H22 实体瘤小鼠生存实验及环磷酰胺对生存期的影响

摘要: 目的研究腹水型H22 肝癌皮下移植小鼠的生存期及环磷酰胺的影响。方法将H22 肝癌腹水瘤细胞接种 于BALB / c 小鼠左侧腋窝皮下,5d 后按肿瘤体积随机分成环磷酰胺组和对照组。环磷酰胺组腹腔注射环磷酰胺 50 mg / kg,每周2 次。观察小鼠一般临床表现、成瘤时间、成瘤率、体质量、摄食量、饮水量、肿瘤体积及生存时间。 结果H22 皮下移植小鼠成瘤时间约为5 d,成瘤率100% 。环磷酰胺组体质量、肿瘤体积与对照组比较明显降低 ( P ＜ 0. 05) ,环磷酰胺组摄食量、饮水量与对照组比较有增加的趋势。H22 皮下移植瘤小鼠平均生存时间为87 d, 环磷酰胺组小鼠平均生存时间为113 d( 生命延长率30. 3% ,P ＜ 0. 01) 。结论H22 腹水型肝癌皮下移植小鼠是一 种较理想的实体瘤模型,具有正常的免疫功能,可用于生物反应调节剂抗肿瘤药物影响荷瘤小鼠的生存期实验。     

扶正升血颗粒对荷H22瘤小鼠免疫功能影响的实验研究

目的:通过观察扶正升血颗粒对荷H22瘤小鼠免疫器官(胸腺、脾脏)重量、脾淋巴细胞增殖活性及细胞因子(IL-2)分泌的影响,探讨扶正升血颗粒对荷瘤小鼠免疫系统的调节作用.方法:采用荷H22(肝癌)实体瘤小鼠模型,用免疫器官重量法计算胸腺指数(TI)和脾脏指数(SI),用MTT比色法测定淋巴细胞增殖反应,用双抗体夹心ELISA法测定脾淋巴细胞培养上清液中IL-2的浓度.结果:扶正升血颗粒大、中、小剂量组荷瘤小鼠胸腺指数、脾脏指数均高于模型组,其中大剂量组TI、SI分别为18.9mg/10g、76.3mg/10g,较模型组分别增长36.0％、17.9％(p＜0.05);中剂量组TI为18.0mg/10g,较模型组增长29.5％(p＜0.05).扶正升血颗粒各剂量组荷瘤小鼠脾淋巴细胞增殖活性均高于模型组,以大剂量组作用最优,与模型组比较有显著性差异(p＜0.05).扶正升血颗粒各剂量组小鼠脾淋巴细胞培养上清液中IL-2的浓度均较模型组增高,大剂量组IL-2的浓度为61.6pg/ml,与模型组比较有显著性差异(p＜0.05).结论:扶正升血颗粒对荷H22瘤小鼠免疫器官胸腺、脾脏具有增重作用,能够增强脾淋巴细胞增殖活性,促进荷瘤小鼠细胞因子IL-2的分泌,表明扶正升血颗粒能明显增强荷瘤小鼠机体的免疫功能.     

不同单位小鼠肝癌H22瘤株蛋白质组成比较研究

从三个单位引进小鼠肝癌H22瘤株,昆明小鼠腹腔传代,制备瘤细胞,用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫组化法,比较研究小鼠肝癌H22瘤株细胞蛋白质表达的异同.结果发现三单位H22瘤株细胞的电泳条带数和染色强度不同,其中有五个条带染色强度差异明显,提示相应蛋白质含量有明显不同;免疫组化染色测定H22瘤株细胞PDGF-A、TrkA、Gai、CDk2、NFκBp65蛋白表达,其中CDK2阳性率两两单位间无显著差异,Gai阳性率两两单位间均有差异显著(p＜0.01),PDGF-A、TrkA、NFκ Bp65阳性率反应不一.可见三单位H22瘤株细胞蛋白质组成明显不同.     

熊果酸对H22荷瘤小鼠抗肿瘤及免疫调节作用

目的 探讨熊果酸（UA）对H22荷瘤小鼠抗肿瘤作用及免疫功能的影响.方法 皮下移植建立H22荷瘤小鼠模型,腹腔注射不同剂量UA,检测抑瘤率和免疫器官指数,MTT法检测脾脏T、B淋巴细胞增殖能力,流式细胞术检测CD4＋、CD8＋T细胞亚群含量及比例,ELISA法检测血清细胞因子IL-2、IL-4和TNF-α的表达量.结果 UA对小鼠皮下移植性肿瘤H22有显著的抑制作用,可降低免疫器官中异常增大的脾指数,增强脾脏中T、B淋巴细胞增殖能力,提高淋巴细胞亚群CD4＋T细胞表达及CD4＋/CD8＋T细胞亚群比例,促进血清IL-2、TNF-α表达,降低IL-4表达.结论 UA可抑制小鼠肝癌H22肿瘤生长,体内可以提高荷瘤小鼠的免疫能力,其抗肿瘤作用可能与机体的免疫调节作用相关.     

