CFTR对肺腺癌细胞Calu-3迁移影响的研究

采用常规培养肺腺癌细胞Calu-3的方法,利用MTT和CCK-8法确定囊性纤维化跨膜传导调节因子(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator,CFTR)的激活剂(Genistein)和抑制剂(CFTRinh-172)的最适浓度,用CFTR激活剂和抑制剂的最佳浓度分别处理Calu-3细胞,然后采用划痕实验观测了培养48h后Calu-3细胞迁移的差异.结果表明:MTT法检测激活剂的最佳浓度为25μmol/L;CCK-8法检测抑制剂的最佳浓度为10μmol/L;划痕实验检测得出25μmol/L激活剂组细胞迁移数量((74.2±5.79)个)与对照组细胞迁移数量((134.1±10.04)个)相比具有显著性差异(P=0.000.01);10μmol/L抑制剂组细胞迁移数量((148.3±17.70)个)与对照组细胞迁移数量((134.1±10.04)个)相比无显著性差异(P=0.270.05).激活剂通过促进CFTR氯离子通道的开放,抑制了肺腺癌肿瘤细胞Calu-3的迁移.     

红细胞保存期对冻干前海藻糖负载量的影响研究

探讨冻干前红细胞保存期对海藻糖负载量的影响,确定红细胞负载海藻糖的最佳条件。在37℃条件下,4℃保存0、24、48和72 h的红细胞在海藻糖浓度800 mmol/L的负载缓冲液中孵育7 h后,检测胞内海藻糖浓度和胞外外游离血红蛋白浓度。经相同条件孵育后,4组红细胞对海藻糖的摄取量基本相同,分别为(49.747±2.253)、(50.316±0.612)、(49.768±2.179)和(49.013±1.991)mmol/L,各组之间无统计学差异。4℃保存24、48和72 h的红细胞相对于新鲜红细胞,3组负载红细胞胞外游离血红蛋白明显增加,分别高达(8.473±2.138)g/L(P0.05)、(12.697±1.787)g/L(P0.01)和(14.036±2.796)g/L(P0.01)。说明冻干前红细胞4℃保存期不会影响海藻糖负载量,红细胞负载海藻糖的主要影响因素仍为负载温度、负载时间和负载缓冲液中海藻糖浓度,若固定孵育条件,红细胞对海藻糖的胞内负载量基本保持不变。但随保存期的延长,红细胞在高渗环境中孵育更易损伤,溶血率明显增加。所以,为达到更好的海藻糖负载效果,应尽量采用新鲜红细胞进行处理。     

解毒酶GSTM1和GSTT1缺失与广西肝细胞癌相关性研究

为了研究谷胱甘肽硫转移酶 GSTM1和 GSTT1基因多态性与肝细胞癌风险的相关性 ,在广西黄曲霉毒素(AFB1)高污染区 ,用 PCR技术检测肝细胞癌患者和非肝细胞癌成人血样中 GSTM1和 GSTT1的存在或缺失。肝细胞癌组 (HCC) 181例 ,经病理确诊为肝细胞癌 ,对照组 36 0例 ,由非肝细胞癌成人组成。结果显示 ,GSTM1和 GSTT1零基因型的频率在对照组分别为 4 7.8%和 4 2 .7% ,在肝细胞癌组分别为 6 4 .6 %和 5 9.7% ,两组间的差异有非常显著性意义 (P <0 .0 1)。GSTM1和 GSTT1联合零基因型在肝细胞癌组与对照组分别为 38.2 %和18.5 % ,两组间差异有显著性意义 (P <0 .0 5 )。说明 GSTM1和 GSTT1零基因型在当地与 AFB1诱发肝细胞癌的风险相互关联。     

原花青素与戊二醛共交联心脏瓣膜的相容性

采用8mg/mL原花青素交联脱细胞猪主动脉心脏瓣膜4h后,再经1.25mg/mL戊二醛交联44h.生物相容性检测结果显示,共交联瓣膜组细胞粘附率较戊二醛单独交联提高59%((78.75±8.7)%～(19.75±3.27)%)、无明显溶血现象((0.75±0.36)%)、血小板粘附量较戊二醛单独交联显著减少((193±15.5)个vs(292.6±24.93)个)、免疫原性低((49.33±6.3)%vs(95.27±5.26)%).研究结果表明,共交联瓣膜材料有良好的细胞相容性、较好的血液相容性和较低的免疫原性,是一种优良的生物瓣材料,有望应用于生物瓣制备.     

