心肌宁冲剂对感染柯萨奇B_3病毒小鼠的保护作用

本文采用4W龄Babl/c小鼠,腹腔内感染,CB_3病毒并给于心肌宁治疗。结果表明:心肌宁冲剂对感染CB_3病毒的小鼠可明显提高其体内中和抗体水平,减少细胞坏死率,明显减弱病毒毒力,病理学检查显示:心肌变性坏死显著减轻,炎性渗出减少,纤维组织增生较早且明显。     

非心肌细胞对受损心肌细胞LDH的影响

当心肌细胞受到损伤的时候,心肌酶——LDH(乳酸脱氢酶)会从细胞中泄漏出来。其受损程度越强,泄漏量也越大。作者曾发现心脏的非心肌细胞,对心肌细胞的损伤有明显的保护作用。为此,本文通过对心肌细胞、非心肌细胞以及混合细胞的培养液,分别进行连续的测定,发现当心肌细胞受到损伤的时候,非心肌细胞能使心肌细胞LDH的泄漏量明显地降低,从而证实了非心肌细胞对心肌细胞具有保护作用。实验方法 1.细胞悬液制备取出生2～3天的S.D乳鼠,剪成1～2mm~3组织块,以D-Hanks液洗涤,加入0.1％胰蛋白酶(Difco)液。在37℃的条件下用磁力搅拌,连续消化7次,每次15分钟,将后6次的消化液离心,1000 rpm 10分     

非心肌细胞对受损心肌细胞LDH的影响

当心肌细胞受到损伤的时候,心肌酶——LDH(乳酸脱氢酶)会从细胞中泄漏出来[1]。其受损程度越强,泄漏量也越大。作者曾发现心脏的非心肌细胞,对心肌细胞的损伤有明显的保护作用[2]。为此,本文通过对心肌细胞、非心肌细胞以及混合细胞的培养液     

培养细胞体系中槐定碱抗EV71病毒的作用

探究槐定碱抗EV71病毒的作用,为防治手足口病提供线索。在体外培养的Vero细胞体系中加入槐定碱,用MTT法检测其细胞毒性;在病毒感染的不同时期用槐定碱处理,用MTT法检测细胞存活率、细胞病变等指标,表征其对EV71病毒吸附、穿入的抑制作用及直接杀灭作用;用RT-PCR法检测其对于病毒RNA复制的抑制作用。(1)槐定碱具有一定细胞毒性,其CC50为1.414mg/m L;(2)能够抑制病毒对Vero细胞的感染,其IC50=0.354mg/m L;(3)其机制可能是抑制病毒的吸附和RNA复制,但对病毒穿入的抑制作用较弱。槐定碱可抑制病毒吸附和病毒增殖,在病毒感染前后用药效果都较好,且有效浓度远小于其CC50值,作为防治手足口病药物的开发潜力较大。     

心肌肽素在心肌细胞氧化应激中的作用

研究心肌肽素对过氧化氢所致心肌细胞氧应激模型中所起的作用。采用原代培养乳鼠心肌细胞,以200μmol/L过氧化氢作用2 h诱导心肌细胞造成氧化应激模型,细胞损伤前分别给予不同浓度的心肌肽素进行干预。使用RT-PCR检测Caspase-3表达变化,MTT比色法检测原代乳鼠心肌细胞的活力,黄嘌呤/黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶活性。过氧化氢组心肌细胞活力低于对照组,超氧化物歧化酶活性下降(P<0.05),caspase-3 mRNA表达升高;心肌肽素组细胞活力、超氧化物歧化酶活性高于过氧化氢组,而caspase-3 mRNA表达水平较过氧化氢组降低(P<0.05),不同浓度心肌肽素之间无明显差别(P>0.05)。心肌肽素对过氧化氢造成的心肌细胞损伤作用有抵抗作用且这种抵抗作用与其抑制凋亡作用有关。     

小鼠胚胎干细胞对病毒性心肌炎的影响

目的使用小鼠验证这样一个假设:外界病毒浸入诱发心肌炎时,机体的干细胞将进入心脏提高心肌的抗病毒能力。方法雄性BALB/c小鼠分为三组:小鼠胚胎干细胞对照组(ES),心肌炎病毒组(EM CV)及EM-CV加ES治疗组。通过尾静脉注射,令小鼠立即感染病毒。小鼠死亡率,炎性细胞浸润及心肌坏死等为观察指征。干细胞的游走及分化等通过免疫荧光法来验证。结果给予干细胞后的小鼠的存活率明显高于生理盐水对照组,炎性细胞侵润及心肌坏死亦明显低于生理盐水对照组。免疫荧光法表明,干细胞进入心肌并分化成新的心肌细胞。结论干细胞能明显提高心肌炎小鼠的存活率,减少心肌组织的坏死。同时,亦证明当心脏遭受病毒的侵入后,干细胞通过某种机理修复或再生心肌细胞,从而提高组织的抗病毒能力。     