小鼠肝癌H_(22)克隆细胞株H2D8与其原瘤株武汉H_(22)的基本特性比较研究

用细胞克隆的方法获得武汉大学典型培养物保藏中心保存的小鼠肝癌H2 2 瘤株 (武汉H2 2 )的克隆细胞株H2D8。比较武汉H2 2 及H2D8对血清的依赖性、致瘤性、病理特征和对环磷酰胺 (CTX)的敏感性。结果发现H2D8细胞株对血清的依赖性 ,和对小鼠致瘤性及肿瘤病理学特性与武汉H2 2 细胞无明显差异 ;H2D8细胞对CTX治疗的敏感性更高。说明H2D8克隆株在体外培养、致瘤性和病理特征方面能保持原瘤株的细胞特性 ;在化疗敏感性方面优于原代细胞     

刺五加增强小鼠免疫功能的作用

研究了刺五加对正常小鼠及免疫抑制小鼠免疫器官重量，细胞数目和体视学参数的影响。结果表明，ＡＳ能增强小鼠脾脏和肠系膜淋巴结的重量，细胞数目，脾脏白髓体积和淋巴结皮质总体积。ＡＳ尚能明显对抗环磷酰胺所致的免疫抑制作用。揭示ＡＳ有增强小鼠免疫功能的作用。     

三氧化二砷对小鼠实体瘤抑瘤作用的实验研究

建立肝癌实体瘤小鼠模型,观察不同浓度的三氧化二砷(As2 O3)对实体瘤小鼠瘤体重量的影响,检测实体瘤小鼠白细胞(WBC)数量,并进行骨髓涂片检查,了解As2 O3对骨髓造血功能的影响.结果表明低,中浓度As2 O3治疗肝癌实体瘤小鼠的瘤体重量明显减小,抑瘤率分别达39.3%和24.4%,与对照组相比有显著差异(P＜0.01和P＜0.05);高浓度As2 O3治疗肝癌实体瘤小鼠的瘤体重量减小不明显,与对照组相比无显著差异(P＞0.05).低、中浓度As2O3治疗肝癌实体瘤小鼠外周血WBC数量明显增多,骨髓涂片检查发现有核细胞增生活跃,粒红比例正常,巨核细胞多见,说明治疗量的As2O3对骨髓造血功能无抑制作用.     

阿魏菇对荷瘤小鼠机体免疫功能的影响研究

从免疫学角度探讨了阿魏菇(Pleurotus Ferulae)抑制肿瘤的作用机理.实验中采用在小鼠体内建立S180移植肿瘤模型的方法,其中两组注射环磷酰胺造成免疫抑制模型.用1 g/kg的阿魏菇对小鼠连续灌胃10天后测定其抑瘤率,同时观察阿魏菇对小鼠免疫器官的影响;鸡红细胞半体内法观察阿魏菇对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响;MTT法测定阿魏菇对外周血NK细胞影响;溶血素法测定阿魏菇对小鼠血清中抗体水平的影响.研究结果表明阿魏菇对S180肉瘤有明显的抑制作用,抑瘤率可达64.97%,同时,阿魏菇可明显促进荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能、外周血NK细胞的免疫活性,提高体液免疫功能,增加脾指数,并且可显著增强环磷酰胺模型小鼠的免疫功能.即阿魏菇可通过促进小鼠机体免疫功能抑制S180肿瘤的增殖.     

龙葵多糖对H22荷瘤小鼠红细胞膜功能的影响

研究龙葵多糖对H22荷瘤小鼠红细胞膜功能的影响.采用DPH荧光探针标记荧光分光光度计测定红细胞膜的流动性,比色法测定红细胞膜表面膜封闭度、SA、SOD的含量.龙葵多糖各剂量组都能够降低H22荷瘤小鼠红细胞膜的微黏度,提高细胞膜脂流动性,提高红细胞膜重新封闭的能力,升高荷瘤小鼠红细胞膜唾液酸及超氧化物歧化酶的含量.龙葵多...     

