钙调神经磷酸酶

钙调神经磷酸酶是一种依赖Ca^2 －CaM的磷蛋白磷酸酶。主要存在于脑组织神经元中，由催化亚基A和调节亚基B1：1组成。钙调神经磷酸酶是一个侈底物的磷蛋白磷酸酶。它的活性还受到Ni^2 和Mn^2 等金属离子的调节。     

CHP与钙调神经磷酸酶的活性调节

作为惟一受Ca2 调节的蛋白磷酸酶,钙调神经磷酸酶(CN)在多种生物学过程中发挥关键性的调控作用,包括T细胞活化,记忆的形成,心肌肥大的发生,细胞周期调控等.CN的丝/苏氨酸蛋白磷酸酶活性受Ca2 /Calmodulin等诸多生物因子的共同调节,其中钙调神经磷酸酶B亚基同源蛋白(CHP)是最近研究较多的CN调节分子之一.近年来CN的研究进展主要体现在其生物学功能,相关信号传导通路及活性调节等方面.     

钙调神经磷酸酶在运动中的作用及调节

运动训练能促使骨骼肌在形态与结构上发生适应性的改变,如肌纤维类型转化、肌纤维选择性肥大等。钙调神经磷酸酶(CaN)是钙离子的下游因子,对细胞内因钙离子升高引起的心肌肥大起着重要作用。CaN的活性与肌纤维类型的表达和肌纤维选择性肥大有着非常紧密的联系。对CaN在运动过程中对心肌和骨骼肌的作用及调节进行综述。     

钙调神经磷酸酶B亚基高表达条件及产业化研究

重组人CNB高表达大肠杆菌已由本室构建成功,摇瓶发酵液表达量可达100mg·L-1. 通过改进培养基配方及摇瓶表达工艺,使CNB在摇瓶发酵液中表达量达到500mg*L-1以上.在高表达量的基础上,又进行了产业化改进,以蒸馏水添加无机盐取代了原配方中的自来水,并提高了表达量.     

荧光光谱法研究单壁碳纳米管与牛血红蛋白的相互作用

选取了单壁碳纳米管（SWCNTs）及两种分离后的单一手性单壁碳纳米管(6,5)-SWCNTs、(8,3)-SWCNTs分别与牛血红蛋白（BHb）结合,通过荧光光谱法分析SWCNTs与BHb的相互作用。结果表明,SWCNTs对BHb的荧光猝灭为动态猝灭与静态猝灭结合的机制,(6,5)-SWCNTs和(8,3)-SWCNTs对BHb的荧光猝灭属于静态猝灭的机制;298 K下BHb与3种SWCNTs的结合常数大小顺序如下：SWCNTs>(6,5)-SWCNTs>(8,3)-SWCNTs;范德华力、氢键和疏水作用是相互作用中的主要作用力。     

阿托伐他汀对压力负荷下钙调神经磷酸酶参与心肌肥大的影响

研究在压力负荷下阿托伐他汀对钙调神经磷酸酶介导的心肌肥大的影响.选用SD大鼠随机分为3组:假手术组(n=10)、单纯模型组(n=10)和阿托伐他汀组(n=10).大鼠通过腹主动脉缩窄建立压力超负荷模型,8周后测定左室重量指数,B超检测左室形态结构,Westernblot检测心肌CaN蛋白表达,RT-PCR法检测心肌CaNmRNA水平.结果①单纯模型组和阿托伐他汀组心肌肥厚指数明显高于假手术组,阿托伐他汀组心肌肥厚指数明显低于单纯模型组(P<0.05).②单纯模型组和阿托伐他汀组心肌CaN蛋白及CaNmRNS表达水平高于假手术组(P<0.05),阿托伐他汀组低于单纯模型组 (P<0.05).说明阿托伐他汀可能参与干预钙调神经磷酸酶介导的通路,从而抑制心肌肥厚的形成.     

血脑屏障对钙调神经磷酸酶B亚基及其降解肽段阻碍作用的研究

应用1,3,4,6－四氯－3α,6α二苯基苷尿（Iodogen)法对钙调神经磷酸酶B亚基进行1125I标记,获得了比活度为740MBq.mg^-1,放化纯度为95．7％的125I标记的钙调神经磷酸酶B亚基,标记率高达85％,利用该标记物研究血脑屏障对其进入脑的阻碍作用,结果显示血脑屏蔽能够阻止完整的钙调神经磷酸酶B亚进入脑,但是它的降解肽段能够透过血脑屏障进入脑组织。     

