株有密切的亲缘关系.     

鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因的克隆及序列分析

用SPF鸡胚成纤维细胞繁殖鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)J1C7毒株。用纯化的病毒颗粒提取RNA基因组。根据已报道的IBDV JD1株的VP2序列设计引物,利用反转录—聚合酶链式反应(RT-PCR)进行扩增,将获得的1 359 bp片段克隆于pMD 18-T载体上。经过限制性酶切及PCR鉴定后,得到阳性重组质粒。对VP2基因进行全序列测定表明,克隆的VP2基因长1 359 bp,编码452个氨基酸。J1C7株VP2蛋白高变区内两个亲水区与其他标准Ⅰ型毒株完全相同,而且具有弱毒疫苗株的特征性氨基酸:222P、256V、279N、284T、294L、299N,七肽区的氨基酸序列为SWS ARGS,因此,从分子水平上推断本研究的J1C7株为标准Ⅰ型毒株,且属于弱毒疫苗株。与已报道的IBDV VP2基因的氨基酸序列进行比对,结果表明,本研究的J1C7株与来自欧洲和中国的弱毒疫苗株有密切的亲缘关系。     

基于离散增量的蛋白质β发夹模体识别

从蛋白质的氨基酸序列出发,应用离散增量的方法对3088个蛋白质的β发夹模体和非β发夹模体进行了识别.以氨基酸(20种氨基酸和一个空位)和氨基酸紧邻关联为参量,利用10-fold交叉检验的方法进行检验,获得了良好的预测效果.     

微型滴定装置及滴定分析微量化初探

用自制的微型滴定装置进行了滴定分析微量化的试验研究 .结果表明 ,该装置测定的准确度和精密度与常规滴定法相当 ,但该法可节省大量试剂 ( 90 % )和时间 ,同时大大减轻试剂对环境的污染     

几种角蛋白的水解及其所含氨基酸的分析

本试验对猪毛、猪骨、猪蹄壳、猪皮、鸡毛、鸡毛粉和角粉等七种角蛋白进行了水解,并对其水解液中所含氨基酸作了定量分析,结果含有14～17种氨基酸,其中以鸡毛粉和猪蹄壳所含氨基酸较全面,必需氨基酸含量也较多。鸡毛含必需氨基酸占总氨基酸的29.51％;猪蹄壳含26.22％。本实验的目的,是将这些角蛋白水解成为游离的氨基酸或短肽,再经浓缩,干燥成粉,作为畜禽饲料中的多种氨基酸添加剂,将不能为畜禽所利用的角蛋白转变为可以利用的氨基酸,提供一种动物性蛋白饲料的新资源。     

新型三倍体鲫鱼肌肉营养成分和氨基酸组成分析

运用生物化学方法对新型三倍体鲫鱼及其父本异源四倍体鲫鲤和母本金鱼肌肉中的营养成分和氨基酸含量进行了定量分析.结果表明:新型三倍体鲫鱼肌肉中[干样(mg/g)]氨基酸总含量为102.35,人体必需氨基酸(EAA)(Thr,Val,Met,Ile,Leu,Phe,Lys,Trp)含量为45.20,占氨基酸总含量的44.16%;两种人体半必需氨基酸(HEAA)(His,Arg)含量为11.68,占氨基酸总含量的11.41%;4种呈鲜、甜味氨基酸(Asp,Glu,Gly,Ala)的含量为31.56,占氨基酸总含量的30.84%.通过对比新型三倍体鲫鱼与其父本四倍体鲫鲤、母本金鱼及其他种类鱼的肌肉营养成分,发现4种呈味氨基酸含量远远高于其父母本中相应4种氨基酸含量,人体必需氨基酸含量也远远高于湘云鲫(鲤)等其他同类品种鱼类的含量.     

树干毕赤酵母(Pichia Stipitis)木糖醇脱氢酶(xyl2)基因克隆与序列分析

根据木糖醇脱氢酶基因序列相似的特点,设计1对引物获得Pichia stipitis CICC1960的木糖醇脱氢酶基因序列,此片段长度为1 092 bp,共编码363个氨基酸.利用生物信息学软件对该序列进行了同源性分析、氨基酸组成分析、疏水性分析、磷酸化位点预测、CDS分析及二、三级结构预测.结果表明,该片段为Pich...     

三溴化硼中溴和硼的化学法测定

采用自制的试样分解装置,把BBr3试样水解为氢溴酸和硼酸,通过Faians法溴化银沉淀滴定和甘油硼酸酯酸度滴定,分别成功的测定了试样中溴和硼的含量,该方法尚未见报道．     

长白蝮蛇类凝血酶基因(Ussurase)的克隆及分析（英文）

从长白蝮蛇（Agkistrodon halys Ussuriensis）毒腺中抽提总RNA,采用RT-PCR扩增其类凝血酶基因,经全序列测定,类凝血酶基因ussurase全长为699个核苷酸,即编码233个氨基酸;根据同源性,推测它的活性中心为His40,Asp85和Ser179;二硫键为Cys7-Cys138,Cys25-Cys41,Cys73-Cys231,Cys117-Cys185,Cys149-Cys164和Cys175-Cys200。该蛇毒类凝血酶cDNA序列及推导的氨基酸序列均为首次报道。     

中华鳖氨基酸组成的反相高效液相色谱分析

应用反相高效液相色谱法测定了中华鳖１６种氨基酸含量。结果表明，中华鳖肌肉中存在１６种酸解氨基酸，其氨基酸总量为８６２．５８０ｍｇ／ｇ和８２３．２３ｍｇ／ｇ；裙边存在１４种酸解氨基酸，其氨基酸总量为７１６．４７ｍｇ／ｇ。本文还对氨基酸的组成进行了分析，中华鳖肌肉中必需氨基酸的组成接近于成人必需氨基酸需要量模式，而裙边则有较大差距。它们的必需氨基酸含量分别为３９．４５％、４０．７５％和２４．００，肌肉     