复方丹参提取物对Hep瘤体及荷瘤小鼠免疫功能的影响

本文采用复方丹参提取物对Hep瘤体及荷瘤小鼠免疫功响进行了实验研究 ,结果为 ,给予复方丹参提取物 10、2 0mg/kg体质重 /d和 5 -Fu(ip) 10d ,对Hep肿瘤的抑制率分别为 32 .4 %、5 0 .0 %和 4 4.1% ;对小鼠碳粒廓清指数、免疫器官的重量有不同程度的提高 ,同时也可使小鼠血清溶血素生成值增高。与对照组比较 ,差异有显著性意义 (P <0 .0 5～ 0 .0 0 1)。     

澳洲茄胺盐酸盐对小鼠肝癌H22抑制作用研究

目的 研究观察澳洲茄胺盐酸盐对移植性实体型肿瘤小鼠肝癌H22的瘤重抑制率.方法 本项研究采用肿瘤细胞悬液接种法制备小鼠移植性实体型肿瘤H22动物模型.腹腔注射给药,连续10 d.给药结束后,解剖小鼠,取瘤称质量,进行统计学处理及分析,观察药物作用,连续3次重复实验.结果 经过研究发现:澳洲茄胺盐酸盐对移植性实体型小鼠肝...     

柴胡胶囊对H22小鼠免疫功能的影响

研究了柴胡胶囊对H22小鼠生命延长率及其免疫功能的影响.结果表明:柴胡胶囊可显著提高H22小鼠的平均生存期,并能增强H22小鼠外周血T淋巴细胞百分数与淋巴细胞转化率.提示:柴胡胶囊抗肿瘤作用的机理之一可能与其提高并改善荷瘤宿主的免疫功能有关.     

桑黄菌丝体对H22荷瘤小鼠肿瘤生长的影响

观察桑黄菌丝体对荷H22小鼠实体瘤生长的影响,探讨其抑瘤作用。采用小鼠移植瘤模型,随机分为5组,分别为荷瘤对照组、环磷酰胺对照组、桑黄菌丝体6.0 g/kg,3.0g/kg,1.5 g/kg剂量组,灌胃给药10 d后对荷瘤小鼠瘤重进行测量。桑黄菌丝体6.0,3.0,1.5 g/kg剂量对荷H22小鼠实体瘤3批小鼠的平均抑瘤率分别为43.6%,36%,26%。结果表明该品6.0,3.0 g/kg剂量组3批试验对荷H22小鼠实体瘤的平均抑瘤率达到30%以上,且重复性良好,说明桑黄菌丝体具有明显的抑瘤作用。     

恶性实体瘤患者自体CIK细胞的体外大量扩增后的免疫表型变化

目的:回顾性分析我院2009年1月至2010年5月行细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)治疗的59例实体瘤患者的自体CIK细胞体外扩增后免疫表型的变化,为恶性实体瘤患者开展CIK细胞治疗提供实验依据。方法:采集59例恶性实体瘤患者外周血单个核细胞,培养体系加入IFN-γ、CD3McAb及IL-2三种细胞因子体外诱导,培养10～14 d;用流式细胞仪分别检测CIK细胞培养前后的免疫表型,进行配对t检验。结果:CIK细胞培养后单个核细胞,CD3+细胞,CD3+CD4+细胞,CD3-CD56+细胞,CD3+CD56+细胞均较培养前增加,差异有统计学意义(P<0.05)。CD3+CD8+细胞,虽然较前增加,但差异无统计学意义(P>0.05),CIK细胞中CD3+,CD3+CD4+,CD3+CD8+,CD3-CD56+表型的细胞比率与培养前相比均有所下降,差异有统计学意义(P<0.05),但CD3+CD8+细胞比率与培养前差异无统计学意义(P>0.05)。而CIK细胞的纯度从培养前(9.90±8.96)%增至(46.55±19.25%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:恶性实体瘤患者自体CIK细胞体外扩增后,CIK细胞纯度显著增加。     

鲨鱼软骨对小鼠H_(22)实体瘤抑制观察

目的:观察鲨鱼软骨对小鼠H_(22)实体瘤的抑制作用.方法:将移植H_(22)实体瘤的昆明种小鼠随机分为治疗组和对照组,并设一正常组,灌胃给药.检测瘤重及末梢血淋巴细胞酸性α-醋酸萘酯酶(ANAE)阳性率.结果:(1)鲨鱼软骨具有抑瘤作用,对小鼠H_(22)实体瘤抑瘤率可达48.03%,与对照组相比P<0.005.(2)鲨鱼软骨使机体免疫功能提高,使H_(22)实体瘤小鼠的末梢血淋巴细胞ANAE阳性率明显升高,与对照组相比P<0.005.结论:鲨鱼软骨具抗癌功效.     

