转基因小麦T1代中外源基因的检测和分析

该研究采用Multiplex PCR和SDS-PAGE技术对转1 Dx5基因(ORF)T1代小麦进行了检测和分析.结果显示,Multiplex PCR能够扩增出转基因T1代材料中1 Dx2基因和1 Dx5基因的特征片段,表明外源基因已整合到受体基因组中;SDS-PAGE检测到一新的蛋白质亚基X,表明外源基因的插入引起了转基因T1代籽粒中HMW-GS组成的变化.该研究不仅验证了线性基因片段遗传转化策略的可行性,而且印证了普通小麦Glu-1D等位基因的多重PCR分子标记体系的有效性,为培育安全型的转基因作物新种质打下坚实的基础,加快小麦分子育种进程.     

外源基因1Dx5在转基因小麦后代中的表达

采用PCR和SDS-PAGE技术,分析研究了转基因小麦后代外源品质基因1Dx5的遗传分离及表达规律,结果显示:转基因小麦后代的遗传分离完全符合孟得尔遗传分离规律,转基因植株都达到了纯合状态,1Dx5基因在转基因植株中已经稳定整合并稳定遗传,并发现了超表达的差异表达现象,在转基因植株中没有发现基因沉默现象.     

151份小麦品种（系）中主要品质基因的分子检测

明确江苏瑞华农业科技有限公司151份小麦品种（系）中品质基因的分布情况,利用分子标记技术对小麦谷蛋白亚基（HMW-GS）、多酚氧化酶（PPO）活性和1B/1R异位系进行检测。结果表明：高分子量谷蛋白亚基（HMW-GS）基因频率Ax2为1.32%,Dx5为17.22%,By8为70.20%,Bx7为89.40%,Ax2+Dx5、Ax2+By8和Ax2+Bx7均为0.66%,Dx5+By8为7.28%,Dx5+Bx7为14.57%,By8+Bx7为62.25%;多酚氧化酶（PPO）活性相关基因频率Ppo-A1b为45.70%,Ppo-D1a为25.83%,双低PPO活性等位基因Ppo-A1b+Ppo-D1a为优异等位基因,频率为8.60%;1B/1R异位系的分布频率为86.75%;同时携带低PPO活性等位变异组合,且为非1B/1R异位系的材料只有2份,频率为1.32%;同时携带谷蛋白亚基Bx7和低PPO活性等位变异组合,且为非1B/1R异位系的材料只有1份,可作为小麦育种材料。     

小麦中源于中间偃麦草抗白粉病基因PmCH5026的SSR定位

CH5026是衍生于八倍体小偃麦TAI7045的新品系,用高感品种(系)CH5065、晋太170分别与CH5026配置组合,于温室接种并调查F2、F3、BC1F2群体的抗感分离之比进行遗传分析,结果表明CH5026成株期对白粉菌E09小种的抗性受1对显性基因控制,暂命名为PmCH5026.使用集群分离分析法(BSA),用378对SSR引物对CH5026×CH5065 F2代群体进行分析,筛选到标记Xcfd233、Xbarc11和Xgwm539与抗性基因连锁,位置顺序为:Xcfd233-7.2cM-PmCH5026-4.9cM-Xbarc11-5.5cM-Xgwm539.根据小麦微卫星遗传连锁图及利用中国春第2同源群缺四体、双端体对SSR标记的定位结果,将PmCH5026定位在染色体2DL上.     

