Pericardin蛋白的表达纯化以及多克隆抗体的制备

Pericardin 基因是果蝇心脏发育的标记基因,在果蝇心脏发育过程中起着重要的作用.从果蝇体内提取出总RNA,反转录得到果蝇的cDNA,将其作为模板.通过生物信息学分析,选择Pericardin 基因抗原亲水区,选取特异性高的片段.将PCR片段克隆到原核表达pET28a(+)载体上,转入E.coli后通过IPTG(Isopropyl β-D-thiogal actoside)诱导表达His融合蛋白,蛋白经分离纯化后免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体.经Western Blot 检测抗体的效价和特异性.结果显示,获得了Pericardin原核表达重组融合蛋白及高效价的特异性兔抗Pericardin 多克隆抗体,为Pericardin 功能的进一步研究奠定了基础.     

斑马鱼心脏标记基因pitx2的多克隆抗体的制备

pitx2基因是一类bieoid相关的同源异型框因子成员,介导心脏左右不对称发育和内脏器官的偏侧化.pitx2基因位于Nodal信号途径的下游,直接由Nodal信号分子控制.用PCR技术扩增斑马鱼pitx2基因的部分编码区,并将其插入到原核表达载体pGEX-4T-1中,经过酶切和测序鉴定后,将重组质粒(pGEX-4T-1-pitx2)转入B121感受态细胞,通过IPTG诱导表达融合蛋白.用GST珠亲和纯化,将纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体,并用Western Blot检测抗体.获得了pitx2原核表达重组融合蛋白及高效价的特异性兔抗pitx2多克隆抗体.提取斑马鱼不同器官和组织蛋白,用自制的多克隆抗体检测pitx2基因在斑马鱼中的表达情况,发现pitx2基因特异性地在心脏、脑、肌肉、小肠和肝脏表达,尤其在心脏中有很高的表达,表明制备的抗体特异性非常好.     

EPS8蛋白的表达、多克隆抗体制备及其亚细胞定位

EPS8 (EGFR pathway substrate 8)是epidermal growth factor receptor (EGFR)重要的激酶活性底物之一,近年有研究表明其与神经胶质瘤密切相关.为了对该基因进行深入的功能研究,成功地将EPS8基因构建于原核表达载体pGEX-4T-2,转化BL21(DE3)获得融合表达产物,用GST-EPS8(-10-230aa)免疫新西兰大白兔获得兔抗EPS8多克隆抗体.采用Western Blot,用该抗体检测EPS8基因的真核表达产物,证明该抗体有较好的针对EPS8蛋白的专一性,可用于对EPS8的结构和功能研究.同时,用该抗体通过荧光免疫细胞对4种神经胶质瘤细胞系进行定位分析发现,EPS8蛋白主要分布于胶质瘤细胞的细胞质中.     

梅毒螺旋体多表位融合抗原的表达及免疫性研究

设计梅毒螺旋体多表位融合抗原,该融合抗原含外膜蛋白Tp0453,Tp0435,Tp1038,Tp0868和Tp0965重要抗原表位,人工合成该多表位融合抗原基因,转入大肠杆菌中IPTG诱导表达,镍柱亲合层析纯化.利用多表位融合抗原检测人血清中梅毒特异性抗体,梅毒患者样本组与非患者样本组检测结果存在极其显著性差异,说明多表位融合抗原可被梅毒抗体特异性识别,有较好免疫反应性,可作为梅毒诊断试剂新抗原.利用多表位融合抗原免疫新西兰兔,兔血清中可持续检测到高滴度梅毒抗体,显示该多表位融合抗原有较强免疫原性,是梅毒基因工程疫苗候选蛋白.     

怎样防止仔兔吊奶?

仔兔吊奶是养免场经常发生的现象,常造成仔兔早期死亡,降低仔兔成活率.造成仔兔吊奶现象的原因主要有以下三种情况:一是仔兔过多,母兔乳汁不足,仔兔吃不饱奶,较长时间吸住母兔乳头不放松,将母兔吮得疼痛,母兔突然跳出产仔箱时,将吸着乳头的仔兔带出产仔箱外;二是仔兔过少,奶水足,母兔奶胀得厉害,仔兔猛一吸吮,母兔感到疼痛,突然跳出,将仔兔吊出箱外;三是母兔正在哺乳时受到惊吓,突然离开产仔箱,将正在吃奶的仔兔滞出产仔箱外.     

马铃薯淀粉加工

1.选薯.选含淀粉高的品种,且表面光滑、无虫孔、无破烂的鲜薯.薯块越大,淀粉含量就高. 2.清洗.用清水将薯块表面的泥土彻底清洗干净. 3.磨浆.将洗净的薯块用磨浆机磨成液浆.在磨浆时要边投薯块,边加清水,这样磨出的液浆均匀细腻、呈乳白色.     

