人甲状腺组织中bFGFs的定位研究

目的：研究bFGFs在人甲状腺及其肿瘤组织中的组织学定位。方法：采用组织化学方法。结果：bFGFs存在于甲状腺滤泡上皮细胞中,同正常甲状腺相比较,甲状腺癌组织中存在大量bFGFs。结论：在甲状腺肿瘤（特别是恶性肿瘤）的发生、展过程中,bFGFs起重要作用。     

Heparin-Argarose亲和层析法分离人甲状腺肿瘤组织中的bFGFs

本文介绍了甲状腺肿瘤组织中碱性纤维母细胞生长因子(basis Fibroblast Growth Factors.bFGFs)的提取过程和分子量鉴定。研究表明:bFGFs对肝素具有强的亲和力,组织匀浆通过Heparin-Argarose亲和层析柱后,用2.0mol/L的NaCl即可洗脱下来,收集其亲和峰值的洗脱组分,经三氯醋酸沉淀后即可得到bFGFs,经Western-blot方法分析其分子量有三种,分别为14KD、17KD、18KD。     

Western-blot方法分析人甲状腺及其肿瘤组织中bFGFs

目的：研究人甲状腺瘤的发生分期ｂＦＧＦｓ（ｂａｓｃ Ｆａｂｒｏｂｌａｓｔ Ｇｒｏｗｔｈ Ｆａｃｔｏｒｓ）基因异常表达的关系。方法：采用Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ方法对人甲状腺及其肿瘤组织来源的ｂＦＧＦｓ进行分析研究。结果：人正常甲状腺组织来源的ｂＦＧＦｓ分子量为１７ＫＤ和１８ＫＤ,而人甲状腺肿瘤组织来源的ｂＦＧＦｓ为１４ＫＤ、１７ＫＤ和１８ＫＤ。结论：１４ＫＤｂＦＧＦｓ的出现提示人甲状腺肿瘤的发生和发展可能与ｂＦＧＦｓ的基因异常表达有关。     

浓度梯度胶制作方法改良研究

通过对小麦高分子量麦谷蛋白亚基（HMW－GS）、低分子量麦谷蛋白亚基（LMW－GS）的SDS－PAGE的电泳分离过程研究，找出了一种适合于在板状电泳中进行的梯度胶制备方法，实验结果表明，采用酸式滴定管依次混合11％和16％两种分离胶制备成11％－16％的浓度梯度胶，可以很好地分离HMW－GS2亚基和2^*亚基。该方法所用设备简单，制备操作方便，梯度胶的分离效果适合于一般生物化学和分子生物学实验室应用。     

聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳和均一凝胶电泳在分离及鉴定植物SOD同工酶中的比较研究

比较了聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳(GPGE)和均一凝胶电泳(PAGE)在分离和鉴定SOD同工酶方面的应用.在GPGE中根据Rf值大小可将SOD谱带分为3个区:A区Rf值最小,对SDS敏感,为Mn-SOD;C区Rf值最大,对SDS不敏感,为CuZn-SOD;B区谱带Rf值位于两者之间,对SDS敏感,为Fe-SOD.根据GPGE图谱上谱带Rf值大小和对SDS敏感性来判断SOD类型结果与用抑制剂判断结果一致,它可作为一种SOD类型初步鉴定的简便可行的方法,相同植物材料经PAGE分离后不具备这些特性.在相同牛血SOD浓度下,GPGE检测SOD灵敏度可达10-15mol,PAGE为10-13mol;在1.56×10-12molSOD时,在GPGE中可分辨出4条带,PAGE仅为2条.枸杞Fe-SOD在7.5%胶中Rf值最大,在10%胶中与CuZn-SOD重叠,香橼Fe-SOD、Mn-SOD和朱桔Mn-SOD、CuZn-SOD在10%PAGE中相互重叠,在GPGE中它们都有规律地完全分离,可根据Rf值大小鉴别SOD类型.通过2次电泳阐明了GPGE分离和鉴定SOD的可靠性,它能有效地分离和鉴定在PAGE上重叠的3种SOD类型.     

