不同分离培养基对检测废水中微生物种群多样性的影响

用3种不同培养基(YPG、LB、WW)从焦化废水处理系统中分离培养细菌,并用ERIC-PCR指纹分析的方法,对分离物的种群多样性进行了比较研究.同一悬浮污泥样品在YPG、LB和WW培养基上的活菌计数结果分别为1.6×106CFU/ml、7.0×105CFU/ml和9.8×105CFU/ml.选取最适稀释度(10-4),分别从YPG、WW和LB三种不同培养基平板上分离了56、39和60株菌株.用ERIC-PCR指纹图的方法分析这155株菌株的多样性,结果显示,废水培养基(WW)的选择性最强,39株分离物只显示12种不同的指纹类型;而YPG培养基的选择性相对较低,54株分离物中共有30种不同的指纹类型,多样性明显;LB培养基上因有28%的小菌落无法用ERIC序列扩增,故不能用此方法对其多样性作有效评价.至此,本次实验就分离焦化废水处理系统中的细菌及对分离物进行分子多样性的研究而言,选用YPG培养基最合适.     

不同分离培养基对检测废水中微生物种群多样性的影响

用 3种不同培养基 (YPG、LB、WW)从焦化废水处理系统中分离培养细菌 ,并用 ERIC-PCR指纹分析的方法 ,对分离物的种群多样性进行了比较研究 .同一悬浮污泥样品在 YPG、LB和 WW培养基上的活菌计数结果分别为 1 .6× 1 0 6 CFU/ ml、7.0× 1 0 5CFU/ ml和 9.8× 1 0 5CFU/ ml.选取最适稀释度 (1 0 - 4) ,分别从 YPG、WW和 LB三种不同培养基平板上分离了 5 6、3 9和 60株菌株 .用 ERIC-PCR指纹图的方法分析这 1 5 5株菌株的多样性 ,结果显示 ,废水培养基 (WW)的选择性最强 ,3 9株分离物只显示 1 2种不同的指纹类型 ;而 YPG培养基的选择性相对较低 ,5 4株分离物中共有 3 0种不同的指纹类型 ,多样性明显 ;LB培养基上因有 2 8%的小菌落无法用 ERIC序列扩增 ,故不能用此方法对其多样性作有效评价 .至此 ,本次实验就分离焦化废水处理系统中的细菌及对分离物进行分子多样性的研究而言 ,选用 YPG培养基最合适 .     

光合细菌3号菌株产类胡萝卜素培养基优化

探讨了光合细菌3号菌株产类胡萝卜素培养基的优化以及类胡萝卜素的提取.首先对3号菌株的60%蔗糖悬液进行全波长扫描,确定了3号菌株在457nm波长下出现最大吸收峰,因此用457nm波长下的OD值作为类胡萝卜素相对含量高低的指标.通过改变培养基碳源、氮源和盐度确定最佳的碳源、氮源和盐度,得出最优碳源为蔗糖,最优氮源为硝酸铵,最适盐度为0.1‰.利用最佳培养基培养3号菌株,用皂化法分离纯化类胡萝卜素,得类胡萝卜素纯品,提取率为30.06mg.g-1.     

从文蛤分离丝状真菌

分离海洋微生物是开发海洋药物的重要内容.对共附生在双壳贝文蛤的真菌,采用平板直接分离和液体富集后涂布分离两种方法,以及6种不同的分离培养基,分离到23株丝状真菌,其中9株丝状真菌在淡水及海水培养基中均能生长、繁殖.对分离菌(W16)的生长特性研究结果表明,盐浓度、pH值,以及海水和淡水的不同环境,对其生长和代谢有明显的影响.     

舟山群岛近海底栖真菌及其抗生活性初筛研究

对分离自舟山群岛海域海底46个沉积物样品中的丝状真菌进行种属鉴定,及其代谢产物抗菌、细胞毒和乙酰胆碱酯酶抑制活性的检测.结果显示:舟山群岛海域海底沉积物中存在着丰富的真菌资源.46个沉积物样品中,真菌含量最高可达到2 250 CFU/g(样品).在进行活性检测的89份真菌代谢产物中,有29.2%的样品对一株或一株以上的指示细菌有不同程度的抑制作用;各有10%左右的样品对5株植物致病真菌显示抑制作用,有49.4%的样品对白色假丝酵母显示抑制作用,但没有样品对黑曲霉有抑制作用;在细胞毒实验中,分别有2个、4个和12个样品在浓度为25μg/mL时,对KB细胞、Raji细胞和Hep G2细胞的抑制率高于50%;有55个样品显示微弱的乙酰胆碱酯酶抑制活性.通过此次研究,我们对舟山群岛海域的底栖真菌资源有了初步了解,将有助于将来更全面深入的研究.     

