聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳和均一凝胶电泳在分离及鉴定植物SOD同工酶中的比较研究

比较了聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳(GPGE)和均一凝胶电泳(PAGE)在分离和鉴定SOD同工酶方面的应用.在GPGE中根据Rf值大小可将SOD谱带分为3个区:A区Rf值最小,对SDS敏感,为Mn-SOD;C区Rf值最大,对SDS不敏感,为CuZn-SOD;B区谱带Rf值位于两者之间,对SDS敏感,为Fe-SOD.根据GPGE图谱上谱带Rf值大小和对SDS敏感性来判断SOD类型结果与用抑制剂判断结果一致,它可作为一种SOD类型初步鉴定的简便可行的方法,相同植物材料经PAGE分离后不具备这些特性.在相同牛血SOD浓度下,GPGE检测SOD灵敏度可达10-15mol,PAGE为10-13mol;在1.56×10-12molSOD时,在GPGE中可分辨出4条带,PAGE仅为2条.枸杞Fe-SOD在7.5%胶中Rf值最大,在10%胶中与CuZn-SOD重叠,香橼Fe-SOD、Mn-SOD和朱桔Mn-SOD、CuZn-SOD在10%PAGE中相互重叠,在GPGE中它们都有规律地完全分离,可根据Rf值大小鉴别SOD类型.通过2次电泳阐明了GPGE分离和鉴定SOD的可靠性,它能有效地分离和鉴定在PAGE上重叠的3种SOD类型.     

聚丙烯酰胺凝胶电泳检测水稻SSR标记

以水稻为试验材料,提取水稻基因组DNA,选择多态性SSR标记,并将标记产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,最后硝酸银染色,试图建立了一种行之有效、简便、快捷的应用于水稻SSR标记的PAGE银染检测方法。     

聚丙烯酰胺凝胶电泳检测大豆SRAP标记

以大豆为试验材料,提取了大豆的基因组DNA,对大豆进行SRAP-PCR扩增,并对产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,最后硝酸银染色。建立了一种行之有效、简便快捷的应用于大豆SRAP标记的PAGE银染检测方法。     

用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法提纯蛋白质

对于含有多种成分且各蛋白质成分的分子量相差较小的菌体蛋白质的提纯,用一般的沉淀法、层析法均达不到理想效果.作者选用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法进行提纯,并尝试电泳后不经过染色,直接从凝胶中分离所需要的蛋白质成分.该实验对制胶、电脉、染色、脱色等各个环节进行了适当的改进,取得了较好的提纯效果.     

大豆聚丙烯酰胺凝胶电泳制胶浓度选择

本文提出在聚丙烯酰胺凝胶电泳中,对未知样品宜先在C％=4.8％,T％=2～5％或C％=2.6％ T％=5～10％的系列浓度分离胶及C％=20％,T％=3.2％的浓缩胶中作圆盘电泳,选择该样品的最适分离胶浓度。然后再按此浓度作垂直平板电泳,并作加样量梯度实验,找出加样最适量,以达到样品在聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳中的最佳分辨率。     

聚丙烯酰胺凝胶电泳实验的“集成化”研究

聚丙烯酰胺凝胶电泳是生物类相关专业学生必须掌握的一项实验技术。该项实验技术可以分析蛋白质及各种同工酶。教学实验中往往只能涉及蛋白质电泳或者是某一种同工酶的分析。为使学生能全面地掌握聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,本实验教学示范中心开展了聚丙烯酰胺凝胶电泳实验的"集成化"研究与实践,并取得了满意的效果。     

辣椒疫霉菌蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳法鉴定

本文以辣椒疫霉菌(Phytophthora capsici)A~1和A~2两个交配型及寄生疫霉菌(P.micotianae Var.parasitica)A~1和A~2两个交配型为标准菌株,对从新疆石河子、塔城、吐鲁番、伊犁、哈密和昌吉六个不同地区辣椒病株上分离的疫霉菌株(分别编号为Ph—2、Ph—11、Ph—14、、Ph—15、Ph—16、Ph—17)的蛋白质,用聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行了分析和比较。结果证明,这6个菌株的蛋白质电泳图谱与辣椒疫霉菌标准菌株一致,它们都有相同的5条重带和基本相同的3～4条弱带,而与寄生疫霉菌完全不同。说明该法可做为疫霉菌鉴定的重要辅助手段之一,实验中同一菌种不同交配型间的蛋白质电泳图谱完全相同,但6个菌株中Ph—2、Ph—14和Ph—16的弱带与标准菌株间稍有差异,是属于菌株间的差异还是其它原因有待进一步研究。     

几种真菌酯酶同工酶的聚丙烯酰胺凝胶电泳的初步研究

用聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳测定裂褶菌(Schizophyllm commune),8111(P1eurotug sp.)佛罗里达(Pleurotus florida),华丽侧耳(Pleurotus sp.)的酯酶同工酶在不同生长时期和不同条件下的酶谱。结果分析认为酯酶同工酶谱可作为研究真菌遗传变异和亲缘关系的一种手段,也是鉴定真菌种属分类的一种方法。实验的结果如下: 1.在培养过程中,菌丝体的酶带数目是不断增加的。 2.幼菌丝体的酶带与子实体的酶带是有区别的,因此必需利用晚期的菌丝体作为电泳样品,因为老的菌丝体接近于子实体的酶带。 3.裂褶菌的酶带与另外三个种的酶带是很不相同的,因此,裂褶菌和它们分属于不同的科。 4.华丽侧耳(Pleurotug sp.)的酶带是相似于佛罗里达侧耳(Pleurotus florida)的酶带,因此,华丽侧耳与佛罗里达侧耳是同一个种,8111的酶带是不同于佛罗里达侧耳,因此8111是侧耳属的另一个种。     