荧光反应速率法测定VB1研究

基于K3Fe（CN）6在碱性溶液中氧化VB1的荧光动力学反应,利用自制的简单装置,以NaOH的加入为反应起点,监视荧光反应的进行,建立了荧光反应速率法测定VB1的方法,方法线性范围为0.0135～5.40g/L,线性相关系数为0.9996,检出下限为4.80g/L,相对标准偏差为2.8%（n=15）。方法应用于VB1药物分析,标准加入的回收率在95.1% ～101.3%之间。     

采收成熟度对烤烟游离氨基酸的影响

为明确采收成熟度对烤烟烟叶中游离氨基酸含量及组成的影响,本文采集了中、上部位不同成熟度烟叶样品,分析了游离氨基酸总量及脯氨酸比例差异。结果表明:过熟采收的烟叶经烘烤后游离氨基酸含量较低,脯氨酸比例较高,欠熟采收的烟叶经烘烤后游离氨基酸含量较高,脯氨酸比例较低;过熟采收的烟叶经烘烤后蛋白质、总氮含量较低,还原糖含量较高;适当提高烟叶采收成熟度可促进烟叶烘烤过程中美拉德反应的进行。     

转移因子的初步试验研究

一、概述: 转移因子(Transfer Factor)简称TF)是从正常人脾脏淋巴细胞提取的一种小分子物质,它是细胞免疫反应中的一个重要因子.能将人群中的细胞免疫能力特异的转移至一个无细胞免疫能力的人,具有转移迟发型变态反应的作用,从而触发和增强机     

红鲫促性腺激素α亚基的cDNA克隆

从红鲫(Red crucian earp)脑垂体中提取总RNA，根据鱼类促性腺激素(Gonadotropin Hormone，简称GTH)α亚基的保守性，设计并合成了一对20个碱基长的简并引物，用RT-PCR方法扩增并克隆了红鲫GTH-α亚基的两种不同的cDNA，分别命名为GTH-α1和GTH-α2。GTH-α1和GTH-α2分别由363和366个核苷酸组成，分别编码117和118个氨基酸．这两种类型的cDNA的核苷酸和氨基酸的同源性非常高，分别达到了95.0％和96．6％．但是，它们之间也有4个氨基酸的差别，而且GTH-α1有一个三联体核苷酸组成的氨基酸的缺失。聚类分析表明，GTH-α亚基在鲤科鱼类中具有高度保守性。     

黑麦草漆酶编码基因片段的克隆与序列分析

黑麦草中木质素的结构、含量是决定其饲用品质的主要因素。漆酶是木质素生物合成中的关键酶之一,属于多铜氧化酶基因家族。根据报道的植物漆酶编码基因的氨基酸序列中铜离子结合域及N-端糖基化位点两个保守区设计4对引物,以黑麦草总DNA为模板,经PCR扩增、克隆、测序后得到3个有效序列,分别命名为Lac10-1、Lac8-1和Lac11-1。序列分析表明,3个基因片段的编码蛋白不仅含有保守的蓝铜氧化酶结合区域HAH和N-末端糖基化位点,而且分别与黄杨、黑麦草中分离的漆酶编码蛋白的氨基酸序列具有较高的同源性。因而,推断克隆到的3个基因片段是黑麦草漆酶基因家族的成员。     

辣椒疫霉菌PcPLD8基因的克隆和表达分析

为了探究磷脂酶D在辣椒疫霉菌(Phytophthora capsici)致病过程中的作用,从辣椒疫霉菌株LT1534中克隆到1个磷脂酶D基因,命名为PcPLD8.PcPLD8基因开放阅读框(ORF)长1596 bp,编码一个含531个氨基酸的蛋白质,相对分子质量为60689,理论pI为4.85,具有两个保守的HKD基序...     

氨基酸添加剂在饲料工业中的应用

<正> 氨基酸是构成蛋白质的基本单位,它参与体内代谢并具有特殊的生理功能,是生物体不可缺少的营养成份之一。氨基酸对促进动物的生长发育起着重要作用。因此,努力开发氨基酸添加剂在饲料工业中的应用,将为畜牧业的发展展现广阔的前景。氨基酸添加剂迅速发展的原因氨基酸添加剂是动物营养学理论与生产实践相结合的成功技术之一。它能帮助调节     

复合氨基酸制剂和8周递增负荷有氧运动对大鼠脑组织的保护作用

通过大鼠递增负荷有氧运动训练模型,并联合给予或分别给予牛磺酸和支链氨基酸制剂,以抗羰基应激防御体系为研究视角,探讨含有氨基生物活性小分子的复合氨基酸制剂对大鼠脑组织的保护作用.8周递增负荷有氧运动联合补充复合氨基酸制剂能显著降低羰基应激损伤,且效果明显优于单独补充牛磺酸或支链氨基酸.     

库仑滴定测定水中痕量砷

本文以实验为依据，利用自制的库仑滴定装置对水中的痕量砷进行了测定，并对实验方法进行了详细叙述。所得结果和传统方法测定结果相比，令人满意。     

东北地区野豌豆属物种生物学研究Ⅸ──种子游离氨基酸分析

本文对东北地区野豌豆植物２２个居群的种子游离氨基酸进行了比较研究．结果发现种子游离氨基酸，特别是非蛋白氨基酸，在种内居群间发生一定程度的变异，但这种变异似乎与染色体数目和结构变化没有明显的相关性．另外，北野豌豆和柳叶野豌豆具有相似的氨基酸变异式样，明显不同于该组其它种类．