美国：克隆动物间自然交配

这5只小猫是不久前通过两只克隆野猫自然交配而产下的。据研究人员介绍，一只雄性克隆猫已与两只雌性克隆猫通过自然交配方式成功生育了8只小猫。在此之前，克隆的羊、老鼠、牛也曾实现自然繁育，但这还是第一次实现两个克隆野生动物之间的自然交配，这表明，克隆技术可用于保护濒危物种。     

植物抗病基因克隆的研究进展

植物抗病基因的分子生物学研究已成为一个热点，抗病基因克隆研究突飞猛进的发展展示了诱人的应用前景。分别从功能克隆、定位克隆、序列克隆和表型克隆4个方面分析讨论了植物抗病基因克隆的研究进展，指出了存在的问题及今后可能解决的策略。     

人血小板生成因子（TPO）的cDNA克隆在小板生成效应

用ＲＴ－ＰＣＲ方法，从人胎肝总ＲＮＡ中扩增得到约１．１ｋｂ人ＴＰＯ ｃＤＮＡ编码顺序，并进行分子克隆，将其中一个克隆（ｐＴＰＯ４７）亚克隆到Ｍ１３载体，测定全部ＤＮＡ顺序。它的碱基顺序与已报道的顺序完全相同，有一个１０５９ｂｐ的开放阅读框架可编码３５３个氨基酸。ｐＴＰＯ４７亚克隆到哺乳动物表达载体ｐＣＥＰ４，在哺乳动物２９３细胞系瞬时表达后，进行Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交，结果显示有约１．４ｋｂ的转录产     

多重感染来源的两型熊蜂短膜虫的生物学特征

对来源于多重感染的两型熊蜂短膜虫（Ｃｒｉｔｈｉｄｉａｂｏｍｂｉ）的生物学特征实验分析表明，两型熊蜂短膜虫克隆的细胞分裂次数及建立克隆所需时间具有差别，其中Ａ型在克隆第３ｄ后，细胞分裂次数最少３次，最多６次；Ｂ型则最少１次，最多６次．建立克隆的时间为（当克隆的细胞在克隆板中分裂至１０７／ｍＬ，并且克隆孔中的培养液已加至２００μＬ时）Ａ型最短１１ｄ，最长１６ｄ；Ｂ型最短１０ｄ，最长２１ｄ．结果说明在多重感染的情况下，两型熊蜂短膜虫具有竞争行为．同时发现两型熊蜂短膜虫在４℃培养液中，其虫体表型具有明显差异，这种差异可以作为遗传标记体外检测两型在同一宿主体内竞争的动态变化     

未来生物学发展中的几个前沿研究热点

21世纪是生物学的世纪，这已成为世人的共识。生命科学以其令人惊叹的发展速度与对人类自身的影响，已走上领导科学的前沿。当人们正在憧憬着宏伟的“人类基因组计划”这一庞大的生物工程将会给人类了解并最终认识生命的真谛、战胜各种疾病带来福音时，英国生物学家杨·维尔穆特首先给人们一个惊讶；实际上应该看成是一个惊喜。“多莉”的诞生是生物技术的一个进步，我们不必为这一技术可能导致“克隆人类自身”而担心，更不必为可能克隆出新纳粹法西斯“希特勒”而忧虑，人是有社会性的高级动物，即便会克隆出新的“希特勒”之流，那也仅是…     

人抑癌基因nm23—H1在逆转录病毒载体上表达的研究

应用基因工程的方法，将抑癌基因ｎｍ２３－Ｈ１的ＤＮＡ片段克隆到逆转录病毒表达载体ｐＬＸＳＮ，得到重组质粒ｐＬＸＳＮ－ｎｍｈ１。用磷酸钙沉淀技术将重组质粒转染到辅助包装细胞ψＣＲＩＰ中，通过Ｇ４１８筛选，得到抗性克隆。经ＰＣＲ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ杂交检测证实：ｎｍ２３－Ｈ１基因已整合到克隆细胞的染色体上，并且得到表达。获得的逆转录病毒滴度达１０５ＣＦＵ／ｍＬ。     