大麦醇溶蛋白酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳条件的探索

以栽培大麦和中国近缘野生大麦为材料，用复合提取剂(内含25％2-氯乙醇和1％2-巯基乙醇)对其种子醇溶蛋白过夜提取后制备的样本液，在保持凝胶浓度(18％)不变的基础上，通过改变交联度，催化剂用量，进样量以及电场强度和电泳时间所获得的不同电泳图谱，经比较分析可知，在酸性聚丙烯酰胺凝胶电泳体系中，交联度为3．33％，催化剂(0．6％H2O2)用量在26μL～30μL之间，进样量控制在5μL～10μL之间，室温下500V稳压电泳90min左右对醇溶蛋白分离效果好，电泳图谱清晰，分辨率高。实验结果亦表明，适当提高交联度和H2O2用量，有助于增加凝胶硬度，加快凝胶聚合速度，缩短制胶时间。     

两种染色方法对聚丙烯酰胺凝胶电泳回收蛋白的影响

以牛血清白蛋白(BSA)为材料进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),分别采用考马斯亮蓝(CBB)G-250染色和咪唑-Zn反染,用电洗脱仪回收.它们的灵敏度分别为500ng和5 ng;蛋白质回收率分别为37.9%和74.4%.     

管藻目绿藻叶绿素蛋白复合物PAGE分离方法的优化

以高等植物菠菜为对照，对管藻目绿藻刺松藻和假根羽藻叶绿素蛋白复合物的ＰＡＧＥ分离方法进行了优化。选择ＳＤＳ，ＤＯＣ，ＤＭＧ和ＴｒｉｔｏｎＸ－１００４种去污剂在不同的浓度、比例及增溶时间条件下，对色素蛋白复合物的分离效果进行了比较，并对电泳分离条件做了部分改进，提高了分辨率。     

5种瓢虫酯酶同工酶种间及种内变异的比较研究

采用聚丙烯酰胺垂直板凝胶电泳的方法分析了５种瓢虫、异色瓢虫４个型及七星瓢虫个体的酯酶同工酶．结果表明，种间的酶谱差异明显，每个种都有自己独特的谱型，彼此易于区分；异色瓢虫型间的主带酶谱相似，但总酶带数差异较大；七星瓢虫个体间的酶谱差异较小．     

RFLPs技术在食线虫菌物分类中的应用

利用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ方法对食线虫菌物节丛孢属进行了系统发育研究，以ＩＴＳ１和ＩＴＳ４为引物对该属１０种１２个菌株的核糖体ＤＮＡ转录间区进行了ＰＣＲ扩增，４种内切酶酶切。结果表明该属的ＩＴＳ区长度没有明显差异，其长度范围在６５８－７０５ｂｐ之间，酶切图谱能体现不同种间的多态性，根据４种内切酶酶切结果，利用ＵＰＧＡＭ法检建的节丛孢属分子系统树，基本体现了属内不同种间的亲缘关系，从节水平证明了节丛孢属形     

庞泉沟国家级自然保护区蝶类的多样性

通过对山西省庞泉沟国家级自然保护区蝶类资源的调查,共发现蝶类25种,隶属7科,25属。区系分析结果表明,该地区蝶类以古北界种为主,东洋界与古北界共有种次之,东洋界种类最少。结合保护区的地理地貌、植被类型、土壤、气候等生态地理因素,分析了保护区蝶类的垂直分布特征。     

韶关地区的名贵蝶类资源

2001年4月至2002年8月，分别在韶关地区的韶关市郊、始兴县车八岭国家级自然保护区、乳源瑶族自治县等地进行蝴蝶资源的抽样调查，共收集蝴蝶1768只，隶属10科62种，其中属于名贵种类的有8科36种，占的比例是58％；其中凤蝶科和蛱蝶科名贵种类最丰富．调查结果表明韶关地区有丰富的名贵蝴蝶资源．     

牦牛肝片吸虫四种抗原交叉免疫印迹分析

用牦牛肝片吸虫四种抗原分别制备四种抗血清，其ＥＳＩＳＡ效价 １：８００，１：１６００，１：３２００和１：８００．ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳区带组分分别为２５，２４，１８和９条带；免疫印迹结果，各种抗清与相庆抗原作用的主要抗原成份分别为５，１０，７和３；四种抗原中存在的共同抗原为１７．２ｋＤ；特征抗原ＨＡ为２９．９ｋＤ，ＳＡ为２７．２ｋＤ的２４．３ｋＤ；正常兔血清与各个抗原间均未出现免疫反应。     

四种竹蛏肌浆蛋白的电泳分析

用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)的方法对产自大连沿海瓣鳃纲(Lamellibranchia)真瓣鳃目(Eulamellibranchia)竹蛏科(Solenidae)中四种蛏进行了肌浆蛋白的比较,通过相似性系数的分析,探讨了该方法在分类学中的应用及前景．