一株（海洋）头孢菌的培养条件及抑菌活性实验

对福建崇武海域的生物共生及附生微生物进行筛选分离,得到一株具有一定抗菌活性的海洋真菌S9.通过对海洋真菌S9的生理特性测定和发酵培养,研究该海洋真菌的生长周期及各种参数之间的关系.正交实验表明,海洋真菌S9的最佳发酵方案:蔗糖5 g·L-1,蛋白胨1.5 g·L-1,pH值为6.5,发酵时间为10 d.抑菌性能检测表明,发酵液对白色念珠菌有一定的抑制作用.     

葡聚糖酶高产菌株的分离鉴定及其培养基优化的研究

进行高产分解葡聚糖酶的优良菌株的分离、鉴定及其培养基的优化.经过对土壤样品的分离、诱变筛选和一系列的形态、生理生化试验后,获得一株葡聚糖酶活力为97μ/ml的菌株并鉴定为枯草芽孢杆菌属.其在摇瓶发酵的优化培养基为葡萄糖4%,磷酸氢二铵0.03%,磷酸二氢钾0.15%,硫酸镁0.1%,其它适量无机离子及生长因子.     

抗肿瘤的海洋微生物筛选

本研究利用人体宫颈癌细胞(Hela细胞)为靶细胞,在大连近海12种海洋动植物体内提取微生物。用4种分离培养基培养,分离并得到48株海洋微生物。对单菌落进行发酵,获得其次生代谢产物。随后,进行海洋微生物的发酵次生代谢产物的抗肿瘤鉴定[1-5],研究结果发现,有1种菌株(12#-从黑泥中用MD培养基筛选的菌)发酵     

人工湖底泥与水体真菌培养基的筛选

为定量研究淡水水域底泥和水体中的真菌种群分布,以广州暨南大学校内的南湖底泥及水体为研究对象,筛选出适合定量分析真菌的最佳培养基,采用平板计数法测定真菌数量.采用了酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基(YPD)、马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)、察氏培养基(CA)、马铃薯琼脂培养基(PA)和混合培养基(HH)等5种培养基,分别按原配方、原配方中加入10%底泥浸出液、以及在原配方中不含抗生素的培养基中加入适量氯霉素等3种方法配制培养基.培养结果表明:各种培养基上生长的真菌数量和种类各异,同一种真菌在不同培养基上的生长情况也相差极大.加入底泥浸出液的5种培养基,无论是底泥还是水样,所培养出来的菌落数量多数都多于原配方;加入抗生素的两种培养基所培养出来的菌落数量都远远少于原培养基.研究结果说明加入10%底泥浸出液的酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基(YPD)更加适合用于底泥和水体真菌数量的调查.     

微生物次生代谢物的提取及其性能

海洋微生物是海洋药物的重要资源,资源微生物次生代谢物的提取及性能研究是开发海洋药物的第一步.从渤海近海域16种动植物体内提取微生物,分离得到261株微生物,其中,霉菌28株、细菌196株、放线菌12株、真菌25株.对单菌落进行发酵,获得次生代谢产物,并对海洋微生物次生代谢产物的抗肿瘤理化性能进行了研究.结果表明,63#菌株发酵液对Hela细胞有较强的抑制作用,黄泥NRG、海苔CHA、海带G1、陈海水NRG、陈海泥NRG、黑泥CHA发酵液对Hela细胞有轻微的抑制作用.     

右旋糖酐酶生产菌株的分离鉴定及发酵培养基优化

为获得右旋糖酐酶高产菌株,并提高其右旋糖酐酶产量,本研究从土壤中筛选高产右旋糖酐酶真菌,并采用响应面法对其发酵培养基进行优化.实验筛选得到一株生产右旋糖酐酶的菌株DJ72,经鉴定为腐皮镰刀菌(Fusarium solani),并确定其最佳发酵培养基配方为右旋糖酐T200011.88 g/L、蛋白胨7.15 g/L、尿素...     

北部湾广西海域海洋真菌多样性及其生物活性研究

本研究从北部湾广西海域采集的海绵、珊瑚、沉积物等样品中分离真菌,旨在挖掘北部湾的海洋真菌资源,筛选出具有潜在抗肿瘤或抗菌活性的菌株。采用稀释涂布法和基于内转录间隔区基因序列(ITS)的系统发育树法分析海洋真菌的多样性信息,并通过滤纸片琼脂扩散法和MTT比色法评价菌株的抗菌、抗肿瘤活性。分离得到45株海洋真菌,隶属17属。其中青霉属(Penicillium)和曲霉属(Aspergillus)为优势种群,分别占总菌株种类的26.7%和24.4%。此外,获得一株潜在的新种菌株Myrothecium gramineum GXIMD01018。活性筛选结果发现菌株Aspergillus japonicus GXIMD01014、Penicillium oxalicum GXIMD01021、Talaromyces purpureogenus GXIMD01024等6株真菌的次级代谢产物对人结直肠癌细胞具有较显著的细胞毒活性,菌株T.purpureogenus GXIMD01024的代谢粗提物具有一定的抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-Resistant Staphylococc...     

