三氧化二砷抑制肝癌细胞端粒酶活性的实验研究

目的：观察三氧化二砷对肝癌细胞株BEL-7402和SMMC-7721端粒酶活性的影响。方法：应用端粒酶多聚酶联反应一酶联免疫测定(PCR-ELISA)方法,检测三氧化二砷作用后,肝癌细胞系BEL-7402和SMMC-7721细胞端粒酶活性的变化并比较两种细胞端粒酶对三氧化二砷敏感性的差异。结果：0．25～2．00μmol／L三氧化二砷(24～96h)可抑制肝癌细胞系BFL-7402的端粒酶活性,抑制作用与时间、剂量呈依赖性关系;0．25～0．50μmol／L三氧化二砷对SMMC-7721细胞端粒酶活性没有影响(96h以内),1．00～2．00μmol/L三氧化二砷可抑制SMMC-7721细胞端粒酶活性(4H8～96h),有时间、剂量依赖关系。结论：三氧化二砷可以抑制肝癌细胞系BEL-7402和SMMC-7721细胞端粒酶的活性;BEL-7402细胞端粒酶对三氧化二砷的敏感性较SMMC-7721细胞端粒酶高。     

缺氧环境下三氧化二砷对人肝癌HepG2细胞c-myc 表达的影响

目的：探讨缺氧环境下三氧化二砷（As20 3）对体外培养的人肝癌HepG2细胞c-myc蛋白表达的影响.方法：用氯化钴（CoC l2） 创造缺氧微环境,设常氧组、缺氧组及缺氧加药物组,用免疫细胞化学法观察4.0umol/L As203作用HepG2细胞48h后c-myc蛋白表达的影响.结果：常氧环境下c-myc蛋白呈弱阳性表达,缺氧诱导48小时后c-myc蛋白表达显著升高（t=186.51,P〈0.05）,缺氧环境下As 203能抑制c-myc蛋白的表达（t=483.64,P〈0.05）.结论：缺氧环境下As 203能抑制c-myc蛋白的表达.     

中药柴胡提取物对人肝癌细胞BEL-7402细胞内VCR蓄积的影响

目的测定中药柴胡(Bupleurun Chinese DC,BCDC)提取物对人肝癌细胞BEL-7402细胞内VCR蓄积的影响,以探索柴胡逆转BEL-7402细胞多药耐药的机制.方法高效液相色谱法测定BCDC作用于BEL-7402后细胞内VCR蓄积情况的变化.结果柴胡可使人肝癌细胞BEL-7402细胞内VCR浓度升高(P＜0.01).结论柴胡可以增加VCR在BEL-7402细胞内的积聚浓度,部分逆转BEL-7402细胞的MDR.     

三氧化二砷对黄鳝肝脏过氧化氢酶活性的影响

用黄鳝为实验对象,采用毒性实验方法,选择不同浓度的三氧化二砷进行腹腔注射后,对所取得的肝脏的匀浆液进行过氧化氢酶(CAT)的活性测定。结果表明：在实验剂量范围内,不同浓度的三氧化二砷对过氧化氢酶(CAT)活性的影响具有极大的差异性。小剂量时,CAT活性升高,浓度增大时,CAT活性下降。     

Epithalon对人胎肝细胞端粒酶活性和端粒长度的影响

以松果体分泌物,"Epithalamin"缩氨酸为基础,人工合成多肽"Epithalon"。通过用细胞形态学观察用药后细胞的生长情况,MTT法检测Epithalon多肽对人肝细胞株L-02增殖与活力的影响,以及运用端粒酶重复序列扩增——焦磷酸根酶联发光技术检测人肝细胞株L-02端粒酶活性,流式荧光原位杂交法检测端粒长度。研究了多肽作用于人肝细胞L-02后对细胞的生长情况、细胞端粒长度以及细胞端粒酶活性所产生的影响。研究显示Epithalon多肽具有提高端粒酶活性,延缓端粒缩短的作用。     