东北鼢鼠血清蛋白质成分与染色体组型的研究

用醋酸纤维薄膜电泳法分离东北鼢鼠血清蛋白质 ,用常规空气干燥法分析东北鼢鼠染色体组型 ,结果表明 :东北鼢鼠血清中含 7种蛋白质 ,分别是清蛋白1 、清蛋白2 、α1 —球蛋白、α2 —球蛋白、β1 —球蛋白 ,β2 —球蛋白、β3—球蛋白 .清、球蛋白比为 :1 44∶1 .东北鼢鼠染色体组型为 2N =62     

野鸡孵育把“三关”

仔兔吊奶是养免场经常发生的现象，常造成仔兔早期死亡，降低仔兔成活率。造成仔兔吊奶现象的原因主要有以下三种情况：一是仔兔过多，母兔乳汁不足．仔兔吃不饱奶，较长时间吸住母兔乳头不放松，将母兔吮得疼痛，母兔突然跳出产仔箱时，将吸着乳头的仔免带出产仔箱外；二是仔兔过少，奶水足，母兔奶胀得厉害，仔兔猛一吸吮，母兔感到疼痛，突然跳出，将仔兔吊出箱外；三是母兔正在哺乳时受到惊吓，突然离开产仔箱，将正在吃奶的仔兔带出产仔箱外。     

果蝇Mef2基因多克隆抗体的制备及检测

为了在果蝇模型中进一步研究Mef2基因的功能,制备了Mef2多克隆抗体.以果蝇cDNA文库为模板,PCR扩增出亲水性和特异性均好的果蝇Mef2基因片段,将其克隆入pET-28a原核表达载体,然后将重组质粒转化入大肠杆菌菌株Rossetea,用IPTG诱导表达融合蛋白.融合蛋白先经Ni-IDA凝胶柱纯化,再免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,然后用不同浓度的抗体分别进行Western-blot实验检测抗体效价.所得结果显示获得了较高效价的果蝇Mef2多克隆抗体.     

兔场发生传染病怎么办?

一、立即隔离病兔兔场一旦发生传染病,应迅速将病兔和可疑病兔隔离治疗,喂料、饮水分别进行;饲养人员要对应固定,无关人员不得入内.在隔离的进出口要设消毒池,防止疫情的继续扩散和传播.     

2007年家兔市场行情预测

肉兔价格持续升高 预测2007年全国活兔平均内销价将同比上涨7.62%.地区差价仍然较大,广东、福建等省活兔售价高达12～15元/千克,山西、河北等省售价在8.5～9.5元/千克之间浮动.     

治疗长毛兔脱毛症四法

脱毛症在长毛兔养殖中常有发生,一般1岁以上的成年兔较多,青年兔和幼兔则少见.在品种上发病率较高的是纯种长毛兔,而杂交兔较少发生.     

真空压浆技术在公路桥梁工程中的应用探讨

近年来,随着公路桥梁建设对于水泥浆的使用日益增加,压浆工艺便成为工程施工中必不可少的一部分。但是,传统压浆存在着显著的缺陷,难以满足施工人员进行施工的需求。为了提升压浆工作的质量水平,施工队伍在新时期逐步地将真空压浆技术应用到了施工中。文中将以公路桥梁工程中真空压浆技术作为主体,通过对真空压浆过程中的各项指标的质量控制,着重探讨真空压浆的特点及其技术工艺。     

兔对非蛋白含氮有机物（NPN）的利用

兔盲肠内的微生物可利用饲料中的非蛋白含氮有机物（ＮＰＮ）台成氨基酸、蛋白质，主要为菌体蛋白，兔通过食粪的方式，将其消化吸收，成为兔的营养来源．     

抗蛔虫人源单链抗体库的构建及鉴定

目的:构建抗蛔虫人源单链抗体库,从中筛选建抗蛔虫人源特异性单链抗体.方法:分离10个患蛔虫病人的淋巴细胞,提取总RNA反转录为cDNA,PCR扩增人抗体重链(VH)和轻链(VL)可变区基因,采用SOE-PCR法将VH和VL片段随机拼接成scFv片段,并克隆入噬菌粒载体pCANTAB5E中,构建噬菌体单链抗体库.结果:初...     

仔兔睡眠期的管理技术(下)

六、防止仔兔尿窝 正常情况下,睡眠期的仔兔吃的奶可以全部消化掉,仔兔没的排尿的现象,窝内应该干燥.如果发现仔兔窝内很湿,应及时采限措施:一是换垫草,二是给母兔啬精料量、干草量,养活青饲料量,必要时喂一些消炎药物.     

皮肉兼用型家兔新品种

<正> 本发明提供了一种皮肉兼用型家兔新品种.并公开了该品种兔的生产方法。发明人采用我国本地白兔、日本大耳兔、比利时兔和法国公羊兔,进行“四元”复杂繁育并结合     

如何选留肉用种兔?

1.第一次选择在断奶时进行.主要根据断奶窝重、断奶个体重,从同批次的断奶仔兔中选留个体重超过其平均重的作为种用后备兔进行精心饲养,选留60%～70%,尽量从断奶窝重大的仔兔中进行选择.     

马铃薯渣发酵蛋白饲料喂肉兔效果的研究

研究马铃薯渣发酵蛋白饲料部分替代兔日粮的饲喂效果.结果表明,30%马铃薯渣发酵蛋白饲料可提高兔日增重,降低饲料消耗,对兔肉品质,兔免疫功能无不良影响.30%马铃著渣发酵饲料与沙棘嫩枝叶配合使用,可提高兔肉蛋白质和脂肪含量,改善兔肉品质.     

肉兔球虫病的预防与治疗

肉兔球虫病是一种原虫病,对肉兔的危害比较严重,有时肉免患病死亡率达85%以上. 一、流行特点 一般说来,仔、幼兔感染球虫病的几率较高,且治愈率偏低;成年兔多为球虫病原体携带者,发病率较低. 饲料中的维生素不足,兔舍拥挤、潮霉,饲料污染严重,饮食不洁净的水及草料,兔舍光照不足等因素,都是肉兔球虫病发病的原因.