载入海藻糖红细胞冷冻干燥保存的实验研究

探讨载入海藻糖对红细胞冷冻干燥保存的效果.利用硫酸蒽酮比色法测量细胞内海藻糖的含量,对载入海藻糖的红细胞进行了冷冻干燥保存.结果表明,细胞载入海藻糖的最高浓度为35mmol/L,经冷冻干燥后的细胞回收率与血红蛋白回收率提高非常明显,分别为冷冻干燥前的59.78±4.51%和57.49±3.69%;渗透脆性与新鲜红细胞无显著差异.载入海藻糖对红细胞的冷冻干燥保存效果有密切作用.     

瘢痕疙瘩的超声检查

采用高频探头(5.0MHZ)对43例瘢痕疙瘩超声检查并与正常皮肤比较,前者表皮平均厚度0.5±0.1mm,真皮平均厚度4.9±0.6mm;后者表皮不均厚度0.6±0.1mm1,真皮平均厚度1.4±0.6mm。两组有显著性差异(P<0.001)。认为超声检查瘢痕疙瘩有实用价值。     

自然流产胚胎绒毛组织中lrh-1基因表达的研究

采用实时荧光定量PCR(Q-RT-PCR)技术,对30例自然流产和30例正常妊娠者的胚胎绒毛组织进行肝受体同系物-1(lrh-1) mRNA检测,同时测定2组人员血清孕酮质量浓度.结果显示:自然流产胚胎绒毛组织中lrh-1 mRNA的表达水平为(0.001385±0.000335),与正常妊娠胚胎绒毛组织中lrh-1 mRNA表达(0.001497±0.000447)无明显差异(P>0.05);自然流产者平均血清孕酮质量浓度((7.17±2.02) ng·mL-1)明显低于正常妊娠者((27.75±1.67) ng·mL-1),二者具有显著性差异(P<0.05);两组lrh-1与孕酮质量浓度相关系数分别为0.37和0.34.推论lrh-1与人类血清孕酮合成无明显相关性,在自然流产中可能不是影响人类胚胎发育的主要因素.     

季节对猪体外成熟卵母细胞的发育能力的影响

猪的卵母细胞对外界环境非常敏感,这造成猪的胚胎学相关研究是家畜繁殖学研究领域中最困难的方面之一.文章的研究目的是描述季节的变化对体外成熟卵母细胞发育能力的影响.研究中比较了不同季节每对卵巢获得A/B级卵的数量以及卵母细胞核成熟的比例(实验1),另外统计分析了不同季节孤雌(实验2)和核移植(实验3)胚胎发育能力的差异,最后在冬春两季分别进行了克隆胚胎的移植以观测其体内发育情况(实验4).结果显示实验1,春季(3月到5月)COCs/卵巢的比例最高(7.6±3.5),夏,秋,冬季的比例依次是(6.4±3.3),(6.7±2.9),(6.7±3.4),p<0.05.然而,没有发现卵母细胞的MⅡ比例有显著性差异((75.3±3.3)%,(73.5±2.3)%,(73.0±4.2)%,(76.5±6.7)%,依次是春,夏,秋,冬季的MⅡ比例,p<0.05).实验2,观察到夏季孤雌胚胎的囊胚率显著性降低(10.1±2.6)%,春,秋,冬季的孤雌胚胎囊胚率依次是(27.2±3.4)%,(22.4±3.5)%,(22.4±3.4)%,p<0.05.实验3,猪体细胞克隆胚胎在春季囊胚率获得提高((12.2±1.3)%,秋,冬季的克隆胚胎囊胚率依次是(10.2±1.2)%,(8.1±1.4)%,p<0.05).实验4,发现冬季胚胎移植无论是妊娠率还是出生率都明显低于春季.以上结果表明季节变化影响体外成熟卵母细胞的发育能力.     