咖啡酸锗对荷瘤H22小鼠抑瘤作用的观察

目的:探讨咖啡酸锗对荷瘤H22小鼠的抑瘤作用。方法:建立荷瘤H22小鼠移植瘤模型,应用咖啡酸锗腹腔注射给药后,计算抑瘤率以及通过HE染色在光学显微镜下观察其对移植瘤的抑制作用。结果:咖啡酸锗对荷瘤H22小鼠移植瘤的具有抑制作用。结论:咖啡酸锗对荷瘤H22小鼠移植瘤具有抑制作用,但最有效的药物剂量需要进一步实验摸索研究。     

苏氨酸对小鼠免疫功能的影响

探讨了苏氨酸对小鼠免疫机能的影响。试验采用灌服不同浓度苏氨酸水溶液,然后检测小鼠循环抗体、脾T淋巴细胞转化、巨噬细胞的吞噬功能以及红细胞的花环率。试验结果表明:1.5mmol/kg和3.0mmol/kg组小鼠体内循环抗体的含量分别出现显著性(P<0.05)与极显著性(P<0.01)高于对照组;脾T淋巴细胞的转化功能均显著性高于对照组(P<0.05);苏氨酸对小鼠巨噬细胞吞噬功能以及红细胞免疫功能的影响程度较弱(P>0.05)。可以看出,苏氨酸能增强小鼠的免疫功能,在实验所设计的剂量范围内呈剂量依赖性升高。     

单核细胞免疫表型的表达对肝癌患者免疫功能状况的影响

单核细胞是机体内重要的吞噬细胞和抗原提呈细胞,在机体处理外源性病原微生物和机体内所产生的危险信号等方面发挥着重要作用。单核细胞有多种免疫表型,表型可变性和功能多样性是单核细胞的重要特性,不同免疫表型的表达对肝癌患者的免疫功能状况有着不同的影响,这为我们提供了肝癌免疫治疗的新思路。     

桂附地黄丸对环磷酰胺致免疫抑制小鼠血常规和血清生化指标影响

探究桂附地黄丸对环磷酰胺致免疫抑制小鼠的血常规及血清生化指标的影响。将24只雌性的昆明种小白鼠分为对照组(CT)、模型组(CTX)和给药组(GDT)。按照1.82 g/kg·d体重剂量给GDT小鼠灌胃桂附地黄丸悬液;在灌胃的第12 d,将环磷酰胺按照50 mg/kg·d体重剂量给CTX和GDT小鼠进行腹腔注射,连续注射3 d。最后一次用药12 h后,称重后采集血液检测血常规及生化指标。结果显示,与CT相比,CTX小鼠白细胞总数、单核细胞总数、淋巴细胞总数、血小板分布宽度、总蛋白含量显著降低(P <0.05),尿素氮含量显著升高(P <0.05);与CTX相比,GDT小鼠单核细胞总数、中性粒细胞总数、中性粒细胞百分比、平均红细胞血红蛋白含量、平均红细胞血红蛋白浓度、肌酐含量显著提升(P <0.05),淋巴细胞百分比、谷草转氨酶含量显著下降(P<0.05)。因此,桂附地黄丸可以有效改善环磷酰胺引起小鼠血常规和血清生化指标的异常变化。     

山银花对黄羽肉鸡血液生化指标及免疫功能的影响

为评估山银花(Lonicerae flos)作为饲料添加剂对黄羽肉鸡(Gallus gallus domesticus)血液生化指标、免疫功能的影响，将150只2日龄的健康黄羽肉鸡随机平均分为5个组进行为期42 d的实验，其中第1 d到第10 d为环境适应期，第11 d到第26 d(12～27日龄)为实验Ⅰ期，从第27 d到第42 d(28～43日龄)为实验Ⅱ期。5组肉鸡每日均饲喂相同基础日粮；对照组(CK组)每日饲喂不含山银花成分的饮用水；4个山银花处理组即T1、T2、T3和T4组在环境适应期饲喂不含山银花成分的饮用水，在实验Ⅰ、Ⅱ期饲喂原药材质量分数分别为1.0%、1.5%、2.0%和3.0%的山银花水提物稀释液以代替饮用水。分别在实验Ⅰ、Ⅱ期结束时检测黄羽肉鸡血清总蛋白、白蛋白和球蛋白的质量浓度，丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶和γ-谷氨酰基转移酶的活性，总胆汁酸、肌酐、尿酸、总胆固醇、甘油三酯和葡萄糖浓度，以及免疫球蛋白IgG和IgA的质量浓度；并测定法氏囊、脾脏及胸腺质量和计算免疫器官指数。研究结果显示：5组黄羽肉鸡血清总蛋白、球蛋白的质量浓度和γ-谷氨酰基转移酶活性没有明显差异；与CK组相比，饲喂原药材质量分数分别为1.0%、1.5%和3.0%的山银花水提物稀释液可使黄羽肉鸡血清总胆汁酸浓度和天冬氨酸氨基转移酶活性明显下降，饲喂原药材质量分数分别为1.5％、2.0％和3.0％山银花水提物稀释液可使黄羽肉鸡血清尿酸浓度明显下降，饲喂山银花水提物稀释液使黄羽肉鸡免疫器官指数升高并使血清IgA、IgG的质量浓度明显升高。饲喂原药材质量分数为1.5%的山银花水提物稀释液可有效地促进黄羽肉鸡生长并改善该鸡种的血液生化指标以及免疫功能。