人血小板生成因子（TPO）的cDNA克隆及促血小板生成效应

用ＲＴ－ＰＣＲ方法，从人胎肝总ＲＮＡ中扩增得到约１．１ｋｂ人ＴＰＯｃＤＮＡ编码顺序，并进行分子克隆．将其中一个克隆（ｐＴＰＯ４７）亚克隆到Ｍ１３载体，测定全部ＤＮＡ顺序．它的碱基顺序与已报道的顺序完全相同，有一个１０５９ｂＰ的开放阅读框架可编码３５３个氨基酸．ｐＴＰＯ４７亚克隆到哺乳动物表达载体ｐＣＥＰ４，在哺乳动物２９３细胞系瞬时表达后，进行Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交，结果显示有约１．４ｋｂ的转录产物．瞬时表达培养液腹腔注射小鼠后，可提高血小板计数４２．３％．血小板生成因子的克隆对进一步研究血小板生成调节以及该因子作用的分子机理具有重要意义．     

克隆人禁令 不要克隆你死去的妻子

据国外媒体报道,当你考虑是否需要克隆自己或者某人时,请立即打消这种念头。克隆实验充满着各种人们无法预知的危险,在你进行克隆实验之前,需要仔细阅读以下克隆实验11条禁令:不要克隆你身体的零件对自己身体器官进行克隆,这并不是一个很酷的主意。人们很容易理解你为什么这样做:当你已年老,十分富有,你的身体器官已出现衰老特征,你会突发奇想——是否能拥有新的身体器官,让自己返老还童!如果你开始选择克隆自己的身体器官,你将逐渐意识到是否应该克隆身体的     

大鼠神经突起因子的克隆及表达载体的构建

从成年SD大鼠脑组织分离提取总RNA，反转录PCR扩增出鼠神经突起因子(neuritin)cDNA的最大开放阅读框(opening reading frame，ORF)后，重组于克隆载体pGEM3z上，经PCR、限制内切酶鉴定和DNA测序鉴定，扩增出的cDNA426bp全部核苷酸序列与国外文献报道的完全一致；在已构建好的重组克隆载体neuritin-pGEM3z基础上，将该neuritin ORF亚克隆到原核表达载体pQE30上，为获取具有天然活性的neuritin蛋白及其功能研究提供了基础。     

Fractalkine基因真核表达质粒的构建及其在小鼠肝癌细胞中的表达

为克隆小鼠趋化因子Fractalkine(．FK)基因，构建真核表达质粒，并在小鼠肝癌细胞中表达，用以进行肿瘤的基因治疗，用RT-PCR法，从小鼠乳腺癌细胞D2F2扩增FK的cDNA，插入pCR2．1 TOPO载体，测序证实后，将其亚克隆至质粒pIRES中构建FK真核表达载体；用脂质体将重组质粒转染小鼠肝癌MM45 T．Li细胞，经G418筛选获得抗性细胞克隆，用RT-PCR和免疫化学方法鉴定转染细胞中FK基因的表达．结果表明：经限制性内切酶酶切图谱分析和DNA序列测定证实目的基因已插入重组质粒，RT-PCR和免疫化学方法证明转基因MM45T．Li细胞克隆中存在小鼠FK基因的表达。     

从电脑信息论到量子计算机信息论

综合“信息”的“双重解”结构，不管是强“不可克隆”，还是弱“不可克隆”，“结构信息”一般是“不可克隆”的。而不管是强“克隆”，还是弱“克隆”，“交换信息”一般是“克隆”的。而所谓的观察、测量，其本质也是一个“克隆”问题。但量子计算机(量脑)的计算本质，则不类似电脑是一个提高“克隆”质量的问题，而是一个把“不可克隆”的问题，转化为一个可观察、测量的“克隆”问题。     

水稻抗稻瘟病,绿叶蝉和黄萎病基因BAC克隆的物理定位

植物单拷贝短序列的染色体原位杂交的检出率一直径低。水稻ＢＡＣ克隆作为一种大容量载体的基因组克隆因其独特的优点已被应用于水稻基因组研究。用生物素标民了两个水稻ＢＡＣ克隆,这两个克隆分别含与抗稻瘟病基因Ｐｉ－５（ｔ）、     