联合海藻糖和二甲基亚砜进行冻干前负载的人红细胞冻干效果研究

探讨人红细胞在冻干前经添加低浓度二甲基亚砜(DMSO)海藻糖负载缓冲液负载后,是否会提高红细胞的冻干效果. 实验组:为6%DMSO 800 mmol/L海藻糖.对照组:冻干前负载缓冲液为等渗PBS.取等量压积红细胞(6份)分别重悬于两组负载缓冲液,37℃孵育8 h后离心去除上清,加入冻干保护剂混匀后程序冻干,15%PVP溶液37℃三步复水.分别检测并比较两组冻干红细胞复水后血红蛋白回收率、复水红细胞变形性、再水化后4℃放置时间对冻干红细胞再水化稳定性的影响及冻干红细胞长期保存的稳定性.结果表明:冻干红细胞再水化后,实验组红细胞血红蛋白回收率为(63.019±4.901)%,对照组为(28.787±7.514)%,两组之间存在显著差异(P＜0.01);冻干红细胞再水化后,两组冻干红细胞的综合变形指数均有明显下降,实验组红细胞综合变形指数为(18.133±2.392)%,对照组为(8.017±1.934)%,两组之间存在显著差异(P＜0.01);两组冻干红细胞复水后4℃保存4 h、6 h、8h后,相对即刻再水化血红蛋白回收率的差值,经配对t检验显示有显著统计学差异(P＜0.05).复水后4℃保存12 h、24 h后,相对即刻再水化血红蛋白回收率的差值,经配对t检验显示无统计学差异;两组冻干红细胞4℃保存6个月前后复水后血红蛋白回收率的差值,经配对t检验显示两者之间存在显著差异(P＜0.05). 结论:红细胞冻干前经添加6% DMSO的海藻糖负载缓冲液处理后,可提高冻干后红细胞血红蛋白回收率、改善复水红细胞变形性,提高复水后4℃保存的稳定性和冻干红细胞长期保存的稳定性.     

电渗透用于强化海藻糖载入红细胞的实验研究

海藻糖是一种有效的冻干保护剂,实验采用电渗透的方法强化海藻糖载入红细胞,在不同电压、脉宽、频率和细胞外海藻糖浓度的条件下对红细胞进行电渗透.实验结果表明,当电压300 V、脉宽1 ms、频率4 次/min、细胞外海藻糖浓度800 mmol/L时,细胞内海藻糖浓度达到(63.68±2.14)mmol/L.电渗透后红细胞形态正常,细胞膜的渗透脆性略有降低,电渗透致溶血率为17%,ATP酶活性与新鲜红细胞无显著差异.     

葎草提取物胃肠促动作用的实验研究

目的探讨葎草提取物对胃肠运动功能的影响。方法采用胃排空、肠推进运动实验法以及离体胃、肠实验法,研究葎草提取物对胃、肠运动功能的影响。结果蒸馏水组胃内容物残留率(%)和小肠推进比(%),分别为(82.53±10.69)和(50.88±8.68);葎草水提物大、中、小剂量(10.0、7.5、5.0 g生药/kg)组,胃内容物残留率(%)和小肠推进比(%),分别为(53.83±9.89)、(48.98±9.75)、(62.75±10.56)和(60.19±7.77)、(64.98±7.41)、(58.71±6.83);葎草醇提物中、小剂量(7.5、5.0 g生药/kg)组,胃内容物残留率(%)和小肠推进比(%),分别为(73.21±8.09)、(74.19±7.71)和(57.48±6.18)、(57.42±6.62)。与蒸馏水组比较,葎草水提物大、中、小剂量(10.0、7.5、5.0 g生药/kg)组均显著降低胃内容物残留率(P0.01),明显提高小肠推进比(P0.01,P0.05);葎草醇提物中、小剂量(7.5、5.0 g生药/kg)组也明显降低胃内容物残留率(P0.05),也明显提高小肠推进比(P0.05);在降低胃内容物残留率及提高小肠推进比,葎草水提物与相同剂量的醇提物比较,差异显著(P0.01)。在离体实验中,葎草水提物给药前后肠管、胃底环状肌的收缩幅度分别为(1.20±0.06)g、(72.01±4.27)mg和(4.89±0.60)g、(211.42±6.76)mg;葎草醇提物给药前后肠管、胃底环状肌的收缩幅度分别为(0.88±0.05)g、(70.20±3.26)mg和(1.43±0.17)g、(218.75±3.13)mg。与给药前比较,葎草水提物与醇提物给药后的肠管和胃底环状肌的收缩幅度明显强于给药前(P0.01);从给药前后肠管收缩幅度差比较,葎草水提物与醇提物比较差异显著(P0.01)。结论葎草提取物具有促进胃排空、肠推进运动的作用,且水提物作用强于醇提物。     

人肺腺癌细胞A549低温保存优化研究

人肺腺癌A549细胞广泛用于体外肺癌发病基因筛查、药物筛选等临床研究,低温保存是保持样本库中的A549细胞高质量的有效方法。本文针对A549细胞低温保存方法,通过使用非接触置核慢速降温程序减小降温过程中溶液的过冷度,并在此基础上优化保护剂乙二醇（ethylene glycol,EG）、二甲基亚砜（dimethyl su...     