鹌鹑伴性羽基因用于遗传学实验的设计与分析

鹌鹑的栗羽、黄羽和白羽是Z染色体上两个有连锁关系的基因座B b和Y y相互作用的结果。B b和Y y两基因座在雄性表现出一定的互换率 ,在雌性为完全连锁。通过以下几种杂交实验 :(1)白羽系×龙城系 ;(2 )黄羽系×龙城系 ;(3)白羽系×黄羽系 ,可以验证伴性遗传规律 ,说明B b和Y y基因间的互作关系。利用 [白羽 (♂ )×黄羽 (♀ ) ]×黄羽 (♀ )或 [黄羽 (♂ )×白羽 (♀ ) ]×白羽 (♀ )可以测定基因座B b的Y y之间的互换率。利用鹌鹑羽色基因进行遗传学实验具有材料来源广 ,实验周期短 ,实验效果明显等特点 ,是大专院校进行有关遗传学实验的理想材料。     

转几丁质酶基因烟草后代的遗传分析

本论文采用分子检测(PCR扩增、PCR-Southern杂交)与表型检测(接真菌实验、酶活力测定)相结合的手段，对花粉管通道法及载体法导入几丁质酶基因烟草后代的遗传表现进行研究。结果证明通过不同方法导入受体细胞基因组中的外源基因均能遗传给后代，并能在转化受体当代及后代中高效表达。但采用花粉管通道法导入的外源基因虽然能够遗传给后代，但分离比复杂，遗传规律性较差。而载体法导入的外源基因T1代x^2检测符合3：1的遗传分离比，遗传稳定性要好于DNA直接导入。因此，建立良好的遗传转化系统是外源基因稳定遗传和表达的前提。     

抗除草剂基因atzA在转基因水稻中的遗传

研究了细菌阿特拉津氯水解酶基因atzA在转基因水稻AA269株系自交和回交后代中的遗传规律．结果表明：atzA基因作为一个显性遗传位点遵循孟德尔遗传分离规律．除草剂抗性鉴定结果表明,在T1代水稻群体中除草剂抗性和敏感株数遵循3：1的分离规律,T2代稳定纯合;T2～T7自交世代的转基因植株均保持稳定的除草剂抗性．在BC1～BC3代群体中除草剂抗性和敏感株数遵循1：1的分离规律,BC群体自交的BCF2群体中遵循3：1分离规律．分别对AA269／9311的B3F1和B2F2群体中的一个株系进行了PCR分析,PCR阳性株与阴性株的分离比例分别符合1：1和3：1,与除草剂抗性鉴定结果一致．对T7代群体中部分单株的Southern杂交和RT—PCR分析表明,atzA基因已稳定遗传至T7代,并得到表达．     

2,5-二苯甲酰基-1,4-二碘苯的合成及其晶体结构

以2,5-二苯甲酰基-1,4-苯二胺为原料,分别经过2次无水体系中的重氮化、碘代反应,合成得到2,5-二苯甲酰基-1,4-二碘苯.通过熔点测定、元素分析、磁共振(NMR)及X线单晶衍射对产物进行了表征及晶体结构分析.分析结果表明该晶体属于正交晶系,Pbca空间群,a=10.980 (2)nm,b=15.866 (3)nm,c=21.110(4)nm,Dx=1.944g/cm3,Z =8,F(000)=2032,μ=3.43mm-1,最终偏差因子分别为R=0.0624,wR=0.1728.     

乙型肝炎病毒转基因小鼠外源基因的复制和传代稳定性观察

目的研究乙型肝炎病毒(HBV)转基因小鼠外源基因的复制、传代稳定性.方法通过nest-PCR和Southern分子杂交等检测方法,对48#、87#、90#三个系列中各15只整合阳性小鼠定期进行血清中HBV DNA存在情况以及对各系列繁育F1-F5代小鼠外源基因整合传代进行检测.结果各系列转基因鼠血清都有HBV DNA存在,并以1月龄时血清中HBV DNA阳性率最高,但随月龄改变,其DNA阳性率也变化,并存在系列、个体及月龄上的差异.结论HBV基因可在转基因小鼠体内复制、传代,且目前已稳定传至第五代(F5).     