应用双向聚丙烯酰胺凝胶电泳分析猪和鱼卵透明带抗原的生化特性

鱼卵透明带免疫哺乳动物的抗生育作用和猪卵透明带组分免疫的抗生育作用相似,然而,抗鱼卵透明带血清与猪卵透明带的交叉反应性结果却不能确认。为进一步研究鱼卵透明带抗原的生化组成及其可能的抗生育作用机理,我们用双向聚丙烯酥胺凝胶电泳（2D－PAGE）对鱼卵透明带抗原和猪卵透明带抗原作比较分析。2D－PAGE的第一向电泳为等电聚焦电泳（IEF）,所用两性载体pH3．5～10;第二向为SDS－PAGE,采用10％浓度胶。热溶性猪卵透明带样品在2D－PAGE图谱上显示出典型的糖蛋白电泳图谱,可看到3列有很宽PI范围的主要蛋白区带,其表…     

猪精浆中,二肽基肽酶Ⅱ的提取、纯化和N-末端氨基酸序列分析

本文采用DEAE-Sephacel、Sephaeoyls──300HR、MtresGelRedA、Q－Sepharose、Zne-ChelateCellulofine，Phenyl－SuPeroseintheFPLC柱层析的方法，从诸糖浆中将二肽基肽酶Ⅱ提纯到1600倍，经聚丙烯酸胺凝胶电泳（SDE-PAGE）分离鉴定后，得到了单一的一条区带。采用SDS－PAGE时、在有β-ME存在条件下、其分子量为61KD，而不存在β－ME的条件下，其分子为58KD。在酸性条件下，它能特异地水解Gly－Pro－MCA和Lys-MCA这两种底物，同时，还测定了氨基酸残基的排列顺序。     

精子膜抗原提取、纯化及SDS—PAGE分析

目的：分析正常生育男性精细胞膜抗原，以便进一步应用精子抗原于其抗体的检测。方法：1．精子膜抗原粗制方法，按“全国临床检验操作规程”(第二版，1998年，P398)描述的方法进行，即收集20名正常生育男性精子样品，用含0．5％NP—40的Tris—Hcl缓冲液抽提。2．粗提液蛋白含量测定采用紫外分光光度法。3．蛋白抗原纯化方法，采用冰冷乙醇沉淀法，以粗提液：冰冷95％乙醇(—20℃)＝1：9(v/v)混合，并按1／50容量加入饱和乙酸钠混匀，于—20℃放置48h。取出后于—10℃，1800g离心30分钟，弃上清，例放试管，沥干沉淀，—20℃保存备用。4、SDS—PAGE分析，步骤3所获样品，以NS溶解，通过紫外分光光度计测定含量，并调节到6mg/ml。SDS—PAGE分析条件的点样量25μl，分离胶17．5％，隔层胶5％，电泳缓冲液用甘氨酸—Tris，PH18．6，电压20v过夜，次日再150V4h。电泳后凝胶经考麦斯亮兰染色、乙酸—甲醇洗脱，直至显示清晰电泳图谱。结果：1、粗提液经紫外分光光度计测定，其原液含蛋白质为24mg/ml，最大吸收峰值280nm。2．纯化的精子膜抗原溶液经SDS—PAGE分析，图谱显示2个蛋白斑，与标准蛋白比较，其分子量一个为35—45KD，另一个为15—25KD；75—85KD处出现微量痕迹。结论：我们成功地进行了精子膜抗原提取、纯化及SDS—PAGE分析实验，结果有清晰记录，为进一步应用精子抗原检测精子抗体的研究提供物质基础。     

几种寄生虫抗原组分的SDS-PAGE电泳比较分析

通过提取制备猪带绦虫、猪囊尾蚴虫体、猪囊虫囊液、多房型束球绦虫、肝片吸虫、细颈囊尾蚴、细颈囊尾蚴囊液和羊绦虫等8种寄生虫抗原，运用SDS－PAGE电泳法比较各种抗原的蛋白质的组成，不连续SDS－PAGE电泳结果显示猪带绦虫、猪囊尾蚴虫体、猪囊虫囊液、多房示绦虫、肝片吸虫、细颈囊尾蚴、细颈囊尾蚴囊液和羊绦虫等几种抗原的蛋白质在凝胶中分别有31，23，18，17，21，22，8和24条带，分子量在13kD-134kD之间，8种抗原的电泳带之间既有相似性又有特异性，其抗原的共同蛋白质亚基带的分子量为63kD,38kD和24kD。     

Tricine-SDS-PAGE电泳分析小分子多肽

研究旨在解决常规SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）对一些小分子多肽进行电泳分析过程中极易扩散丢失，常无着色带显示等问题。实验采用不同类型胶来电泳分析低分子量多肽，比较Tricine-SDS-PAGE电泳分析小分子多肽时的聚丙烯酰胺浓度和交联度，为小分子多肽的分析与鉴定提供快速准确的条件。     

手术治疗甲状腺肿瘤62例体会

目的探讨手术切除治疗甲状腺肿瘤的疗效。方法回顾分析我院2005至2007年收治的62例甲状腺肿瘤的患者资料，根据病情分别采用单侧甲状腺叶切除或者腺瘤单切加腺叶部分切除法，对其治疗效果、风险及并发症进行分析。结果62例患者术后除1例皮下出血，1例复发外，无喉返神经、喉上神经损伤，无永久性甲状旁腺甲状腺功能低下。结论单侧甲状腺叶切除或者腺瘤单切加腺叶部分切除法治疗甲状腺肿瘤并发症少，临床效果满意。     