The test freezing temperature of C2―C6 dicarboxylic acid: The important indicator for ice nucleation processes

The importance of organic compounds as significant constituents of atmospheric aerosols, and cloud condensation nuclei （CCN）, as well as players influencing the tropospheric oxidation and atmospheric energy budget, have been increasingly recognized. Low molecular weight dicarboxylic acids （LMW-DCAs） are significant identified portions of atmospheric condensed matter including aerosols, fog and clouds. Besides the photochemical transformation of DCA, the implication of organic matter in ice nucleation processes has been considered. In this study, we investigated the freezing temperature of pure and mixed （C2-C6） DCA solutions in ultra-pure water and tap water solution droplets using a freezing nucleus counter at different pH, and in different water ionic conditions. The mean freezing temperature of different mixture of LMW-DCA in ultra-pure and tap water solution droplets ranged from -24.1±2.8 to -21.3±3.9℃ and -10.2±2.2 to -9.5±2.2℃, respectively. The mean freezing temperature of the control （ultra-pure and tap） water droplets （-22.6±3.5℃, 11.2±2.4℃） was also measured. The results, and their implications in atmospheric chemistry and physics of the atmosphere will be discussed.     

可跨膜SOD对肝癌及正常肝细胞增殖的作用

可跨膜融合蛋白PTD-SOD与肝癌细胞和正常肝细胞共培养,使细胞内SOD活力分别增加了52%和23%,提高胞内总抗氧化能力(T-AOC)水平达100%,同时降低ROS水平.实验结果显示,肝癌细胞增殖受到显著抑制,最高抑制率达91.91%,对正常肝细胞抑制率较小,为45.50%.     

层状云人工催化物理效应的数值模拟

对于自然云催化过程的数值模拟可以再现人工催化后云的宏微观物理响应特征,有助于提高对人工催化机理的科学认识,优化人工催化方案。在天气研究与预报(weather research and forecasting, WRF)模型Thompson微物理方案中加入碘化银人工催化过程,对2018年河北省一次层状云催化过程开展数值研究。数值模拟结果表明,采用与实际催化过程相似的催化剂量,层状云降水个例催化后冰晶含水量及地面降水显著增加。该次降水个例自然云中冰相粒子较少,自然云中冰相过程不活跃,数值模拟结果再现了降水个例催化后从过冷却到冰、雪晶含量明显增加的转变。相同催化剂量下,催化层厚度的减少提高了播撒率,进一步优化了催化效果,可见,应该在云中过冷水含量丰富的云区开展冷云催化作业。人工催化过程增加的冰晶通过凝华过程增长并自动转化为雪晶,雪晶增长下落过程中以凇附过冷云水增长为主。催化过程导致地面降雪显著增加。     

BDE-209对人正常肝L-02细胞生长和凋亡的影响

采用Cell Counting Kit-8 (CCK-8)和Hoechst 33342/PI等, 分析十溴联苯醚(BDE-209)对人正常肝L-02细胞增殖和凋亡的影响。结果显示, 在不同浓度水平(0~70 μg/mL)的BDE-209中暴露24小时后, 细胞增殖抑制率随着BDE-209浓度的升高而升高。经SPSS-Probit-Logit法计算, 得出 BDE-209对人正常肝L-02细胞24小时的IC₅₀为127.08 ±24.93 μg/mL。在不同浓度水平(0~15 μg/mL)的BDE-209中暴露24小时后, 与对照组相比, 各剂量组细胞未出现明显的细胞形态变化, 仅在15 μg/mL剂量组观察到细胞减少的现象。凋亡染色后, 荧光显微镜检发现, 随着BDE-209浓度升高, 亮蓝、淡粉染色细胞数量增大, 人正常肝L-02细胞的凋亡率增高。与对照组相比, 各剂量组差异均具有统计学意义。分析结果表明, BDE-209可引起人正常肝L-02细胞增殖受到抑制, 并诱导细胞凋亡率增加。     

Carbonaceous particles in Muztagh Ata ice core,West Kunlun Mountains,China

Carbonaceous particles concentrations of OC and EC are determined using a two-step gas chroma- tography system in Muztagh Ata ice core covering the time period of 1955--2000. Over the period represented by the core, OC and EC concentrations appear to have changed significantly, varied in the range of 17.7--216.7 and 6.5--124.6, and averaged 61.8, 32.9 ng·g^-1, respectively. The average concentration of EC in Muztagh Ata ice core is much lower than that in an Alpine ice core record （100--300 ng·g^-1） during the same period, but it is a factor of 14 in Greenland ice core （2.3 ng·g^-1）, this may induce a strong impact on the snow albedo in the last 46 years in our study area. Observations indicate two periods with obviously high deposition concentrations （1955--1965 and 1974--1989） and two periods with low concentrations （1966--1973 and 1990--1995）, as well as a recent increasing trend. By comparing EC and SO4^2- concentration variations and deciphering OC/EC ratios recorded in the same ice core, we can judge roughly that the carbonaceous particles deposited in Muztagh Ata ice core were attributed to fossil fuel combustion sources.     