荧光光谱法研究辛烷磺酸钠与BSA的相互作用

用荧光猝灭法研究了水溶液中辛烷磺酸钠（SOS）与牛血清白蛋白（BSA）的相互结合反应．结果表明,SOS与BSA的相互结合作用为动态猝灭．在水溶液中SOS与蛋白质牢固结合,其结合常数K=4．06×10^3．根据Fǒrster非辐射能量转移理论,计算了给体与受体间距离r=7．56nm和能量转移效率E＝0．317,并根据热力学参数推测了SOS与BSA的作用力类型及其随BSA浓度的变化．结合红外和溶液中粒径大小的变化初步探讨了BSA构象的变化．     

荧光光谱法研究槲皮素与牛血清白蛋白的相互作用

用荧光光谱法、分光光度法研究了水溶液中中草药的有效成分槲皮素(Quercetin,QCT)与牛血清白蛋白(Bovine Serum A lbum in,BSA)的相互结合反应.实验表明,槲皮素与牛血清白蛋白的相互结合作用为单一的静态猝灭过程.在水溶液中槲皮素与蛋白质牢固结合,其结合常数KB=1.12×106L/mol.根据F rster非辐射能量转移机理,求算了给体(BSA)与受体(QCT)间距离r=3.69 nm和能量转移效率E=0.317,并根据热力学参数推测了槲皮素与牛血清白蛋白的作用力类型.     

钙离子对钙调神经磷酸酶B亚基结构和功能的影响

应用原紫外CD光谱、内源荧光光谱以及ANS荧光光谱探究了Ca~(2+)对钙调神经磷酸酶(CN)调节亚基(CNB)结构和功能的影响.结果显示:Ca~(2+)能够激活CN磷酸酶活性提高到约1.5倍;CD谱显示结合Ca~(2+)后CNB出现α-螺旋含量上升、无卷曲含量下降、分子有序性升高等现象;!源荧光光谱显示结合Ca~(2+)导致CNB结构更加紧凑;ANS荧光光谱显示Ca~(2+)结合导致其疏水性增强.结合Ca~(2+)后,CNB分子有序性升高,结构更加紧凑,疏水表面暴露.这些结构变化促进了其与CNA的结合并激活了CNA的磷酸酶活性.     

血卟啉与色氨酸相互作用的荧光光谱研究

血卟啉作为光动力学治疗中的光敏剂,常用于诊断和治疗各种肿瘤、癌症;而色氨酸是肌红蛋白和胃蛋白酶的重要组成部分.本文在生理条件下(pH=7.4磷酸缓冲体系中),用荧光光谱法研究了血卟啉与色氨酸之间的作用,计算出它们之间的键合常数分别为7.78×104和7.19×104,并初步探讨了它们之间的相互作用机理.     

牵牛子提取物对CN的激活及对东莨菪碱致记忆获得性障碍小鼠的影响

研究了牵牛子 (Pharbitisnil)提取物 (EPN)对钙调神经磷酸酶 (CN)的激活作用以及对东莨菪碱所致记忆获得性障碍小鼠的影响 .结果表明 ,在EPN终质量浓度 ρ≥ 0 .0 0 8g·L- 1时 ,对CN有激活作用 ,在 ρ =0 .0 4 g·L- 1时达到最高激活率为 118.3% .利用东莨菪碱造成小鼠学习记忆障碍 ,采用小鼠跳台法检测学习记忆功能 .结果表明 ,EPN低剂量组与东莨菪碱造模组比较 ,小鼠触电潜伏期明显延长 (P <0 .0 5 ) ,错误次数有降低趋势 ,说明EPN低剂量组对东莨菪碱所致小鼠记忆获得性障碍有比较明显的改善作用 .     

荧光法研究金属离子与蛋白质的作用

本文使用荧光法系统研究了Ag(Ⅰ)、Hg(Ⅱ)、Pb(Ⅱ)三种重金属离子与不同蛋白质和酶内源荧光之间的关系。结果表明,Pb(Ⅱ)、Hg(Ⅱ)与蛋白质的作用强,荧光猝灭明显。Ag(Ⅰ)与蛋白质作用较弱,并对不同的蛋白质表现的荧光变化趋势不同。并且研究了Ag(Ⅰ)对色氨酸荧光的影响,并对离子的作用进行了讨论。     

荧光法研究氟罗沙星与牛血清白蛋白的相互作用

用荧光法研究了氟罗沙星对血清白蛋白的荧光猝灭现象,根据荧光猝灭双倒数图读物计算了氟罗沙星与牛血清白蛋白之间的结合常数,根据Foester能量传递原理计算出氟罗沙星在牛血清白蛋白上的结合位置,并根据热力学参数研究了氟罗沙星与牛血清白蛋白之间的作用力类型。     

荧光各向异性法研究铝试剂与血清白蛋白的结合作用

实验部分 F-4500荧光分光光度计,铝试剂(玫红三羧酸铵,ATA)水溶液,牛血清白蛋白(BSA)水溶液,二次蒸馏水在一系列10 mL容量瓶中各加入ATA溶液和BSA溶液,加水稀释至刻度,摇匀.     

