轮环藤碱对小胶质细胞活化的抑制作用研究

考察了轮环藤碱对脂多糖(LPS)诱导小胶质细胞过度活化的抑制作用.培养BV2小鼠小胶质细胞系,以脂多糖(1μg/mL)激活小胶质细胞,同时给予不同浓度的轮环藤碱(0.1～10μmol/L)处理细胞,以四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞存活率,Griess法测定细胞释放一氧化氮(NO)水平,酶联免疫吸附分析实验(ELISA)检测细胞释放肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)和白介素-6(IL-6)的水平.进一步在无细胞体系中考察了轮环藤碱对NO的直接清除能力;以及对DPPH、羟自由基(·OH)、过氧亚硝酸根离子自由基(ONOO~-)和超氧阴离子(·O_2~-)自由基的清除作用.结果表明,轮环藤碱可显著抑制LPS激活的小胶质细胞释放NO及三种炎症因子(IL-1β、IL-6和TNF-α),且对细胞存活率无明显影响;此外,轮环藤碱对NO、DPPH、·OH、ONOO~-和·O_2~-自由基均具有显著清除能力.综上,轮环藤碱可能对小胶质细胞过度激活引起的神经炎性相关疾病具有潜在的防治作用.     

小胶质细胞在不同炎性环境下亚型和功能的演变及其意义

近年来随着对多种神经系统炎性变性病如阿尔茨海默氏病(AD)、帕金森氏病(PD)和多发性硬化(MS)等发病机制的深入研究,显示脑内慢性免疫炎症反应可能是其重要病理特征之一,而小胶质细胞在其中所起的重要作用也日益受到人们的关注。小胶质细胞是中枢神经系统(CNS)的重要组成部分,同时又是脑内的主要免疫效应细胞。正常成年人脑中,小胶质细胞处于相对静息状态,而在免疫炎性反应过程中,小胶质细胞显示激活的细胞形态,在向病灶区移行的同时,可以产生神经毒性分子和神经营养因子,具有致炎和抗炎的作用。因此小胶质细胞的双重性对于理解疾病的发生发展,以及寻找疾病的治疗靶点具有极其重要的理论和实际意义。     

胶质细胞与药物成瘾

药物成瘾是一种慢性和复发性脑病.传统的观念认为胶质细胞在药物成瘾中仅起辅助作用.目前发现胶质细胞上存在众多的神经递质受体和转运体,且能分泌多种氨基酸、多肽、神经营养因子及炎症因子,对神经递质的代谢、神经冲动的传导以及突触的调节等起着重要的作用；且胶质细胞在药物成瘾中发生极大变化.对中枢神经系统中的星形胶质细胞、小胶质细...     

肝X受体α在小胶质细胞激活致神经元损伤中的作用研究

[目的]研究肝X受体alpha(LXRα)在小胶质细胞激活致神经元损伤中的作用.[方法]小鼠小胶质细胞株(BV2细胞)置于6孔培养板培养,分为对照组、Aβ组、干扰组、干扰+Aβ组、假干扰+Aβ组.应用倒置显微镜观察各组BV2细胞的形态学变化,Western blot方法检测LXRα蛋白表达变化,ELISA检测各组上清液中COX-2、iNOS的表达水平.收取BV2细胞上清液作为条件培养基用来培养人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y细胞),并通过CCK-8和免疫荧光法检测SH-SY5Y细胞的存活率和凋亡蛋白Bax表达情况.[结果]与对照组相比,Aβ组及干扰组的BV2细胞表现为胞体变圆变大,细胞突起减少,呈阿米巴样活化状态,LXRα蛋白水平明显下调(P0.05),细胞上清液COX-2,iNOS的表达含量明显升高(P0.05),Aβ处理组和干扰组的细胞上清液明显引起SH-SY5Y细胞存活率降低、凋亡蛋白Bax表达增加(P0.05).与假干扰+Aβ组相比,干扰+Aβ组的细胞胞体变大,突起减少,LXRα蛋白表达减少,COX-2,iNOS的表达增加,干扰+Aβ组的细胞上清液导致SH-SY5Y细胞存活率降低,Bax表达增加(P0.05).[结论] LXRα参与调控Aβ诱导的小胶质细胞激活及炎症因子的释放,在AD的炎症机制中发挥重要作用.     