人参皂甙对大鼠缺血再灌注心肌保护作用的研究

研究人参皂甙对大鼠心肌缺血再灌注心肌细胞凋亡的拮抗作用及其对缺血再灌注心肌保护作用的机制。用电镜观察心肌细胞的超微结构变化,TUNEL法原位标记凋亡的心肌细胞,免疫组化技术和图像分析技术检测心肌细胞内Bcl-2蛋白的表达。缺血再灌注组电镜观察发现,心肌细胞出现典型凋亡结构特征。TUNEL染色结果表明：用人参皂甙保护后的心肌细胞凋亡指数明显下降（P＜0．01）,而心肌细胞内Bcl-2蛋白表达明显升高（P＜0．01）。     

异鼠李素对心肌细胞缺血再灌注损伤的保护作用

本研究在体外建立心肌细胞缺血再灌注模型.利用透射电镜、MTT,流式细胞技术,及乳酸脱氢酶活性检测细胞活性和Western Blot分析等方法探讨异鼠李素对心室肌细胞缺血再灌注损伤的作用.发现缺血再灌注心室肌细胞出现明显的细胞凋亡现象,电镜观察细胞超微结构发生明显改变,MTT,流式细胞技术,及乳酸脱氢酶活性结果显示I/R+/isor+组心肌细胞活性与I/R+/isor相比明显增强,细胞凋亡程度减弱;Western Blot也表明与I/R+/isor组相比,I/R+/isor+组心室肌细胞中Bcl-2蛋白表达明显上调,Bax及p53蛋白表达明显下降, Bcl-2/Bax比率显著减小.从实验结果显示异鼠李素对心肌缺血再灌注损伤具有一定的保护作用,其作用与药物浓度有关,低浓度的异鼠李素对心肌具有保护作用,且药物浓度越大,保护作用越强;而高浓度的异鼠李素则随药物浓度的增加对心肌的保护作用逐渐减弱,甚至出现一定的细胞毒性.     

雌激素对缺氧/复氧心肌钙离子的影响

雌激素对心肌细胞缺氧/复氧损伤具有保护作用,但其保护机制尚未完全阐明.缺氧/复氧可引起心肌细胞损伤,其中发生钙超载是心肌损伤的一个重要因素.进行了雌激素对缺氧/复氧心肌细胞内钙离子浓度的影响研究.结果显示:心肌细胞缺氧/复氧后细胞内钙离子浓度明显升高,呈复氧时间依赖性增加.雌激素有抑制缺氧/复氧心肌细胞内钙离子浓度升高...     

补骨脂酚对阿霉素心肌细胞损伤的保护作用及机制研究

探究补骨脂提取物补骨脂酚(Bakuchiol,BAK)是否可以减轻ADR引起的心肌细胞损伤及其作用机制。首先建立损伤合适的H9c2心肌细胞ADR损伤模型,采用不同浓度BAK处理,观察其对心肌细胞ADR损伤是否有保护作用并筛选最佳保护浓度。检测的指标包括:细胞活力、凋亡率、活性氧(ROS)含量以及培养液中乳酸脱氢酶(LDH)水平,并用Western blot检测AMPK/PGC1α通路相关分子表达情况,初步明确该通路在BAK抗ADR心肌损伤中的作用。ADR可显著降低H9c2细胞的活力,并呈浓度依赖性,当浓度为2μM时损伤明显,用于进一步研究。BAK对H9c2细胞有明确的保护作用,当其浓度为1. 25μM时效果最佳,具体表现为:细胞活力增加、凋亡率下降、ROS含量下降以及培养液中LDH水平下降。Western结果显示,BAK可以逆转ADR下调的p-AMPK和PGC1-α蛋白表达。BAK可显著减轻ARD引起的H9c2心肌细胞损伤,其作用跟激活AMPK/PGC1α信号通路有关。     

心肌宁冲剂抗异丙肾上腺素诱发的大鼠急性心肌缺血的试验研究

心肌宁冲剂按3.5g/kg/日,1.75g/kg/日,0.875g/kg/日剂量i·g·给药7天,可明显对抗由异丙肾上腺素诱发的大鼠急性心肌缺血的心电图和病理学改变。     

Comparison of infection of different cell lines by uropathogenic Escherichia coli

Studying the interaction between uropathogenic Escherichia coil （UPEC） and uroepithelial cells is important in elucidating the pathogenesis of urinary tract infection. In this study, the African green monkey kidney cells （Vero）, human kidney carcinoma cells （Ketr-3） and bladder carcinoma cells （EJ） were infected by UPEC132, a clinical strain isolated from Tianjin, China, and were compared for their capacities to allow the adherence and invasion by this strain. The results revealed that all these cell lines could be attached and invaded by UPEC132. The adherence rates for Vero, Ketr-3 and EJ cells were （49,20 ±7.55）%, （55.22 ±4.09）% and （73.20 ±5.26）%, respectively, and invasion frequencies were （2.61 ±0.32）×10^-3, （3.00 ±0.34）×10^-3 and （3.25 ± 0.20）×10^-3, respectively. The statistical analysis showed that the adherence rate for EJ cells was significantly higher than those for the other two cell lines （P〈0.05）, and the invasion frequencies for EJ and Ketr-3 cells had no statistical differences （P〉0.05） but were higher than that for Vero cells （P〈0.05）. Three cell lines were detected for the receptors for P pill of UPEC by using indirect immunofluorescence. The results showed that receptors existed on the surfaces of all cell lines, and the highest distribution was found on the surface of EJ cells. Additionally, the invasion of EJ cells by recombinant UPEC132/pSELECT-GFP could be directly visualized using confocal microscopy. These data strongly implicated that EJ cells could be more easily infected by UPEC132 than the other cells, and thus could serve as a good experimental target for further investigation of UPEC infection.     