水稻矮化突变体G蛋白α亚基基因的结构和表达

利用γ-Co60辐射诱发水稻特光矮-2(Oryza sativa L.cv.TGA-2)产生变异,获得一种稳定遗传的新型水稻矮化突变体dwarf69.dwarf69和TGA-2及其杂交后代F1、F2、F3成熟期的株高数据表明矮化表型受一对隐性基因控制.进一步研究发现,虽然dwarf69和TGA-2的G蛋白α亚基基因(Rice G protein alpha-subunit,RGA)编码区核苷酸序列只有一个核苷酸的差异,但RGA在野生型TGA-2中的表达量明显高于在突变体dwarf69中的表达量.对矮化突变体dwarf69和野生型TGA-2的RGA基因5＇上游区的序列分析表明,dwarf69 RGA 5＇上游区比TGA-2RGA5＇上游区多出1076bp.首次报道水稻矮化突变体中的RGA5＇上游区序列与其野生种的RGA5＇上游区序列存在显著的差异.     

转基因食品的安全性

论述了转基因食品的主要内涵及目前转基因食品发展的现状及问题,指出了转基因食品的安全性是其发展的焦点;提出了转基因食品的发展应以制定专门的转基因法律,对转基因生物及食品进行规范为保障。     

转基因植物的生态影响

自从1983年转基因植物诞生以来，至今各种类型的转基因植物进入大田实验已不计其数，很多产物已商品化。作为生物界的新品种，转基因植物在带来巨大的经济效益和社会效益的同时，也带来了潜在的风险。从生态学角度论述了转基因植物所带来的影响及采取相应的措施来加以调控和管理。     

Avp －iCre 转基因小鼠的鉴定

将Avp－iCre转基因首建小鼠传到C57BL／6背景。通过与纯合ROSA26 Cre报告小鼠交配来检测iCre（improved Cre，改进的Cre重组酶）的表达，在子代中研究β－gal（beta－galactosidase，β－半乳糖苷酶）与AVP（ arginine vasopressin，精氨酸血管加压素）的共定位关系。利用ClockLab软件记录分析Avp－iCre小鼠跑轮运行行为节律的完整性。实验结果显示β－gal和AVP在SCN（ suprachiasmatic nucleus，视交叉上核）的表达存在明显共定位；Avp－iCre小鼠具备正常行为节律，其周期为23．65±0．14 h（Mean ±SD），表明该Avp－iCre转基因小鼠可用于近日节律研究。     

Production of antibodies in transgenic plants

Complementary DNAs derived from a mouse hybridoma messenger RNA were used to transform tobacco leaf segments followed by regeneration of mature plants. Plants expressing single gamma or kappa immunoglobulin chains were crossed to yield progeny in which both chains were expressed simultaneously. A functional antibody accumulated to 1.3% of total leaf protein in plants expressing full-length cDNAs containing leader sequences. Specific binding of the antigen recognized by these antibodies was similar to the hybridoma-derived antibody. Transformants having gamma- or kappa-chain cDNAs without leader sequences gave poor expression of the proteins. The increased abundance of both gamma- and kappa-chains in transformants expressing assembled gamma-kappa complexes was not reflected in increased mRNA levels. The results demonstrate that production of immunoglobulins and assembly of functional antibodies occurs very efficiently in tobacco. Assembly of subunits by sexual cross might be a generally applicable method for expression of heterologous multimers in plants.     

谷氨酰tRNA合成酶转基因拟南芥的生长特性分析

以不同独立株系的拟南芥谷氨酰tRNA合成酶（Arabidopsis glutamyl tRNA synthetase,简称AtGluRS）过量表达的三种纯合株系（GS3、GS4、GS6）及抑制表达的三种纯合株系（GAS2、GAS3、GAS7）为实验材料,分析其生长情况和表型.表型分析结果表明,拟南芥谷氨酰tRNA合成酶过量表达植株表现出开花晚、基叶多、茎生长快等与对照和AtGluRS抑制表达植株不同的特点.此外,用氯化钠（NaCl）模拟盐胁迫环境,对转基因植物的萌发率和生长情况进行分析,发现谷氨酰tR