神经病理性疼痛的小胶质细胞机制

小胶质细胞是中枢神经系统内重要的免疫细胞,起递呈抗原、吞噬病原体、分泌多种细胞因子和神经修复的作用。神经损伤后,小胶质细胞会被激活,可释放大量的细胞因子、炎性介质,激活补体,引起神经炎症和神经免疫反应,导致各种神经功能紊乱,引起痛觉过敏和异常痛敏。本文从小胶质细胞的激活、以及激活途径的关键分子TLR4来探讨神经病理性疼痛的发病机制。     

脂多糖诱导星形胶质细胞炎性反应的机制研究

目的 探讨脂多糖(LPS)诱导星形胶质细胞产生炎性反应及其可能机制.方法 原代培养并鉴定C57BL/6小鼠大脑皮质星形胶质细胞,GFAP免疫荧光染色进行鉴定,1μg/mL LPS刺激第2代星形胶质细胞,正常组细胞作为对照,Griess法检测NO的释放,ELISA检测细胞因子IL-6、IL-1β和TNF-α的水平,免疫荧...     

法舒地尔通过调控糖酵解通路对原代小胶质细胞的影响

目的探讨法舒地尔在阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)等多种认知功能障碍的疾病中对原代小胶质细胞的作用及其可能的调控机制。方法采用原代小胶质细胞,在经过不同浓度的法舒地尔处理后,荧光定量PCR检测细胞炎症水平、糖酵解相关酶及HIF-1α的活化水平,酶标仪检测原代小胶质细胞Aβ吞噬活化能力,通过ATP实验检测小胶质细胞的能量代谢能力。结果经过不同浓度的法舒地尔处理后,LPS刺激不同时间点的原代小胶质细胞的促炎因子的m RNA表达水平均有下降(P <0.05); Aβ吞噬能力明显增加(P <0.001);法舒地尔促使原代小胶细胞细胞新陈代谢能力明显增加(P <0.005),糖酵解过程的相关酶以及HIF-1α的mRNA水平均有下降(P <0.005)。结论法舒地尔可能通过下调小胶质细胞HIF-1α的转录活性来降低糖酵解过程相关酶的相对表达量,抑制糖酵解的过程从而增加ATP的产生,维持小胶质细胞的新陈代谢来减轻炎症反应,增加吞噬作用。     

神经胶质细胞与HIV相关神经认知障碍

HIV-1相关神经认知障碍(HIV-1 associated neurocognitive disorder,HAND)是艾滋病患者中枢神经系统(central nervous system,CNS)的常见并发症,其患病率高达40%~60%,是40岁以下成人痴呆的最主要原因之一;患者从确诊到死亡的平均时间约为4~6个月,且其发病机理尚待研究.已有的研究表明,HIV-1不感染神经元,但在HAND的发病机制中,神经胶质细胞的过度活化和由此而引发的神经炎症起着重要的作用.本文就神经胶质细胞在HAND的发生发展中的作用进展进行综述.     