肝癌细胞黏附稳定性对其“重叠生长”的影响

运用显微形态学观察、计算机图像处理技术和数据统计分析对细胞融合生长过程中的形变调节趋势进行定量表征；以细胞力学和生化检测等手段对细胞黏附力和整合素表达进行检测。结果发现：1）肝癌细胞运动变形较正常肝细胞强，其融合生长层内出现大量圆形细胞，且圆细胞多有聚集倾向；2）肝癌细胞株HepG2的Integrin β1表达明显高于正常细胞株L02；3）“重叠”灶的圆细胞黏附力明显低于周边铺展细胞；4）纤维连接蛋白（fibronectin，Fn）对HepG2的Integrinβ1表达有下调作用；5）Fn裱衬后，HepG2黏附力增高，形变减弱，融合生长层圆细胞产生及聚集减少。由此推断：1）肝癌细胞整合素受一配体比对其细胞黏附稳定性有一定影响；2）肝癌细胞“重叠灶”的形成与细胞频发形变和大量圆细胞聚集存在相关性。     

中药柴胡提取物对人肝癌细胞BEL-7402细胞内VCR蓄积的影响

目的　测定中药柴胡(BupleurunChineseDC,BCDC)提取物对人肝癌细胞BEL 7402细胞内VCR蓄积的影响,以探索柴胡逆转BEL 7402细胞多药耐药的机制.方法　高效液相色谱法测定BCDC作用于BEL 7402后细胞内VCR蓄积情况的变化.结果　柴胡可使人肝癌细胞BEL 7402细胞内VCR浓度升高(P<0.01).结论　柴胡可以增加VCR在BEL 7402细胞内的积聚浓度,部分逆转BEL 7402细胞的MDR.     

中药柴胡提取物对人肝癌细胞BEL-7402细胞内游离钙离子浓度的影响

目的测定中药柴胡(Bupleurun Chinese DC, BCDC)提取物对人肝癌细胞BEL-7402细胞内游离钙离子浓度([Ca2 ]i)的影响,以探索柴胡逆转BEL-7402细胞多药耐药的机制.方法以Fura-2/AM为细胞内钙离子的荧光指示剂,用双波长荧光分光光度计分别测定不同条件下的BEL-7402细胞内[Ca2 ]i.结果柴胡可使人肝癌细胞BEL-7402细胞内游离钙离子浓度下降(P<0.001).结论柴胡可使人肝癌细胞BEL-7402细胞内游离钙离子浓度下降,为一种钙离子通道阻滞剂(Calcium channel blocker, CCB),提示钙离子通道阻滞作用为柴胡逆转BEL-7402细胞多药耐药的机制之一.     

龙葵碱对HepG2细胞NAT1酶活性的影响

探讨龙葵碱对HepG2人肝癌细胞的N-乙酰基转移酶1(NAT1)酶活性的影响.采用高效液相色谱法(HPLC),以对氨基苯甲酸(PABA)为底物,以PABA被NAT1乙酰化为乙酰对氨基苯甲酸(Ac-PABA)的量反应NAT1酶的活性.观察不同质量浓度、不同时间龙葵碱对完整HepG2细胞NAT1酶活性的影响;龙葵碱对HepG2细胞细胞质中NAT1酶活性的影响.结果表明,在NAT1酶活性测定中,龙葵碱能显著降低HepG2完整细胞NAT1的活性;龙葵碱能够降低HepG2细胞质内NAT1的活性,且作用具有剂量依赖性;随着时间的增加NAT1转化产物的量逐渐增加,但龙葵碱能显著降低同一时段NAT1的活性.提示龙葵碱通过抑制HepG2细胞中NAT1的活性是龙葵碱抑制人肝癌细胞HepG2增殖的作用机制之一.     