新功能单体的合成及鬼臼毒素分子印迹聚合物的制备和性能研究

 合成了一种新的手性功能单体（L）-N-烯丙基吡咯烷基-2-羰基酰胺（APCA）,采用本体聚合法,对功能单体和交联剂的用量、致孔溶剂的种类等实验条件进行了优化,合成了11个鬼臼毒素分子印迹聚合物（MIP^_1-11）及相应的非印迹聚合物（NIP_1-11）.平衡吸附实验表明,采用APCA为功能单体,优化条件下制备的鬼臼毒素分子印迹聚合物MIP₁具有较大的吸附量和较高的印迹因子.并在不同酸度下研究了MIP₁对混合标准样品的吸附选择性,结果表明:当醋酸在甲醇中含量为0.3%时,MIP₁对4′-去甲表鬼臼毒素的选择因子β达到最大（2.97）.最后,结合超高效液相色谱（UPLC）研究了MIP₁在实际样品中的分离富集能力,结果表明MIP₁具有较好的吸附分离性能和一定的应用潜能.     

铜离子耐受菌的筛选及其吸附特性研究

本研究旨在筛选出能够在较高铜离子浓度下生长并吸附铜离子的菌株,并对其吸附特性进行研究,以期为微生物处理重金属污染废水提供可靠的技术支持。本实验充分利用环境对微生物的胁迫作用,选择被铜离子污染的土壤,放入锥形瓶中并用水稀释后取上清夜涂布于含铜离子的4种培养基(即细菌、霉菌、放线菌和真菌固体培养基)。经过划线分离得到单菌落,从中挑选耐受能力最强的菌株,对其进行菌种16SrDNA鉴定及生长、吸附条件的优化。结果筛选到一株对铜离子耐受达到19 000mg/L的菌株,经鉴定为枯草芽孢杆菌,优化吸附条件后其对溶液中铜离子吸附率可以达到72%。实验筛选到的菌株具有改善和治理铜离子污染废水的潜力。     

人脐静脉内皮细胞培养液的选择

目的:筛选出人脐静脉内皮细胞(HUVECs)原代、传代最适培养液.方法:0.02%II型胶原酶灌注脐静脉消化15min获得细胞,用不同的培养液培养.24h后观察细胞贴壁状况,细胞计数法得到贴壁细胞数量;内皮细胞标志性蛋白vWF进行细胞鉴定.传代培养后,用MTT法比较不同培养液对HUVECs活力的影响.结果:用含ECGS、20%FBS的ECM组进行原代培养,可获得贴壁细胞数量最多的HUVECs,且与其他组间有显著差异;用含30ng·mL-1 VEGF165、10%FBS的M199进行传代培养,HUVECs活力较ECM组无明显差异.结论:HUVECs原代、传代培养分别选用优化后的培养液,既保证原代HUVECs的质量和数量,又使传代培养成本降低60.8%.     

槭菌刺孢发酵产红色素培养基及发酵条件的优化

采用单因子试验和正交试验,对菌株槭菌刺孢(Mycocentrospore acerina)的发酵培养基进行优化,得到最佳发酵培养基配方为:蔗糖6%,黄豆粉2.26%,(NH4)2SO40.16%,CaCO30.45%,NaCl 0.19%;最佳发酵条件为20℃,100r/min,起始pH值为7.0,在250mL的三角瓶中加入优化发酵培养基50mL,发酵培养240h;在发酵过程中,不必补加各成分,其原始培养基成分已足够整个发酵过程中产色素的需要.     

乙醇-水介质中钙与DBC-偶氮氯膦显色反应及包头铁矿中钙的测定

优化了乙醇-水介质中钙与DBC-偶氮氯膦显色反应的条件，考察了该显色体系的分析性能．研究了复杂铁矿样品的分解和干扰消除的方法，建立了包头铁矿中钙经简单分离的分光光度法．     

β-寡聚酸对4种食用菌菌丝生长的影响

以杏鲍菇、鸡腿菇、灵芝、猴头4种食用菌为实验材料,分别在PDA和栽培料培养基中加入不同浓度的β-寡聚酸,研究不同浓度的β-寡聚酸对4种食用菌菌丝生长的影响,结果表明：在PDA培养基中,β-寡聚酸浓度为1.0 mL/L时,菌丝生长速度最快,与对照组有显著性差异;在栽培料培养基中,β-寡聚酸质量浓度为2.0 mL/kg时,菌丝生长速度最快,与对照组有显著性差异.可选择β-寡聚酸为1.0 mL/L和2.0 mL/kg分别作为4种食用菌PDA母种培养基和生产中固体栽培料中添加的最适浓度.     

怀牛膝愈伤组织诱导及分化的研究

对怀牛膝叶片和茎段愈伤组织的诱导及分化进行了研究.结果表明:KT 0.5 mg/L+2,4-D 1.5 mg/L对叶片愈伤组织的诱导效果最好,KT 0.5 mg/L+NAA 1.5 mg/L对茎段愈伤组织的诱导效果最好,出愈率均达100%;KT 0.5 mg/L+NAA 1.5 mg/L有利于叶片形成的愈伤组织分化为根,6-BA 0.5 mg/L+NAA 1.5 mg/L则有利于茎段形成的愈伤组织分化为芽.