双水相体系萃取天冬氨酸转氨酶

研究了不同的双水相体系对天冬氨酸转氨酶的萃取分离效果，对聚乙二醇／无机盐成相系统进行了系统的研究，初步确定PEG1000-Na2HPO4为研究体系，并考察体系pH值、无机盐对双水相体系分配系数和纯化系数的影响。当PEG1000的质量分数为18％、Na2HPO4的质量分数为20％时，双水相体系对天冬氨酸转氨酶的分离系数和纯化系数分别为2．36和2.94。     

双水相纯化湖南黑茶茶多酚工艺优化

选用PEG-(NH4)2SO4双水相体系对湖南黑茶茶多酚进行分离纯化。通过单因素实验考察PEG的平均分子量与质量分数、硫酸铵质量分数、提取液体积、体系pH值和温度等多种因素对茶多酚纯化的分配系数以及萃取率的影响,并选择正交实验对茶多酚纯化工艺条件进行进一步优化。实验表明,双水相纯化湖南黑茶茶多酚的最佳工艺条件为:10.0g双水相体系中,选用平均分子量为600、质量分数为30%的PEG,质量分数为21%的(NH4)2SO4,体系的提取液体积为2.7 mL,pH=5.5,温度为25℃。在此最优工艺条件下,可得双水相纯化湖南黑茶茶多酚的分配系数为34.50,萃取率可达97.57%。     

双水相萃取法富集分离地木耳中的藻蓝蛋白

采用聚乙二醇(PEG4000)/硫酸盐双水相体系,经一次萃取从地木耳细胞破碎液中富集分离藻蓝蛋白.分别考察萃取时间、硫酸盐种类及浓度、PEG4000浓度、溶液pH值和离子强度对双水相萃取分离地木耳中藻蓝蛋白的影响.结果表明:在萃取时间为30 min,Na2SO4的质量分数为15％,PEG4000的质量分数为12％,加入...     

双水相法分离螺旋藻藻蓝蛋白与多糖

以螺旋藻为原料,采用PEG2000-硫酸镁双水相体系对螺旋藻粗提液中的藻蓝蛋白和多糖进行分离。分别探讨了PEG2000质量分数、硫酸镁质量分数、离子强度、体系pH及萃取次数对双水相体系萃取藻蓝蛋白与多糖的影响,设计正交试验优化萃取条件,并考察了螺旋藻的反萃取体系条件。结果表明:当硫酸镁质量分数为14%,PEG质量分数为6%,KCl质量分数为0.5%,体系为p H4.0时,为优化双水相萃取体系。螺旋藻水提液通过双水相萃取,藻蓝蛋白富集于上相,萃取率为93.91%;下相中糖类萃取率为59.58%。收集上相,采用12%PEG,6%硫酸镁的双水相体系对藻蓝蛋白进行反萃取,藻蓝蛋白反萃取率为99.06%。螺旋藻水提液经过PEG2000-硫酸镁双水相体系萃取与反萃取,藻蓝蛋白回收率达92.66%,藻蓝蛋白纯度由0.78提高到2.64。     

人溶菌酶的双水相萃取法分离

采用双水相体系直接从重组巴氏毕赤酵母发酵上清液中分离人溶菌酶,研究了体系中聚乙二醇(PEG)平均分子量,PEG、硫酸钠和氯化钠浓度,pH对人溶菌酶和总蛋白的分配系数、相体积比、萃取率和纯化因子的影响。结果表明:在PEG 4000、N a2SO4和N aC l质量分数分别为0.08、0.13、0.06,pH为5.6时,在室温下的双水相萃取率达96.63%,纯化因子为6.5。     

PEG-磷酸盐双水相体系纯化Cu.Zn-SOD研究

利用聚乙二醇（PEG）与磷酸盐的合理配比组成的双水相体系能够使猪血超氧化物歧化酶（SOD）粗酶得到进一步纯化,研究结果表明,6％PEG-6000与24％磷酸盐（pH7,0）组成的双水相体系一次成相萃取,使猪血SOD粗酶的纯度提高3-5倍,活力回收70～95％,而且发现SOD在PEG／磷酸盐双水相体系中的分配行为有一定规律,使用双水相处理粗酶能有效、快速、大量使样品达到一定纯度．     

基于PEG和不同盐的双水相体系萃取牛血清白蛋白研究

建立了PEG 4000/NaH_2PO_4和PEG4000/(NH_4)_2SO_4两种双水相体系,比较了两种双水相体系对牛血清白蛋白萃取行为的影响.考察了无机盐种类和浓度、PEG质量分数、牛血清白蛋白浓度等因素对双水相形成以及对牛血清白蛋白分配行为的影响.结果表明PEG 4000/NaH_2PO_4双水相系统的最佳萃取条件为:PEG4000=11.50%,NaH_2PO_4=20%,此时K值最小为0.45,达最大回收率.PEG4000/(NH_4)_2SO_4双水相系统最佳萃取条件为:PEG4000=12%,(NH4)_2SO_4=17.50%,此时K值最小为0.42,达最大回收率.     

2种盐与PEG4000组成的双水相体系及其对BSA萃取的影响

通过对PEG4000-NaH2PO4和PEG4000-(NH4)2SO4双水相体系最佳条件的确定,研究双水相体系对BSA萃取的影响.考察NaH2PO4、(NH4)2SO4、PEG4000的质量分数,BSA的质量浓度对双水相形成以及牛血清白蛋白分配行为的影响.结果表明,PEG4000-NaH2PO4双水相系统中w(PEG4000)=10.50%,w(NaH2PO4)=20%,回收率最大为89.4%;PEG4000-(NH4)2SO4双水相系统中,w(PEG4000)=12%,w((NH4)2SO4)=17.50%,回收率最大为91.5%.PEG4000-(NH4)2SO4双水相体系比PEG4000-NaH2PO4更易分离纯化得到大量目标蛋白质.     

双水相萃取与疏水层析分离基因工程人溶菌酶

采用双水相萃取与疏水层析分离纯化重组巴氏毕赤酵母表达的基因工程人溶菌酶.通过正交实验方法研究了聚合物浓度、盐浓度和pH对双水相体系萃取人溶菌酶过程的影响.结果表明:当双水相萃取的pH为4,硫酸钠、氯化钠、PEG4000的质量浓度为0.13、0.06和0.08时,人溶菌酶上相回收率达98.8%,纯化因子18.0,浓缩因子3.6.双水相萃取后选用高效疏水层析色谱纯化人溶菌酶,经苯基高取代基介质疏水层析后得到纯化因子为22.7,收率为88.4%的人溶菌酶纯化产品,电泳纯度检测为100%.     

磁性阳离子吸附树脂在双水相体系中分离神秘果蛋白的研究

利用磁性阳离子吸附树脂与双水相体系联用对神秘果蛋白进行分离和纯化.探究了溶液p H值、离子强度和吸附速率对羧基改性粒子吸附神秘果蛋白能力的影响,并考察了双水相的组成、溶液p H和氯化钠质量分数对该体系萃取神秘果蛋白效果的影响.结果表明,当羧基改性粒子在溶液p H值为4.9,且不加氯化钠时,吸附神秘果蛋白效果最佳.双水相体系中,当PEG 4000质量分数为16%,(NH4)2SO4质量分数为8%时,该双水相体系对神秘果蛋白的萃取效果最佳.联合两种方法,经紫外分光光度法测定,从25 g冻干神秘果果肉中,提取出了30 mg的神秘果蛋白.