刺参多糖对星形胶质细胞活化作用机制研究

目的探讨刺参多糖对星形胶质细胞的活化作用机制.方法选取新生Wistar大鼠24只,经胰酶消化分离可得星形胶质细胞;采用MTT法检测HS-4对细胞的毒副作用;采用伊红染色与免疫荧光染色检查细胞的形态学变化;采用Western blot法检测细胞特征蛋白GFAP和细胞周期调控蛋白Cyc DI的表达;采用BrdU法检测细胞的增殖;采用Transwell法检测细胞的迁移.结果 HS-4浓度在0.1～100μg/mL,作用时间为3,5 d时,细胞数量与对照组差异不显著,HS-4浓度在100μg/mL,作用时间为7 d时,细胞存活率明显低于对照组,差异显著;体外培养的细胞与HS-4单独作用,细胞形态无明显改变,HS-4与FGF-2联合作用后,细胞形态发生明显改变;星形胶质细胞的特征蛋白GFAP表达水平显著升高,HS-4在1μg/mL和5μg/mL时,GFAP表达升高了169%和183%;对照组细胞周期调控蛋白Cyc DI表达最低,FGF-2单独作用后,Cyc DI表达略有升高,当HS-4与FGF-2联合作用后,Cyc DI表达明显升高;对照组BrdU阳性率最低,占细胞总数的12.9%,FGF-2单独作用后,BrdU阳性率略有升高,占细胞总数的16.4%,与对照组差异不显著,HS-4浓度为1μg/mL和5μg/mL时与FGF-2联合作用,BrdU阳性率明显升高,占细胞总数的28.5%和56.1%,与对照组相比差异显著;静息状态星形胶质细胞无迁移,HS-4与FGF-2作用下星形胶质细胞迁移明显.结论 HS-4与FGF-2能有效诱导星形胶质细胞的活化,其活化机制主要是强化细胞增殖与迁移.     

岗松总黄酮对脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症的影响

为探讨岗松总黄酮（GSH）的抗炎活性机制,通过NF-κB信号通路,研究脂多糖（LPS）诱导RAW264.7细胞炎症的保护作用。实验采用噻唑蓝（MTT）法检测GSH对RAW264.7细胞增殖活性的影响,采用酶联免疫法（ELISA）检测GSH对白介素（IL-1β、IL-8）及转换生长因子β （TGF-β）的影响,采用蛋白印迹法（WB）检测细胞中IκBα蛋白相对表达,采用实时定量基因扩增荧光检测法（QPCR）检测细胞中NF-κB p65的mRNA基因表达。研究结果表明, GSH处理细胞后,可促进RAW264.7细胞增殖（P<0.05）,抑制IL-1β、IL-8、TGF-β含量（P<0.01）,上调IκBα蛋白的相对表达（P<0.05或P<0.01）,抑制NF-κB p65的mRNA基因表达（P<0.01）。推测岗松总黄酮抑制NF-κB信号通路可能是其抗炎活性作用机制之一。     

愈结灵对溃疡性结肠炎小鼠治疗作用

目的：观察愈结灵对实验性结肠炎（UC）小鼠的治疗作用及机制。方法：C57BL/C小鼠40只随机分为正常、模型、SASP（520 mg/kg）,YJL组,每组10只,除正常组外,余以5%DSS水溶液自由饮用8 d产生UC模型,同时灌服相应药物。评价各组小鼠的体质量变化,观察结肠组织病理学改变,疾病活动指数评分（disease activity index, DAI）,Western blotting法检测结肠组织中核转录因子（NF-κB）的表达。结果：愈结灵能显著减轻结肠炎小鼠结肠组织病理学损伤。与模型组相比,各给药组DAI明显降低（ p〈0.01）,结肠组织NF-κB表达下降（ p〈0.01）。结论：TASA可能通过抑制NF-κB的表达,发挥治疗溃疡性结肠炎的作用。     

NF-κB与疾病的关系

随着分子生物学技术和生物信息学的发展 ,生命科学进入了后基因组时代 ,对转录因子NF κB的研究越来越受到重视 ,尤其是NF κB的活性与细胞的生长分化、炎症、免疫应答、肿瘤生长及病毒繁殖等生物学过程的关系 ,以及NF κB的活化过程与某些老年性和顽固性疾病的发生关系     

元宝枫叶黄酮抑制脂多糖诱导的小胶质细胞激活的作用

 探讨枫叶黄酮对脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)诱导的小胶质细胞株BV-2细胞炎性因子释放的抑制作用.用LPS刺激BV-2细胞构建炎症模型,采用免疫荧光双标和RT-PCR方法检测不同浓度枫叶黄酮(5,10,15μmol/L)对细胞炎性蛋白酶诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)和环氧合酶-2 (cyclooxygenase-2,COX-2)、细胞炎性因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白介素-1β (interleukin-1β,IL-1β)、炎性信号蛋白核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)蛋白与mRNA的表达变化.结果发现:不同浓度的枫叶黄酮在翻译水平和转录水平上明显抑制了LPS诱导的细胞炎性蛋白酶iNOS和COX-2,细胞炎性因子TNF-α和IL-1β与炎性信号蛋白NF-κB的上调.上述结果表明枫叶黄酮可通过调控LPS诱导的小胶质细胞株BV-2细胞炎性因子释放从而抑制小胶质细胞激活,发挥抗神经炎症的作用.     