肝癌细胞形态和生长行为对基底拉伸的响应

采用“四点弯曲梁加载装置”，对培养的人肝癌细胞株SMMC－7721旋以拉伸刺激，通过显微计算机图像处理系统了解其形态变化，流式细胞仪了解其增殖行为，结果发现1）加载24h后SMMC－7721 G2－M期8．63％，对照组15．92％；2）加载72h后SMMC－7721铺展投影面积缩小；3）加载24h后SMMC－7721分裂指数0．46，对照组0．55。加载可部份抑制SMMC－7721的生长。     

三氧化二砷对原代恶性淋巴瘤细胞的作用

目的：研究不同浓度的三氧化二砷对原代淋巴瘤细胞的影响，方法：采用台盼蓝拒染法观察细胞的活力，原位末端标记法（TUENL）检测凋亡细胞，流式细胞仪检测细胞的DNA含量，结果：0．5－2．0umol/L三氧化二砷能显著地抑制原代淋巴瘤细胞的活力，并能诱导原代淋巴瘤细胞凋亡，结论：三氧化二砷有可能用于恶性淋巴瘤的治疗。     

采用硫化砷渣制备三氧化二砷工艺

硫化砷渣经氢氧化钠溶液浸出、空气氧化脱硫和SO2还原制备得到As2O3。研究结果表明：当NaOH与AS2S3物质的量比为7．2：1,固体质量与液体体积之比为1：6,反应温度为90℃,反应时间为2h,转速为300r／min时,用氢氧化钠溶液浸取硫化砷渣,其砷的浸取率达到95．90％;过滤后在碱浸液中通空气脱除碱浸液中Na3AsS3中的硫;当反应时间为10h,反应温度为30℃,空气流量为120L／h,对苯二酚和高锰酸钾质量浓度分别为1．5g／L和0．5g/L,木质素磺酸钠质量浓度为0．13g／L时,脱硫率可达到96．00％;当pH值为0,反应时间为1h,反应温度为30℃,砷质量浓度为60．00g/L时通入SO2还原溶液中AsO4^3-,产物中As2O3含量和砷回收率分别达到92．14％和95．21％;稀硫酸洗涤后,As2O3纯度达95．14％。     

三氧化二砷与肿瘤细胞凋亡机制的研究进展

综述了细胞凋亡的相关概念及其三氧化二砷(As203)诱导凋亡可能机制的研究进展.查阅近几年国内外有关的文献资料,进行分析、整理和归纳得出,细胞凋亡是细胞与生俱来的一种机制,是最常见的细胞生理性死亡形式,它的异常在肿瘤的发病上具有重要作用.三氧化二砷能够诱导多种肿瘤细胞凋亡,现已用于治疗血液系统肿瘤和实体瘤.其诱导凋亡的机制正在逐渐成为研究的热点,但还远未被研究透彻,随着研究的不断深入,相信不久的将来三氧化二砷很可能为研究肿瘤治疗新策略提供参考.     

白血病细胞对三氧化二砷的不同敏感性

目的：探讨白血病细胞对三氧化二砷（As2O3）敏感性的差异。方法：用台盼蓝色染色区分死活细胞,检测细胞活性;利用碘化丙啶（PI）染色和流式细胞技术测定凋亡细胞和细胞DNA的含量。结果：0．50μmol/L以上浓度的As2O3与细胞共同孵育48h以后对NB4细胞有明显的杀伤作用;而对K562细胞来说,As2O3浓度要达到2．0μmol/L以上,72h以后才有明显的杀伤作用。结论：白血病细胞对As2O3有不同的敏感性。     