阿昔洛韦与牛血清蛋白相互作用研究

目的研究了阿昔洛韦(ACV)与牛血清白蛋白(BSA)之间的相互作用。方法在pH为7.4的Tris-HCl缓冲液中,发现阿昔洛韦在348 nm(λex=282 nm)对牛血清白蛋白的荧光有猝灭作用。并对阿昔洛韦对牛血清白蛋白荧光猝灭的机理进行了初步探讨。结果发现在弱酸性、中性及弱碱性条件下均表现为静态猝灭。利用荧光猝灭双倒数图计算了阿昔洛韦与牛血清白蛋白之间的表观结合常数为1.48×10~4、结合位点数为1,结合位置接近于色氨酸残基,牛血清白蛋白中色氨酸残基与阿昔洛韦分子间的距离为3.138 nm。结论根据热力学参数计算确定了阿昔洛韦与牛血清白蛋白之间的主要作用力类型为疏水作用力,同时,采用同步荧光技术考察了阿昔洛韦对牛血清白蛋白构象的影响。     

激光诱导热助振动荧光光谱及其应用

基于分子激发态振动能级之间粒子碰撞能量弛豫过程理论,提出利用激光诱导分子热助振动荧光光谱实现瞬态燃烧温度测量新技术,从理论上建立了描述分子激发态振动能级粒子碰撞能量弛豫模型的速率方程组。以BaCl分子为对象,研究了激光诱导热助振动荧光的特性,通过选择以517nm波长激发Bacl C~2π_(1/2)(V′=1)(?)X~2∑(v″=0)能级跃迁,实验测量了液化石油气/空气的轴对称预混层流火焰温度,测得焰锥顶部附近的温度为1792±30K。     

以静态和时间分辨荧光光谱研究胶束对DCM的作用

以静态荧光光谱、荧光偏振、时间分辨荧光光谱研究了非离子表面活性剂胶束对发光染料DCM(4-二氰基亚甲基-2-甲基-6-对二甲胺苯乙烯基-4H-吡喃)的作用.结果表明,由于胶束微环境的特性及其对激发态DCM的保护作用,DCM在TritonX-100或Tween-80胶束水溶液中的荧光强度(F)、量子效率(φ)和荧光偏振度(P)、微粘度(η),分别比在水中增加100～300和700～2000倍;荧光寿命(τ)分别比在乙醇、四氢呋喃及二氧六环中增长10％,27％,74％.且DCM的F与浓度(c)的线性范围和它的τ保持恒定的浓度范围也分别比它在乙醇中扩大10和2倍.此外,还观测到P和η是影响DCM的τ的重要因素.     

人组织型纤溶酶原激活剂（t—PA）在大肠杆菌中的表达、复性及分离纯化

人组织型纤溶酶原激活剂（ｔ—ＰＡ）。ＤＮＡ重组在表达质粒ｐＤＲ７２０中，在Ｅ．ｃｏｌｉＣ６００中获得了表达，表达水平为２％．以醋酸钟显色ＰＡＧＥ凝胶回收ｔ—ＰＡ表达条带，进行复性处理．Ｒ性产物经Ｂｅｎｚａｍｉｄｉｎｅ—Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ，Ｌｙｓｉｎｅ—Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析，纯化得到ＳＤＳ—ＰＡＧＥ银染一条带纯度，比活为为４，０００ｍｏｌ／ｓ·ｇ的人ｔ—ＰＡ．     

无水三氯化铝催化聚苯乙炔的制备及荧光性能研究

使用无水ALCL3作为催化剂,通过本体聚合制备出具有良好荧光性能的聚苯乙炔,并用FT-IR。UV-Vis,PL对聚合物结构、性能进行了表征,研究了催化剂用量对聚合物分子量及荧光光谱的影响．结果发现,减少催化剂用量可使分子量增加,主链共轭体系增大,在紫外光谱和荧光光谱上表现出红移现象．另外,当选用不同波长(300、350、400nm)的光激发时,其荧光发射峰依次红移,说明所得聚苯乙炔可能含有多种异构链结构,存在不同的发光点．