雷公藤甲素与雷公藤红素对小胶质细胞炎症反应的影响机制

雷公藤甲素与雷公藤红素是雷公藤的主要生物活性成分,具有多种潜在的药理作用与毒性。神经炎症是各种神经退行性疾病的共同特征,小胶质细胞的激活是中枢神经系统神经炎症的主要组成部分。本文用雷公藤甲素与雷公藤红素处理小胶质细胞（HMO6）,探究其对小胶质细胞增殖、细胞膜完整性的影响,以及雷公藤甲素对小胶质细胞M1、M2极化的影响。结果表明：与对照组相比,雷公藤红素（10^-4 mol/L）处理HMO6后,细胞增殖抑制率可高达（71.91±16.28）%（P<0.01,n=3）,当浓度为10^-5 mol/L时,乳酸脱氢酶（LDH）释放量明显增加（8.58±1.56）%（P<0.01,n=4）;与对照组相比,雷公藤甲素处理HMO6后,对细胞膜完整性无显著影响,但当浓度为10^-5 mol/L时,细胞增殖抑制率可高达（94.31±0.62）%（P<0.01,n=5）,与脂多糖（LPS）组相比,雷公藤甲素浓度为10^-7 mol/L时人肿瘤坏死因子-α（TNF-α）释放量显著减少至（264.83±64.25）pg/mL（P<0.01,n=3）,人白细胞介素-10（IL-10）释放量减少至（63.48±16.79）pg/mL（P<0.05,n=3）。     

金线莲多糖抗衰老作用及其机制

考察金线莲多糖抗衰老作用及其机制.每天给小鼠皮下注射D-半乳糖溶液(40 mg·kg^-1)诱导其衰老,同时灌胃给予金线莲多糖(100,200,300 mg·kg^-1)或维生素E(200 mg·kg^-1)进行治疗,以维生素E治疗组为阳性对照.6周后对小鼠进行行为学测试,8周后检测小鼠的大脑皮层p-NF-κB p65表达,以及大脑皮层过氧化氢酶、超氧化物歧化酶及血清总抗氧化能力活性和丙二醛浓度,并检测小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬情况.结果表明:与衰老小鼠相比较,经金线莲多糖治疗后,小鼠的抗氧化酶活性显著提高,其大脑皮层p-NF-κB p65表达下调,且运动、空间探索和学习记忆能力明显改善;同时,金线莲多糖能增强衰老小鼠清除抗原的能力;金线莲多糖抗衰老作用与其抗氧化、抑制NF-κB信号通路、增强衰老小鼠免疫能力有关.     

羟乙基淀粉对内毒素感染大鼠中性粒细胞功能的影响及分子机制

检测羟乙基淀粉(HES 200／0．5)对内毒素腹腔感染大鼠中性粒细胞(PMN)功能的影响及其分子机理．雄性Wistar大鼠注射内毒素(LPS，6mg／kg，ip)以造成感染模型．LPS注射后1min，4种不同剂量的HES：3．75，7．5，15，和30mL／kg，分别由右侧颈静脉持续输注．LPS注射后2h及4h分别检测：循环血PMN核转录因子kappaB(NF-κB)水平，PMN表面CD11b表达，和多种组织中PMN浸润情况．HES(3．75和7．5mL／kg)，能降低LPS引起的NF-κB激活和肺、肝、心诸脏器PMN浸润增高．4种不同浓度的HES剂量依赖性地减少CD11b表达．HES对感染时PMN的激活和浸润有抑制作用，这种作用的产生与它对NF-κB的抑制有关．     