Study on the purification of OPV produced on vero cells with Q-Sepharose F. F.

Q-Sepharose Fast Flow (Q-Sepharose F. F.) was adopted to purify the suspensions of type I, II, III oral poliovaccine (OPV), which is prepared from Vero cells. After clarification and concentration by ultrafiltration, the recovery of virus infected titre may attain above 85%. Using column chromatography on Q-Sepharose F. F. to purify the concentrated virus suspensions, the purified viruses attain 100% recovery of virus infectivity. Dot membrane hybrization was used to detect DNA with the probe of Vero cell genome DNA which was labeled with α-P³² dATP, the contents of residual substrate DNA was less than 100 Pg/dose. The process of downstream had no significant influence on some biological characters of purified viruses, such as virus morphology, tumorigenicity, rct/40 character and capsid protein. This downstream reseach indicates that Q-Sepharose F. F. is an ideal chromatography material for purifying OPV prepared from Vero cells. Biography: LIAO Guo-yang (1962-), Ph D Candidate.     

牛轮状病毒的分离与细胞培养特性

探讨牛轮状病毒(BRV)的细胞培养方法,为研发诊断试剂盒和疫苗提供依据.将RT-PCR阳性样品在MA-104细胞及Vero细胞上进行培养,盲传4代后MA-104细胞出现病变(CPE),主要表现为细胞脱落,出现拉网现象,部分出现死亡.这表明轮状病毒能够在MA-104细胞上生长,并引起细胞病变;而Vero细胞无病变.用胰酶处理的病毒接种MA-104细胞,用含2μg/mL、3μg/mL和5μg/mL三种(A、B和C)不同浓度胰酶的培养液在MA-104和Vero细胞对犊牛轮状病毒传代培养.将分离培养的病毒经聚丙烯酰胺凝胶电泳,结果表明BRV在C组培养液中分离培养最好,聚丙烯酰胺凝胶电泳图显示病毒核酸呈4∶2∶3∶2排列,与参考株NCDV相似,呈典型A群轮状病毒的特征.     

白藜芦醇对心肌细胞缺氧性损伤的作用

本文的目的是观察白藜芦醇(Res)对大鼠乳鼠心肌细胞缺氧性损伤的保护作用.具体是通过建立体外培养大鼠乳鼠心肌细胞缺氧模型,采用MTT法检测心肌细胞活力,相差显微镜观察心肌细胞形态学及细胞搏动频率.结果表明白藜芦醇Res对缺氧诱导的大鼠乳鼠心肌细胞损伤具有良好的保护作用.     

线粒体连续超薄切片电镜图像的三维可视化

研究建立对连续超薄切片电镜图像的三维可视化方法。对正常及用SARS冠状病毒感染非洲绿猴肾细胞（VeroE6）样品进行连续超薄切片，通过透射电镜得到线粒体断层图像，用表面显示技术对线粒体进行三维重构显示。正常和SARS冠状病毒感染的VetoE6细胞中的线粒体在结构上有明显区别，揭示出SARS冠状病毒感染VeroE6细胞线粒体的病理改变。以此建立起电镜连续超薄切片线粒体图像三维可视化方法。     

汉滩病毒G1重组腺病毒的表达及其免疫学特性研究

将汉滩病毒(HTNV)囊膜糖蛋白G1重组腺病毒(Adeno-G1)感染VeroE6细胞,用IFA法检测其表达产物;并进一步将其免疫Balb/c小鼠。结果可检测到HTNV糖蛋白G1在VeroE6细胞中表达;用该重组腺病毒免疫小鼠,结果表明免疫小鼠体内可诱导产生抗汉滩病毒G1特异性抗体,同时微量细胞培养中和实验结果表明重组腺病毒还可刺激机体产生低水平的中和抗体,但淋巴细胞增殖反应不明显。说明Adeno-G1免疫小鼠后,主要刺激机体产生特异性的抗HTNV体液免疫应答,但刺激机体产生特异性的细胞免疫应答不明显,为HTNV基因工程疫苗的研究提供了实验基础。     

心肌宁冲剂对麻醉开胸犬动脉血压和总外周阻力的影响

本试验采用麻醉开胸犬经12指肠灌注给予心肌宁药粉,大剂量组1g/kg,小剂量组0.4g/kg,30分钟后可明显降低犬的收缩压和舒张压及总外周阻力,与盐水组比较P<0.01。