昆虫标本DNA提取的研究进展

昆虫标本是研究昆虫遗传变异的重要资源,在昆虫起源与进化和昆虫物种多样性研究中应用越来越广泛。本文综述了造成多年保存的昆虫标本DNA降解的原因,以及昆虫标本DNA的提取方法。     

从动物固定标本中提取DNA方法研究

作者主要介绍了一种在福尔马林固定标本中提取DNA的方法，利用该方法从固定了半年以上的标本中提取到大于2kb的DNA片段，并利用通用引物获得了16S rRNA的扩增片段．并讨论了福尔马林固定标本中提取DNA该注意的问题．     

远志属腊叶标本DNA提取方法研究

以远志属植物腊叶标本为例,研究如何从植物腊叶标本中提取到高质量的DNA。在改良CTAB法的基础上,对水浴时间、水浴温度、沉淀时间进行优化。结果表明,降低水浴温度为45℃,延长水浴时间为5-6h,延长沉淀时间为1-2h,可以从远志属腊叶标本中提取到用于PCR反应的DNA。     

蝴蝶干标本DNA的提取及RAPD分析

通过对3种基因组DNA提取方法的实验比较,提出了适合蝴蝶干标本基因组DNA的提取方法,并成功地应用于RAPD-PCR的扩增,表明该方法可行．     

固定标本的DNA提取及PCR扩增

报道富尔马林、酒精固定的日本绒螯蟹标本的ＤＮＡ提取及ＰＣＲ扩增，并与冷冻、煮沸标本进行了比较。结果表明，福尔马林固定标本与酒精固定标本一样可以撮加入的蛋白酶Ｋ量越多，ＤＮＡ的回收率越高。以提取的ＤＮＡ为模板，进行了线粒体ＤＮＡ１２ＳrＲＮＡ和Ｄ－１ooＰ基因片段的ＰＣＲ扩增，经琼脂糖产电泳ＰＣＲ扩增产物后均得到了与期待的碱基长度相一致的清晰谱带。     

一种四膜虫线粒体DNA提取的新方法

本文根据四膜虫线粒体DNA（mtDNA）对碱稳定这一特性，建立了一种更为简便的，能直接提取四膜虫线粒体DNA的方法。该方法快速简便，重复性好，可用于游离细胞材料mtDNA的提取。     

一种简便快捷的植物线粒体质粒DNA的提取方法

介绍了一种从植物材料中提取线粒体质粒DNA的方法,该方法不需要密度梯度离心和有机溶剂油提,整个提取过程可在较短时间内完成,该方法简便,快捷,效果好,对拷贝数低的线粒体质粒DNA得率高。     

中国漠王族干标本DNA提取及部分类群发育关系

为了降低昆虫分子系统学研究中的成本,提高资源利用率,本实验利用干制标本提取基因组DNA.通过对河北大学馆藏30年的漠甲亚科不同保存期干标本与液浸标本DNA的提取和特定基因片段PCR(聚合酶链式反应)扩增,获得一致效果.通过细胞色素B(Cytb)基因片段序列信息构建系统树并与传统分类学做比较,探讨了漠王族部分种类的系统进化关系,研究结果支持Reitter(1893)建立的Platyopini和Pimeliini是2个独立族的观点,而不同意Beutle等(2005)将它们合并为1个族的观点.研究结果为利用鞘翅目昆虫干标本进行分子系统学研究提供了借鉴.     

蚂蚁DNA提取方法的研究

针对不同体型的蚂蚁,提出了一套实用的总DNA提取方法.该方法依照虫体大小,分别采用冰冻固定后捣碎和剪刀剪碎两种方法破碎虫体,使材料利用充分,提高了提取效率.探讨了组织匀浆、DNA沉淀及溶解等实验中常见问题.结果表明,采用盐析法提取DNA,较传统的酚-氯仿抽提法简单、高效.     

湖北民族学院标本馆鸟类标本统计分析

湖北民族学院生物多样性标本馆现有369号鸟类标本,首次对馆藏鸟类标本进行分类和统计分析.研究确定了本馆收藏鸟类标本354种,隶属于23目、69科、175属.并分别从鸟类种类组成、生态类型、馆藏中国鸟类标本的地理分布特点和保护种类等方面进行了统计分析.     

4种提取水稻基因级DNA方法的比较

对于含有大量硅质及多糖如酚、酯、萜等其它次生代谢产物的水稻,要从其组织中提取高质量的基因组DNA,一般比较困难,作者以水稻叶片为材料,分别采取了简易提取法,CTAB法,QIAGEN公司Dneasy Plant Mini Kits法,Shanghai Sangon公司Genomic DNA Isolation Kits法4种方法提取水稻基因组DNA;并通过质量分数为0．8％琼脂糖凝胶电泳和PCR扩增的方法所提取的DNA样品进行检测,将它们在DNA的产量、质量和耗费等方面进行简要比较,并根据分子生物学研究工作的实际特点,确定了CTAB沉淀法为最佳方法。     

油页岩微生物总DNA的提取方法

为建立油页岩微生物总DNA提取方法,以两矿区的6个样品为材料,采用SDS高盐、SDS液氮研磨、SDS反复冻融、SDS异硫氰酸胍和试剂盒提取法分别对总DNA进行提取.结果表明,各方法提取效果差异很大,改进的SDS高盐提取法效果最好,各样品均得到约23kb较完整片段,且产率显著高于其他方法,达9144~38685ng·g-1干样;以未纯化的DNA为模板,对16SrDNA进行PCR-DGGE,得到了相应的扩增产物及DGGE指纹图谱,说明该法适合油页岩样品.SDS液氮研磨和SDS反复冻融提取法仅能得到部分样品总DNA,且产率和纯度较低,而SDS异硫氰酸胍和试剂盒提取法无DNA提出,不适合此类样品.     