Albumin resuscitation protects against traumatic/hemorrhagic shock-induced lung apoptosis in rats

Objective： To determine the effects of albumin administration on lung injury and apoptosis in traumatic/hemorrhagic shock （T/HS） rats. Methods： Studies were performed on an in vivo model of spontaneously breathing rats with induced T/HS; the rats were subjected to femur fracture, ischemia for 30 min, and reperfusion for 20 min with Ringer＇s lactate solution （RS） or 5% （w/v） albumin （ALB）, and the left lower lobes of the lungs were resected. Results： Albumin administered during reperfusion markedly attenuated injury of the lung and decreased the concentration of lactic acid and the number of in situ TdT-mediated dUTP nick-end labelling （TUNEL）-positive cells. Moreover, immunohistochemistry performed 24 h after reperfusion revealed increases in the level of nuclear factor κB （NF-κB）, and phosphorylated p38 mitogen-activated protein kinase （MAPK） in the albumin-untreated group was down-regulated by albumin treatment when compared with the sham rats. Conclusion： Resuscitation with albumin attenuates tissue injury and inhibits T/HS-induced apoptosis in the lung via the p38 MAPK signal transduction pathway that functions to stimulate the activation of NF-κB.     

基于变异系数的模糊物元模型评价阔叶十大功劳根不同提取部位的抗炎镇痛作用

为了筛选阔叶十大功劳根抗炎镇痛的有效部位,应用模糊物元模型对阔叶十大功劳根不同提取部位抗炎镇痛效果进行综合评价。采用醋酸扭体法、热水缩尾法及热板法,以小鼠足跖肿胀、耳廓肿胀程度考察阔叶十大功劳根不同提取部位的抗炎镇痛作用;用变异系数权重的模糊物元模型对其干预效果进行综合评价;通过计算贴近度比较模型组（M₁）、阳性对照组（M₂）、水提物组（M₃）、乙醇提取物组（M₄）、正丁醇提取物组（M₅）、乙酸乙酯提取物组（M₆）、石油醚提取物组（M₇）的抗炎镇痛效果。结果显示阔叶十大功劳根不同提取部位均有抗炎镇痛的效果,但各部位抗炎镇痛效果程度不同;反应不同部位抗炎镇痛总效应的贴近度值从大到小排序为M₆,M₄,M₃,M₅,M₂,M₇,M₁。基于变异系数权重的模糊物元模型可筛选出阔叶十大功劳根抗炎镇痛的最佳有效部位为乙酸乙酯提取部位,能够客观、科学地评价不同提取部位的抗炎镇痛效果。     

基于变异系数的模糊物元模型评价阔叶十大功劳根不同提取部位的抗炎镇痛作用

为了筛选阔叶十大功劳根抗炎镇痛的有效部位，应用模糊物元模型对阔叶十大功劳根不同提取部位抗炎镇痛效果进行综合评价。采用醋酸扭体法、热水缩尾法及热板法，以小鼠足跖肿胀、耳廓肿胀程度考察阔叶十大功劳根不同提取部位的抗炎镇痛作用；用变异系数权重的模糊物元模型对其干预效果进行综合评价；通过计算贴近度比较模型组（M₁）、阳性对照组（M₂）、水提物组（M₃）、乙醇提取物组（M₄）、正丁醇提取物组（M₅）、乙酸乙酯提取物组（M₆）、石油醚提取物组（M₇）的抗炎镇痛效果。结果显示阔叶十大功劳根不同提取部位均有抗炎镇痛的效果，但各部位抗炎镇痛效果程度不同；反应不同部位抗炎镇痛总效应的贴近度值从大到小排序为M₆，M₄，M₃，M₅，M₂，M₇，M₁。基于变异系数权重的模糊物元模型可筛选出阔叶十大功劳根抗炎镇痛的最佳有效部位为乙酸乙酯提取部位，能够客观、科学地评价不同提取部位的抗炎镇痛效果。