鲫鱼斯坦尼小体降血钙因子的初步鉴定

采用向春季鲫鱼体腔注射Cacl2,导致身钙升高的方法,使其含有降血钙因子——斯氏降钙素的斯坦尼小体Ⅰ型细胞的分泌颗粒应答性地释放殆尽。然后对这种不含斯氏降钙素的斯坦尼小体组织匀浆和含有斯氏降钙素的斯坦尼小体组织匀浆的电泳带进行比较、分析,从而鉴定出鲫鱼坦尼小体中的降血钙因子是一种表观分子量为48kD的糖蛋白,其解聚物的分子量为24kD。     

纳米碳在甲状腺癌手术中对甲状旁腺辨认保护的临床研究

目的探讨纳米碳在甲状腺癌手术时对甲状旁腺的保护作用.方法将173例甲状腺乳头状癌患者随机分为实验组与对照组,实验组于甲状腺内注射纳米碳混悬液,10 min后待中央区黑染后再行清扫术,对照组按传统手术方式行甲状腺切除术.统计两组清扫组织中淋巴结数量、转移淋巴结数量及甲状旁腺数量.结果实验组与对照组在清扫淋巴结数目、清扫转移淋巴结数目及甲状旁腺误切数目上差异具有统计学意义.纳米碳使中央区淋巴结黑染,而甲状旁腺不黑染,且在黑染组织中均未发现甲状旁腺.结论纳米碳示踪效果确切,而且甲状旁腺不黑染,可达到既彻底清扫淋巴结同时又使甲状旁腺易于识别和保护的目的.     

心力衰竭患者甲状腺激素的变化及其临床意义

探讨充血性心力衰竭患者甲状腺激素的变化及其临床意义。通过对 80例充血性心力衰竭患者 ( CHF)进行治疗前后甲状激素测定 ,并与 30例对照组进行相应比较。发现 CHF患者T3降低 ,且降低程度与心功能分级有关 ,治疗后甲状腺素水平上升。因此 ,甲状腺激素水平可作为心力衰竭患者程度、治疗及预后的参考指标     

运用爪蟾变态实验检测镉的甲状腺激素干扰效应

将NF51阶段非洲爪蟾(Xenopus laevis)蝌蚪暴露于Cd2+浓度为0.01,0.1和1mg.L-1的溶液中21d,观测Cd2+对爪蟾的生长、变态和甲状腺组织结构的影响.1mg.L-1Cd2+暴露组爪蟾蝌蚪与对照组相比,7d后,平均体重减少了0.39倍,体长和后肢长分别减少了0.17倍和0.27倍,发育阶段稍有延缓;21d后,1mg.L-1Cd2+暴露组爪蟾蝌蚪后肢长减小了0.11倍,延缓了1个发育阶段.其余各浓度组在7d和21d暴露后,体重、体长、后肢长和发育阶段与对照组无显著差异.21d后,Cd2+各浓度组甲状腺组织结构出现滤泡数目减少、胶质减少甚至空泡化等现象,1mg.L-1Cd2+暴露组甲状腺滤泡之间还出现溶通现象.结果表明CdCl2具有甲状腺激素干扰效应,并可能是由于该化合物直接作用于甲状腺组织引起.由此可见,爪蟾变态实验可以有效检测重金属盐的甲状腺激素干扰效应.     

线粒体转录终止因子3在甲状腺癌中的表达及预后意义

对线粒体转录终止因子3（MTERF3）在甲状腺癌中的表达水平进行分析并评估其预后价值。从TCGA和GTEx等数据库提取甲状腺癌患者MTERF3的表达数据，探究MTERF3在甲状腺癌和癌旁组织中差异表达，分析差异表达对患者免疫细胞浸润和预后情况的影响，并明确MTERF3的临床意义。MTERF3在甲状腺癌中表达水平显著低于正常甲状腺组织，该基因在甲状腺癌中表达较低提示患者预后不良。MTERF3是甲状腺癌的预后标志物，是甲状腺癌诊断和治疗的潜在分子靶标。     

表达人胰岛素前体的毕赤酵母菌株的构建

将人胰岛素前体 (HIP)基因插入到毕赤酵母Pichiapastoris的分泌表达质粒pPIC9K中,得到分泌表达质粒pPIC9K/HIP并用电转化法转化P.pastorisGS115。筛选出整合型His⁺Mut^s 菌株,进一步用G418筛选获得高拷贝转化子。经诱导培养后,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)证明HIP在毕赤酵母中能有效分泌表达。对毕赤酵母中外源基因的稳定性进行了研究,结果表明外源基因在毕赤酵母中很稳定.