紫菜叶状体DNA的提取方法

为得到适合不同试验的高纯度紫菜DNA,对紫菜叶状体DNA的3种提取方法进行了分析比较.结果显示:酶解法提取的DNA样品质量最高,但要求样品量较多;改良的CTAB法提取的DNA样品多糖含量少,完全可以满足通常的遗传操作的需要,且需要样品量较少;常规的CTAB法提取效果最差.     

螺旋藻基因组DNA制备方法的摸索与比较

为了得到高质量的螺旋藻基因组DNA,采用超声波法和溶菌酶法两种方法提取基因组DNA,并对实验方法进行了摸索与比较。结果表明:影响螺旋藻基因组DNA制备质量和得率的重要因素之一是螺旋藻细胞壁的破壁程度。本实验中采用两种破壁方法均可得到高质量高得率的螺旋藻基因组DNA,但超声波法破壁不易掌控,而适当浓度的溶菌酶法可获得较理想的结果。     

多光谱遥感影像湿地水体提取方法综述

湿地是陆地与水域交错而形成的水陆过渡地带,它对环境和社会经济的可持续发展有着举足轻重的作用,而这些作用的发挥必需有一定的水域为基础。鉴于多光谱遥感影像较高的定位精度和相对较低的价格,一直是湿地调查、研究与保护的重要数据源。首先探讨了水体特征提取过程,然后列举了具有代表性的提取方法,并对各个方法的特点进行了分析,总结了每种方法的优缺点和应用范围,最后阐述了湿地水体提取还需解决的问题,并对其研究前景进行了展望。     

不同动物肌肉组织中DNA提取方法研究

实验目的旨在从三种提取方法中筛选出一种经济适用、操作简单、快速且能满足后续PCR扩增检测技术的动物肌肉组织中的DNA提取方法.分别采用SDS法、试剂盒法、异硫氰酸胍法提取猪肉、牛肉、羊肉、鸡肉、草鱼肉的生鲜肌肉组织以及高压肌肉组织的基因组DNA.通过酶标仪、琼脂糖凝胶电泳对提取的DNA进行质量检测,然后根据五种动物的线粒体细胞色素B基因(cytb)保守序列设计特异性引物,进行PCR扩增结果来验证方法的可行性.结果显示,异硫氰酸胍法在生鲜和高压肉中提取DNA的浓度和纯度高于SDS法,且此方法经济适用、操作简便、快速,所提取DNA质量能满足后续PCR实验的要求.     

大草履虫总DNA的提取方法比较

快速而稳定地提取大草履虫的基因组DNA是进行后续分子生物学研究的前提.文章通过比较传统SDS法、CTABⅠ法和CTABⅡ法等提取大草履虫DNA的效果,进一步优化提取方法,获得快速稳定地提取大草履虫基因组DNA的方法.结果表明:用CTAB I法提取的DNA浓度低,杂质较多;CTABII提取的DNA电泳时检测不出条带;而SDS法提取的DNA在电泳时带型较整齐,无降解,且DNA的得率和纯度较高,但仍有蛋白质污染.针对蛋白质的去除,用SDS-蛋白酶K法和SDS-NaAc法来提取DNA,经过试验发现这2种方法都能够很好地去除蛋白质,所获DNA样品的纯度和得率都能用于进一步分子试验,而SDS-NaAc法更经济适用.     

棉花枯萎菌gDNA不同提纯方法的比例研究

以棉花枯萎菌菌株为试验材料,在CTAB法,SDS－CTAB法等基础上国以改进,对4种提纯棉花枯萎菌DNA的方法进行了比较研究,结果表明,SDS－CTAB法是适合于棉花枯萎菌DNA提取的方法,该方法提取的DNA纯度高,产率高,无明显降解现象,能很好地被限制性内切酶酶切,并用作PCR模板,同时对DNA提取过程中的细节问题进行了探讨与分析。     

梨属DNA提纯方法的比较研究

通过比较试验,使用ＳＤＳ－氯仿－异戊醇法,并添加ＢＭＥ及Ｖｃ,可简便,快速地从梨属成熟叶中提取大分子量能且很好地被酶切的ＤＮＡ,有效地去除了梨属植物组织中富含的多酚类、单宁、色素及多糖类杂质。     

玉米丝黑穗病菌DNA提取方法比较(简报)

玉米丝黑穗病是玉米生产上的一大主要病害,严重威胁着玉米的可持续生产。华致甫等用妇人指等5个自交系作鉴别寄主,对玉米丝黑穗病菌的致病力进行了试验,认为我国至少存在5个生理小种。用鉴别寄主来鉴定生理小种易受环境条件的限制,生理小种间是否存在遗传物质的差异,才能从根本上说明小种致病力的分化,而DNA的纯度是制约RAPD扩增质量的一个重要基础。因此,笔者对玉米丝黑穗病菌的DNA提取方法进行了初步探讨。