肝癌细胞对三氧化二砷诱导凋亡的敏感性与细胞内谷胱甘肽含量的关系

目的:比较肝癌BEL-7402和SMMC-7721细胞对三氧化二砷(As2O3)诱导凋亡的敏感性差异,探讨细胞内谷胱甘肽(GSH)含量与其作用的关系。方法:不同浓度As2O3作用BEL-7402和SMMC-7721细胞24~96 h,流式细胞仪检测细胞DNA含量,计算细胞凋亡百分率;GSH检测试剂盒检测细胞内GSH含量。结果:0.25μmol/L As2O3作用24 h,有效地诱导BEL-7402细胞凋亡;对SMMC-7721细胞来说,需要用1.0μmol/L As2O3作用24 h才能达到相同的抑制效果。1.0μmol/LAs2O3作用72 h时,BEL-7402细胞的凋亡率为(43.8±0.2)%,SMMC-7721细胞的凋亡率为(12.8±0.2)%,检测BEL-7402细胞内GSH为(18.7±1.4)nmol/mg;SMMC-7721细胞内GSH为(50.8±5.2)nmol/mg,两者比较均有显著差异。结论:肝癌BEL-7402和SMMC-7721细胞对As2O3诱导细胞凋亡的敏感性不同,可能与细胞内GSH含量有关。     

砷锑价态对铜电解液中砷锑铋脱除率的影响

采用SO2还原,使铜电解液中As(Ⅴ)还原为As(Ⅲ),Sb(Ⅴ)还原为Sb(Ⅲ),并调节电解液中As(Ⅴ)与As(T),Sb(Ⅴ)与Sb(T)的物质的量比,蒸发浓缩电解液,冷却结晶后,能有效脱除铜电解液中As,Sb和Bi等杂质。研究结果表明:当铜电解液体积为3L,Cu的质量浓度为32g/L,As(T)的质量浓度为9.36g/L,Sb(T)的质量浓度为0.65g/L,Bi的质量浓度为0.45g/L,n(As(Ⅴ))/n(As(T))和n(Sb(Ⅴ))/n(Sb(T))分别为0.4时,蒸发浓缩电解液,使浓缩前电解液与浓缩后电解液体积比为2.5,冷却至10℃结晶,过滤,铜电解液中Cu,As,Sb和Bi脱除率分别为82%,62%,55%和85%。蒸发浓缩结晶产物中含CuSO4.5H2O和As2O3。其结晶产物中Cu为29%,As为5%,Sb为0.37%,Bi为0.2%。     

不同序贯的吉非替尼与化疗药物联合对人肝癌细胞Bel-7402增殖的抑制作用

应用MTT法检测了靶向性药物吉非替尼(gefitinib)分别与阿霉素(ADM)、氟尿嘧啶(5-FU)、顺铂(DDP)和紫杉醇(PTX)等4种化疗药物按照不同给药序贯联合作用对肝癌细胞Bel-7402增殖的影响.结果表明,吉非替尼与4种化疗药物联用对Bel-7402细胞增殖的抑制作用效果均要好于单药治疗,其对细胞的IC50较单独用药时明显较低.联合用药效果受到给药序贯的影响,用靶向性药物前先用化疗药物的效果要好于先用靶向性药物后用化疗药物.研究结果可供肝癌临床治疗参考,有助于临床降低用药剂量,减轻药物毒副作用.     

胃肠道恶性肿瘤的端粒酶活性研究

目的：探讨端粒酶活性与胃肠道恶性肿瘤之间的关系．方法：采用非核素银染TRAP法，对30例胃肠道恶性肿瘤(16例胃癌、9例食管癌、5例结肠癌)患者癌组织及其癌旁组织和6例非肿瘤患者的相应正常组织中端粒酶活性进行检测．结果：端粒酶活性在胃癌组织中阳性率为87．5％(14／16)、食管癌中为88．9％(8／9)、结肠癌中为80％(4／5)，其阳性率与患者年龄及组织类型无关，病灶越大、病期越晚、分化程度越低，端粒酶活性率越高，淋巴结转移者高于无转移者．在相应癌旁组织和非肿瘤患者正常组织端粒酶活性皆为阴性．结论：端粒酶活性可能是特异性较强的恶性肿瘤标志物，它有望成为有力的胃肠道恶性肿瘤鉴别诊断的辅助手段，并在肿瘤患者的预后判断方面具重要意义．