世界优秀径赛运动员兼项制胜的项群内稳态研究

在研究世界优秀径赛运动员兼项的发展变化趋势及对兼项运动员在同一比赛中成绩与名次是否具有相关性来探讨项群内稳态。以第21-31届奥运会和第1-17届锦标赛径赛运动员兼项同时取得前8名来统计兼项人次,运用数学模拟及相应统计方法进行了径赛兼项的变化趋势分析。结果表明：在兼项人次上,女运动员显著高于男运动员;世界格局显示,前三名美国、牙买加、英国的兼项人次高于其它国家;运动员平均兼项人次方面,第一集团美国（1.61 ±0.45）与牙买加为首的第二集团（0.96 ±0.26）和埃塞俄比亚为首的第三集团(0.31 ±0.17)显著高于其它国家（0.07 ±0.03）（P<0.05）;且速度性项群显著高于耐力性项群（P<0.01）;100 m与200 m（115,53.24%）和5000 m与10000 m（49,22.68%）占总兼项人次的75.92%;在平均兼项人次上,100 m与200 m（4.42±1.60）显著高于其它8个项目（P<0.01）。获冠军运动员兼项人次显著高于任何其他运动员（P<0.01）。从兼项名次及成绩相关上,大部分兼项项目具有非常显著差异（P <0.01）;除1500 m与3000 m（女）相关系数无统计学意义;在名次相关上400 m与800 m,1500 m与5000 m也无统计学意义。径赛兼项上女运动员优于男运动员;兼项制胜已成为径赛的重要发展趋势,并且在距离结构呈现相邻性原则。100 m与200 m和5000 m与10000 m成为径赛兼项主流,且呈现上升趋势,出现两极化即速度性、耐力性现象。高水平运动员兼项能力比低水平运动员更强。径赛兼项成绩与名次具有强相关性,表明项群内稳态存在。项目供能方式、项群内稳态（SSH）差异和恢复时间可能是影响兼项制胜三个关键因素,提出恢复时间是项群分类的一个重要指标。     

葡萄幼胚培养技术的研究(Ⅰ)——激素对胚培养的影响及培养基的筛选

选用巨峰、里扎马特和无核白葡萄的幼胚接种在附加了GA3、IAA、6-BA等的不同激素水平的MS培养基上进行培养,结果表明花后60d的巨峰和花后50d的无核白的幼胚在附加GA30.5mg.L-1、IAA2.0mg.L-1、6-BA0.5mg.L-1的培养基上分别得到了44.0±8.9%和96.0±8.9%的发育率与31.9±6.4%和37.5%的成苗率;花后60d的里扎马特幼胚在附加GA30.5mg.L-1、IAA0.5mg.L-1、6-BA0.5mg.L-1的培养基上得到了76.0±8.9%的发育率和63.5±5.5%的成苗率.筛选出了适合不同品种的最佳胚培养、萌发以及成苗培养基,为葡萄新品种的选育提供了新的方法与技术依据.     

Two-dimensional gel electrophoresis analysis of the proteomes expressed in the human hepatoma cell line BEL-7404 and normal liver cell line L-02

Proteome analysis technology has been used extensively in conducting discovery research of biology and has become one of the most essential technologies in functional genomics. The proteomes of the human hepatoma cell line BEL-7404 and the normal human liver cell line L-02 have been separated by high resolution two-dimensional gel electrophoresis (2-DE) with immobilized pH gradient isoelectric focusing (IPG-IEF) in the first dimension and sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) in the second dimension (IPG-DALT). The resulting images have been analyzed using 2-D analysis software. Quantitative analysis reveals that 7 protein spots are detected only in hepatoma BEL-7404 cells, 14 only in L-02 cells, and 78 protein spots show significant fluctuation in quantity in both cell lines (P< 0.01). These protein spots have been displayed on a proteome differential expression map. Analysis for the reproducibility of 2-DE indicates that the positional variability in the IEF dimension is 0.73 mm, while the variability in the SDS-PAGE dimension is 0.44 mm, and the quantitative variability is 17.6%–19.2%. These results suggest that the reproducibility of 2-DE has been suitable for the study of differential expression of proteomes. Proteome differential expression maps can be useful tools for disease diagnosis, drug-target validation analysis and biological process elucidation.