一个烟草PR-1a启动子的克隆及序列分析

通过PCR扩增，从烟草Nicotiana tabacum cv Samsun中克隆了水杨酸诱导表达的病程相关蛋白PR-la基因的启动子TP12，以期用于构建诱导表达基因敲除系统，并用于无性繁殖植物的无标记基因转化。启动子的克隆产物经正反两向测序后，拼接分析结果表明，扩增得到的PR-1α基因启动子长1313个碱基，序列富含AT，其中A T占71．67％，与已报道的序列比较，核苷酸的相似性为98．6％。     

抗肿瘤生物制品项目——恶性肿瘤基因治疗

基因治疗是当今肿瘤治疗研究的最前沿，它为从基因水平上根治癌症开辟了全新途径。随着分子生物学技术的迅速发展，多种淋巴因子的基因已在体外获得克隆及高效表达，重组肿瘤坏死因子(TNF)已应用于人体肿瘤过继免疫治疗。然而，由于TNF半衰期短，迫使应用大剂量冲击，结果导致机体难以耐受的毒副作用，严重影响疗效。     

聚焦新技术新产品

1中国克隆成功世界顶级牛2004年12月22日,世界顶级荷斯坦种公牛“龙”在中国克隆成功。目前,两头分别被命名为“大隆”和“二隆”的克隆小公牛已年满半岁,鉴定委员会一致认为顶级荷斯坦种公牛体细胞克隆生产技术的总体效率已经达到国际前沿水平,这也是我国在动物克隆领域     

Xp11.2区域YAC OAT1中表达顺序筛选

筛选X染色体XAp11.2区域的酵母人工染色体（YAC）克隆OAT1所包含的表达序列，为该区域疾病相关基因的克隆探索方法，以YAC克隆OAT1为探针，与胎脑cDNA文库的噬菌体原位烈解膜进行两轮杂交，所得的阳性克隆经地杂交鉴定除假阳性克隆和重复序列,并进行测序分析，获得了一个YAC OAT1编号的表达顺序克隆，该克隆与鸟氨酸转氨酶（Ornithine Aminotransferase,OAT)基因同源。     

植物基因分离的方法

总结了目前植物基因分离的方法．概括出四大类植物基因分离的方法，即序列克隆法，功能克隆法。作图克隆法。表型差异克隆法，并对其特点和适用范围进行了评述。     

胶州湾浮游植物分子遗传多样性初步研究

用聚合酶链式反应扩增海洋浮游植物总体的核酮糖1，5-二磷酸羧化／氧化酶大亚基基因(rbcL)片段，建立该基因变异类型文库，并随机测定了38个rbcL大亚基基因片段序列，初步分析了海洋浮游植物分子遗传多样性。将≥97％的氨基酸序列相似性定义为种内变异，38个片段分别代表13个不同的物种，或称为不同的操作分类单元。与数据库序列比较发现，PPJZ01，PPJZll和PPJZ20可能是已报道的rbcL基因序列代表的物种，其它克隆在数据库中没有对应的近缘物种序列存在。系统学分析表明分离的克隆分别属于隐藻门、硅藻门、绿藻门和streptophyta等的浮游植物，极少数克隆来源于异鞭毛藻类、定鞭藻纲和原细菌。根据各操作分类单元克隆数计算得胶州湾浮游植物分子遗传多样性指数为1．97。研究结果为利用分子生物学方法剖分海洋浮游植物群落结构、研究海洋浮游植物动力学积累了基础数据。     

花特异表达启动子的克隆及花色调节基因Lc表达载体的构建

克隆了矮牵牛花特异表达基因CHSA启动子，并定向插入到已含有花色调节基因Lc的质粒pBI121中，取代原有的CaMV 35S启动子．所构建的新表达载体可用于花色改良研究．     

是天使,还是撒旦——关于基因技术发展的悖论

克隆绵羊“多莉”的诞生,从理论上讲使用基因复制技术对人类进行克隆已成为可能。复制的克隆人类以及有可能出现的新物种对这个世界的未来又预示着什么呢?